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文献类型

1 篇 学位论文

馆藏范围

1 篇 电子文献
0 种 纸本馆藏

日期分布

学科分类号

1 篇 医学
- 1 篇 临床医学

主题

1 篇 血管紧张素ii氧化...
1 篇 肾素-血管紧张素系...
1 篇 易卒中高血压大鼠
1 篇 血管紧张素ii受体...
1 篇 内皮祖细胞

机构

1 篇 福建医科大学

作者

1 篇 余毅

语言

1 篇 中文

检索条件"主题词=血管紧张素II氧化应激"

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详细简洁

排序：

坎地沙坦对盐负荷高血压大鼠内皮祖细胞和氧化应激的影响

坎地沙坦对盐负荷高血压大鼠内皮祖细胞和氧化应激的影响

引用

作者：余毅福建医科大学

学位级别：博士

目的研究血管紧张素ii受体拮抗剂(ARB)坎地沙坦对盐负荷易卒中自发性高血压大鼠(SHRSP)外周血内皮祖细胞(EPC)数目和功能的影响及对氧化应激的抑制作用,探讨ARB对EPC的影响与抗氧化应激的关系,为ARB临床治疗心血管疾病提供新的理论和实... 详细信息

目的研究血管紧张素ii受体拮抗剂(ARB)坎地沙坦对盐负荷易卒中自发性高血压大鼠(SHRSP)外周血内皮祖细胞(EPC)数目和功能的影响及对氧化应激的抑制作用,探讨ARB对EPC的影响与抗氧化应激的关系,为ARB临床治疗心血管疾病提供新的理论和实验依据。方法 12周龄SHRSP和WKY大鼠,予8%高盐饮食。SHRSP随机分为4组,高盐饮食同时给予相应药物干预:(1)坎地沙坦组(Can, n=6),给予坎地沙坦1mg/kg/day灌胃;(2)抗氧化剂Tempol组(Tem, n=6),Tempol 1mmol/L溶解于水中,大鼠自由饮水;(3)利尿剂三氯噻嗪组(TCM, n=6),予TCM 1.6 mg/kg/day灌胃;(4) SHRSP组(SHRSP, n=6),予等量溶媒灌胃。于实验2周末,收集并分离外周血单个核细胞(MNC),用流式细胞仪检测MNC中CD34+细胞(假定为EPC)百分数。将MNC接种于培养板,24h后的非贴壁MNC(其中含EPC)部分用于硫代巴比妥酸反应物(TBARS)检测和迁移试验,部分继续培养,观察EPC集落形成,显微镜下计数EPC集落。EPC集落进行免疫荧光检测,观察内皮细胞标志物CD31的表达。抽取鼠肾皮质、主动脉和左心室组织总RNA,逆转录为cDNA,采用Real time PCR检测烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶(NAD(P)H氧化酶) cDNA水平。组织病理行主动脉PAS染色和gp91phox免疫组化检查。14周龄SHRSP和WKY大鼠,取外周血培养形成EPC集落。显微镜下挑取EPC集落,提取细胞总RNA,RT-PCR检测EPC集落细胞肾素-血管紧张素系统(RAS)组分mRNA的表达。结果 1.坎地沙坦、Tem和TCM均显著降低了高盐SHRSP收缩压(P<0.01),但坎地沙坦与TCM降压幅度无显著差别。 2.从大鼠外周血分离MNC,用流式细胞仪检测MNC中CD34+细胞,SHRSP组CD34+细胞百分数(% MNC)显著低于WKY组(0.40±0.02% vs 1.08±0.10%);坎地沙坦和Tem均显著增强了高盐SHRSP CD34+细胞百分数(0.84±0.09%、0.61±0.08% vs 0.40±0.02%) (P<0.01),而TCM则无明显作用(0.38±0.13% vs 0.40±0.02%)。 3. MNC体外培养形成EPC集落,免疫荧光检测CD31阳性。SHRSP组EPC集落形成能力显著低于WKY组(5.3±3.0 vs 32.2±8.6) (P<0.01);坎地沙坦和Tem均显著增强了高盐SHRSP EPC集落形成能力(198.5±46.9、45.3±6.3 vs 5.3±3.0) (P<0.01),而TCM无明显作用(3.8±0.4 vs 5.3±3.0)。 4.迁移试验结果表明,SHRSP组非贴壁MNC(含EPC),对间质来源生长因子(SDF-1)和血管内皮生长因子(VEGF)趋化性显著受损(P<0.01),坎地沙坦增强了高盐SHRSP非贴壁MNC对SDF-1的趋化性,而Tem和TCM均无明显作用。VEGF mRNA在主动脉中的表达,SHRSP组显著低于WKY组(P<0.01),坎地沙坦和Tem均显著上调了高盐SHRSP主动脉VEGFmRNA的表达(P<0.01)。 5.检测含EPC的非贴壁MNC中TBARS浓度,SHRSP组显著高于WKY组;坎地沙坦和Tem均显著降低了高盐SHRSP TBARS水平(P<0.01),而TCM无明显作用。 6. NAD(P)H氧化酶亚单位mRNA在肾皮质、左心室和主动脉中的表达,SHRSP组显著高于WKY组(P<0.01);坎地沙坦和Tem显著下调了NAD(P)H氧化酶亚单位p22phox、gp91phox或p47phox mRNA在高盐SHRSP肾皮质、左心室和主动脉中的表达(P<0.01),而TCM未见类似作用。 7.主动脉病理和免疫组化显示,坎地沙坦和Tem减轻了高盐SHRSP血管壁损伤,下调了gp91phox在主动脉中的表达,而TCM作用不明显。 8.在SHRSP和WKY大鼠EPC集落细胞中检测到肾素、组织蛋白酶D、糜蛋白酶、AT1和AT2受体mRNA的表达,但未检测到血管紧张素原和血管紧张素转换酶mRNA的表达。结论 1.我们成功地将大鼠外周血MNC体外培养形成EPC集落,免疫荧光检测内皮细胞标志物CD31阳性。 2.坎地沙坦增加了高盐SHRSP EPC数目和EPC集落形成能力,

关键词：血管紧张素ii受体阻滞剂内皮祖细胞血管紧张素ii氧化应激易卒中高血压大鼠肾素-血管紧张素系统

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