检索结果-内蒙古大学图书馆

中国农业科技导报(中英文) 2025年第1期27卷 25-34页

作者：冯哲瀚华德平梅雪锋赵柏萍张蕾天津大学生命科学学院天津300072

乳酸乳球菌是乳酸菌在异源表达蛋白方面的应用与研究中的一种重要模式菌,由于其公认的安全性、益生特性、无包涵体和内毒素、易于表面显示和细胞外分泌使其成为蛋白异源表达的理想宿主。由于乳酸乳球菌刺激黏膜免疫的特性,其在递呈病毒... 详细信息

乳酸乳球菌是乳酸菌在异源表达蛋白方面的应用与研究中的一种重要模式菌,由于其公认的安全性、益生特性、无包涵体和内毒素、易于表面显示和细胞外分泌使其成为蛋白异源表达的理想宿主。由于乳酸乳球菌刺激黏膜免疫的特性,其在递呈病毒、细菌抗原等方面得到了广泛应用。阐述了乳酸乳球菌表达系统的相关研究进展,着重介绍了乳酸乳球菌表达异源蛋白的分泌和锚定策略,并总结了对乳酸乳球菌作为细胞工厂在食品、医药,特别是抗原呈递方面的应用,最后对乳酸乳球菌表达系统未来的研究方向进行了展望。

关键词：乳酸乳球菌表达系统异源蛋白分泌表达表面展示

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胰岛素原基因的高效分泌表达系统——甲醇酵母Pichia pastoris

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浙江大学学报（工学版） 2005年第7期39卷 1091-1095页

作者：吴颖钱凯先浙江大学生命科学学院生物技术系浙江杭州310027

为了提高重组人胰岛素的表达效率,使用了近年发展起来的真核表达系统-甲醇酵母Pichia pastoris. Pichia pastoris以甲醇为其惟一碳源,而乙醇氧化酶基因的启动子是强启动子,可用来调控异源蛋白的表达.该系统具有操作技术简单,可进行高水... 详细信息

为了提高重组人胰岛素的表达效率,使用了近年发展起来的真核表达系统-甲醇酵母Pichia pastoris. Pichia pastoris以甲醇为其惟一碳源,而乙醇氧化酶基因的启动子是强启动子,可用来调控异源蛋白的表达.该系统具有操作技术简单,可进行高水平的胞内或胞外表达,及对表达产物进行翻译后修饰与加工等显著优点.将含有小C肽或不含有C肽的人胰岛素原类似物基因整合到酵母基因组上来发酵生产人胰岛素原,在表达量上,每升发酵液中可以得到胰岛素原250～300mg,分泌水平约占总蛋白量的20%,重组人胰岛素具有与猪胰岛素相同的受体结合能力和生物活性.

关键词：胰岛素原甲醇酵母 Pichia pastoris 乙醇氧化酶(AOX) 表达系统

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乳酸乳球菌表达系统及其启动子的研究进展

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食品科学 2022年第11期43卷 330-336页

作者：王慧劳晓黄琳琳方以诚熊智强艾连中宋馨上海理工大学健康科学与工程学院上海200093

乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)是工业应用中一种重要的模式菌株,具有非致病性、分泌蛋白能力强、容易分离培养等特性,是异源蛋白表达和分泌的理想宿主。高效可控的启动子是实现外源蛋白高效表达的关键因素之一。根据诱导机制,启动子... 详细信息

乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)是工业应用中一种重要的模式菌株,具有非致病性、分泌蛋白能力强、容易分离培养等特性,是异源蛋白表达和分泌的理想宿主。高效可控的启动子是实现外源蛋白高效表达的关键因素之一。根据诱导机制,启动子可分为组成型和诱导型。本文阐述了乳酸乳球菌表达系统及其启动子结构,总结了生物信息学预测启动子及筛选克隆新启动子的方法,并对乳酸乳球菌启动子未来的研究方向进行了展望,可为深入研究启动子的结构和功能并进一步在工业上生产外源蛋白提供参考。

关键词：乳酸乳球菌表达系统启动子

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微生物表达系统研究进展

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中国食品学报 2013年第10期13卷 126-135页

作者：闫子祥杨然李秀婷北京工商大学食品学院北京100048 食品添加剂与配料北京高校工程研究中心北京100048 北京市食品风味化学重点实验室北京100048

近些年,随着分子生物学的发展及基因克隆表达研究的不断深入,人们对外源基因的表达系统有了进一步的认识。微生物表达系统具有培养方便,培养周期短,成本低等优点,目前已发展几套技术。比较成熟的技术是用微生物作为表达系统,如大肠杆菌... 详细信息

近些年,随着分子生物学的发展及基因克隆表达研究的不断深入,人们对外源基因的表达系统有了进一步的认识。微生物表达系统具有培养方便,培养周期短,成本低等优点,目前已发展几套技术。比较成熟的技术是用微生物作为表达系统,如大肠杆菌表达系统、枯草芽孢杆菌表达系统、酵母表达系统、丝状真菌表达系统等,为重组蛋白的生产及性质研究打下良好基础。本文综述以上几种表达系统的特点,外源基因高效表达的影响因素及应用现状。

关键词：表达系统大肠杆菌枯草芽孢杆菌酿酒酵母毕赤酵母丝状真菌

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异源表达系统中蛋白质糖基化

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 1999年第2期31卷 3-7页

作者：许强王克夷中国科学院上海生物化学研究所

糖基化作为真核细胞中最为广泛的蛋白翻译后修饰方式，对糖蛋白的分泌、抗原性、代谢等有重要的作用。大多数药用蛋白均为糖蛋白。近年来，在糖生物学功能的研究，糖形的精确分析，以及糖基化生物合成的调控等方面，人们已取得巨大进步... 详细信息

糖基化作为真核细胞中最为广泛的蛋白翻译后修饰方式，对糖蛋白的分泌、抗原性、代谢等有重要的作用。大多数药用蛋白均为糖蛋白。近年来，在糖生物学功能的研究，糖形的精确分析，以及糖基化生物合成的调控等方面，人们已取得巨大进步。本文主要探讨了不同异源表达系统中糖基化的优缺点。

关键词：糖基化表达系统

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丝状真菌蛋白表达系统研究进展

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中国生物工程杂志 2020年第5期40卷 94-104页

作者：胡益波皮畅钰张哲向柏宇夏立秋湖南师范大学生命科学学院淡水鱼类发育生物学国家重点实验室长沙410081 湖南师范大学生命科学学院微生物分子生物学湖南省重点实验室长沙410081

丝状真菌以其优秀的表达分泌能力和良好的环境适应能力,使得其在蛋白质表达领域应用越来越广泛。近几十年来,通过诱变、培养优化及遗传改造等手段,使得包含曲霉属、木霉属、青霉属等在内的丝状真菌被开发成高效表达宿主。为促进丝状真... 详细信息

丝状真菌以其优秀的表达分泌能力和良好的环境适应能力,使得其在蛋白质表达领域应用越来越广泛。近几十年来,通过诱变、培养优化及遗传改造等手段,使得包含曲霉属、木霉属、青霉属等在内的丝状真菌被开发成高效表达宿主。为促进丝状真菌蛋白表达系统的开发,结合作者的研究工作,对工业上丝状真菌表达宿主、蛋白质表达元件及其改造策略进行综述,并探讨了当前丝状真菌表达系统开发过程中的不足之处,为新型丝状真菌表达系统的研究提供参考和启示。

关键词：丝状真菌表达系统蛋白质表达宿主启动子

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不同表达系统的治疗性纳米抗体研究进展

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中国生物工程杂志 2023年第11期43卷 43-55页

作者：孙白荷吴悦赵芮楼雨馨李婉婷李延飞马琳琳上海理工大学健康科学与工程学院上海200093 上海健康医学院医学技术学院上海201318 上海市东海老年护理医院上海201303

从骆驼科动物血清中提取的纳米抗体,由于其具有不同于传统单克隆抗体的结构和较小的尺寸,以及高特异性、高理化稳定性和组织渗透性等特征,因此显示出巨大的应用潜力,被认为是生物医学发展中有前景的治疗性蛋白。利用微生物生产表达纳米... 详细信息

从骆驼科动物血清中提取的纳米抗体,由于其具有不同于传统单克隆抗体的结构和较小的尺寸,以及高特异性、高理化稳定性和组织渗透性等特征,因此显示出巨大的应用潜力,被认为是生物医学发展中有前景的治疗性蛋白。利用微生物生产表达纳米抗体无须翻译后修饰,可实现大规模生产,且显著降低生产成本。目前常规生产纳米抗体的表达系统主要为大肠杆菌、毕赤酵母和哺乳动物细胞系,此外还有真菌、植物细胞、昆虫细胞及乳酸杆菌等表达系统。详细介绍了不同表达系统的特点、优势及应用,并总结了各个系统亟须解决的问题,同时概述了治疗性纳米抗体药物的生产、研发情况及临床疾病治疗应用,以期为选择合适的表达系统,用于治疗性纳米抗体的生产及临床治疗提供参考依据。

关键词：纳米抗体异源表达抗体药物表达系统重组蛋白

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神经营养素-4(NT-4)在昆虫杆状病毒表达系统中的克隆与表达

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中国医学科学院学报 2001年第2期23卷 141-144页

作者：马晓骊黄秉仁中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生化室医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的通过昆虫杆状病毒表达系统的优势，表达出具有生物学活性的神经营养素-4（ hNT-4）蛋白。方法通过 PCR方法获得 hNT-4成熟肽的基因，将其连接到昆虫表达载体 pAcGP67B上，在昆虫细胞 Sf9中进行表达。对表达产物进行免疫原性和生... 详细信息

目的通过昆虫杆状病毒表达系统的优势，表达出具有生物学活性的神经营养素-4（ hNT-4）蛋白。方法通过 PCR方法获得 hNT-4成熟肽的基因，将其连接到昆虫表达载体 pAcGP67B上，在昆虫细胞 Sf9中进行表达。对表达产物进行免疫原性和生物学活性测定。结果获得 hNT-4蛋白的表达产物， SDS-PAGE电泳显示表达产物相对分子质量为 15 000。经 Western-blot验证，表达上清及细胞全蛋白均有一条能与抗人 NT-4抗体发生特异性免疫反应的条带。经 PC12细胞测定，表达上清中的 rNT-4蛋白具有明确的生物学活性。结论 hNT-4在昆虫杆状病毒表达系统中的表达为今后进一步深入研究 hNT-4的功能及其在临床中的应用提供了条件。

关键词：神经营养素-4 载体PacGP67B Sf 细胞昆虫杆状病毒表达系统克隆表达

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瑞氏木霉外源基因表达系统中受体菌株的改造

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菌物学报 2004年第2期23卷 248-254页

作者：汪天虹刘倜刘世利龙昊刘谨山东大学微生物技术国家重点实验室济南250100

将解除了葡萄糖阻遏的纤维素酶高产菌株瑞氏木霉TrichodermareeseiRutC30经EMS诱变后,在酪蛋白平板上筛选出部分蛋白酶缺陷突变菌株***30M3。RutC30M3的胞外蛋白酶活力比亲本株降低约74%,但生长特性、产纤维素酶活力等性状与亲本株相同... 详细信息

将解除了葡萄糖阻遏的纤维素酶高产菌株瑞氏木霉TrichodermareeseiRutC30经EMS诱变后,在酪蛋白平板上筛选出部分蛋白酶缺陷突变菌株***30M3。RutC30M3的胞外蛋白酶活力比亲本株降低约74%,但生长特性、产纤维素酶活力等性状与亲本株相同。用携带潮霉素磷酸转移酶基因(hph)的表达质粒pAN7-1分别转化瑞氏木霉RutC30和RutC30M3原生质体,转化结果显示RutC30M3(pAN7-1)对潮霉素的抗性比RutC30(pAN7-1)提高约20%,而Northernblot分析结果显示在两菌株中潮霉素基因转录水平相似,由此证明宿主菌蛋白酶缺陷对保护重组蛋白免于降解有明显作用。蛋白酶缺陷菌株RutC30M3适于作为瑞氏木霉外源基因表达系统中的受体菌株用于大量生产同源与异源蛋白。

关键词：瑞氏木霉外源基因表达系统受体菌株蛋白酶缺陷株腐生性丝状真菌

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马克斯克鲁维酵母表达系统菊粉酶启动子的改造及活性研究

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复旦学报（自然科学版） 2017年第4期56卷 438-445,454页

作者：胡晓悦周峻岗余垚吕红 HU Xiaoyu 复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室上海200438 上海工业菌株工程技术研究中心上海200438

马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)作为一种食品安全级酵母,具有生长快,生物量高等特点,是一种新型的重组蛋白表达的宿主系统.启动子是供RNA聚合酶识别和结合的DNA序列,调控着转录的起始过程,直接影响基因的表达水平.本文通过... 详细信息

马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)作为一种食品安全级酵母,具有生长快,生物量高等特点,是一种新型的重组蛋白表达的宿主系统.启动子是供RNA聚合酶识别和结合的DNA序列,调控着转录的起始过程,直接影响基因的表达水平.本文通过易错PCR技术对马克斯克鲁维酵母菊粉酶启动子Pinu进行两轮突变,以阿魏酸酯酶(Est1E)作为报告基因,经筛选、鉴定获得了5个可以显著提高外源蛋白表达量的突变型启动子Pm1D81、Pm1F138、Pm2Q89、Pm2M73、Pm2X47,报告蛋白Est1E的酶活性是启动子改造前的2.31,2.65,5.01,5.40,5.43倍.随后测试了启动子Pm2X47对外源蛋白甘露聚糖酶和赤霉烯酮降解酶表达的影响,结果显示这两种酶的表达量均有提高,分别是启动子改造前的3.57倍和4.13倍.上述结果提示,改造后的菊粉酶启动子在提高外源蛋白表达水平方面具有一定的通用性,可作为新型候选表达元件,以提升马克斯克鲁维酵母重组表达外源蛋白的能力.

关键词：马克斯克鲁维酵母表达系统启动子优化改造

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