检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：牛天水第四军医大学

学位级别：硕士

人NDRG2(N-myc downstream regulated gene2)基因是邓艳春等通过锚定PCR方法以正常成人全脑cDNA为模板，最先发现并克隆获得。该基因的cDNA全长为2,024bp，染色体定位在14q11.2，含有15个内含子，16个外显子，可分别编码357和371个氨基... 详细信息

人NDRG2(N-myc downstream regulated gene2)基因是邓艳春等通过锚定PCR方法以正常成人全脑cDNA为模板，最先发现并克隆获得。该基因的cDNA全长为2,024bp，染色体定位在14q11.2，含有15个内含子，16个外显子，可分别编码357和371个氨基酸残基。目前已经报道的该家族成员有4个，分别为：NDRG1、NDRG2、NDRG3和NDRG4。BLAST序列比对结果显示该家族各成员间氨基酸的同源性很高，但在各组织器官中的表达模式却明显不同。这提示NDRG家族成员可能在不同的组织中发挥类似的功能。 NDRG2与肿瘤的发生、发展及转归密切相关，在组织胚胎的发育及细胞分化中有着重要的作用。该分子还参与了细胞的应激反应，并且与阿兹海默症等神经系统疾病有关。近年来关于NDRG2参与的信号通路也有了深入的研究。研究表明，NDRG2受Myc﹑p53, hif-1﹑ER等多种转录因子的调控；可以与MSP58﹑PRA1等分子相互作用，参与了MAPK及TCF/β-catenin的信号通路的活化。但目前的研究结果多局限于细胞系及组织水平，缺乏整体水平的研究。利用基因剔除和转基因技术，从整体动物水平来研究基因功能已成为现代生物学领域常用的研究策略。基因敲除（knock out）技术是利用同源重组原理将外源基因序列转移至胚胎干细胞内，以取代基因组上序列相同或相近的基因并使后者完全丧失功能,彻底敲除靶基因。条件性基因敲除（Conditional knock out）主要通过染色体位点特异性重组酶系统Cre-LoxP来实现靶基因的敲除。基因敲低（knock down）技术是通过基因遗传修饰的方法使得生物体中某些特定基因的表达量降低，这些修饰方法有染色体DNA的改变、与mRNA转录本或靶基因具有互补序列的各种小RNA的干涉作用。这些方法具有手段简单，易于操控的特点，而且可以不同程度的干涉目的基因的表达。为进一步研究NDRG2的功能，分别构建了Ndrg2条件性基因敲除小鼠（Ndrg2-Conditional knockout小鼠）与Ndrg2shRNA转基因小鼠（Ndrg2-knockdown小鼠），并对获得的模式小鼠进行了鉴定和表型初步分析。第一部分实验中，为了在整体动物水平研究Ndrg2功能，我们委托上海南方模式生物科技发展有限公司构建了基于Cre-loxP系统的Ndrg2条件性基因敲除小鼠。并通过基因组PCR对小鼠基因型进行了鉴定；通过Realtime PCR、Western blot、免疫组化方法对小鼠体内Ndrg2的敲除效果进行了分析；利用大体观察、HE染色、Realtime PCR、免疫组化方法对基因敲除小鼠的表型进行了分析；Realtime PCR检测了Ndrg2敲除后对NDRG家族其它同源分子的影响。结果： Ndrg2基因敲除载体成功整合到小鼠基因组中；在RNA和蛋白水平，Ndrg2在小鼠各组织中被完全敲除，成功构建了Ndrg2条件性基因敲除小鼠；大体观察未发现小鼠生殖﹑发育﹑体重有异常表型。在肌肉、肾、胰腺、脾、肺组织结构也未有异常变化。同时在敲除Ndrg2后，小鼠体内主要组织中Ndrg1、Ndrg3、Ndrg4的表达量呈现上升趋势。第二部分实验中，观察小鼠肝脏组织切片发现，肝血管内皮相对于野生鼠有明显的增厚，并且内皮细胞的标记分子（VWF、CD31、CD34）也明显升高。为了进一步研究NDRG2对内皮细胞的作用，利用病毒感染的方法，构建了NDRG2过表达和低表达的内皮细胞系。通过流式细胞仪检测观察NDRG2对血管内皮细胞增殖的影响。结果：成功的构建了过表达和NDRG2干涉内皮细胞系。与对照相比，过表达NDRG2组中，NDRG2的表达量升高了24倍，在NDRG2干涉组中，NDRG2的表达量降低了50%；通过检测细胞周期发现，在过表达NDRG2组中，细胞的增殖率相比对照组显著下降。在干涉NDRG2组中，细胞的增殖率相比对照组显著上升。第三部分实验中，我们构建了基于RNAi技术的Ndrg2shRNA转基因小鼠。通过基因组PCR对小鼠基因型进行了鉴定；利用Realtime PCR、Western blot等方法对小鼠体内Ndrg2的干涉效果进行了分析。结果：Ndrg2干涉载体已经整合到小鼠基因组中，且在转录水平能够检测到；而与野生型小鼠相比，Ndrg2shRNA转基因小鼠的各组织中Ndrg2的表达量并没有明显的下降。结论：Ndrg2条件性基因敲除小鼠体内Ndrg2基因被完全敲除。Ndrg2基因的失活并未导致肉眼可见的小鼠异常表型。小鼠肝血管内皮增厚，血管内皮细胞标志物(VWF、CD31、CD34)表达明显的上调，HUVEC细胞中过表达NDRG2能够抑制血管内皮细胞的增殖。

关键词： NDRG2 条件性基因敲除 shRNA转基因小鼠表型分析增殖人脐静脉内皮细胞

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水稻dull突变体w54的基因图位克隆和温度敏感型黄叶突变体yl2(t)的表型分析与基因定位

水稻dull突变体w54的基因图位克隆和温度敏感型黄叶突变体yl2(t)...

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作者：孔飞南京农业大学

学位级别：硕士

水稻突变体的筛选是研究水稻生长发育调控过程和分子调控机制的重要手段,利用图位克隆的方法克隆水稻突变体基因并分析其功能对解析水稻生理代谢途径,鉴定参与这些途径的新的关键因子具有重要意义。本研究是在汪鹏(2015)研究结果的基础... 详细信息

水稻突变体的筛选是研究水稻生长发育调控过程和分子调控机制的重要手段,利用图位克隆的方法克隆水稻突变体基因并分析其功能对解析水稻生理代谢途径,鉴定参与这些途径的新的关键因子具有重要意义。本研究是在汪鹏(2015)研究结果的基础上对水稻dull突变体w54突变基因的进一步定位和图位克隆,同时分析了 w54中淀粉代谢相关基因的表达水平和关键酶类的活性。此外,从粳稻越光(Koshihikari)化学诱变的M2群体中分离到一个温度敏感型黄叶突变体y12(t),分析了其表型,并对突变基因进行了定位。主要结果如下:1.w54种子的胚乳呈现半不透明(dull),直链淀粉含量显著降低。半薄切片观察表明,与野生型相比,w54胚乳中复合型淀粉颗粒发育正常,但Ⅰ2-KI染色较浅。2.种子灌浆期间贮藏物质积累曲线表明,除开花后15天(days after fertilization,DAF),在测定的各时期,w54胚乳中贮藏物质的积累量较野生型显著低。同时期,w54种子中直链淀粉的积累与野生型相比显著缓慢。3.前期已将w54突变基因定位在水稻第6染色体长臂的280kb区间内;在此基础上,增加定位极端个体至900个、加密分子标记,最终将w54突变基因定位于第6染色体标记W72和W47之间约187kb的区间内,该区间内预测有26个ORF,在第23个基因的第八外显子上发现一个C到T的突变,导致蛋白质翻译提前终止。***-PCR实验发现,与野生型相比,6和9DAF的w54胚乳中Wxb基因的表达水平显著降低,在9天时仅为野生型的十分之一,但12天时恢复至野生型水平。Wxb基因pre-mRNA剪接的半定量测定表明,12DAF的w54胚乳中Wxb基因异常剪接的产物增多。***-PCR结果表明,与野生型相比,在w54的12DAF胚乳中控制淀粉合成基因淀粉分支酶Ⅱla、蔗糖合酶和淀粉合酶IVb的表达水平显著降低,其他基因表达量的变化较小。*** blotting分析表明,在12DAF的w54和野生型胚乳中,淀粉合成相关酶中磷酸烯醇式丙酮酸双激酶、ADPG焦磷酸化酶大亚基2、ADPG焦磷酸化酶小亚基2b、质体磷酸化酶1、淀粉分支酶Ⅰ和淀粉合酶Ⅱa的蛋白含量均未发现显著差异。7.活性电泳表明,与野生型相比,w54的12DAF的胚乳中淀粉合成关键酶类如异淀粉酶和普鲁兰酶、可溶性淀粉合酶Ⅰ以及质体磷酸化酶的酶活均没有显著差异,而可溶性淀粉合酶Ⅲa的活性略微升高。综上所述,w54胚乳中Wxb基因的表达水平较野生型显著下调,并且Wxb基因的mRNA异常剪接量增加,推测W54蛋白可能通过调控Wxb基因的转录或者转录后调控参与直链淀粉的合成。8.水稻黄叶突变体y12(t)经20℃持续处理15天时幼苗表现为黄叶,幼苗叶片中叶绿素含量较野生型显著降低,但叶绿体发育未受到明显影响;若处理时间延长至20天,y12(t)幼苗则不能继续生长最后死亡,转移至或在30℃连续生长时叶色正常。田间生长条件下,y12(t)的农艺性状与野生型相比,没有显著差异。qRT-PCR结果表明,20℃和30℃两种温度条件下,与野生型相比,y12(t)幼苗中叶绿素合成相关基因的表达出现不同的变化。遗传分析表明,y12(t)突变表型受一对隐性核基因控制,该基因被定位在第8染色体长臂末端标记N8-36与P16之间647kb范围内,是一个新的控制水稻叶绿素合成的基因。

关键词：水稻突变体图位克隆表型分析基因定位

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细胞色素CYP3A11 knock-down小鼠的表达检测及表型分析

细胞色素CYP3A11 knock-down小鼠的表达检测及表型分析

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作者：赵从西南大学

学位级别：硕士

细胞色素P450 (cytochrome, CYP450)是参与药物代谢的一类非常重要的代谢酶,在多种内源性和外源性物质的生物代谢中起着重要作用。大约60%的普通处方药都需要通过P450酶进行生物转化。CYP3A是CYP450中最重要的亚家族成员之一,参与内源... 详细信息

细胞色素P450 (cytochrome, CYP450)是参与药物代谢的一类非常重要的代谢酶,在多种内源性和外源性物质的生物代谢中起着重要作用。大约60%的普通处方药都需要通过P450酶进行生物转化。CYP3A是CYP450中最重要的亚家族成员之一,参与内源性物质的生物合成、代谢以及外源性物质的氧化代谢。据国外研究报道在CYP3A亚家族中,CYP3A11是小鼠含量最丰富的亚型,且是小鼠肝脏表达量最高(占小鼠肝脏P450酶总体表达量的20%)、代谢活性最强的P450酶,然而其在药物代谢中的作用还没有完全被世人所知。为了充分发挥药物疗效,减少或避免不良反应的发生,需要对CYP3A11的表达进行更深入的研究。 Knock-down是在药物代谢研究中应用最广泛的特异性改变蛋白表达的一类新技术。本文在前期采用该技术制备的CYP3Allknock-down小鼠基础上,以单线法连续繁殖至第3代的近交系小鼠为实验动物,通过RT-PCR、FQ-PCR和微粒体外孵育等分子生物学方法研究了CYP3A11转基因小鼠在连续传代过程中的表达情况、miR-shRNA对CYP3A11转基因小鼠的干扰效率和CYP3A11转基因小鼠表型分析,为以后利用慢病毒载体制作其它小鼠模型和大型转基因哺乳动物提供理论依据,同时为建立代谢谱更广、适用范围更大的P450酶人源化转基因小鼠奠定基础。研究主要结果如下： 1.采用PCR和RT-PCR相结合的方法定性鉴定了连续3代转基因小鼠的阳性率。结果表明：单线近交繁育的转基因小鼠阳性率和表达率均为100%,此结果说明转基因动物在单线近交繁殖群体中并未出现基因分离现象,可以通过此方法建立稳定的阳性转基因品系。 2.紫外灯下可观察到小鼠耳廓皮肤及尾巴的EGFP特征性绿色荧光,该结果表明目的基因已在小鼠体内表达。 3.通过荧光定量PCR分析,结果显示在肝脏中miR-shRNA对CYP3A11转基因小鼠的干扰效率最高可达80%左右,表明由慢病毒介导的miRNA分子也得以表达并因此显著地减少了目的基因的表达。 4.对CYP3A11基因knock-down小鼠表型分析采用肝脏微粒体体外代谢活性检测方法,结果发现knock-down小鼠的肝脏微粒体对CYP3A11酶的经典底物6β-羟基睾酮的代谢活性比对照组降低了80%以上；表达无关对照shRNA转基因小鼠与正常FVB/N小鼠的CYP3A11酶的体外代谢活性无显著差异,表明慢病毒介导的转基因过程对CYP3A11酶的活性无显著差异,与基因表达的降低幅度相当。综上所述,得到以下结论： 1.利用konck-down技术建立起来的转基因动物通过单线法近交繁殖,在转基因后代群体中未出现基因分离现象,因此该繁育方法可以用来建立阳性转基因品系。 2.慢病毒介导技术显著地减少目的基因的表达,为制备CYP3A亚家族人源化小鼠奠定了技术基础。

关键词：小鼠细胞色素P450 CYP3A11 FQ-PCR EGFP基因表型分析

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EMS诱变西瓜突变体库的构建及表型分析

EMS诱变西瓜突变体库的构建及表型分析

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作者：朱娜娜东北农业大学

学位级别：硕士

创建突变体库筛选突变体可以为西瓜育种提供新的种质材料,从而解决遗传狭窄的问题,推进西瓜种质创新。本试验以东北农业大学西甜瓜育种研究室自育的西瓜品系W1-17为材料,以EMS为诱变剂,处理西瓜W1-17种子以创建突变体库,分析诱变后的种... 详细信息

创建突变体库筛选突变体可以为西瓜育种提供新的种质材料,从而解决遗传狭窄的问题,推进西瓜种质创新。本试验以东北农业大学西甜瓜育种研究室自育的西瓜品系W1-17为材料,以EMS为诱变剂,处理西瓜W1-17种子以创建突变体库,分析诱变后的种子发芽率、相对出苗率和相对成苗率情况,确定EMS最佳诱变条件。调查M1代和M2代植株农艺性状,初步筛选突变体,进行突变表型鉴定和分析,为进一步构建西瓜突变体库,拓宽西瓜资源遗传背景和开展西瓜功能基因组学研究提供基础数据。主要结果如下:(1)采用6个EMS诱变浓度(0%,0.2%,0.6%,1.0%,1.4%,1.8%),4个处理时间(3 h,6h,9 h和12 h),分析诱变后的种子发芽率、相对出苗率和相对成苗率情况,最终确定EMS处理浓度1.0%、诱导时间9 h是西瓜品系W1-17种子的最佳诱变条件。(2)以此最佳诱变条件构建含有120个M1代家系及相应M2代种子的西瓜突变体库,对M1代进行观察和记录,共出现叶面黑斑点、叶面白斑点、叶畸形、叶变大、叶褶皱、叶簇生、部分黄化、花畸形、花瓣畸形、雄花不散粉、茎变粗、果畸形、种子变小、种子变少、种子变大、无籽、卷须畸形、矮小、生长缓慢等20种潜在的变异类型。总变异频率达18.33%。对M2代群体进行株系和单株的系统观察,得到叶色变浅、叶变小、叶变大、叶色变深、叶边缘内卷、叶片无蜡质、第一真叶浅黄化、叶片裂刻变深、叶片裂刻变浅、叶脉黄化、叶边缘内卷、叶片黄化、两性花、花期早、花期晚、雄蕊畸形、花瓣畸形、花冠大、花冠小、柱头畸形、花色变浅、子房变大、不育、茎变粗、茎变细、节间变短、节间变长、生长缓慢、矮化株、分支方式变异等48种不同变异类型。总变异频率达20.55%。(3)选取M2代10个典型变异单株种子,培育成苗后,使用23对SSR引物进行分析,发现9份材料在DNA水平上有变异。

关键词：西瓜 EMS 诱变表型分析

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黄瓜EMS突变体库的构建及表型分析

黄瓜EMS突变体库的构建及表型分析

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作者：何书强河北科技师范学院

学位级别：硕士

黄瓜（Cucumis sativus L.）是重要的世界性蔬菜。栽培黄瓜遗传基础狭窄,地方品种的种质资源趋于单一,变异率只有3%8%。突变体是新品种选育和功能基因组学研究的重要材料,构建黄瓜突变体库,可丰富种质资源,推进育种进程。本研究以华南... 详细信息

黄瓜（Cucumis sativus L.）是重要的世界性蔬菜。栽培黄瓜遗传基础狭窄,地方品种的种质资源趋于单一,变异率只有3%8%。突变体是新品种选育和功能基因组学研究的重要材料,构建黄瓜突变体库,可丰富种质资源,推进育种进程。本研究以华南型黄瓜优质地方品种‘唐山秋瓜’高代自交系‘32X’为材料,利用甲基磺酸乙酯（Ethyl methane sulfonate,EMS）诱变技术,优化诱变技术体系,构建突变体库,结合表型分析、筛选,鉴定出具有重要农艺性状的突变体,为黄瓜新品种的选育、重要农艺性状遗传分析提供了重要材料。研究结果如下:1.利用6个EMS浓度梯度（0%、0.4%、0.8%、1.2%、1.6%、2.0%）处理高代自交系‘32X’黄瓜种子12 h,根据诱变后的种子发芽率、出苗率,最终筛选出最适EMS浓度为1.6%。2.采用此最适浓度处理5000粒‘32X’黄瓜种子,M1代群体共成活1920株,成活率为38.40%,其中1132个单株获得自交种子;获得了极矮化植株、花期早、果色嵌合体、果实变短、叶色嵌合体、果实畸形等突变体。3.M2代群体共存活3743个单株（662个株系）,初步筛选出1055个候选突变单株,总的表型突变率达28.19%,其中出现了三片子叶、子叶半黄化、真叶白化、真叶褶皱、卷须对生、两性花、花萼叶片化、果实无刺毛等,共有64种典型表型变异,其中叶片突变率最高达8.68%,其次为花、株型、果实、子叶等表型性状器官,分别占总变异株数的8.60%、6.79%、2.81%、1.31%;4.经过筛选,构建了包含36个典型突变株系的M3代群体,表型鉴定发现20个株系已纯合,主要有果实球形、果瘤密、黄果皮、白色卷须、种子性状变异等重要农艺性状的变异类型,总的变异率达16.13%,典型突变株系有H18S6、H18S14、H18S15、H18S619、H18S21、H18S24、H18S25、H18S30、H18S32等。对M3代种子进行表型鉴定,发现种子表皮为淡黄色、种子形状为卵圆形、种子形状近圆形、种子畸形等多种变异类型。

关键词：黄瓜甲基磺酸乙酯(EMS) 突变体库表型分析

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巨噬细胞极化分型的表型分析及对创面愈合的影响

巨噬细胞极化分型的表型分析及对创面愈合的影响

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作者：路超青岛大学

学位级别：硕士

研究背景与目的　　1900年，ElieMetchnikoff在《二十年来对传染病的免疫性研究》一文中，首次提出了噬菌细胞免疫学说(Phagory-tentheorie )，并被视为巨噬细胞(Macrophages，M0)探索与发现的起点。经过一百多年的研究，学者们对巨噬... 详细信息

研究背景与目的　　1900年，ElieMetchnikoff在《二十年来对传染病的免疫性研究》一文中，首次提出了噬菌细胞免疫学说(Phagory-tentheorie )，并被视为巨噬细胞(Macrophages，M0)探索与发现的起点。经过一百多年的研究，学者们对巨噬细胞的认知已经远远超越了其在免疫方面发挥的作用，进而在损伤修复、创伤微环境调节等方面进行了细致深入的研究。目前，巨噬细胞已被证实与各种各难治性创面的发生有着密切的关联,但动物实验方面,其对愈合转归的影响，结论却不尽相同，甚至相互矛盾。这也提示了单核/巨噬系统在愈合中发挥的作用存在着复杂性。随着不同表型巨噬细胞(M1、M2)的发现、定向诱导分化技术的成熟以及体外实验大量数据的支持，使得我们可以通过尝试巨噬细胞定向诱导分化及外源性巨噬细胞输注的方式观察讨论不同表型巨噬细胞对创面愈合的不同作用，为难治性创面的细胞治疗提供思路，亦为加速愈合的新药研制奠定基础。　　本课题利用单核细胞定向诱导分化技术获得不同表型巨噬细胞(M1、M2)，通过细胞悬液创周局部注射的手段对大鼠创伤模型进行差异化处理，并通过若干愈合指标、细胞因子的测定，讨论不同表型巨噬细胞(M1、M2)对创面愈合的影响。　　方法　　1.骨髓单核细胞的提取与激活。提取大鼠股骨骨髓细胞，并通过差速贴壁、M-CSF刺激等方法纯化、激活获得实验所需的巨噬细胞,应用流式细胞技术分析培养结果。　　2.巨噬细胞定向诱导分化。使用LPS刺激巨噬细胞M0向M1转化，IL-4刺激巨噬细胞M0向M2转化，并通过ELISA分析验证M1、M2诱导的有效性。　　3.大鼠创伤模型的制备及其可用性的评价。实验大鼠背部制作4枚直径6mm全层皮肤贯通伤模型，通过创面愈合率分析、HE染色分析评价所制模型的可用性。　　4.创面的实验条件干预及评价：实验动物分1天组、3天组、7天组、10天组、14天组5组，每组5只。按照随机双盲的原则分别对每只鼠的四枚创面做如下处理：①局部(皮下、真皮层及创基浸润，同下)注射M1悬液。②局部注射M2悬液。③局部注射灭菌PBS。④不做任何处理。到达实验天数后，处死实验鼠取标本进行愈合相关指标的检测、分析。通过创面未愈面积宏观描述愈合速率的差异，HE染色、MASSON染色、免疫组化微观分析导致愈合速率差异存在的原因。　　结果　　1.大鼠骨髓细胞培养CD14、CD68双阳性细胞比率可达86.5%。　　***、IL-4刺激可分别使巨噬细胞显著表达IL-12、IL-10。　　3.大鼠背部不同解剖位置的四枚创面愈合速率无统计学差异，HE染色结果无明显差异。　　4.相对于空白对照组，M1组创面可观察到愈合延迟，HE染色及MASSON染色提示创面存在炎细胞浸润时间长、肉芽发生及胶原生成缓慢等不利于愈合的改变;未愈创面面积、免疫组化(VEGF、bFGF、TGF-β1)定量分析提示相关指标较空白对照组存在统计学差异。M2组可观察到愈合提前，上述指标分析结果与M1组相反且存在统计学意义。PBS组与空白对照组间无统计学差异。　　结论　　1.M-CSF可体外诱导大鼠骨髓细胞形成巨噬细胞。　　***、IL-4分别可诱导巨噬细胞向M1、M2转变。　　3.打孔器法制备大鼠背部创伤愈合模型的方法可用。　　4.外源性M1输注可延迟愈合、外源性M2输注可促进愈合、PBS注射对愈合无显著影响。

关键词：创面愈合巨噬细胞细胞极化表型分析

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勋章菊有性繁殖生物学及后代表型分析

勋章菊有性繁殖生物学及后代表型分析

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作者：王韡苏州大学

学位级别：硕士

勋章菊（Gazania rigens L.）是菊科勋章菊属的多年生草本植物，原产于南非，性喜温暖向阳，耐旱、耐热、耐贫瘠，也具有一定的抗寒能力。头状花序中有单瓣和复瓣两种，花径7-12cm，花色丰富多彩，花瓣清晨开放，夜晚闭合，单花寿命长达... 详细信息

勋章菊（Gazania rigens L.）是菊科勋章菊属的多年生草本植物，原产于南非，性喜温暖向阳，耐旱、耐热、耐贫瘠，也具有一定的抗寒能力。头状花序中有单瓣和复瓣两种，花径7-12cm，花色丰富多彩，花瓣清晨开放，夜晚闭合，单花寿命长达10d，既可观叶也可观花，是既能地栽也可盆栽的新优地被植物。本研究对勋章菊花器官形态、花粉和柱头表面物质、质量及发芽指标、种子形态及蛋白成分进行了分析，通过自然和人工杂交，从花色、株型、叶型及种子生理等方面对杂交后代表型进行了探讨，主要研究结果如下：（1）勋章菊头状花序包含无性的舌状花和两性的管状花，花药和花柱均包被在管状花瓣内，随着开花进程的推移，花柱逐渐伸出花瓣，柱头呈现棒状→“丫”状→卷牛角状的形态变化；花粉粒整体呈现近球形，表面有脊，脊上无刺，呈不规则的向内凹陷的多边形，直径约28μm，花粉表面有网状纹饰；授粉时柱头为“丫”状，花粉粒被柱头上表面的木耳状突起所截获。（2）勋章菊的花粉为黄色，后期为白色，花粉中所含的色素为β-胡萝卜素，由于β-胡萝卜素在强光下不稳定，导致花粉由黄色变为白色，花粉表面蛋白的分子量在30-50kD之间，蛋白等电点为5.51-9.07。（3）随着柱头形态的变化，雌蕊呈现不同程度的缩短，当柱头达到卷牛角状时，部分柱头甚至会反卷，雌蕊缩短到接近管状花花瓣的位置。在时间上花粉先熟，在空间上花粉粘于花柱上方或外侧，柱头可授面则处于下方或内侧，有助于勋章菊的异花授粉。（4）勋章菊的种子分为饱满和不饱满两类，种子外被冠毛，可育种子由外种皮、内种皮和胚三部分构成，外种皮的存在与否对勋章菊种子的萌发影响不大，可根据种子的外部形态对种子的质量进行鉴定。（5）不同花色的品种，其种子的外部形态也有差异，利用SDS-PAGE电泳技术对种子蛋白进行分析发现，不同杂交后代的种子既有相同的蛋白条带，又有各自的特征条带。（6）勋章菊杂交后代的变异性较强，具有一定的分离比。不同花色的品种杂交后代具有明显的偏母倾向，多表现在条纹、晕圈与眼斑的差异上。

关键词：勋章菊有性杂交表型分析

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解脲脲原体对大环内酯类抗生素耐药表型分析

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中国公共卫生 2006年第12期22卷 1492-1493页

作者：孟冬娅薛文成胡晓芳杨婧万楠陈渝宁马晓博沈阳军区总医院检验科沈阳110016

解脲脲原体(Uu)是引起非淋菌性泌尿生殖道炎(NGU)的主要致病体,约占30%－50%,大环内酯类(Macrolides)抗生素是其主要治疗药物之一。由于发病率不断增加。以及抗生素的不规范使用,耐药Uu株逐年增加,甚至出现多重耐药,给NGU的防治带来一... 详细信息

解脲脲原体(Uu)是引起非淋菌性泌尿生殖道炎(NGU)的主要致病体,约占30%－50%,大环内酯类(Macrolides)抗生素是其主要治疗药物之一。由于发病率不断增加。以及抗生素的不规范使用,耐药Uu株逐年增加,甚至出现多重耐药,给NGU的防治带来一定困难。本文分析了2003－2005年分离自妇科、皮肤科门诊患者泌尿生殖道分泌物的Uu株对大环内酯类抗生素的耐药性变化,并分析了Uu对4种大环内酯抗生素耐药表型。为进一步研究其耐药机制提供依据。现报告如下。[第一段]

关键词：大环内酯类抗生素抗生素耐药解脲脲原体表型分析泌尿生殖道分泌物大环内酯抗生素泌尿生殖道炎非淋菌性

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EDA变异导致选择性先天缺牙的表型分析

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实用口腔医学杂志 2024年第1期40卷 71-75页

作者：郭新月许涛云段小红口颌系统重建与再生全国重点实验室国家口腔疾病临床医学研究中心陕西省口腔医学重点实验室空军军医大学第三附属医院口腔生物学教研室和口腔罕见病与遗传病门诊西安710032

目的:探讨EDA基因变异导致选择性先天缺牙的表型特征。方法:从PubMed及多个中文数据库检索截止2023年4月已发表的EDA变异导致的选择性先天缺牙病例,分析缺牙数目、不同牙位缺失率并对比男女患者表型特征。结果:EDA基因变异导致的选择性... 详细信息

目的:探讨EDA基因变异导致选择性先天缺牙的表型特征。方法:从PubMed及多个中文数据库检索截止2023年4月已发表的EDA变异导致的选择性先天缺牙病例,分析缺牙数目、不同牙位缺失率并对比男女患者表型特征。结果:EDA基因变异导致的选择性先天缺牙好发于下颌中切牙(47.7%)及上下颌侧切牙(41.6%, 40.1%),较少累及磨牙。男性较女性易患病,且男性缺牙严重程度显著高于女性。结论:EDA变异的表型分析有助于医生从缺牙表型预测致病基因并开展遗传咨询。

关键词： EDA变异选择性先天缺牙表型分析

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籽用美洲南瓜EMS诱变突变体库的构建及表型分析

籽用美洲南瓜EMS诱变突变体库的构建及表型分析

引用

作者：孙明洋内蒙古农业大学

学位级别：硕士

籽用美洲南瓜为葫芦科南瓜属草本植物,是世界主要蔬菜作物之一。我国籽用南瓜育种材料遗传基础相对狭隘,有利重组体的数量及基因资源有限,加之籽用南瓜种间亲缘关系较近,严重阻碍了常规育种发展和重要农艺性状的遗传研究。突变体创制是... 详细信息

籽用美洲南瓜为葫芦科南瓜属草本植物,是世界主要蔬菜作物之一。我国籽用南瓜育种材料遗传基础相对狭隘,有利重组体的数量及基因资源有限,加之籽用南瓜种间亲缘关系较近,严重阻碍了常规育种发展和重要农艺性状的遗传研究。突变体创制是种质资源创新和功能基因挖掘的重要途径之一。其中,甲基磺酸乙酯（EMS）因其具有诱变效率高、频率高和范围广的优点,已广泛应用于植物突变体库的构建,但目前国内外鲜见籽用美洲南瓜突变体库构建及相关研究的报道。因此,本研究利用EMS对籽用美洲南瓜自交系‘ZHL4’进行诱变处理,对M1、M2代群体单株在叶、花、茎、果实等方面进行表型变异观察,并对M2群体变异株系‘ZHL4-33’叶片和茎的显微组织结构进行观察,初步构建籽用美洲南瓜突变体库,拓宽籽用美洲南瓜遗传背景,加速功能基因的解析过程,为遗传改良工作提供帮助。主要研究结果如下: 1.本试验采用6个浓度梯度（0%、0.6%、1.2%、1.8%、2.4%、3.0%）和4个时间梯度（6 h、9 h、12 h、15 h）共计24个处理诱变籽用美洲南瓜自交系‘ZHL4’,通过计算不同处理的发芽致死率和出苗致死率,发现EMS浓度为1.8%处理15h后,种子的发芽致死率和出苗致死率都接近半致死剂量。因此确定1.8%EMS处理15h为最佳诱变处理条件。 2.M1群体呈现出子叶皱缩、真叶缺刻、叶色变浅、叶片皱缩、主茎变粗,植株矮生、花瓣畸形、花粉败育等特异性状,获得由1250个单株构成的籽用美洲南瓜突变体M1群体。 3.M2群体中共筛选到242个突变植株,45种表型变异,表现在叶和茎性状（叶片变大、黄化、内卷、裂刻变深、茎变粗、节间变短、分支多等）、花性状（花变小、花瓣褶皱、花瓣内卷、柱头畸形、花瓣数目变异等）和果实形状及种子形状与大小等方面,总的突变频率达到了25.17%。在M2代突变体中,筛选到茎节间变短、自封顶、叶柄变粗、主茎变粗、花柱增多且排列紧密、花粉败育、果实无籽、籽粒变多等有益突变材料。 4.‘ZHL4-33’叶片横切显微结构显示,突变体栅栏组织厚度显著高于野生型,排列紧凑,叶绿体较多,海绵组织排列相对松散,维管形成层痕迹明显。‘ZHL4-33’茎横切显微结构显示,突变体的维管束数量显著多于野生型,且排列紧密,但导管直径缩小;髓部细胞间隙较小,紧密程度较高;‘ZHL4-33’茎纵切显微结果显示,突变体的表皮厚度略大于野生型,细胞变大,细胞数目有所增加,细胞纵向长度高于野生型。

关键词：籽用美洲南瓜 EMS 表型分析突变体库显微组织结构

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