检索结果-内蒙古大学图书馆

中国临床康复 2005年第46期9卷 83-85,T0004页

作者：刘坡祁少海谢举临黄冰舒斌徐盈斌利天增中山大学附属第一医院烧伤科广东省广州市510080 中山大学中山眼科中心眼科视觉科学重点实验室广东省广州市510060

目的:采用单纯胰酶和中性蛋白酶联合胰酶两种不同的消化方式,观察表皮细胞表面抗原α6整合素和转铁蛋白受体CD71表达的变化,为荧光激活细胞分选术分选表皮干细胞选择合适的消化方法。方法:选取中山大学附属第一医院外科门诊包皮环切手... 详细信息

目的:采用单纯胰酶和中性蛋白酶联合胰酶两种不同的消化方式,观察表皮细胞表面抗原α6整合素和转铁蛋白受体CD71表达的变化,为荧光激活细胞分选术分选表皮干细胞选择合适的消化方法。方法:选取中山大学附属第一医院外科门诊包皮环切手术患者的皮肤标本10份,患者均知情同意,年龄14～22岁。每份标本均分为2份,分别用胰酶、中性蛋白酶联合胰酶进行消化,共20份,分为胰酶组、中性蛋白酶联合胰酶组,10份/组。胰酶组将皮条放入质量浓度为2.5g/L的胰酶中,4℃消化过夜。次日撕除表皮角质层,以弯镊轻刮皮肤上皮面,获得表皮基底层细胞;中性蛋白酶联合胰酶组将皮条放入质量浓度为2.5g/L的中性蛋白酶中,4℃消化过夜。次日轻撕下皮肤表皮层,将其剪成1mm×1mm大小的碎块,以质量浓度为2.5g/L的胰酶消化5min,获得表皮基底层细胞。分别取两组细胞悬液300μL,加入碘化丙啶标记死亡细胞,流式细胞仪检测死亡细胞百分率,计算细胞活力。以荧光标记的α6整合素和CD71抗体标记细胞表面抗原,通过流式细胞术检测抗原表达。剩余细胞以表皮细胞培养液重悬,移入预先铺有100mg/LⅣ型胶原的培养瓶中,接种密度为5×104/cm2,3d换液1次,观察两组细胞的生长情况。结果:实验纳入包皮环切手术患者的皮肤标本10份,每份标本分别用胰酶、中性蛋白酶联合胰酶进行消化,共20份,全部进入结果分析。①不同酶消化后两组细胞活力的比较:中性蛋白酶联合胰酶组细胞活力明显高于胰酶组[(86±1.81)%,(82±1.48)%,P<0.01]。②不同酶消化后两组细胞抗原的表达:胰酶组α6briCD71dim细胞占(8.00±1.69)%,α6briCD71bri细胞占(36.00±18.03)%,α6dim细胞占(40.00±10.08)%;中性蛋白酶联合胰酶组3种细胞所占比例依次为(30.00±8.59),(8.00±1.63),(38.00±8.72)%,两组各抗原的表达基本相似(P>0.05)。③不同酶消化后两组细胞形态学观察结果:胰酶组细胞贴壁及伸展较中性蛋白酶联合胰酶组稍迟0.5～1.0h,此后培养过程中生长增殖情况无明显差异,一般7d左右接近融合,传代。培养第7天,表皮细胞体积小,核浆比例大,可见夹杂有成纤维细胞。中性蛋白酶联合胰酶组细胞30min内基本贴壁,并有少量细胞伸展,60min后大部分细胞伸出短小伪足,胞质展开,折光率减低。培养第7天,表皮细胞体积小,核浆比例大,未见夹杂有成纤维细胞。结论:从对表面抗原表达影响的角度来看,单纯胰酶消化与中性蛋白酶联合胰酶消化后α6briCD71dim,α6briCD71bri,α6dim这3种表皮细胞的检出率基本相似,两种消化方法可根据习惯选用。但中性蛋白酶联合胰酶消化对细胞活力影响小,消化时机容易掌握,对细胞损伤相对小,适用于荧光激活细胞分选术分选表皮干细胞。

关键词：表皮/细胞学干细胞结合素类/生物合成受体,转铁蛋白流式细胞术

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

移植用表皮细胞培养的安全性标准

引用

中国组织工程研究与临床康复 2008年第18期12卷 3541-3544页

作者：王钰夏照帆韩姝解放军第二军医大学附属长海医院烧伤科上海市200433

表皮细胞培养为皮源匮乏的大面积烧伤患者的创面封闭提供了新的思路和途径。然而,由于涉及到人体应用,对于实验室培养的表皮细胞临床移植可能引发的人体安全性问题尚需进行全面的评价,以期为表皮细胞的临床移植提供安全性保障。同时建... 详细信息

表皮细胞培养为皮源匮乏的大面积烧伤患者的创面封闭提供了新的思路和途径。然而,由于涉及到人体应用,对于实验室培养的表皮细胞临床移植可能引发的人体安全性问题尚需进行全面的评价,以期为表皮细胞的临床移植提供安全性保障。同时建立严格控制的标准化表皮细胞培养体系对于保证表皮细胞生物学特征的稳定及增强移植安全性具有重要意义。文章系统阐述了表皮细胞体外培养的安全性标准。

关键词：皮肤移植表皮/细胞学细胞培养组织移植

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

重复利用Ⅳ型胶原以差速贴壁法分选表皮干细胞

引用

中国临床康复 2006年第13期10卷 38-40,i0002页

作者：刘虎仙贾赤宇付小兵胡大海谢晓繁解放军第四军医大学西京医院烧伤外科陕西省西安市710032 解放军总医院第一附属医院全军烧伤研究所北京市100037

目的:观察表皮干细胞对Ⅳ型胶原的黏附特性,评价重复利用Ⅳ型胶原以差速黏附法在分选表皮干细胞中的效果。方法:实验于2004-09/2005-06在解放军总医院第一附属医院全军烧伤研究所基础部完成。①包皮来自解放军空军总医院泌尿外科收治的7... 详细信息

目的:观察表皮干细胞对Ⅳ型胶原的黏附特性,评价重复利用Ⅳ型胶原以差速黏附法在分选表皮干细胞中的效果。方法:实验于2004-09/2005-06在解放军总医院第一附属医院全军烧伤研究所基础部完成。①包皮来自解放军空军总医院泌尿外科收治的7～25岁行包皮环切术患者。②未包被胶原的培养瓶作为对照1组,首次Ⅳ型胶原和3次Ⅳ型胶原包被的培养瓶分别作为对照2组和实验组1,将包被Ⅳ型胶原并曾黏附细胞的培养瓶消化后作为实验组2。③人角质形成细胞分别接种其上,15min后对贴壁细胞进行显微摄像并计数;对贴壁细胞的生长及增殖活性进行观察;并用β1整合素、鼠抗人角蛋白19对贴壁的细胞进行鉴定。结果:①胶原包被组的贴壁细胞数明显增多(P≤0.05),并于5d铺满培养瓶底,而对照1组2d后仍未铺满瓶底。对照1组15min细胞贴壁数显著低于对照2组、实验1组、实验2组[(119.0±3.0),(246.3±19.6),(241.3±15.3),(262.0±11.1)个/100倍视野,P≤0.01];对照2组与各实验组差异无显著性意义(P>0.05)。②贴壁细胞β1整合素和鼠抗人角蛋白19表达阳性。结论:表皮干细胞对Ⅳ型胶原具有较好的黏附特性,回收利用Ⅳ型胶原对表皮干细胞的黏附特性几乎无影响,并可节约费用。

关键词：干细胞表皮/细胞学胶原Ⅳ型

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

正常人表皮细胞老化过程中的生物学特性(英文)

引用

中国临床康复 2005年第42期9卷 154-156,i0004页

作者：高学军蔡霞张鹏唐胜建潍坊医学院附属医院普外科山东省潍坊市261041 潍坊医学院整形外科研究所山东省潍坊市261042

背景:目前有关表皮细胞体外衰老的文献报道甚少,而表皮细胞是构建组织工程化皮肤所必需的种子细胞,文章拟对正常人表皮细胞老化过程中的生物学特性加以阐述,为组织工程化皮肤选择合适的种子细胞奠定基础。目的:通过研究表皮细胞体外增... 详细信息

背景:目前有关表皮细胞体外衰老的文献报道甚少,而表皮细胞是构建组织工程化皮肤所必需的种子细胞,文章拟对正常人表皮细胞老化过程中的生物学特性加以阐述,为组织工程化皮肤选择合适的种子细胞奠定基础。目的:通过研究表皮细胞体外增殖与老化规律,为选择合适的组织工程化皮肤种子细胞提供依据。设计:自身对照实验。单位:潍坊医学院整形外科研究所,潍坊医学院附属医院普外科。材料:实验于2000-09/2002-09在潍坊医学院整形外科研究所完成。实验样本来源于在潍坊医学院附属医院普外科行包皮环切术的6～8岁正常男性儿童20例切除的健康包皮组织,监护人获完全同意,将包皮标本用于表皮细胞增殖培养实验。方法:取正常年轻人表皮细胞进行传代培养,以不同代龄细胞为实验对象,采用形态学观察、群体倍增时间、免疫细胞化学及β-半乳糖苷酶染色的方法,检测表皮细胞老化规律。主要观察指标:①表皮细胞生长特性的改变。②表皮细胞形态学改变。③表皮细胞表型的改变。结果:①表皮细胞生长特性的改变:体外单层培养9代,P2的群体倍增时间最短,前5代增殖能力较强,P5以后群体倍增时间明显延长,P8细胞不再增殖。②表皮细胞形态学改变:原代细胞接种3d后开始增殖,4d后细胞加速增殖,培养1周左右细胞接近融合。显微镜、免疫组化鉴定,符合表皮细胞的特点。③表皮细胞表型的改变:随着细胞的连续传代培养,β-半乳糖苷酶组化表达呈现从弱(在年轻细胞中占9%)到强(在老化细胞中占65%)的趋势,β-半乳糖苷酶染色的阳性率和细胞代龄之间呈显著正相关(r=0.87,P<0.01)。结论:①与年轻细胞相比,老化细胞具有衰老形态和酶细胞化学特征的增多;在细胞从年轻向老化发展的进程中,细胞群体倍增时间呈延长的趋势。②与年轻细胞相比,老化细胞中β-半乳糖苷酶的表达显著增强,且这种增强与细胞衰老表型的出现和细胞增殖能力的丧失相平行,反应细胞的老化程度。③本实验建立了体外培养正常人表皮细胞的衰老模型,第1～5代表皮细胞(供者年龄16～18岁)可作为构建组织工程化皮肤的种子细胞。

关键词：组织工程表皮/细胞学细胞,培养的细胞衰老

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

静脉注射表皮角朊细胞在烫伤大鼠各主要器官的分布

引用

中国临床康复 2005年第22期9卷 77-79,i003页

作者：彭代智周新刘敬付国金董征学李芳李前伟解放军第三军医大学西南医院全军烧伤研究所创伤烧伤与复合伤研究国家重点实验室重庆市400038 解放军第三军医大学西南医院核医学科重庆市400038

目的:烧伤创面的修复在很大程度上取决于表皮角朊细胞迁移、增殖和在相应器官的分化,通过静脉注射表皮角朊细胞,了解其在烫伤大鼠主要器官的分布情况。方法:实验于2003-03/2004-06在第三军医大学西南医院全军烧伤研究所完成。取38只Wis... 详细信息

目的:烧伤创面的修复在很大程度上取决于表皮角朊细胞迁移、增殖和在相应器官的分化,通过静脉注射表皮角朊细胞,了解其在烫伤大鼠主要器官的分布情况。方法:实验于2003-03/2004-06在第三军医大学西南医院全军烧伤研究所完成。取38只Wistar新生鼠的表皮,采用Dispase和胰蛋白酶消化法,制备出角朊细胞悬液,然后用99Tcm标记。12只Wistar大鼠麻醉后沸水烫伤背部10s,制作20%Ⅲ度烫伤模型。实验分为对照组(假伤)、烫伤0d、烫伤3d和烫伤7d组,分别在假伤后1h内、烫伤后1h内、3d和7d经尾静脉注射99Tcm标记的角朊细胞悬液。注射后4h,单光子发射型计算机断层扫描仪检测大鼠主要器官(心、肝、脾、肺、肾、胸腺、皮肤或/和创面)的放射性活度,计算出各器官放射性计数角朊细胞分布的百分率。结果:4组12只大鼠进入结果分析。①对照组、烫伤0d组、烫伤3d组和烫伤7d组大鼠单光子发射型计算机断层扫描仪检测到的放射性活度主要分布在肺脏(66.8%～77.6%),肝脏10.8%～21.5%。②烫伤7d组大鼠肾脏的放射性活度百分率与对照组比较明显增加(12.2%,2.6%),皮肤或/和创面的放射性活度百分率在伤后仅略有增加(从0.64%到5.11%)。结论:经静脉注射的表皮角朊细胞主要随血循环向正常和烧伤大鼠的肺脏和肝脏迁移;烫伤后7d时角朊细胞向肾脏迁移显著增多,而向肺脏迁移有所减少。烫伤后迁移到皮肤或/和创面的角朊细胞仅略有所增多。

关键词：烧伤表皮/细胞学角蛋白注射,静脉内

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

壬二酸对人黑素细胞和鼠黑素瘤B_(16)细胞黑素合成功能的影响

引用

安徽医科大学学报 2006年第5期41卷 503-505页

作者：马佳沈继龙张汝芝安徽医科大学病原生物学教研室蚌埠医学院附属医院皮肤科蚌埠233004

目的建立体外培养的正常人表皮黑素细胞系,检测壬二酸对人表皮黑素细胞和鼠黑素瘤B16细胞黑素合成的影响。方法体外人表皮黑素细胞和鼠黑素瘤B16细胞培养,TRP-1染色观察壬二酸作用后,细胞形态的变化;测定壬二酸对人表皮黑素细胞和鼠黑... 详细信息

目的建立体外培养的正常人表皮黑素细胞系,检测壬二酸对人表皮黑素细胞和鼠黑素瘤B16细胞黑素合成的影响。方法体外人表皮黑素细胞和鼠黑素瘤B16细胞培养,TRP-1染色观察壬二酸作用后,细胞形态的变化;测定壬二酸对人表皮黑素细胞和鼠黑色素瘤B16细胞酪氨酸酶活性及黑素含量变化观察壬二酸的脱色素作用。结果壬二酸作用于人表皮黑素细胞后,可见细胞树突明显减少;壬二酸作用于B16细胞后,细胞形态无明显改变。壬二酸抑制人表皮黑素细胞和鼠黑素瘤B16细胞的酪氨酸酶活性,细胞黑素合成减少,而且具有浓度依赖性。结论壬二酸对体外培养的人表皮黑素细胞和鼠黑素瘤B16细胞的酪氨酸酶活性及黑素生成都有抑制作用,可临床应用于治疗色素性疾病。

关键词：表皮/细胞学黑色素瘤二羧酸类

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

蝾螈表皮装片制作永久制片观察细胞四种结构

引用

基础医学教育 1998年第4期6卷 123页

作者：赵伟山东济南山东医科大学细胞生物学教研室 250012

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：