检索结果-内蒙古大学图书馆

癌症进展 2022年第7期20卷 649-651,655页

作者：郭奕卓刘芳大连医科大学研究生院辽宁大连116044 南京医科大学附属常州第二人民医院神经外科江苏常州2130000

胶质瘤是临床最常见的原发中枢神经系统恶性肿瘤之一,治疗难度较大且预后较差。表皮生长因子受体(EGFR)的异常活化及突变在胶质瘤的发生发展、治疗中均发挥了重要作用,表皮生长因子受体ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)是其最常见的突变形式。近年来... 详细信息

胶质瘤是临床最常见的原发中枢神经系统恶性肿瘤之一,治疗难度较大且预后较差。表皮生长因子受体(EGFR)的异常活化及突变在胶质瘤的发生发展、治疗中均发挥了重要作用,表皮生长因子受体ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)是其最常见的突变形式。近年来,随着肿瘤免疫治疗的发展,越来越多的研究发现EGFRvⅢ为胶质瘤的免疫治疗提供了重要靶点,包括单克隆抗体、肿瘤疫苗和过继性T细胞治疗。本文对近年来EGFRvⅢ在胶质瘤中表达及与患者治疗、预后间的关系进行综述。

关键词：胶质瘤表皮生长因子受体ⅲ型突变体免疫治疗

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表皮生长因子受体ⅲ型突变体及血小板衍生生长因子-D在结肠癌组织中的表达及对靶向治疗的作用分析

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中国药物与临床 2018年第3期18卷 347-350页

作者：郭建平侯秋霞侯志刚程继霞王岚王学玲山西省汾阳医院普外科 032200 山西省汾阳医院消化科 032200 山西省汾阳医院科研办 032200

目的探究表皮生长因子受体ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)及血小板衍生生长因子-D(PDGF-D)在结肠癌组织中的表达及对靶向治疗的指导作用。方法选取2016年1月2017年6月于我院行结肠癌根治术的患者60例,收集其标本作为观察组,另取正常结肠组织20例... 详细信息

目的探究表皮生长因子受体ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)及血小板衍生生长因子-D(PDGF-D)在结肠癌组织中的表达及对靶向治疗的指导作用。方法选取2016年1月2017年6月于我院行结肠癌根治术的患者60例,收集其标本作为观察组,另取正常结肠组织20例作为对照组。采用免疫组织化学技术及蛋白质印迹法检测组织中的EGFRvⅢ和PDGF-D,比较结肠癌和正常结肠组织中上述2指标的表达差异及影响表达的因素。结果观察组EGFRvⅢ和PDGF-D的阳性表达率及含量均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。EGFRvⅢ和PDGF-D在结肠癌中的表达与性别和年龄无关,而同分化程度和临床病理分期(TNM)有关,分化程度低、TNM分期高的标本EGFRvⅢ和PDGF-D阳性表达程度及含量均高于分化程度高、TNM分期低的标本,差异均有统计学意义(P<0.05)。EGFRvⅢ和PDGF-D在结肠癌组织中的表达呈正相关(r=0.647,P<0.05)。结论 EGFRvⅢ和PDGF-D在结肠癌组织中表达显著增加,且同分化程度和TNM分期有关。

关键词：结肠肿瘤表皮生长因子受体ⅲ型突变体血小板源性生长因子

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靶向表皮生长因子受体ⅲ型突变体的嵌合抗原受体修饰T细胞对肝癌细胞SMMC-7721的特异杀伤作用

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中华实验外科杂志 2018年第12期35卷 2242-2245页

作者：付玉龙郜宁郑岩岳冉张炳勇李修岭韩双印新乡医学院研究生院 453003 郑州大学人民医院河南省肾脏病免疫重点实验室 450003 郑州大学人民医院消化科 450003

目的观察靶向表皮生长因子受体ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)的嵌合抗原受体修饰T细胞(EGFRvⅢ/2CAR-T)对肝癌细胞SMMC-7721的特异杀伤作用。方法二代EGFRvⅢCAR表达框(EGFRvⅢ/2CAR,1374bp)克隆入PiggyBac转座子载体PB513B-1的XbaⅠ和BamHⅠ位点... 详细信息

目的观察靶向表皮生长因子受体ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)的嵌合抗原受体修饰T细胞(EGFRvⅢ/2CAR-T)对肝癌细胞SMMC-7721的特异杀伤作用。方法二代EGFRvⅢCAR表达框(EGFRvⅢ/2CAR,1374bp)克隆入PiggyBac转座子载体PB513B-1的XbaⅠ和BamHⅠ位点,转座子载体(PB-EGFRvⅢ/2CAR)和转座酶双质粒电穿孔(1×20ms,840V)转导人外周血T细胞,流式细胞术检测EGFRvⅢ/2CAR表达。Westernblot法检测SMMC-7721中EGFRvⅢ表达。EGFRvⅢ/2CAR-T细胞和SMMC-7721细胞共培养,乳酸脱氢酶(LDH)释放试验检测特异杀伤作用、酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测干扰素(IFN)-γ分泌水平。结果重组载体PB-EGFRvⅢ/2CAR经XbaⅠ和BamHⅠ酶切、电泳分析及DNA测序证明基因片段连接无误、核酸序列正确。流式细胞术检测结果转座子/转座酶双质粒电穿孔外周血T细胞EGFRvⅢ/2CAR表达率为55.5%。Westernblot显示SMMC-7721在相对分子质量145000处EGFRvⅢ表达。EGFRvⅢ/2CAR-T和SMMC-7721共培养24h,LDH释放试验证明肿瘤特异性杀伤,与效靶比呈正比(E∶T为1∶1、5∶1、10∶1、15∶1、20∶1);ELISA检测到IFN-γ分泌量为(1060.1±89.0)pg/ml,明显高于对照组(P=0.000)。结论靶向EGFRvⅢ的二代CAR-T细胞能够特异杀伤EGFRvⅢ+的肝癌细胞SMMC-7721。

关键词：表皮生长因子受体ⅲ型突变体嵌合抗原受体免疫治疗 PiggyBac转座子

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靶向表皮生长因子受体ⅲ型突变体的嵌合抗原受体T细胞构建及其抗肺癌研究

靶向表皮生长因子受体Ⅲ型突变体的嵌合抗原受体T细胞构建及其抗...

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中国细胞生物学学会2017年全国学术大会

作者：张钊蒋俊何有文边惠洁陈志南第四军医大学细胞工程研究中心西安710032 中国科学院北京基因组研究所北京100101

目标：嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)是基因修饰性T细胞，具有特异、高效杀伤靶细胞能力.表皮生长因子受体ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)是肿瘤特异突变.本研究构建靶向EFGRvⅢ的CAR-T并探讨其抗肺癌治疗效果.方法：采用病毒感染活化PBMC获得EGFRvⅢ-... 详细信息

目标：嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)是基因修饰性T细胞，具有特异、高效杀伤靶细胞能力.表皮生长因子受体ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)是肿瘤特异突变.本研究构建靶向EFGRvⅢ的CAR-T并探讨其抗肺癌治疗效果.方法：采用病毒感染活化PBMC获得EGFRvⅢ-CART.共培养后评价EGFRvⅢ-CART增殖、杀伤能力和细胞因子释放.利用三联免疫缺陷小鼠构建肿瘤模型，尾静脉回输CAR-T评价其体内抗肿瘤效果和安全性.结果：1、获得嵌合抗原受体表达载体：酶切、连接获得EGFRvⅢ-CAR载体，转染至工程细胞.

关键词：表皮生长因子受体ⅲ型突变体嵌合抗原受体T细胞肺癌免疫治疗

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表皮生长因子受体和表皮生长因子受体ⅲ型突变体在胆囊癌中的表达及意义

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广东医学 2016年第15期37卷 2304-2307页

作者：王军戴文超雷钧李强吴鹏王超方路南昌大学第二附属医院肝胆外科南昌330000 新疆伊犁哈萨克自治州友谊医院 835000

目的检测胆囊癌组织中表皮生长因子受体(EGFR)和表皮生长因子受体ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)蛋白表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测52例胆囊癌组织及50例慢性胆囊炎组织中EGFR和EGFRvⅢ蛋白表达情况,分析EGFR和EGFRvⅢ蛋白表达... 详细信息

目的检测胆囊癌组织中表皮生长因子受体(EGFR)和表皮生长因子受体ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)蛋白表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测52例胆囊癌组织及50例慢性胆囊炎组织中EGFR和EGFRvⅢ蛋白表达情况,分析EGFR和EGFRvⅢ蛋白表达与胆囊癌患者临床病理特征的关系。结果胆囊腺癌和慢性胆囊炎组织中的EGFR阳性表达率分别为46.6%和20%(P=0.005);胆囊腺癌中EGFRvⅢ的阳性表达率为28.8%,慢性胆囊炎组织未见EGFRvⅢ阳性表达(P=0.000)。EGFR和EGFRvⅢ蛋白在胆囊腺癌中表达呈正相关(r=0.517,P=0.000)。EGFR表达与胆囊腺癌组织分化、T分期相关(P<0.05);EGFRvⅢ阳性表达与胆囊腺癌组织分化、T分期、淋巴结转移、远处转移相关(P<0.05)。EGFR与EGFRvⅢ阳性表达胆囊癌患者总体生存显著低于阴性表达患者;EGFRvⅢ阳性表达、淋巴结转移是评估胆囊癌预后独立因素。结论胆囊癌组织中EGFR与EGFRvⅢ蛋白高表达,与胆囊癌分化程度、淋巴结转移等临床指标相关,可能成为胆囊腺癌诊断、治疗及评估预后的有效指标。

关键词：胆囊癌表皮生长因子受体表皮生长因子受体ⅲ型突变体临床指标

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靶向表皮生长因子受体ⅲ型突变体的第三代嵌合抗原受体的构建与表达

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中国肿瘤生物治疗杂志 2015年第5期22卷 603-606页

作者：敖仕梅伍玥王春荣杨玉秀韩双印新乡医学院研究生部河南新乡453003 郑州大学人民医院中心实验室河南郑州450003 郑州大学人民医院消化内科河南郑州450003

目的:构建第三代靶向表皮生长因子受体ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)的嵌合抗原受体表达载体,为肿瘤过继免疫治疗提供实验基础。方法:运用分子克隆方法将嵌合抗原受体的胞外抗原结合区(EGFRvⅢ单克隆抗体的轻链和重链可变区,EGFRvⅢsc Fv,726 bp... 详细信息

目的:构建第三代靶向表皮生长因子受体ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)的嵌合抗原受体表达载体,为肿瘤过继免疫治疗提供实验基础。方法:运用分子克隆方法将嵌合抗原受体的胞外抗原结合区(EGFRvⅢ单克隆抗体的轻链和重链可变区,EGFRvⅢsc Fv,726 bp)、铰链区/穿膜区(213 bp)、共刺激分子(CD28和CD137的胞内信号区,123 bp和126 bp)和免疫受体酪氨酸活化基序(CD3ζ链,336 bp)连接成EGFRvⅢsc Fv-CD28-CD137-CD3ζ(EGFRvⅢ/3CAR),克隆入真核表达载体p CDHCMV-MCS-EF1-cop GFP的EcoRⅠ和Bam HⅠ位点,转染293T细胞48 h后提取蛋白,采用SDS-PAGE和Western blotting检测EGFRvⅢ/3CAR的表达。结果:EGFRvⅢsc Fv和基因合成的CD28-CD137-CD3ζ表达框通过重叠延伸PCR拼接成EGFRvⅢ/3CAR,限制性内切酶片段分析和DNA测序均验证了重组载体序列完全正确,Western blotting应用抗人-CD3ζ抗体检测到EGFRvⅢ/3CAR在293T细胞中的完整表达(相对分子质量约58 k D)。结论:成功构建嵌合抗原受体EGFRvⅢ/3CAR表达载体,为嵌合抗原受体修饰T细胞靶向治疗肿瘤提供研究基础。

关键词：嵌合抗原受体过继免疫肿瘤治疗表皮生长因子受体ⅲ型突变体

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表皮生长因子受体及其Ⅲ型突变体在人食管癌的表达及意义

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中国现代医学杂志 2016年第7期26卷 24-28页

作者：朱彦红韩大正河南大学第一附属医院消化内科河南开封475001

目的检测表皮生长因子受体(EGFR)及表皮生长因子受体ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)在人食管癌组织中的表达,探讨其与食管癌发生、发展的关系及其与各临床病理特征之间的关系。方法采用免疫组织化学染色法(Maxvision TM二步法)检测食管癌组织及正... 详细信息

目的检测表皮生长因子受体(EGFR)及表皮生长因子受体ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)在人食管癌组织中的表达,探讨其与食管癌发生、发展的关系及其与各临床病理特征之间的关系。方法采用免疫组织化学染色法(Maxvision TM二步法)检测食管癌组织及正常食管组织中EGFR和EGFRvⅢ蛋白的表达水平,并将检测结果与临床病理参数进行综合分析。结果食管癌组织EGFR和EGFRvⅢ的表达率分别为65.6%、58.5%,正常食管黏膜EGFR和EGFRvⅢ表达率为30.0%、0%。EGFR在食管癌组织的表达明显高于正常食管组织(P<0.01),EGFRvⅢ在正常食管黏膜不表达。二者在食管癌组织的表达与性别、年龄、肿瘤大小和生长部位均无相关(P>0.05),与食管癌的分化程度、淋巴结转移、远隔器官转移及临床分期相关(P<0.05)。结论EGFR、EGFRvⅢ过度表达可能与食管癌的发生发展密切相关,EGFR、EGFRvⅢ有望作为预测食管癌预后的候选基因,EGFRvⅢ在食管癌组织中特异性表达,可能使其成为食管癌治疗的理想的靶点。

关键词：表皮生长因子受体表皮生长因子受体ⅲ型突变体食管癌免疫组织化学

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表皮生长因子受体ⅲ型突变体在胃癌的表达及其临床意义

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中国实用医刊 2011年第10期38卷 11-12页

作者：朱彦红李修岭河南大学开封475000 河南省人民医院消化内科

目的检测表皮生长因子受体ⅲ型突变体（EGFRvⅢ）在胃癌组织中的表达，探讨其与胃癌发生、发展的关系。方法采用免疫组织化学染色法（Maxvion 二步法）检测胃癌组织及正常胃组织中EGFRvⅢ蛋白的表达水平，并将检测结果进行统计学分析、... 详细信息

目的检测表皮生长因子受体ⅲ型突变体（EGFRvⅢ）在胃癌组织中的表达，探讨其与胃癌发生、发展的关系。方法采用免疫组织化学染色法（Maxvion 二步法）检测胃癌组织及正常胃组织中EGFRvⅢ蛋白的表达水平，并将检测结果进行统计学分析、比较。结果胃癌组织EGFRvⅢ的阳性表达率为60．34％，正常胃黏膜EGFRvⅢ表达率为0，胃癌组织表达明显高于正常胃组织（P〈0．01）；EGFRvⅢ的表达与性别、年龄和肿瘤生长部位均无相关性（P〉0．05）。结论EGFRvⅢ过度表达可能与胃癌发生发展密切相关，EGFRvⅢ在胃癌组织的特异性表达，可能使其成为胃癌治疗的理想的靶点。

关键词：表皮生长因子受体ⅲ型突变体胃癌免疫组织化学

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地皮菜水应激蛋白介导EGFRvⅢ对胃癌细胞迁移的影响

地皮菜水应激蛋白介导EGFRvⅢ对胃癌细胞迁移的影响

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作者：陈晓霞山西医科大学

学位级别：硕士

目的:胃癌(gastric cancer,GC)因其发病率高,死亡率高,治疗效果不甚理想等特点,成为当今肿瘤研究的热点。目前,临床上治疗GC主要有手术、放疗和化疗等手段,但是它们均有一定的局限性。中草药在辅助GC的治疗过程中起着重要的作用,可以增... 详细信息

目的:胃癌(gastric cancer,GC)因其发病率高,死亡率高,治疗效果不甚理想等特点,成为当今肿瘤研究的热点。目前,临床上治疗GC主要有手术、放疗和化疗等手段,但是它们均有一定的局限性。中草药在辅助GC的治疗过程中起着重要的作用,可以增加疗效,降低放、化疗副作用,增强免疫力。地皮菜早在古籍医书中便有记载,具有“明目、益气”、“补心、清胃”等重要功效,具有一定的药用价值。其中含量最高的水应激蛋白(water stress protein,WSP),已被证实具有一定的抗肿瘤功效。为了探究地皮菜WSP对于GC作用效果,我们从其抗GC迁移能力入手,探究其作用位点及分子机制;之后通过动物实验,对WSP的体内抗GC转移能力进行评估,以期为后续WSP的开发利用奠定研究基础。方法:1.采用丙酮沉淀法以及硫酸铵分级沉淀法提取WSP,应用基因工程对WSP进行诱导表达纯化,使用聚丙烯酰氨凝胶电泳检测所制备蛋白分子量。2.培养SGC-7901、BGC-823和MKN-28细胞,借助划痕实验观察WSP的抗GC迁移能力。3.采用免疫共沉淀验证WSP与EGFRv Ⅲ相互作用,比较SGC-7901、BGC-823和MKN-28三种细胞系EGFRVⅢ表达。4.敲低SGC-7901的EGFRVⅢ,使用q PCR和Western blot法检测敲低效果,并通过划痕实验观察EGFRv Ⅲ敲低后WSP的抗GC迁移能力变化。5.建立裸鼠腹腔转移模型,通过比较WSP注射组与未注射组裸鼠的肝转移瘤数目,体内验证WSP的抗GC转移能力。结果:1.通过丙酮沉淀法和原核表达系统成功制备WSP,经聚丙烯酰氨凝胶电泳验证其蛋白分子量为35KD。2.通过划痕实验,观察到WSP抑制了GC的迁移。当WSP浓度达到0.3μg/μL,对SGC-7901、BGC-823和MKN-28细胞均有显著的抗迁移能力(P<0.05);当WSP为0.05μg/μL时,对SGC-7901细胞仍具显著抗迁移能力(P<0.05)。3.免疫共沉淀显示WSP可以与膜受体蛋白EGFRv Ⅲ相互作用,通过比较三种胃癌细胞系EGFRVⅢ的m RNA表达和蛋白表达,发现SGC-7901的EGFRVⅢ的m RNA显著高于BGC-823和MKN-28细胞(P<0.05)。4.使用si-RNA干扰后,Western blot和q PCR验证EGFRVⅢ表达量显著减少,划痕实验观察到EGFRv Ⅲ敲低后WSP处理组抗GC迁移能力对比未处理组无明显差异(P>0.05)。5.动物实验中,与未注射组相较,WSP(30μg/g)组和WSP(60μg/g)组治疗后裸鼠肝转移瘤数目显著减少(P<0.05)。结论:WSP可抑制GC迁移,此抑制作用是通过EGFRv Ⅲ所介导的。在裸鼠体内,WSP同样具有抗GC转移能力,为WSP的抗胃癌研究和进一步开发适用于胃癌患者的蛋白药物提供参考依据。

关键词：水应激蛋白迁移胃癌表皮生长因子受体ⅲ型突变体

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分子靶点表皮生长因子受体ⅲ型突变体（EGFRvⅢ）在乳腺癌组织中表达的临床研究

分子靶点表皮生长因子受体Ⅲ型突变体（EGFRvⅢ）在乳腺癌组织中...

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作者：李雨弥泸州医学院

学位级别：硕士

在肿瘤分子靶向治疗日益进步的今天,是否能寻求一个乳腺肿瘤特异性靶点,同时解决诊断和治疗问题,是继手术、化疗和放疗三大传统模式后进一步提高乳腺肿瘤患者生存率和生活质量的关键。近年研究发现人表皮生长因子受体ⅲ型突变体(Epiderm... 详细信息

在肿瘤分子靶向治疗日益进步的今天,是否能寻求一个乳腺肿瘤特异性靶点,同时解决诊断和治疗问题,是继手术、化疗和放疗三大传统模式后进一步提高乳腺肿瘤患者生存率和生活质量的关键。近年研究发现人表皮生长因子受体ⅲ型突变体(Epidermal Growth Factor Receptor typeⅢvariant, EGFRvⅢ)在乳腺肿瘤的发生发展中具有重要作用。其只在恶性肿瘤中表达、.而不在正常组织中表达的特性,使EGFRvⅢ成为乳腺肿瘤潜在的诊断和治疗靶点。目的：1.测定EGFRvⅢ在乳腺癌组织和乳腺良性病变组织中的表达,分析EGFRvⅢ表达水平与乳腺癌生物学特性之间的关系,评估EGFRvⅢ在乳腺癌组织中表达的临床价值与意义；2.探讨EGFRvⅢ表达状态与腋窝淋巴结阴性乳腺癌患者预后的关系；3.探讨以EGFRvⅢ为靶点的乳腺癌诊断及治疗可行性,为今后以EGFRvⅢ靶向治疗乳腺癌提供一定的临床实验基础。方法：1.应用UltraSensitiveTMSP免疫组织化学法检测108例乳腺癌组织以及62例乳腺良性病变组织中EGFRvⅢ的表达；2.应用半定量法分析乳腺癌组织中EGFRvⅢ的表达量,并采用统计学软件回顾性分析其与临床病理参数(年龄、肿瘤大小、组织学分级、腋窝淋巴结转移状态、ER、PR、Her-2、Ki-67表达)间的相互关系；3.对其中获得术后随访资料、腋窝淋巴结阴性的41例乳腺癌患者采用Kaplan-Meier方法进行全组生存分析,EGFRvⅢ表达阳性组和EGFRvⅢ表达阴性组对随访期总生存率(Overall survival,OS)影响的显著性分析采用Log-rank检验完成,多因素分析采用Cox比例风险模型进行。结果：1. EGFRvⅢ在乳腺癌组织中的阳性表达率为56.48%(61/108),其中弱阳性(+)28例(25.93%),阳性(2+)27例(25%),强阳性(3+)6例(5.56%), EGFRvⅢ阴性(-)47例(43.52%), EGFRvⅢ在乳腺良性病变组织中基本不表达；2.乳腺癌组织中EGFRvⅢ的表达与肿瘤大小、腋窝淋巴结状态、组织学分级、ER、Her-2呈显著性相关(P<0.05),且EGFRvⅢ表达率随组织学分级升高和腋窝淋巴结转移个数增加而增高(P<0.01)；与患者年龄、PR、Ki-67差异无统计学意义(P>0.05)；3.47例腋窝淋巴结阴性乳腺癌患者中,6例失访。41例腋窝淋巴结阴性乳腺癌5年无瘤生存率(Disease Free Survival Rate, DFS)为90.4%,OS为95.12%。Log-Rank检验显示EGFRvⅢ表达阴性组和阳性组随访期内总生存曲线有显著差别,EGFRvⅢ阴性组随访期总生存率显著高于阳性组,差异有统计学意义(P＜0.05)。组织学分级高、ER表达阴性和Her-2表达阳性是影响腋窝淋巴结阴性乳腺癌患者生存时间的危险因素。EGFRvⅢ表达状态不是腋窝淋巴结阴性乳腺癌患者独立的预后指标(P=0.138,>0.05)。结论：***Ⅲ在乳腺癌组织中存在特异性表达,在乳腺良性病变组织中未见表达。2.乳腺癌组织中,.患者的肿瘤越大、组织学分级越高、腋窝淋巴结转移数目越多,EGFRvIII的表达率越高；ER阴性和Her-2阳性患者的EGFRvIII表达率高于ER阳性和Her-2阴性的患者。3.腋窝淋巴结阴性乳腺癌组织中,EGFRvIII表达阳性组较EGFRvIII表达阴性组OS低；组织学分级高、ER表达阴性和Her-2表达阳性是影响腋窝淋巴结阴性乳腺癌患者生存时间的危险因素,EGFRvIII表达状态不是腋窝淋巴结阴性乳腺癌患者独立的预后指标。

关键词：表皮生长因子受体ⅲ型突变体乳腺肿瘤淋巴结阴性免疫组织化学

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