检索结果-内蒙古大学图书馆

上海第二医科大学学报 2005年第6期25卷 541-544页

作者：谢挺陆树良上海第二医科大学瑞金医院灼伤整形科上海市烧伤研究所上海200025

目的研究糖尿病大鼠皮肤组织中表皮细胞的增殖改变及其可能机制。方法12只SPF级SD大鼠随机分为糖尿病组(6只)和正常对照组(6只),糖尿病大鼠以STZ诱导。成模后8周,二组同时采集背部皮肤,观察表皮的组织学特征;流式细胞术检测表皮细胞的... 详细信息

目的研究糖尿病大鼠皮肤组织中表皮细胞的增殖改变及其可能机制。方法12只SPF级SD大鼠随机分为糖尿病组(6只)和正常对照组(6只),糖尿病大鼠以STZ诱导。成模后8周,二组同时采集背部皮肤,观察表皮的组织学特征;流式细胞术检测表皮细胞的细胞周期;Westernblot检测细胞增殖调节因子cyclinD1、cyclinB1和cdk4的表达水平,并测定表皮细胞丝裂期促进因子(MPF)的组蛋白激酶活性。结果与正常组相比,糖尿病大鼠表皮结构欠清晰,部分表皮缺乏复层排列,表皮细胞数量明显减少,表皮层厚度明显变薄;S期和G2/M期表皮细胞百分比均显著降低(P<0.01,P<0.05);糖尿病组cdk4的表达水平显著低于正常组(P<0.05),两组间cyclinD1、cyclinB1表达无显著差异(P>0.05);糖尿病组表皮细胞MPF活性显著降低(P<0.01)。结论糖尿病大鼠皮肤表皮细胞处于明显增殖抑制状态,这种增殖抑制可能与cdk4的低表达和MPF活性下降有关。

关键词：糖尿病大鼠皮肤组织表皮细胞增殖相关事件 cyclin 流式细胞术检测 Western blot检测 cdk4 蛋白激酶活性皮肤表皮细胞正常对照组 STZ诱导组织学特征可能机制 SD大鼠 SPF级细胞周期调节因子促进因子表皮结构细胞数量

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硅钙镁晶须增强RPUF复合材料的制备与性能研究

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塑料工业 2006年第9期34卷 42-44,54页

作者：周秋明田春蓉王建华刘静中国工程物理研究院化工材料研究所四川绵阳621900

研究了硅钙镁(SCM)晶须在硬质聚氨酯泡沫塑料(RPUF)基体中的分散状况及SCM晶须用量对SCM晶须/RPUF复合材料的力学性能、表皮结构和尺寸稳定性的影响。结果表明SCM晶须在RPUF基体中具有较好的分散性;随着SCM晶须用量的增加,复合材料的压... 详细信息

研究了硅钙镁(SCM)晶须在硬质聚氨酯泡沫塑料(RPUF)基体中的分散状况及SCM晶须用量对SCM晶须/RPUF复合材料的力学性能、表皮结构和尺寸稳定性的影响。结果表明SCM晶须在RPUF基体中具有较好的分散性;随着SCM晶须用量的增加,复合材料的压缩性能逐渐提高,直至晶须用量超过60g/100g聚醚后,复合材料的压缩性能开始下降;复合材料的冲击强度随着SCM晶须用量的增加明显下降;复合材料的表皮随晶须用量的增加越来越致密;在一定用量范围内,SCM晶须可改善复合材料的尺寸稳定性。

关键词：硬质聚氨酯泡沫塑料 SCM晶须分散性力学性能表皮结构

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基于叶片解剖特征分析三种无患子科果树的亲缘关系

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广西植物 2016年第6期36卷 679-685页

作者：张永福黄鹤平银立新陈泽斌华金珠牛燕芬刘佳妮昆明学院农学院昆明650214 云南省高校都市型现代农业工程研究中心昆明650214

采用石蜡切片和组织离析法,对3种无患子科果树的10份种质叶片横切及表皮解剖特征进行观察,并采用聚类分析对其亲缘关系进行初步研究。结果表明：10份试材均为异面叶,叶横切结构分为表皮、叶肉和叶脉3部分。中脉厚度总体上龙眼最大、龙... 详细信息

采用石蜡切片和组织离析法,对3种无患子科果树的10份种质叶片横切及表皮解剖特征进行观察,并采用聚类分析对其亲缘关系进行初步研究。结果表明：10份试材均为异面叶,叶横切结构分为表皮、叶肉和叶脉3部分。中脉厚度总体上龙眼最大、龙荔次之、荔枝最小,差异显著。荔枝的中脉横切面为圆三角形,龙眼近似半圆形,龙荔则近似扁圆形。不同试材的叶片、上表皮和下表皮、栅栏组织及海绵组织的厚度分别为175.23～318.84、11.18～25.13、7.49～20.43、50.01～124.59和84.0～173.64μm,栅栏组织细胞有2～3层。此外,叶脉突起度、栅栏组织与海绵组织厚度之比、叶片组织结构紧密度和叶片组织结构疏松度分别为2.65～5.77、0.52～0.82、28.89%～39.95%和44.89%～55.57%。荔枝的表皮细胞较小、多边形,垂周壁为弧形,下表皮无表皮毛,气孔器呈长椭圆形;龙眼的表皮细胞较大、不规则形,垂周壁深波状,下表皮具表皮毛,气孔椭圆形或近圆形;龙荔的表皮细胞与龙眼相近,但垂周壁为波状。聚类分析显示,10份试材首先聚为两大类,其中第一类是荔枝属,第二类是龙眼属;然后又分为4个亚类,三月红和龙荔各自单独聚为一个亚类。

关键词：无患子科果树叶片横切结构表皮结构聚类分析

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蔬菜作物果实和叶片表皮蜡质研究进展

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中国瓜菜 2019年第5期32卷 1-6页

作者：龚成胜刘文革中国农业科学院郑州果树研究所

植物蜡质是附着于植物组织表面的一层疏水性屏障,在蔬菜作物中,表皮蜡质是重要的农艺性状,存在于甘蓝、黄瓜、西瓜等蔬菜作物的组织器官上,对植物生长发育和适应外界环境起到重要作用。目前,植物蜡质的生理生化作用和遗传分子机制研究... 详细信息

植物蜡质是附着于植物组织表面的一层疏水性屏障,在蔬菜作物中,表皮蜡质是重要的农艺性状,存在于甘蓝、黄瓜、西瓜等蔬菜作物的组织器官上,对植物生长发育和适应外界环境起到重要作用。目前,植物蜡质的生理生化作用和遗传分子机制研究已经取得了重要进展,笔者综述了蔬菜作物果实和叶片表皮蜡质性状的生物学功能、结构与化学成分、遗传规律与基因定位以及植物蜡质合成与调控基因的克隆,并对蜡质在蔬菜作物上的研究与应用前景进行了展望。

关键词：蔬菜作物表皮蜡质表皮结构化学成分遗传规律基因定位

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非甾醇类蜕皮激素竞争物(RH-2485)对棉铃虫六龄幼虫部分组织蛋白质表达和体壁结构的作用

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Zoological Research 2003年第2期24卷 140-143页

作者：李照民赵小凡王金星王家宝王胜利山东大学生命科学学院生物系山东济南250100 山东省棉花研究中心试验站山东临清252600

棉铃虫六龄幼虫经非甾醇类蜕皮激素竞争物 (RH 2 4 85 )饲喂处理后 ,取部分组织做酶 /蛋白检测以及切片光镜观察。变性聚丙烯酰胺凝胶电泳显示 ,处理 2 4和 4 8h幼虫的脂肪体和体壁的一种主要蛋白质表达量降低 ;非变性聚丙烯酰胺凝胶电... 详细信息

棉铃虫六龄幼虫经非甾醇类蜕皮激素竞争物 (RH 2 4 85 )饲喂处理后 ,取部分组织做酶 /蛋白检测以及切片光镜观察。变性聚丙烯酰胺凝胶电泳显示 ,处理 2 4和 4 8h幼虫的脂肪体和体壁的一种主要蛋白质表达量降低 ;非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳酯酶染色显示 ,处理 4 8h后血淋巴和中肠有新的酯酶同功酶表达 ;处理 2 4h幼虫的体壁组织切片出现蜕皮特征 (中表皮 +内表皮囊泡化、上表皮 +外表皮与真皮细胞层分离 ) ,以及异常蜕皮 (真皮细胞层变薄 )。这些结果深化了RH 2 4 85杀虫机制的认识。

关键词：棉铃虫 RH-2485 蛋白质酯酶同工酶表皮结构

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干热胁迫对紫花苜蓿叶片气孔大小的影响

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云南农业大学学报（自然科学版） 2013年第3期28卷 336-339页

作者：赵雅丽熊浩毕玉芬王玉佳单贵莲姜华云南农业大学动物科学技术学院云南昆明650201 甘肃省天祝县草原工作站甘肃天祝733200

为了解紫花苜蓿(Medicago sativa L.)在干热条件下的气孔变化,本文以德钦紫花苜蓿和阿尔冈金紫花苜蓿为材料,在干热胁迫处理下,采用扫描电镜技术对紫花苜蓿的表皮结构和气孔大小进行了研究,结果表明紫花苜蓿上表皮和下表皮的气孔长度与... 详细信息

为了解紫花苜蓿(Medicago sativa L.)在干热条件下的气孔变化,本文以德钦紫花苜蓿和阿尔冈金紫花苜蓿为材料,在干热胁迫处理下,采用扫描电镜技术对紫花苜蓿的表皮结构和气孔大小进行了研究,结果表明紫花苜蓿上表皮和下表皮的气孔长度与宽度都随着胁迫的增加呈现出先增加后下降的趋势,而紫花苜蓿苜蓿的气孔开度基本上是随着干热胁迫的增加呈现先增加后下降,复水后又增加的趋势。德钦苜蓿和阿尔冈金苜蓿相同处理时间下同一指标差异大都显著(P<0.05)。

关键词：干热胁迫紫花苜蓿扫描电镜表皮结构气孔大小

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新型防虫果袋对‘绿化九’桃日灼果实影响研究

新型防虫果袋对‘绿化九’桃日灼果实影响研究

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作者：崔延河北农业大学

学位级别：硕士

新型防虫果袋（专利号:ZL201320160410.3）的使用减少了害虫对桃果实的蛀果率,延长了果实保质期。但在防虫果袋使用过程中,会导致‘绿化九’桃果实发生日灼,严重影响新型防虫果袋的推广和应用。为了明确新型防虫果袋对果实表皮结构和内... 详细信息

新型防虫果袋（专利号:ZL201320160410.3）的使用减少了害虫对桃果实的蛀果率,延长了果实保质期。但在防虫果袋使用过程中,会导致‘绿化九’桃果实发生日灼,严重影响新型防虫果袋的推广和应用。为了明确新型防虫果袋对果实表皮结构和内部相关生理指标的影响以及果实表皮变化原因,进而为新型防虫果袋的改进提供理论依据,本研究以河北省保定市满城区的‘绿化九’桃作为试验材料,对桃果实表皮结构、木质素和纤维素含量以及果皮组织抗氧化指标进行测定,主要结果如下:（1）使用新型防虫果袋的‘绿化九’桃,日灼果实表皮层出现解体、变薄现象,表皮细胞结构受损严重。而亚表皮层出现不同程度损伤,其中,轻度日灼果实亚表皮层细胞随着时间的延长逐渐扁平化（未木质化）,亚表皮层平均厚度由开始的245.86μm减少到166.34μm;重度日灼果实随着时间的延长,近表皮层的亚表皮层细胞逐渐木质化,厚度显著高于轻度日灼果实（P<0.05）。（2）使用新型防虫果袋的‘绿化九’桃,木质素含量随着时间的延长逐渐增加,轻度日灼果实木质素含量高于正常果实,但差异不显著;纤维素含量在上色期显著高于使用普通果袋果实（P<0.05）。重度日灼果实木质素含量始终显著高于使用普通果袋果实与轻度日灼果实（P<0.05）;纤维素含量在上色期显著高于使用普通果袋果实（P<0.05）。（3）使用新型防虫果袋的‘绿化九’桃,轻度日灼果实抗氧化酶活性（SOD、POD、CAT、APX）与抗氧化剂（GSH、ASA）含量受影响较小,膜脂过氧化产物（MDA）与O2-含量水平较低,可以维持一定抗氧化能力。重度日灼果实抗氧化酶活性（SOD、POD、CAT、APX）与抗氧化剂（GSH、ASA）含量随着时间的延长显著增加后迅速下降,甚至低于正常水平;膜脂过氧化产物（MDA）与O2-含量显著高于使用普通果袋果实（P<0.05）,随着上色时间的延长MDA与O2-含量持续增加,严重影响果实氧化平衡。

关键词：新型防虫果袋 ‘绿化九’桃表皮结构生理指标

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Desiccate基因在飞蝗干燥适应中的功能研究

Desiccate基因在飞蝗干燥适应中的功能研究

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作者：高志梅山西大学

学位级别：硕士

蝗灾、水患和旱灾曾经并称为我国的三大自然灾害,常导致一系列连锁的社会反应,严重提高社会治理成本。蝗灾往往发生在水灾和旱灾之后,提示它的爆发与环境变化及其对干燥的适应能力密切相关。理解蝗虫对干燥环境的适应能力及其机制,将为... 详细信息

蝗灾、水患和旱灾曾经并称为我国的三大自然灾害,常导致一系列连锁的社会反应,严重提高社会治理成本。蝗灾往往发生在水灾和旱灾之后,提示它的爆发与环境变化及其对干燥的适应能力密切相关。理解蝗虫对干燥环境的适应能力及其机制,将为蝗虫的有效预防和治理提供科学依据。飞蝗(Locusta migratoria)是我国历史上造成农业毁灭性灾害的主要类群,也属于世界性的农业害虫,具有迁飞和繁殖能力强,干燥环境适应能力强以及分布广泛等特点,一旦爆发,对农业生产造成严重的威胁。目前,关于参与飞蝗适应干燥环境的关键基因有哪些以及这些基因在飞蝗耐受干燥环境中的机制是什么尚不清楚。因此,本研究以飞蝗为研究对象,采用生物信息学的分析方法并结合飞蝗的转录组数据库,鉴定出1条与黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)幼虫期受干燥诱导高表达的脱水抗性基因(Desiccate,Desi)的直系同源基因LmDesi。通过分析该基因的蛋白质和基因结构、时空表达特性及其对环境的敏感性,确定LmDesi受干燥环境诱导最明显的部位。利用RNAi技术,系统分析LmDesi缺失对5龄飞蝗若虫的表型、趋水性行为、表皮渗透性和脂类合成等适应干燥环境指标的影响,初步揭示LmDesi参与飞蝗干燥耐受的相关机制。最后通过分析LmDesi缺失对飞蝗卵-若虫、若虫-若虫和若虫-成虫各阶段耐受干燥过程中的影响,确定LmDesi在飞蝗整个生命周期内耐受干燥环境过程中的作用是否保守。本文具体研究成果如下:(1)LmDesi的基因和蛋白质结构、时空表达特性及其对环境敏感性的分析基于果蝇Desi基因的cDNA序列,利用Blastn在飞蝗转录组数据库检索,获得LmDesi的cDNA片段为1,000 bp,其基因组DNA长度为73,564 bp。该基因包括5个外显子,总长是783 bp,共编码260个氨基酸。结合SMART网站在线分析和Gene Doc多物种比对法,确定LmDesi蛋白质含有1个信号肽、1个跨膜结构域、1个未知功能的结构域、2个STATS SH2结合区以及4个PDZ结合域。Desi基因系统发育分析结果显示,LmDesi与渐变态昆虫西花蓟马(Frankliniella occidentalis)的亲缘关系最近。利用RT-qPCR检测LmDesi的在飞蝗5龄若虫期的时空表达,结果发现,该基因在飞蝗N5D4天的表达量达到最高,同时,N5D4天在由外胚层发育形成的表皮、前肠和后肠中高表达。此外,通过改变环境湿度和饲喂含水量不同的食物后,检测飞蝗LmDesi在表皮和前后肠等高表达部位的表达量,发现只有在环境和食物含水量都很低的条件下,该基因在飞蝗表皮中被诱导高表达的效果最为明显,前后肠由于处于相对湿润的内环境而未出现明显升高。同时,不管环境中还是食物中含有较多水分,该基因在各部位包括表皮的表达量均无明显差异。(2)LmDesi参与5龄飞蝗耐受干燥环境的机制探索利用RNAi技术降低5龄飞蝗中LmDesi的表达后,发现该基因在mRNA水平表达降低时,对干燥环境的适应能力变弱。表现为在正常环境+含水量低的麦麸饲喂的干燥条件下,30%的飞蝗个体出现旧表皮蜕皮困难导致的死亡表型,另有65%的飞蝗个体在蜕皮前未见异常死亡,死亡率达到95%;同时,无论环境中还是食物中含水量较高时,LmDesi表达降低引起的飞蝗干燥耐受能力减弱的作用就会被缓解。采用Y型嗅觉仪检测飞蝗在不同条件下的趋水性,发现沉默该基因后在正常条件下喂食麦麸的飞蝗在行为上更倾向于多停留在水分含量高的脱脂棉球存在的反应臂中,提示该基因增强了这组飞蝗对水源的敏感性,表明Desi是飞蝗耐受干旱环境的关键基因。飞蝗LmDesi被干扰后,体重明显下降,体内水分含量大幅减少,揭示其表皮的保水性降低。采用亲水性染料(伊红)染色法浸染各组飞蝗活体表皮,没有发现不同处理组飞蝗表皮着色的显著差异,表明LmDesi并没有改变飞蝗表皮的渗透性。进一步采用HE染色法对LmDesi干扰后解剖其腹部表皮进行观察后,发现无论饲喂飞蝗的食物中的含水量高还是低,5龄若虫蜕皮前LmDesi沉默组的旧表皮层均相对较薄。此外,沉默LmDesi后饲喂含水量低的麦麸,会导致飞蝗旧表皮在蜕皮前与皮细胞层显著剥离。综上所述,表明LmDesi可以通过改变飞蝗表皮厚度降低其保水性。通过RT-qPCR技术检测不同处理组飞蝗表皮脂类合成及转运相关基因的表达,发现只有沉默该基因并喂食含水量低的麦麸组的飞蝗表皮中的脂合成及转运相关基因表达显著上调,同时,GC-MS检测发现只有该组中相关CHCs的含量显著升高,表明LmDesi通过调节表皮脂合成相关基因的高表达,增加表皮中相关CHCs的含量以及改变表皮层厚度等方式来应对干燥环境。(3)LmDesi在飞蝗不同龄期耐受干燥环境能力的保守性分析探究L

关键词：飞蝗脱水抗性基因Desi 干燥适应表皮结构脂类

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茶藨生柱锈菌寄主、转主寄主与茶藨生柱锈菌感染关系的初步研究

茶藨生柱锈菌寄主、转主寄主与茶藨生柱锈菌感染关系的初步研究

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作者：蒙进芳西南林学院

学位级别：硕士

华山松(PinusarmandiiFrach)作为中国特有的一种优良速生针叶造林树种，有着重要的经济价值和生态价值。目前，华山松林面临着华山松疱锈病的危害，严重地影响了林业生产的发展以及生态防护林的安全。华山松疱锈病病原菌为茶藨生柱锈菌(... 详细信息

华山松(PinusarmandiiFrach)作为中国特有的一种优良速生针叶造林树种，有着重要的经济价值和生态价值。目前，华山松林面临着华山松疱锈病的危害，严重地影响了林业生产的发展以及生态防护林的安全。华山松疱锈病病原菌为茶藨生柱锈菌(***)，该病原菌是具有长循环型生活史、转主寄生以及有较长的潜伏期的锈菌，其寄主为华山松，主要的转主寄主为茶藨子属(Ribes)植物。本研究主要针对华山松疱锈病的寄主(华山松)和转主寄主(茶藨子植物)与病原菌的抗性关系展开，旨在初步探讨寄主和转主寄主在病原传播过程中的作用地位，为进一步深入研究有效控制该病原危害的手段提供基础数据和实验理论依据。研究分为4个部分：\n (1)对采自云南省华山松疱锈病四个典型发病区的122份华山松针叶样本进行解剖结构分析，发现华山松的感病株组与健康株组之间在针叶表皮结构上有显著差异，其中主要是表皮细胞厚度和角质膜厚度，有抗病性的植株具有显著加厚的针叶表皮结构，抗病的健康株组比感病株组的角质膜和表皮分别增厚达30.5％和8.0％，病健株的气孔数量和内皮层厚度差异不明显。结果支持疱锈菌感染华山松是通过主动侵入机制从表皮进入针叶的，角质膜厚度和表皮厚度对华山松抵抗疱锈菌的感染有重要作用。\n (2)对采自中国五针松疱锈病7个典型发病区的10个种源样本的茶藨子植物进行叶表皮解剖结构研究，发现对茶藨生柱锈菌孢子不易感染样本与易感染样本之间在叶表皮结构上存在显著差异，主要是不易感染组茶藨子植物的叶表皮结构中表皮厚度和角质膜厚度呈现显著增厚，表明角质膜厚度和表皮厚度与茶藨子植物抵抗疱锈菌感染有很强的相关性。以表皮结构各项指标聚类分析，不易感染组和易感染组样本明显聚为两类。\n (3)对采自五针松疱锈病7个典型发病区的11个茶藨子种源的样本进行ITS遗传关系分析。结合这些茶藨子植物与各个发病区的茶藨生柱锈菌锈孢子的感染特性，初步探讨茶藨生柱锈菌对转主寄主茶子藨植物的选择机制。结果显示：易被多个发病区的茶藨生柱锈菌锈孢子所感染的茶藨子植物的ITS遗传关系很接近；属于单性花亚属的茶藨子植物更容易被多个地理种群的茶藨生柱锈菌锈孢子选择作为转主寄主；在同一生活环境中的茶藨生柱锈菌与茶藨子植物由于经过长期协同进化和相互适应，茶藨生柱锈菌能够特异性地选择寄生在本地的茶藨子属植物上；地域上分布广泛的茶藨子植物容易被多个发病区的茶藨生柱锈菌选择作为转主寄主。根据研究结果探讨了茶藨子属植物在传播疱锈病过程中的作用，可以看到茶藨生柱锈菌特异地选择其转主寄主时与茶藨子植物的遗传结构和地域分布范围关系密切。\n (4)对采自云南华山松疱锈病3个典型发病点(云南东川222林场、云南巧家跃进林场、云南东川法者林场)共77个华山松植株样品，分为健康株组和感病株组，进行ISSR分析。建立起了华山松ISSR反应体系为：总体积25ul，其中含10×buffer2.5ul，TaqDNApolymerase0.3ul(终浓度1.5U)，Primer2ul(终浓度2.0umol/L)，DNATemplate5ul(终浓度1.5ng/ul)，Mg2+2.5ul(终浓度3.0mmol/L)，dNTP2ul((终浓度250umol/L)，ddH2O10.

关键词：华山松茶藨子茶藨生柱锈菌表皮结构抗性育种

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切花菊蚜虫抗性鉴定与机理探讨及LLA转基因研究

切花菊蚜虫抗性鉴定与机理探讨及LLA转基因研究

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作者：何俊平南京农业大学

学位级别：硕士

菊花[Chrysanthemum grandiflorum (Ramat.) Kitamura]是我国十大传统名花、世界四大切花之一,在园林、家庭绿化美化中占有十分重要的地位。然而,菊花病虫害危害严重,蚜虫、蓟马、黑斑病、褐斑病等是其常见病虫害,在幼苗至成苗期时有发... 详细信息

菊花[Chrysanthemum grandiflorum (Ramat.) Kitamura]是我国十大传统名花、世界四大切花之一,在园林、家庭绿化美化中占有十分重要的地位。然而,菊花病虫害危害严重,蚜虫、蓟马、黑斑病、褐斑病等是其常见病虫害,在幼苗至成苗期时有发生,多危害芽心嫩尖,抑制植株的生长发育,严重影响观赏品质和应用,蚜虫不仅直接为害菊花,而且是TAV、PVP、CMV病毒的媒介者。目前,蚜虫的防治多采用化学方法,不仅消耗人力物力、造成环境污染,而且导致农药残留,使得蚜虫群体产生抗药性。因此,蚜虫的防治已成为菊花产业化生产中的一大难题,创造抗蚜虫菊花新种质已成为菊花抗性育种亟待解决的问题。目前关于切花菊抗蚜虫的研究较少,从切花菊中鉴定抗蚜虫性资源和利用转基因技术提高切花菊蚜虫抗性的研究尚未见报道。本研究旨在探讨切花菊抗蚜虫性鉴定方法,阐述蚜虫抗性机理及通过基因工程创造抗蚜虫切花菊新种质,进行了室内人工蚜虫接种的抗性鉴定,比较分析了不同蚜虫抗性品种间相关叶片结构特征、蚜虫接种后抗氧化酶与防御酶活性变化,并尝试了石蒜凝集素基因LLA转化切花菊的研究,主要研究结果如下： 1.切花菊抗蚜虫性的抗性等级及不同品种的抗蚜虫性对35个切花菊品种进行了室内人工接种蚜虫的抗性鉴定研究,结果显示不同的菊花品种对蚜虫的抗性表现出明显差异,蚜虫接种21 d时各品种上虫口数量差异甚大,为0～267头不等；根据蚜量比值可将切花菊抗蚜虫性分为5级,分别为：高抗,0～0.25；中抗,0.26～0.50；抗,0.51～0.75；低抗,0.76～1.25；不抗：>1.25。其中,‘神马’、‘风车菊1’、‘南农红枫’等15个品种蚜量比值在1.25以上,为不抗品种；‘小丽’、‘韩1’、‘南农茶香’等4个品种蚜量比值为0.76～1.25,为低抗品种；‘阳光’、‘馒头菊’、‘优香’(3个品种)蚜量比值为0.51～0.75,为抗虫品种；‘韩5’、‘韩6’(2个品种)蚜量比值为0.26-0.50,为中抗品种；‘韩4’、‘南农紫勋章’、‘精云’等11个品种蚜量比值为0～0.25,为高抗品种。 2.抗感切花菊品种的叶片结构特征、抗氧化酶及防御酶活性以高抗品种‘精云’、中抗品种‘韩6’和不抗品种‘神马’为材料,比较分析了三者相关叶片表面结构特征(表皮毛、腺体、蜡质等)及蚜虫接种对抗氧化酶、防御酶活性变化的影响,结果发现,‘精云’的表皮毛致密,单个表皮毛长度和高度、腺体大小及蜡质含量均高于‘韩6’和‘神马’,初步说明叶片表皮毛、腺体、蜡质含量等与切花菊抗蚜虫性具有一定的相关性；蚜虫接种后,抗氧化酶和防御酶活性水平变化均存在显著差异。在抗性品种中,超氧化物岐化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、抗坏血酸酶(APX)活性水平上升速度快,出现峰值较不抗品种早。APX活性变化幅度亦明显大于不抗品种。POD、POD活性在蚜虫接种后期(3d-7d)保持上升趋势。多酚氧化酶(PPO)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性均有所提高,抗性品种响应快,上升幅度大,且接种后期保持较高的活性水平。说明蚜虫接种前后切花菊抗感材料叶片的活性氧系统和防御酶系统与抗虫性密切相关,可作为其苗期蚜虫抗性评价的生理指标之一。 3.农杆菌介导的LLA基因转化切花菊的研究以目前生产应用比较广泛的切花菊‘神马’为材料,对其遗传转化中合适的抗生素筛选浓度进行了研究,结果表明叶片对潮霉素、羧苄青霉素十分敏感,10 mg·L-1的潮霉素能够完全抑制叶片分化,20 mg·L-1的潮霉素完全抑制了不定芽生根；确定了‘神马’叶盘再生筛选以8～10 mg·L-1的潮霉素为宜,生根筛选以18 mg·L-1的潮霉素为宜。羧苄青霉素对菊花叶片的再生有一定的抑制作用,随着浓度的升高,抑菌效果增加,但芽的分化率逐渐下降,500 mg·L-1的羧苄青霉素能够完全抑制农杆菌的滋生,但严重抑制了叶片的分化,浓度降至300 mg·L-1时,能够完全抑制农杆菌的滋生并保证50%的再生率,故确定羧苄青霉素抑菌浓度早期以500 mg·L-1为宜,后期以250～300 mg-L-1为宜。通过农杆菌介导的叶盘法将长筒石蒜凝集素LLA基因转入‘神马’,获得了105个抗性芽,生根筛选后获得54个潮霉素抗性植株；PCR及RT-PCR分子检测显示有7个株系检测到目的条带的整合与表达；对该7个转基因株系采用室内人工蚜虫接种试验进行鉴定,结果表明转基因切花菊幼苗对蚜虫密度有明显的抑制作用,且不同转化株系的抗蚜性差异较大,蚜口密度抑制率为12.2%～76.8%不等,平均蚜口密度抑制率为41.8%。

关键词：菊花抗虫性表皮结构抗氧化酶防御酶 LLA基因遗传转化

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