检索结果-内蒙古大学图书馆

临床心血管病杂志 2010年第6期26卷 453-456页

作者：王惠覃数何泉杨义刘俊彭艳重庆医科大学附属第一医院心内科重庆400016

目的:观察辛伐他汀对大鼠急性心肌梗死(AMI)后血管新生的影响,以及血管生成素-1(Ang-1)在这一过程中的表达变化。方法:SD大鼠60只,随机分为假手术组、对照组、小剂量辛伐他汀(***-1.d-1)组、中剂量辛伐他汀(***-1.d-1)组、大剂量辛伐他... 详细信息

目的:观察辛伐他汀对大鼠急性心肌梗死(AMI)后血管新生的影响,以及血管生成素-1(Ang-1)在这一过程中的表达变化。方法:SD大鼠60只,随机分为假手术组、对照组、小剂量辛伐他汀(***-1.d-1)组、中剂量辛伐他汀(***-1.d-1)组、大剂量辛伐他汀(***-1.d-1)组。结扎大鼠冠状动脉左前降支建立AMI动物模型。术后次日起分别灌胃给予相应剂量辛伐他汀4周。检测缺血区心肌新生血管密度、左室重量指数(LVMI)、及Ang-1蛋白及mRNA表达。结果:小剂量及中剂量辛伐他汀组缺血区心肌新生血管密度较对照组显著增加(P<0.05);各剂量辛伐他汀组Ang-1蛋白及mRNA表达较对照组均显著增强(P<0.05);小、中剂量辛伐他汀组LVMI较对照组显著减小(P<0.05),大剂量组LVMI则进一步减小(P<0.01)。结论:小、中剂量辛伐他汀可促进AMI后心肌血管新生;辛伐他汀这一作用可能与其上调Ang-1的表达有关。

关键词：急性心肌梗死辛伐他汀血管新生血管生成素-1

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中国人血管生成素-1cDNA克隆和序列分析

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中华实验外科杂志 2003年第5期20卷 411-412页

作者：王建华陈立波张长清杨新光曾炳芳睦述平上海市第六人民医院骨科 200233 华中科技大学同济医学院附属协和医院胰腺外科中心

目的　克隆和测定国人血管生成素 1(Ang 1)基因序列。方法　巢式多聚酶链反应(PCR)从婴儿肺组织扩增中国人Ang lcDNA ,克隆入载体 pGEM Teasy ,测定核苷酸序列 ,分析测序结果。结果　通过巢式PCR获得Ang 1cDNA ,和GeneBank的Ang 1序列 ... 详细信息

目的　克隆和测定国人血管生成素 1(Ang 1)基因序列。方法　巢式多聚酶链反应(PCR)从婴儿肺组织扩增中国人Ang lcDNA ,克隆入载体 pGEM Teasy ,测定核苷酸序列 ,分析测序结果。结果　通过巢式PCR获得Ang 1cDNA ,和GeneBank的Ang 1序列 (U83 5 0 8)对照 ,两者成熟区cDNA的核苷酸和氨基酸同源性分别大于 99%和大于 98% ;在 3 3 0bp～ 93 0bp间核苷酸同源性为 98% ,氨基酸同源性为 95 %。结论　获得克隆的中国人Ang 1基因成熟区 ,其卷曲卷曲结构域内可能存在一个内部高变区。

关键词：中国人血管生成素-1 cDNA 克隆序列分析巢式多聚酶链反应

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脑缺血耐受大鼠脑组织血管内皮生长因子和血管生成素-1表达的改变及其意义

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临床神经病学杂志 2012年第1期25卷 36-39页

作者：董滨孙顺昌王国峰刘伯芹赵玉芳肖成贤赵仁亮青岛市第九人民医院神经内科 266002 青岛大学医学院附属医院神经内科

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)和血管生成素-1(Ang-1)在短暂性脑缺血预处理(IP)诱导的脑缺血耐受大鼠脑组织表达的改变及其意义。方法将99只Wistar大鼠随机分成对照组(9只)、非IP(NIP)组(45只)和IP组(45只)。大脑中动脉线栓法建立局灶... 详细信息

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)和血管生成素-1(Ang-1)在短暂性脑缺血预处理(IP)诱导的脑缺血耐受大鼠脑组织表达的改变及其意义。方法将99只Wistar大鼠随机分成对照组(9只)、非IP(NIP)组(45只)和IP组(45只)。大脑中动脉线栓法建立局灶性IP模型,NIP组以假手术代替预缺血,分别在IP后1、3、7、14、21 d予以缺血2 h、再灌注22 h,对照组2次均为假手术。大鼠处死前给予神经功能缺损评分(NDS),采用TTC染色测定脑梗死体积,免疫组化染色法检测脑组织VEGF、Ang-1蛋白表达。结果对照组大鼠脑组织无梗死灶,NDS为0。IP 1、3、7 d亚组NDS和梗死体积显著小于NIP组1、3、7 d亚组(P<0.01～0.05),其中IP 3 d亚组NDS最低,梗死体积最小。对照组脑组织少量VEGF蛋白表达,IP 1、3、7 d亚组VEGF蛋白表达显著高于NIP 1、3、7 d亚组(均P<0.05),其中IP 3 d亚组VEGF蛋白表达最高。各组脑组织均有一定程度Ang-1蛋白表达,IP 7 d亚组Ang-1蛋白表达高于NIP 7 d亚组(P<0.05)。结论 IP 1～7 d内脑组织VEGF、Ang-1表达增加,对脑缺血耐受的产生具有重要作用。

关键词：脑缺血耐受血管内皮生长因子血管生成素-1 缺血预处理

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大鼠局灶性脑缺血/再灌注后血管生成素-1和-2的动态表达变化

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中国老年学杂志 2005年第4期25卷 407-409页

作者：李华军李巍邵延伸尹娇饶明俐张改华陈晋文谢仁厚解放军空军总医院神经内科北京100036 北华大学第一临床学院吉林大学第一临床医学院

目的检测相关细胞因子血管生成素1(Ang1)、Ang2在大鼠局灶性脑缺血/再灌注后表达的动态变化。方法采用免疫组化及原位杂交技术。结果在正常脑组织及缺血/再灌注后均发现Ang1蛋白及Ang1mRNA的中等程度的广泛表达,在再灌注48h时达到高峰,... 详细信息

目的检测相关细胞因子血管生成素1(Ang1)、Ang2在大鼠局灶性脑缺血/再灌注后表达的动态变化。方法采用免疫组化及原位杂交技术。结果在正常脑组织及缺血/再灌注后均发现Ang1蛋白及Ang1mRNA的中等程度的广泛表达,在再灌注48h时达到高峰,此后虽有所下降,但仍为持续的阳性表达。Ang2蛋白及Ang2mRNA在对照组及假手术组中均呈阴性表达,在MCAO后6h于梗死灶内的一些单个细胞中发现,在12～24h后达到高峰,这种表达一直持续到72h。结论Ang1、Ang2在脑损伤的过程中起着重要的作用。

关键词：大鼠缺血再灌注血管生成素-1 血管生成素-2

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血管内皮生长因子和血管生成素-1抑制心脏成肌细胞凋亡研究

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中国临床康复 2003年第5期7卷 769-771,T001页

作者：周磊马文珠张馥敏杨志建陆丽丁兆丰丁必森哈团柱李传富高翔南京医科大学第一附属医院心脏内科江苏省南京市210029 南京大学分子医学研究所江苏省南京市210009 美国东田纳西州大学JamesH.Quillen医学院外科系

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF165)和血管生成素-1(angiopoietin-1)抑制心肌细胞凋亡的作用机制。方法:将编码人VEGF165或angiopoi-etin-1的复制缺陷型腺病毒载体(Ad-VEGF165或Ad-Ang1)转染大鼠心脏成肌细胞(H9C2),24h后以H2O2诱导细胞凋亡,分析VEGF165和an-giopoietin-1的抗凋亡作用。腺病毒转染24h后检测细胞中三磷酸肌醇激酶(phosphatidylinositol-3kinase)活性和bcl-2表达水平。结果:VEGF165和angiopoietin-1可不同程度抑制H9C2细胞凋亡。VEGF165和Ang1作用下细胞内三磷酸肌醇激酶活性和bcl-2表达水平增高。结论:VEGF165和/或Ang1可抑制心脏成肌细胞凋亡,这种保护作用与其激活细胞内三磷酸肌醇激酶途径和促进抗凋亡分子bcl-2的表达相关。血管生长因子VEGF165和angiopoietin-1的心脏成肌细胞保护作用为其功能学研究和临床应用开辟了新的方向。

关键词：血管内皮生长因子血管生成素-1 抑制心脏成肌细胞细胞凋亡心肌保护

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血管生成素-1在体外对人胃癌细胞生物学作用的研究

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东南大学学报（医学版） 2008年第2期27卷 116-121页

作者：杨柳欧希龙颜芳关云艳杭程陈慧娟陈国胜东南大学临床医学院江苏南京210009

目的:探讨人血管生成素-1(Ang1)及其与血管内皮生长因子165(VEGF165)共同作用对人胃癌细胞的生物学作用,研究其在肿瘤发生中的作用机制。方法:应用复制缺陷型腺病毒(Ad)-绿色荧光蛋白(GFP)、Ad-Ang1、Ad-VEGF165和Ad-Ang1+Ad-VEGF165/2... 详细信息

目的:探讨人血管生成素-1(Ang1)及其与血管内皮生长因子165(VEGF165)共同作用对人胃癌细胞的生物学作用,研究其在肿瘤发生中的作用机制。方法:应用复制缺陷型腺病毒(Ad)-绿色荧光蛋白(GFP)、Ad-Ang1、Ad-VEGF165和Ad-Ang1+Ad-VEGF165/2转染人胃癌细胞株MGC-803,使用MTT比色法分析它们对胃癌细胞增殖的影响;通过流式细胞仪分析血浆饥饿时其对凋亡的影响;使用免疫细胞化学法检测Ki-67的表达;应用RT-PCR方法半定量检测bcl-2 mRNA、bax mRNA的表达情况。结果:MTT结果显示24、48和72 h Ad-Ang1转染组、Ad-VEGF165转染组和Ad-Ang1+Ad-VEGF165/2转染组吸光度均明显高于Ad-GFP组及对照组(P<0.05);Ad-GFP组与对照组相比无显著差异(P>0.05);Ad-Ang1+Ad-VEGF165/2转染组吸光度明显高于Ad-Ang1转染组和Ad-VEGF165转染组(P<0.05)。流式细胞仪检测结果显示Ad-Ang1、Ad-VEGF165及Ad-Ang1+Ad-VEGF165/2处理组与对照组及空转染组相比均能够显著抑制细胞凋亡(P<0.01)。免疫细胞化学法显示各转染组Ki-67表达强度均显著高于对照组和Ad-GFP组(P<0.01)。RT-PCR结果显示bcl-2 mRNA在各转染组中的表达要明显高于对照组(P<0.05);bax mRNA在各转染组中的表达要明显低于对照组(P<0.05)。结论:Ang1、VEGF165和Ang1+VEGF165/2能够明显促进人胃癌细胞MGC-803增殖,抑制血浆饥饿时的凋亡,Ang1+VEGF165/2组的作用要显著强于Ang1组和VEGF165组。

关键词：血管生成素-1 血管内皮生长因子165 Ki-67 胃癌增殖凋亡

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复合磷酸三钙/转血管生成素-1的骨髓间充质干细胞对骨修复及血管形成的实验研究

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中华实验外科杂志 2004年第9期21卷 1116-1118,F004页

作者：张晔王建华陈立波曾炳芳张长青邹剑袁霆上海交通大学附属第六人民医院骨科 200233 华中科技大学同济医学院附属协和医院胰腺外科中心

目的研究转染Ang-1基因的骨髓间充质干细胞(BMSCs)复合磷酸三钙(TCP)对骨缺损的修复及血管形成作用。方法脂质体介导质粒pEGFP-N1-hAng-1转染兔BMSCs,与TCP复合,修复兔桡骨1.5 cm缺损模型。分别在2、4、8、12周取材,以组织学、免疫组... 详细信息

目的研究转染Ang-1基因的骨髓间充质干细胞(BMSCs)复合磷酸三钙(TCP)对骨缺损的修复及血管形成作用。方法脂质体介导质粒pEGFP-N1-hAng-1转染兔BMSCs,与TCP复合,修复兔桡骨1.5 cm缺损模型。分别在2、4、8、12周取材,以组织学、免疫组化、核素扫描等方法检测骨修复及血管再生状况。结果组织学检查见转染细胞组毛细血管生长及新骨形成活跃,术后8、12周骨小梁体积(TBV％)由对照组21.67±6.28和40.18±9.57升至实验组42.17±8.93和67.54±15.29(P<0.05)。微血管密度(MVD)则由对照组10.18±3.54、14.28±5.03升至实验组15.23±5.67、19.64±6.47(P<0.05)。实验组99m锝(Tc)放射性计数在术后4、8、12周达到68.39±21.43、85.52±26.68、98.64±29.28,与对照组37.54±12.36、55.23±18.85、75.67±26.39组间差异有显著性(P<0.05)。结论 Ang-1转染细胞组较对照组血供加强,骨修复加速。与细胞因子局部定向释放,加强血管形成及骨代谢有关。利用基因转染技术结合组织工程有助于深入加强骨缺损的修复研究。

关键词：骨修复对照组血管形成磷酸三钙骨缺损骨髓间充质干细胞术后 BMSC 血管生成素-1 EGFP

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Gateway技术构建小鼠血管生成素-1慢病毒表达载体及其病毒包装

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临床儿科杂志 2013年第9期31卷 866-870页

作者：李秋平马新娜张小英许靖章晟王春枝封志纯北京军区总医院(第二军医大学临床医学院)附属八一儿童医院北京100700

目的构建携带小鼠血管生成素-1(Ang-1)基因的慢病毒载体并进行慢病毒包装。方法利用Gateway技术构建携带DsRed荧光蛋白的Ang-1慢病毒载体,经PCR及基因测序鉴定后,与辅助质粒pLV/helper-SL3、pLV/helper-SL4及pLV/helper-SL5混合采用脂... 详细信息

目的构建携带小鼠血管生成素-1(Ang-1)基因的慢病毒载体并进行慢病毒包装。方法利用Gateway技术构建携带DsRed荧光蛋白的Ang-1慢病毒载体,经PCR及基因测序鉴定后,与辅助质粒pLV/helper-SL3、pLV/helper-SL4及pLV/helper-SL5混合采用脂质体法制备DNA-Lipofectamine 2000复合物,并共同转染293FT细胞进行慢病毒包装,产生相应慢病毒颗粒,通过荧光表达情况来测定病毒滴度和感染效率。结果通过PCR、基因测序证实,Ang-1慢病毒表达载体***3d.P/puro-CMV>Ang-1>IRES/DsRed-Express2构建成功。经转染293FT细胞包装出具高效感染力的慢病毒,经测定病毒滴度为5×108TU/ml。结论成功构建Ang-1慢病毒表达载体,并包装出具高效感染力的慢病毒颗粒,为进一步研究Ang-1基因功能及基因治疗提供实验基础。

关键词：血管生成素-1 慢病毒载体 Gateway技术

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夏天无注射液对血管性痴呆大鼠海马血管生成素-1表达的影响

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中成药 2006年第6期28卷 839-842页

作者：余丽梅于爽龚其海聂晶石京山陈代雄周歧新重庆医科大学药理学教研室重庆400016 郑州大学基础医学院药理学教研室河南郑州450052 遵义医学院药理学教研室贵州遵义563003 贵州省细胞工程实验室贵州遵义563003

目的:观察夏天无注射液(Corydalis decumbens Pers In jection,CDPI)对血管性痴呆(vascu lar dem entia,VD)大鼠学习记忆能力和海马血管生成素-1(angiopoietin-1,Ang-1)表达的影响,探讨其防治VD的作用机制。方法:采用永久性结扎双侧颈... 详细信息

目的:观察夏天无注射液(Corydalis decumbens Pers In jection,CDPI)对血管性痴呆(vascu lar dem entia,VD)大鼠学习记忆能力和海马血管生成素-1(angiopoietin-1,Ang-1)表达的影响,探讨其防治VD的作用机制。方法:采用永久性结扎双侧颈总动脉的方法制作VD大鼠模型,Morris水迷宫试验观察CDPI对大鼠空间辨别学习记忆能力的影响,HE染色观察海马的组织病理学变化,免疫组化染色,图像分析半定量测定Ang-1的表达。结果:CDPI 2 mg/kg、5 mg/kg治疗VD大鼠1个月和2个月后,显著缩短逃避潜伏期和搜索距离;治疗2个月后,明显增加海马内Ang-1的表达。结论:CDPI可明显改善VD大鼠的学习记忆能力,其作用机制可能与增加海马内Ang-1的表达有关。

关键词：夏天无血管性痴呆大鼠血管生成素-1

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慢病毒载体介导血管生成素-1基因修饰的骨髓间充质干细胞移植治疗脑梗死的实验研究

慢病毒载体介导血管生成素-1基因修饰的骨髓间充质干细胞移植治疗...

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作者：陈柏龄福建医科大学

学位级别：博士

脑梗死是人类致死的三大疾病之一,其高致残性给患者、家庭和社会带来沉重的负担。长期以来,人们认为中枢神经损伤后引起神经细胞不可逆的死亡,损伤的神经元只能被胶质细胞所填充,形成胶质疤痕,从而丧失了神经功能。近年来,骨髓间充质干... 详细信息

脑梗死是人类致死的三大疾病之一,其高致残性给患者、家庭和社会带来沉重的负担。长期以来,人们认为中枢神经损伤后引起神经细胞不可逆的死亡,损伤的神经元只能被胶质细胞所填充,形成胶质疤痕,从而丧失了神经功能。近年来,骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植治疗脑梗死已成为研究热点。MSCs作为种子细胞,在体内可向多种急性损伤后的组织迁移并定位,在局部微环境的调控下分化为不同的组织细胞。MSCs为组织结构和功能修复提供了细胞来源,且易通过血-脑屏障,少有免疫排斥反应,已成为脑缺血性疾病治疗的理想靶细胞。血管生成素-1 ( Angiopoietin-1,Ang-1)是一类重要的血管生长因子,特异性地作用于内皮细胞,参与血管生成的调控过程,Ang-1通过干预内皮细胞、平滑肌细胞和周细胞之间的相互作用促进血管生成和重塑,在缺血等病理状态下可作为一种关键的血管生成调节剂。它可通过促进缺血组织周围侧支循环形成、稳定血管、延缓血管退化;加强内皮细胞间的紧密连结,维持血脑屏障的完整性;保护神经元、抑制凋亡等多重作用机制,从而明显增加缺血脑组织血流灌注,挽救半暗带神经元。Ang-1已成为缺血性脑血管病基因治疗新的靶点。慢病毒载体具有可感染分裂细胞及非分裂细胞、转移基因片段容量较大、目的基因表达时间长、不易诱发宿主免疫反应等优点,已成为当前基因治疗中载体研究的热点。因此,我们设想通过慢病毒载体的介导,将Ang-1基因转移至MSCs中,并将基因修饰的MSCs通过静脉移植至大脑中动脉栓塞模型大鼠中,利用MSCs可向急性损伤病灶趋化聚集的特点,期待MSCs能够携带Ang-1基因迁移至损伤部位,发挥Ang-1和MSCs的协同治疗作用。本课题分为三部分。第一部分:血管生成素-1基因重组慢病毒载体质粒的构建及鉴定从Genbank获得Ang-1基因序列,结合载体上的酶切位点需要,设计上下游引物,通过RT-PCR方法扩增目的基因片段,通过TA克隆筛选正确的重组体,再通过双酶切和基因重组构建Ang-1重组慢病毒载体质粒pNL-Ang-IRES2-EGFP,经抗生素筛选后,进行酶切鉴定和测序。结果显示我们获得长度为1512bp的Ang-1目的基因片段,质粒pNL-Ang-IRES2-EGFP经双酶切后凝胶电泳鉴定正确,测序结果与Genbank报道序列一致。第二部分:构建血管生成素-1基因修饰的骨髓间充质干细胞首先通过密度梯度离心和贴壁培养相结合的方法在体外提取、扩增培养大鼠骨髓间充质干细胞(rMSCs),并经流式细胞学检测各代CD29、CD34、CD45的表达情况。通过脂质体介导慢病毒三质粒pNL-Ang-IRES2-EGFP(或pNL-IRES2-EGFP,做为空载体对照)、pVSVG、pHELPER共转染293T细胞,收集病毒上清进行超速离心浓缩。PCR检测病毒基因组中目的基因Ang-1的插入。将病毒上清感染rMSCs,通过荧光显微镜观察目的基因的表达,细胞RT-PCR检测Ang-1的mRNA表达,细胞免疫化学和Western blot检测Ang-1蛋白的表达情况。然后通过鸡胚绒毛尿囊膜(chorioallantoic membrane,CAM)血管形成实验和内皮细胞条件培养检测所表达Ang-1蛋白的生物学活性。结果显示我们通过密度梯度离心和贴壁培养相结合的方法获得了比较纯的rMSCs,慢病毒感染后Ang-1可整合至rMSCs基因组中,并可正确转录和表达,所表达的Ang-1蛋白具有促进血管生长的生物学活性。第三部分:血管生成素-1基因修饰的骨髓间充质干细胞静脉移植对脑梗死的疗效及其迁移、分化的观察线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,通过体征的观察和TTC染色验证模型的成功与否。然后通过股静脉移植基因修饰的rMSCs,通过modified Neurological Severity Scores(mNSS)评分法进行大鼠行为学观察,脑片HE染色观察组织学变化。利用载体自带的EGFP报告基因,在荧光显微镜下观察移植细胞的迁移和分布,并通过NF200、GFAP、NSE抗体的免疫荧光染色观察移植细胞在脑中的分化情况。结果显示,线栓法建立的大鼠MCAO模型稳定可靠,可很好地模拟人类急性脑缺血的病理生理变化。经rMSCs移植治疗的MCAO大鼠神经功能和组织学的恢复都好于对照组,而Ang-1和rMSCs联合治疗的MCAO大鼠神经功能和组织学观察则显示优于单纯rMSCs治疗组,证实了Ang-1和rMSCs的协同治疗作用。另外我们观察到移植的rMSCs可迁移定居至脑损

关键词：血管生成素-1 慢病毒载体骨髓间充质干细胞大脑中动脉栓塞

来源：评论

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