检索结果-内蒙古大学图书馆

泰山卫生 2013年第1期38卷 15-17页

作者：高清梅张铭艳张瑞玲潍坊市妇幼保健医院妇产科山东潍坊261000 潍坊市复退军人医院 261000

目的本文旨在探讨表皮生长因子受体egfr与慢性外阴营养不良的关系及HIFV治疗对其表达的影响.方法取慢性外阴营养不良患者病损较重区皮肤和正常对照组皮肤组织,免疫组化方法,检测表皮生长因子受体egfr在不同皮肤组织中的表达的阳性表... 详细信息

目的本文旨在探讨表皮生长因子受体egfr与慢性外阴营养不良的关系及HIFV治疗对其表达的影响.方法取慢性外阴营养不良患者病损较重区皮肤和正常对照组皮肤组织,免疫组化方法,检测表皮生长因子受体egfr在不同皮肤组织中的表达的阳性表达情况,对比其在不同组织中表达的差异.结果慢性外阴营养不良者HIFV治疗后阳性表达率降低(p＜0.05).

关键词：表皮生长因子受体egfr 慢性外阴营养不良 HIFV 免疫组织化学

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

表皮生长因子受体靶向RNAi抑制恶性肿瘤中的研究现状

引用

井冈山医专学报 2008年第6期15卷 14-16页

作者：滕帼英潘泽政吴剑毛位贞江西医学院上饶分院生化教研室江西上饶334000

表皮生长因子受体(egfr)在许多恶性肿瘤中有过度表达或突变的现象,它借助信号转导使细胞的生长失控和恶化,与肿瘤的发生、发展、转移及预后等密切相关。因此,抑制内源性egfr及其突变体的表达,是有效治疗恶性肿瘤的途径之一。RNAi是一种... 详细信息

表皮生长因子受体(egfr)在许多恶性肿瘤中有过度表达或突变的现象,它借助信号转导使细胞的生长失控和恶化,与肿瘤的发生、发展、转移及预后等密切相关。因此,抑制内源性egfr及其突变体的表达,是有效治疗恶性肿瘤的途径之一。RNAi是一种发展迅速且极有应用前景的基因治疗技术,细胞内存在一个完整的可引发RNA干扰结构,可将egfr外源性双链RNA裂解成21～23个核苷酸短干扰RNA(SiRNA),后者可自动杂交同源egfr的mRNA上并使之降解,从而达到抑制egfr表达和治疗恶性肿瘤的目的。

关键词：卡基因治疗表皮生长因子受体egfr RNAi 恶性肿瘤

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

表皮生长因子受体在慢性外阴营养不良中的表达

引用

中国伤残医学 2014年第15期22卷 17-18页

作者：高清梅张铭艳张敏谢伟晗刘新新潍坊市妇幼保健医院妇产科山东潍坊261000

目的：本文旨在探讨表皮生长因子受体egfr和慢性外阴营养不良的关系。方法：取慢性外阴营养不良患者病变区皮肤60例和正常对照组皮肤组织55例，通过免疫组化方法，检测表皮生长因子受体在两者中的阳性表达情况，对比其表达的差异。结果... 详细信息

目的：本文旨在探讨表皮生长因子受体egfr和慢性外阴营养不良的关系。方法：取慢性外阴营养不良患者病变区皮肤60例和正常对照组皮肤组织55例，通过免疫组化方法，检测表皮生长因子受体在两者中的阳性表达情况，对比其表达的差异。结果：慢性外阴营养不良者阳性27例，占32．7％，对照组7例阳性表达，占12．73％，经统计学处理慢性外阴营养不良者阳性表达率明显高于正常对照组皮肤组织（ P＜0．01）。结论：慢性外阴营养不良患者皮肤存在着上皮细胞增值和分化异常，具有上皮代谢活跃的特征。

关键词：表皮生长因子受体egfr 慢性外阴营养不良免疫组织化学

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

连接组蛋白H1.2与组蛋白去甲基化酶KDM6A在非小细胞肺癌中的作用和机制研究

连接组蛋白H1.2与组蛋白去甲基化酶KDM6A在非小细胞肺癌中的作用...

引用

作者：陈雨琛华中科技大学

学位级别：博士

目的:非小细胞肺癌约占整体肺癌病例的85%,发病率高,致死率高,大量患者缺乏有效的药物治疗策略,对其致病机制的研究具有重要意义。连接组蛋白H1和核心组蛋白是染色质的重要组成部分,能够影响染色质结构,通过表观遗传调控机制,在DNA序列... 详细信息

目的:非小细胞肺癌约占整体肺癌病例的85%,发病率高,致死率高,大量患者缺乏有效的药物治疗策略,对其致病机制的研究具有重要意义。连接组蛋白H1和核心组蛋白是染色质的重要组成部分,能够影响染色质结构,通过表观遗传调控机制,在DNA序列不变的情况下影响基因表达。常见H1变体H1.2可参与细胞周期和凋亡等活动,影响多种肿瘤的增殖和侵袭,然而,H1.2在肺癌中的作用尚无报道。此外,组蛋白去甲基化酶KDM6A能调控核心组蛋白H3的甲基化,在不同肿瘤中既可扮演肿瘤抑制因子,也可发挥癌基因的作用;它在肺癌中的功能尚无定论,且已知机制大多集中于KDM6A如何调控下游靶基因转录,对于其上游网络的探索有限。本文旨在研究H1.2和KDM6A这两种具有表观遗传调控功能的分子在非小细胞肺癌中的作用及具体分子机制。方法:通过蛋白免疫印迹等方式检测临床肺癌样本中的H1.2和KDM6A水平,并在多个肺癌细胞中敲除、敲低或过表达相应分子,考察增殖迁移等表型变化。H1.2相关研究中,使用肺癌原发转基因小鼠考察表型并进行转录组学测序分析,通过检测活性氧及谷胱甘肽水平考察了细胞抗氧化能力;KDM6A相关研究中,使用多种小分子抑制剂探索了表皮生长因子受体egfr相关通路与KDM6A的联系。此外,通过在线数据库分析了H1.2和KDM6A与肺癌预后的联系。结果:第一部分结果中,H1.2在肺癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织,高表达H1.2患者预后较差,敲除H1.2的肺癌细胞和小鼠中肿瘤增殖减慢。H1.2与介导抗氧化反应的重要核转录因子Nrf2结合,H1.2敲除导致Nrf2在核内水平下降,谷氨酰半胱氨酸连接酶催化亚基GCLC(谷胱甘肽合成限速酶之一)转录下调,细胞合成谷胱甘肽能力受损,抗氧化能力降低。第二部分结果中,临床样本中KDM6A水平与egfr磷酸化水平呈正相关性,细胞中egfr激活其下游的转录调控因子STAT3磷酸化导致KDM6A的m RNA和蛋白水平上调;敲低KDM6A或抑制其酶活性均会抑制肺癌细胞增殖。结论:本论文的两部分研究均从临床样本的检测结果出发,一方面,基于H1.2在肿瘤中的高表达及其水平与预后的关系,发现H1.2通过调控抗氧化系统参与非小细胞肺癌恶性增殖;另一方面,基于KDM6A在肿瘤中与egfr磷酸化水平的正相关性,发现了KDM6A受到由egfr及STAT3激活介导的转录调控,且其促恶性增殖的作用依赖于酶活性,可能有潜力成为治疗特定类型肺癌的靶标。创新点:本论文的发现提示了H1.2与KDM6A的促肺癌作用,对非小细胞肺癌发生发展机制进行了补充,为进一步研究表观遗传机制的药物提供了新的理论基础,为探索表观遗传调控与肿瘤中其它通路的交叉作用提供了新视角。

关键词：非小细胞肺癌连接组蛋白H1.2 组蛋白去甲基化酶KDM6A 活性氧表皮生长因子受体egfr

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

副猪嗜血杆菌毒力因子筛选和capD基因功能研究及致脑膜炎大肠杆菌突破血脑屏障的分子机制研究

副猪嗜血杆菌毒力因子筛选和capD基因功能研究及致脑膜炎大肠杆菌...

引用

作者：王湘如华中农业大学

学位级别：博士

副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis, HPS)是定居在猪群上呼吸道的一种革兰氏阴性菌,但在特定的条件下如应激、免疫力低下和混合感染时,毒力菌株可以侵入宿主深部组织引起严重的革拉瑟氏病,主要表现为多发性的浆膜炎、关节炎和脑膜炎,... 详细信息

副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis, HPS)是定居在猪群上呼吸道的一种革兰氏阴性菌,但在特定的条件下如应激、免疫力低下和混合感染时,毒力菌株可以侵入宿主深部组织引起严重的革拉瑟氏病,主要表现为多发性的浆膜炎、关节炎和脑膜炎,是临床上危害养猪业的重要病原菌之一。对该病原的研究起步晚,且缺乏完善的遗传操作系统,导致目前HPS的毒力因子及其分子致病机制并不十分的清楚,给防制该病以及发展有效的新型疫苗带来了一定的困难。在本实验中,我们从临床上选择了两株HPS分离株(血清5型菌株SH0165和4型菌株7140),并通过动物感染实验证实其在致病力上的显著差异。通过两者基因组间的消减杂交,以及对消减文库的PCR筛选和斑点杂交验证,最终鉴定出了33个在强毒菌株SH0165中存在而在弱毒菌株7140中不存在的差异片段。这33个差异片段依据其对应序列的功能注释可以分为8大类,分别是sclB基因家族,限制修饰系统,噬菌体相关产物,转运系统,外膜蛋白类,代谢,DNA合成以及插入序列。随后,我们对除噬菌体相关片段以外的其他21个差异片段在不同毒力背景的15株HPS参考菌株和42株地方分离株中的流行情况进行了调查并做了统计分析,最终发现,sclB4, sclB7, sclBll, nhaC, ABC-type transport system和fhuA这6个基因在HPS高毒力菌株中的流行情况显著高于它们在HPS低毒力菌株中的流行,提示这些差异基因可能与HPS菌株的致病力存在潜在的关联。结合其他已有的HPS菌株毒力因子筛选的报道,我们选择了HPS菌株的capD基因进行后续基因功能的验证。capD基因编码一种多糖合成蛋白,该蛋白与创伤弧菌的1型荚膜多糖操纵子中的WbfY蛋白具有52%的氨基酸相似性,提示该基因可能与菌株荚膜的生物学功能相关。先前有研究报道,capD基因为HPS强弱毒菌株间的差异基因,在本实验中通过消减杂交并未筛出该基因,但结合其他报道我们在后续的PCR检测中发现该capD基因在强毒株SH0165中存在,而在弱毒株7140中不存在,推测capD基因可能为HPS菌株的一种潜在毒力相关基因,但该基因在致病中的作用并不清楚。本实验中,我们通过构建HPS强毒菌株SH0165的capD基因缺失突变株△capD以及互补菌株C-capD,直接证实了该基因与HPS菌株致病力之间的关系。结果表明,(1) capD基因的缺失导致HPS菌株对本动物猪的致病力显著降低,而将该基因互补之后其致病力明显得到提升；(2)野生株SH0165、缺失株AcapD以及互补菌株C-capD感染实验动物后,野生株SH0165和互补菌株C-capD可以有效地侵入机体各组织造成多系统感染,同时从这些组织中可以成功地分离到细菌,而缺失株AcapD无法造成多组织的感染,也不能分到菌,提示capD缺失后菌株向组织侵袭力的降低；(3) capD缺失后,HPS菌株对血清中补体介导的杀菌作用的抵抗力完全丧失,而该血清抗性在capD互补之后明显的恢复。综合以上结果表明,capD基因通过影响菌株的血清抗性继而参与菌株的致病过程,为HPS菌株的一种重要的致病因子。然而,本实验中通过透射电镜观察发现capD基因可能仅与荚膜中多糖的结构相关,而与菌株荚膜形成的有无并无直接关联,提示CapD蛋白参与菌株的血清抗性和致病可能与菌株的荚膜关联不大。我们随后通过蛋白质组双向电泳进一步寻找在capD缺失前后菌株蛋白水平上的差异,并鉴定出18个capD基因缺失后上调的蛋白和18个下调的蛋白。后续对这些差异蛋白功能的进一步分析将有助于我们更好地理解CapD蛋白与这些蛋白间可能的互作情况,以及它们与HPS菌株致病力的具体关系。另外,由细菌感染引发的脑膜炎一直是造成高死亡率的重要诱因之一,也是目前临床上急需得到控制的感染病症。HPS感染后的典型特征之一就是脑膜炎的发生,有文献报道,HPS毒力菌株可以有效地穿过脑微血管内皮细胞,继而突破血脑屏障(Blood-brain barrier, BBB)引起脑膜炎。但HPS侵入BBB这一过程的具体分子机制目前完全未知,一些与脑膜炎感染相关的分子靶标尚有待于逐步的发掘。目前国内对于细菌性脑膜炎的研究由于实验平台的不够完善以及脑组织细胞来源受限而未能较好的开展,本研究与国外脑膜炎致病机制研究团队合作,以引发中枢神经系统(CNS)感染最为常见的病原菌大肠杆菌(Escherichia coli) K1菌株作为代表菌株,探索在致脑膜炎菌株突破BBB致病过程中的重要分子靶标。在本研究中,我们首次直接证明了细胞中的一磷酸鞘氨醇(Sphingosine1-phosphate,S1P)和表皮生长因子受体(Epidermal growth fact

关键词：副猪嗜血杆菌抑制消减杂交 capD基因血清抗性细菌性脑膜炎血脑屏障表皮生长因子受体egfr 一磷酸鞘氨醇S1P

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

肺腺癌egfr突变与临床和影像特征的相关性研究

肺腺癌EGFR突变与临床和影像特征的相关性研究

引用

作者：梁明玉广州医科大学

学位级别：硕士

【背景】肺癌是全球发病率第二高、死亡率居首位恶性肿瘤。使用靶向治疗药物是晚期驱动基因阳性肺癌患者的一线治疗方案。egfr是肺癌最常见的驱动基因,靶向药物egfr-TKI对有效突变患者疗效显著,不同突变亚型对靶向药物的疗效反应存在一... 详细信息

【背景】肺癌是全球发病率第二高、死亡率居首位恶性肿瘤。使用靶向治疗药物是晚期驱动基因阳性肺癌患者的一线治疗方案。egfr是肺癌最常见的驱动基因,靶向药物egfr-TKI对有效突变患者疗效显著,不同突变亚型对靶向药物的疗效反应存在一定差异。因此在用药前需确定肿瘤的egfr突变状态以指导治疗。临床应用上基因检测有一定的限制性,为了让患者更有效地使用egfr-TKI提供理论依据,egfr突变状态与临床及影像的相关性成为研究热点,但许多研究结果存在争议。【目的】研究肺腺癌患者egfr突变与一般临床资料、血清肿瘤标志物、CT征象及PET/CT参数之间的关系,筛选出egfr突变的预测因素,以评估egfr的突变状态。探讨egfr外显子19-del及L858R两组亚型与PET/CT代谢参数的关系。【方法】回顾性分析179例肺腺癌患者,根据egfr突变状态被分为突变型和野生型两组,记录并比较两组患者的临床资料、治疗前血清肿瘤标志物水平、免疫组化标志物以及CT征象、PET/CT参数等指标。通过单因素分析和多因素logistic回归分析,比较两组的临床、实验室检查及影像特征的差异,确定egfr基因突变的独立预测因素。筛选出80例egfr突变常见亚型患者进行统计分析,采用Mann-Whitney U检验进行比较PET/CT定量参数在两组间的差异。【结果】单因素分析中,egfr突变型在无吸烟史、具有淋巴结转移患者中更常见。血清CEA高水平、pro-GRP正常水平在egfr突变型患者中更常见。egfr野生型更多见于TTF-1表达缺失、Napsin A表达缺失患者中。中央型肺癌、最大径≥3cm的病灶在egfr突变型中更常见,支气管异常、毛刺征在egfr野生型中更常见。egfr突变型的SUVmax、TLG显著更高。多因素logistic回归分析中,只有Napsin A表达阳性表达是egfr突变的独立预测因素。80例egfr常见突变患者中,SUVmax、MTV、TLG在外显子19-del与L858R两组间差异无统计学意义。【结论】Napsin A表达为egfr突变状态的独立预测因素。无吸烟史、淋巴结转移、血清CEA、pro-GRP水平、TTF-1及Napsin A表达缺失、病灶部位及大小、支气管异常、毛刺征、SUVmax、TLG与EFGR突变相关,但不是egfr突变的独立预测因素。PET/CT代谢参数在19-del及L858R突变亚型间无显著差异。

关键词：表皮生长因子受体egfr 肺腺癌免疫组化血清肿瘤标志物 PET/CT

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

转录共激活因子TAZ在胶质瘤细胞增殖中的作用及其机制研究

转录共激活因子TAZ在胶质瘤细胞增殖中的作用及其机制研究

引用

作者：吴娅楠西南大学

学位级别：硕士

神经胶质瘤是中枢神经系统最常见的和致命原发性肿瘤,约占中枢神经系统恶性肿瘤的80%。根据生长速度和对邻近脑组织的浸润程度,胶质瘤可分为低级别(世界卫生组织(WHO)I级和II级),以及高级别(WHO III级和IV级)[3]。即使经过目前最有效的... 详细信息

神经胶质瘤是中枢神经系统最常见的和致命原发性肿瘤,约占中枢神经系统恶性肿瘤的80%。根据生长速度和对邻近脑组织的浸润程度,胶质瘤可分为低级别(世界卫生组织(WHO)I级和II级),以及高级别(WHO III级和IV级)[3]。即使经过目前最有效的治疗方法如手术、放疗、联合化疗等治疗后,高级别胶质瘤病人的中位生存期仍不容乐观(14.6个月)。这可能是由于胶质瘤的具体特性,如高度浸润性和缺乏明确的边界等引起的。此外,血脑屏障(BBB)的物理和化学约束也是胶质瘤综合治疗的主要障碍。因此,研究恶性胶质瘤形成的分子机制,寻找恶性胶质瘤新的药物靶点是迫切需要的。转录共激活因子TAZ是哺乳动物Hippo通路下游最主要的效应因子之一,包含400个氨基酸,其结构由一个TEAD结合区域(TB),一个WW区域,一个卷曲螺旋结构,一个转录激活区域,以及C端的一个PDZ结合模序组成。TAZ参与其下游靶因子的转录共激活过程,调控细胞的增殖、凋亡以及迁移等多种生理过程。近年来研究发现,在胃癌、非小细胞肺癌、乳腺癌及神经母细胞瘤等多种恶性肿瘤中TAZ的表达均高于正常癌旁组织。肿瘤细胞的恶性增殖往往和细胞周期进程的改变密切相关,egfr信号通路在此过程中发挥着至关重要的作用。egfr属于ErbB受体家族,在哺乳动物上皮细胞、成纤维细胞、胶质细胞、角质细胞等细胞表面均有广泛分布,egfr及其下游信号通路对细胞的生长、增殖和分化等过程至关重要。egfr一经磷酸化激活,其下游的PI3K/AKT和Ras-ERK通路随即被激活,进而加速细胞周期进程。研究发现,TAZ能够通过促进egfr配体双调蛋白(AREG)的表达,进而促进乳腺癌细胞MCF10A不依赖于生长因子(EGF)增殖。但是,TAZ对于胶质瘤细胞的增殖的影响的研究还尚未有报道。本文旨在研究转录共激活因子TAZ对胶质瘤细胞增殖的影响及其可能的分子机制,通过实验取得如下结果:***对胶质瘤的影响及表达分析我们通过查询数据库及基因芯片检测TAZ与胶质瘤病人预后的关系,及TAZ在不同级别的胶质瘤中的表达情况,结果表明TAZ的表达情况与胶质瘤病人的预后密切相关,胶质瘤级别越高,TAZ的表达量越高。利用Western blot技术检测TAZ在多种不同胶质瘤细胞系中的表达情况,结果显示TAZ在U251、LN229、U87、A172、U118及胶质瘤组织中均有较高的表达。***对恶性胶质瘤细胞增殖及肿瘤形成能力的影响采用慢病毒介导的shRNA干扰技术和稳定质粒表达技术在U87和LN229两种胶质瘤细胞系中对TAZ蛋白进行下调和上调,利用MTT、Brdu技术检测两种细胞系的增殖情况,建立荷瘤小鼠模型和利用Soft Agar实验检测TAZ在体内及体外成瘤及自我更新能力的影响。结果显示细胞增殖实验结果表明,细胞的增殖率与TAZ的表达量呈正相关,TAZ下调后细胞的增殖受到抑制,在体内及体外成瘤及自我更新能力也受到相应的抑制,TAZ上调的结果恰好与此相反。***对胶质瘤细胞细胞周期的调控利用流式细胞仪检测TAZ对细胞周期的调控,采用Western blot技术检测相应蛋白的表达量结果显示TAZ下调的情况下细胞周期阻滞在G1期,相关周期蛋白CDK2和cyclin E2表达伴随其下调,TAZ上调的结果恰好与此相反。***调控恶性胶质瘤细胞增殖的机制研究采用Western blot技术检测egfr/AKT/ERK信号通路的变化情况,最后利用egfr信号通路抑制剂阻断由TAZ促进的细胞增殖检测胶质瘤细胞的增殖情况变化,结果显示下调TAZ后相关的egfr信号通路受到相应的抑制,TAZ上调的结果恰好与此相反,egfr信号通路抑制剂Eriotinib可以阻断由TAZ过表达引起的相关反应,从而初步确定了TAZ是通过egfr信号通路调控胶质瘤细胞的增殖与迁移的。

关键词：胶质瘤转录共激活因子 TAZ 细胞增殖细胞周期表皮生长因子受体egfr

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

新型雌激素受体GPR30在子宫内膜癌中的表达及其临床意义的研究

新型雌激素受体GPR30在子宫内膜癌中的表达及其临床意义的研究

引用

作者：王冲河北医科大学

学位级别：硕士

目的:子宫内膜癌是女性三大恶性肿瘤之一,近年来发病率有上升趋势。多年研究证实其发生与长期持续的雌激素刺激有关,雌激素与传统的雌激素核受体ERα结合,启动相关基因的转录,发挥其生物学作用。但最近发现在阻断经典的雌激素核受体ER... 详细信息

目的:子宫内膜癌是女性三大恶性肿瘤之一,近年来发病率有上升趋势。多年研究证实其发生与长期持续的雌激素刺激有关,雌激素与传统的雌激素核受体ERα结合,启动相关基因的转录,发挥其生物学作用。但最近发现在阻断经典的雌激素核受体ERα后仍然存在着快速的信号转导和基因激活,由此推测阻断核受体ERα并不能使雌激素受体封闭完全。最新发现的新型雌激素受体GPR30,可通过更快的非基因组细胞信号转录途径对雌激素发生反应。本实验通过检测正常子宫内膜和子宫内膜癌组织中GPR30 mRNA、egfr mRNA、ERαmRNA和c-fos mRNA的基因表达情况;研究子宫内膜癌中GPR30 mRNA、egfr mRNA的表达与患者的临床分期、肌层浸润、组织类型的关系;探讨新型雌激素受体GPR30和经典的雌激素受体ERα介导子宫内膜癌发生的途径,从而在基因水平对子宫内膜癌的发生做较深入的研究,揭示Ⅱ型子宫内膜癌发生的一个重要机制,为临床治疗子宫内膜癌并监测其预后提供新的理论依据和思路方法。方法: 1研究对象:选择2007年9月至2008年11月期间在河北医科大学第二医院妇科和计划生育病房术前诊刮确诊为子宫内膜癌的住院病人20例,取全切后的子宫内膜癌组织,旁组织送病理回报为子宫内膜癌。同期在宫腔镜室选择因子宫纵隔、子宫斜隔行宫腔镜诊疗的正常子宫内膜组织10例,旁组织病理回报为正常内膜。子宫内膜癌病人按照1988年FIGO临床-手术学分期分别纳入标准。所有对象采集标本前三个月均无激素类药物应用史,未进行过放疗或化疗,未合并其他妇产科和内科疾病。子宫内膜癌FIGO分期和子宫纵隔、子宫斜隔的诊断标准参照乐杰等主编的第六版《妇产科学》。 1.1取材:采用3点取材法,取子宫全切后的子宫内膜癌组织和因纵隔、斜隔子宫行宫腔镜诊疗的正常子宫内膜组织,每份各取3块,1×1cm大小,旁组织送病理。标本用DEPC水漂洗干净去除血液,从活体取下的标本必须在20分钟内放入液氮中,最终转运至-80℃冰箱保存。 1.2实验方法:采用逆转录聚合酶链反应半定量技术(RT-PCR)检测正常子宫内膜组织和子宫内膜癌组织中的GPR30 mRNA、ERαmRNA、egfr mRNA和c-fos mRNA的表达,所得灰度值IOD数据应用SPSS13.0统计软件进行分析,各项测定值以均数±标准差( x±s)表示,各因子的数据资料符合正态分布,进行方差齐性检验,可以采用两组间均数比较的两样本t检验或近似t检验。统计各子宫内膜癌标本的FIGO分期、肌层浸润和组织类型与GPR30 mRNA、egfr mRNA的关系并分别进行t检验,因子间进行直线相关分析,以P<0.05为差异有统计学意义。结果: 1子宫内膜癌组织和正常子宫内膜组织中均扩增到GPR30、ERα、egfr的预期目的基因片段,在正常子宫内膜中未扩增到c-fos的目的片段;且在子宫内膜癌组织中GPR30、egfr、c-fos的相对灰度IOD值明显高于正常子宫内膜组织,有显著性差异(P<0.05);ERα的相对灰度IOD值在正常子宫内膜和子宫内膜癌组织中没有显著性差异(P>0.05)。2癌组织肌层浸润大于等于1/2肌层的子宫内膜癌组织(7例)中GPR30的相对灰度IOD值明显高于肌层浸润小于1/2或没有侵犯肌层的组织(13例),且有统计学意义(P<0.05);FIGO临床分期Ⅲ、Ⅳ期患者(9例)组织中GPR30、egfr的相对灰度IOD值明显高于FIGO临床分期Ⅰ、Ⅱ患者(11例),且有统计学意义(P<0.05);特殊类型的子宫内膜癌(包括子宫乳头状浆液性腺癌2例、透明细胞癌2例,未分化癌1例)组织中GPR30的相对灰度IOD值不但高于正常子宫内膜组织,而且高于子宫内膜腺癌组织中GPR30的相对灰度IOD值,且均具有统计学意义(P<0.05)。 3子宫内膜癌组织中GPR30 mRNA的表达与egfr mRNA的表达呈正相关(r=0.507,P<0.05);GPR30 mRNA的表达和ERαmRNA无关( P>0.05 );egfr mRNA的表达和ERαmRNA的表达无关(P>0.05)。结论: 1子宫内膜癌患者组织中GPR30 mRNA、egfr mRNA和c-fos mRNA的表达明显高于正常子宫内膜,且GPR30 mRNA和egfr mRNA的表达具有正相关性。提示新型雌激素受体GPR30在可能在egfr的协助下,诱导激活原癌基因c-fos,参与了子宫内膜癌的发生。此过程可能与特殊类型子宫内膜癌的发生有关。 2新型雌激素受体GPR30的表达高低与子宫内膜癌的预后密切相关,GPR30表达高的子宫内膜癌患者的临床期别较晚,恶性度高,预后不佳。

关键词：子宫内膜癌新型雌激素受体GPR30 表皮生长因子受体egfr ER_α 原癌基因c-fos

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

喉声门上鳞癌nm23H1/NDPK,egfr表达及其与颈淋巴结转移和预后的关系

喉声门上鳞癌nm23H1/NDPK,EGFR表达及其与颈淋巴结转移和预后的关...

引用

作者：刘巍巍中山医科大学中山大学

学位级别：硕士

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

PEDV感染通过激活egfr调控NHE3活性的机制研究

PEDV感染通过激活EGFR调控NHE3活性的机制研究

引用

作者：张依玲西南大学

学位级别：硕士

猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）是仔猪病毒性腹泻的主要病原,引起仔猪以严重水样腹泻、呕吐和脱水为特征的高致死率消化道传染病,新生仔猪对PEDV相对易感,80～100%的仔猪在感染后几天内死亡。近年来,由于不... 详细信息

猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）是仔猪病毒性腹泻的主要病原,引起仔猪以严重水样腹泻、呕吐和脱水为特征的高致死率消化道传染病,新生仔猪对PEDV相对易感,80～100%的仔猪在感染后几天内死亡。近年来,由于不断有新的PEDV流行株出现,传统疫苗免疫未能提供预期的防控效果,该病仍在大规模流行爆发,给养猪业带来惨重损失。因此,阐明PEDV引发腹泻的病因和致病机制,可为防控猪流行性腹泻的流行提供更有效的途径。严重的腹泻与脱水是导致新生仔猪死亡的关键因素,钠氢交换体NHE3是介导肠内Na+/H+吸收的最重要的跨膜转运蛋白之一,NHE3的活性状态与腹泻的发生密切相关。本实验室前期研究表明特异性抑制猪小肠上皮细胞NHE3的活性,可导致仔猪出现严重腹泻,症状与PEDV致病相似,因此NHE3可能在PEDV感染致仔猪腹泻过程中发挥重要作用。已有研究表明表皮生长因子受体egfr可介导PEDV的感染过程,但是否参与PEDV感染调控NHE3活性机制还未见报道。基于此,本研究以新生仔猪和猪小肠上皮细胞IPEC-J2为感染模型,探讨PEDV感染小肠上皮细胞后,仔猪肠道中NHE3的表达变化,解析egfr在PEDV感染中的作用,以及生理情况下egfr对NHE3活性的调控机理,进一步研究egfr/ERK信号通路在PEDV感染对NHE3的活性调控中的作用,以此揭示PEDV感染通过egfr介导的信号通路调控NHE3活性的机制,为防治PEDV腹泻作用靶点提供新参考。主要研究内容如下:***感染对仔猪肠道NHE3表达的影响以3日龄荣昌仔猪为模型,经PEDV感染36 h后仔猪出现特征性临床症状,解剖并鉴定,感染仔猪出现严重水样腹泻,肠道变薄且含有大量未消化残渣,肠道剖检样品PCR鉴定为PEDV阳性;HE染色结果显示,PEDV感染仔猪空肠、回肠肠道绒毛明显萎缩脱落,肠道出现病理性损伤;利用免疫组化和免疫荧光检测空肠和回肠中NHE3的分布,结果显示NHE3在PEDV感染仔猪空肠和回肠纹状缘中分布显著降低;通过Ca2+螯合法提取肠道组织中新鲜分离的小肠上皮细胞测定组织NHE3蛋白相对含量,Western-blot结果分析显示,PEDV感染后仔猪肠道NHE3表达下调,回肠中NHE3的表达量显著减少（0.0150结果显示EGF预处理后病毒滴度显著上升（0.01egfr参与PEDV入侵IPEC-J2细胞,激活egfr促进PEDV的感染,抑制egfr活性减少PEDV的感染。（3）通过构建PEDV S1结构域和egfr胞外区真核表达载体,共转染HEK 293T细胞后,免疫共沉淀检测结果表明PEDV S1结构域与egfr胞外区存在直接的互作关系,即egfr通过胞外受体区结合PEDV S1参与病毒的感染。***调控NHE3活性的研究（1）通过调控egfr活性检测NHE3总蛋白和膜蛋白变化,Western-blot结果分析显示:EGF激活egfr后60 min内NHE3总蛋白水平基本不变,膜蛋白水平上调但不显著,但24 h后NHE3的表达均下调;AG1478抑制egfr后48 h内NHE3总蛋白和膜蛋白相对水平均有上调。结果表明egfr活性与NHE3蛋白的表达呈一定相关性。（2）NHE3在质膜上的流动性对其发挥钠氢交换活性起着关键作用,鉴定荧光质粒p EGFP-NHE3在IPEC-J2细胞中的稳定性后,通过荧光恢复漂白技术检测调控egfr活性后质膜上NHE3流动性变化,分析实时荧光恢复率和动态分数结果表明:持续激活egfr活性后质膜NHE3流动性相对降低,抑制egfr活性后漂白恢复6 min内能相对上调NHE3的流动性,即egfr的活性和NHE3的流动性在一定时间内呈负相关性。***感染通过egfr/ERK调控NHE3活性的机制研究（1）使用egfr调控剂预处理IPEC-J2细胞后感染PEDV,通过Western-blot检测egfr/ERK信号通路关键蛋白的表达和NHE3的表达情况,结果表明:激活egfr促进了PEDV感染引起的egfr和ERK磷酸化水平升高,NHE3表达显著下调;抑制egfr能减弱PEDV感染引起的egfr和ERK的磷酸化,阻滞了PEDV感染引起的NHE3的表达下调。提示egfr/ERK信号通路参与了PEDV感染对NHE3的调控。（2）使用荧光恢复漂白技术检测PEDV感染后质膜上NHE3流动性,分析数据表明:PEDV感染IPEC-J2细胞后NHE3在质膜上的流动性减弱,激活egfr后感染PEDV会进一步减弱NHE3的流动性,而抑制egfr活性后感染PEDV能相对增加NHE3的流动性。说明在PEDV感染的情况下,I

关键词：猪流行性腹泻病毒钠氢交换体NHE3 表皮生长因子受体egfr

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：