为筛选适用于青钱柳(Cyclocarya paliurus(Batal.)Iljinskaja)不同组织器官的稳定内参基因,本研究利用青钱柳花芽的转录组测序数据,选取Actin、CYP、EIF、GAPDH、TUB、TEF和18S r RNA共7个看家基因作为候选内参基因;以根、茎、叶、雌花...
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为筛选适用于青钱柳(Cyclocarya paliurus(Batal.)Iljinskaja)不同组织器官的稳定内参基因,本研究利用青钱柳花芽的转录组测序数据,选取Actin、CYP、EIF、GAPDH、TUB、TEF和18S r RNA共7个看家基因作为候选内参基因;以根、茎、叶、雌花和雄花为材料,通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术对各候选内参基因进行扩增。结合Norm Finder、ge Norm和BestKeeper等软件分析各候选基因的表达稳定性,用RefFinder综合分析获得适宜的内参基因。结果表明,不同组织中各内参基因表达稳定性具有一定差别,稳定性综合排序从高到低为EIF>18S r RNA>TEF>GAPDH>CYP>Actin>TUB。但由于EIF较18S r RNA的CT值差异较大,即18S r RNA在各组织中的表达量更高,因此本研究确定18S r RNA为青钱柳荧光定量分析的最适内参基因,为后续相关基因功能性研究奠定理论基础。
乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)的持续感染与人类肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)的发展密切相关。乙肝病毒X蛋白(Hepatitis B virus X protein,HBx)在肝癌的发展过程中发挥着重要作用。最近研究发现乳腺癌扩增性抗原1(amp...
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乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)的持续感染与人类肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)的发展密切相关。乙肝病毒X蛋白(Hepatitis B virus X protein,HBx)在肝癌的发展过程中发挥着重要作用。最近研究发现乳腺癌扩增性抗原1(amplified in breast cancer1,AIB1)在68%的人类肝癌组织中过表达,并且通过提高肝癌细胞的增殖和侵袭能力来促进肝癌的发展。因为HBx和AIB1都在肝癌的发展过程中起重要作用,研究目标是确定HBx和AIB1是否能够协同促进肝癌的发展。在此,发现与HBx阴性肝癌组织相比,HBx阳性肝癌组织中AIB1的蛋白水平较高。在肝癌组织中,HBx的相对蛋白水平和AIB1的相对蛋白水平呈现正相关。在不影响AIB1的mRNA水平的情况下,HBx可通过延长AIB1蛋白的半衰期来提高AIB1的蛋白水平。在机理方面,HBx通过与AIB1的结合来阻止E3泛素连接酶Fbw7α(F-box and WD repeat domain containing7α,Fbw7α)和AIB1的结合,进而抑制Fbw7α对AIB1的泛素化降解。此外,HBx和AIB1能够被募集到MMP-9基因的启动子上协同促进MMP-9的启动子活性,进而增强MMP-9在HepG2细胞中的表达,最终促进肝癌细胞的侵袭能力。研究表明HBx能够提高AIB1蛋白的稳定性并与AIB1协同促进肝癌细胞的侵袭,说明HBx和AIB1之间的联系在乙肝病毒相关的肝癌的发展过程中起着重要作用。
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