检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：李娅慧重庆医科大学

学位级别：硕士

近年来，单核苷酸多态性（SNPs）作为一类能够在基因组DNA中稳定遗传的生物标记物被广泛地应用于生物医学研究的各个领域。研究表明，一些存在于基因编码序列或调控区域的单碱基突变能够导致基因功能的紊乱，从而影响个体对某些特定疾... 详细信息

近年来，单核苷酸多态性（SNPs）作为一类能够在基因组DNA中稳定遗传的生物标记物被广泛地应用于生物医学研究的各个领域。研究表明，一些存在于基因编码序列或调控区域的单碱基突变能够导致基因功能的紊乱，从而影响个体对某些特定疾病的易感性和对药物反应的差异性。因此，单碱基突变的检测对于疾病的风险评估、临床诊断和治疗发挥着重要的作用，特别是对于一些遗传性疾病的早期诊断以及指导个性化用药意义重大。到目前为止，许多新兴的方法已经被广泛地应用于SNPs的检测，其中生物传感器发展尤为迅速，特别是表面等离子共振（SPR）生物传感器，已经发展成为了一种成熟的研究生物分子间相互作用的方法。SPR生物传感器因其具有无需对分子进行标记、实时监测动态反应过程、分析性能优越、样本用量少、易于自动化、检测周期短等其他传统方法所无法比拟的优点，在核酸、多肽、蛋白质等生物分子测定方面显示出了巨大的应用潜力。本研究将基因芯片技术、分子生物学技术与SPR传感技术整合起来，利用了巯基自组装以及DNA聚合酶对错配碱基的识别作用，原创性地提出了一种快速、简便、实时、免标记、高灵敏的点突变检测方法。本论文研究工作主要包括以下两个部分： 1.表面等离子共振生物传感平台的构建本实验选用了BIACORE X分析系统和裸金芯片，采用分子自组装技术在芯片金膜表面直接固定巯基修饰的捕获探针构建用于检测的传感芯片。在金膜表面，巯基被氧化后形成金硫键，由于Au-S键之间的共价结合力很强，从而保证了配体在芯片表面固定的稳定性。用6-巯基-1-己醇（MCH）对芯片表面进行封闭，最大程度地减小非特异性吸附对响应信号的影响。实验过程中，选择70μl的进样体积进行样本分析，分别对2μl/min、5μl/min、7μl/min、10μl/min的样本流速进行了优化，考察了不同样本流速对检测信号的影响。该分析过程耗时较短，每次检测仅需15分钟。分别利用NaOH溶液和不同pH的Gly-HCl溶液对芯片表面进行再生，优化再生条件，结果表明，芯片再生效果好，可重复使用30次以上。 2.基于DNA聚合酶核酸延伸反应的单碱基突变的检测将第一部分所构建的SPR生物传感器应用于聚合延伸反应产物的检测，建立一种灵敏性高、特异性好的点突变检测新方法。在液相反应中，利用DNA聚合酶对引物3'末端错配构象的识别作用，在适宜的缓冲液和温度条件下，以待测靶序列为模板进行核酸延伸反应，进而将反应产物注入Biacore X SPR系统中与芯片金膜表面修饰的捕获探针进行杂交检测。对引物延伸反应条件（Mg2+浓度、反应温度、反应时间）进行了优化并研究了该检测方法的灵敏度、特异性及可重复性等。在优化的实验条件下，RU变化值与突变型靶序列浓度的对数值在一定范围内具有良好的线性关系，相关系数为0.9963，最低检测限（LOD）可达到100pM。研究结果表明该检测方法简便快速，灵敏度高，特异性好，能够有效地区分野生型和突变型靶序列，在单碱基突变的基础研究和临床诊断等方面具有很好的应用前景。

关键词：表面等离子共振生物传感器聚合延伸反应点突变

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基于微型表面等离子共振生物传感器的葡萄糖浓度测量技术

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传感技术学报 2006年第5B期19卷 2072-2076页

作者：黄显栗大超徐可欣于海霞黄福祥胡小唐天津大学精密测试技术及仪器国家重点实验室天津300072

葡萄糖是生物体和食品中普遍含有的一种重要物质,其浓度的高低直接影响着生物体功能的正常发挥和食品的质量,因此检测葡萄糖的浓度有重要的意义和作用.本文利用微型表面等离子共振生物传感器构造了葡萄糖测量实验系统,并通过葡萄糖溶液... 详细信息

葡萄糖是生物体和食品中普遍含有的一种重要物质,其浓度的高低直接影响着生物体功能的正常发挥和食品的质量,因此检测葡萄糖的浓度有重要的意义和作用.本文利用微型表面等离子共振生物传感器构造了葡萄糖测量实验系统,并通过葡萄糖溶液浓度的测量实验对系统的性能进行了评估,对实验现象进行了分析,探讨了测量结果的数据处理方法.实验系统对葡萄糖溶液的分辨率达到了6.25mg/L,其精度高于其他采用折射率测量方法能够获得的葡萄糖溶液浓度的测量值.实验结果表明微型化的表面等离子共振测量装置在工业和医疗上的检测有很好的应用前景.

关键词：微系统表面等离子共振生物传感器葡萄糖浓度测量 GGBP蛋白

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基于表面等离子共振生物传感器的核酸检测新技术研究

基于表面等离子共振生物传感器的核酸检测新技术研究

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作者：张德才重庆医科大学

学位级别：硕士

核酸是一类最基本的物质，在生物体遗传信息的存储、复制和传递的过程中起着至关重要的作用，是生命科研领域的热点之一。获取目标核酸的序列、浓度等信息，对基因诊断、基因筛选、检测基因变异以及新药开发等领域具有重大意义。因此，... 详细信息

核酸是一类最基本的物质，在生物体遗传信息的存储、复制和传递的过程中起着至关重要的作用，是生命科研领域的热点之一。获取目标核酸的序列、浓度等信息，对基因诊断、基因筛选、检测基因变异以及新药开发等领域具有重大意义。因此，建立快速、操作便利、灵敏的核酸检测方法是非常必要的。核酸生物传感器是将特定序列的探针分子偶联在传感芯片表面，通过与靶核酸杂交并将杂交信息以电信号、光信号等形式表达并检测出来，是核酸研究的重要手段。表面等离子共振生物传感器以其不需要标记、简单灵敏、特异性好、所需样品量少、成本低廉、可在线监测结合反应的动态过程等显著优点而成为研究分子间相互作用的先进手段，并广泛的应用于生物分子的检测领域。本研究以表面等离子共振生物传感器为技术手段，整合分子生物学、分析化学和临床检验诊断学技术，发展了简单灵敏的核酸检测方法。本研究主要包括以下两个部分： 1.发展表面等离子共振核酸传感器高灵敏的检测沙门氏菌建立了一种基于表面等离子共振DNA生物传感器的免标记、高灵敏的沙门氏菌检测方法。根据沙门氏菌特异性invA基因设计生物素修饰的单链寡核苷酸探针并固定在葡聚糖/亲和素芯片表面。将invA基因从细菌菌体中提取出来并用不对称PCR扩增。该传感器检测靶基因在浓度范围为5nM-1000nM内具有很好的线性关系，最低检出限为0.5nM。该传感器对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌没有响应，表明具有很高的特异性。整个杂交检测过程仅需要15分钟。芯片能够重复使用300次以上。该方法灵敏特异，无需标记，可用于沙门氏菌各血清型的检测，具有很大应用潜力。 2.构建表面等离子共振生物传感器用于miRNA的高灵敏检测建立了基于表面等离子共振技术的miRNA的灵敏、特异的检测方法。与目标miRNA互补的巯基标记的DNA探针吸附在芯片表面，特异性识别目标miRNA后，捕获的目标miRNA再结合另一连接有亲和素的识别探针。这种“三明治”的结合模式能够显著的增加响应信号，并提高传感器灵敏度约24倍。最低检测限为1.7fM，同时能够识别单碱基错配。整个分析过程仅需30分钟。芯片能再生使用30次以上。该方法已成功用于实际样本miRNA的检测。

关键词：表面等离子共振生物传感器核酸检测沙门氏菌不对称PCR 亲和素 miRNA

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一种用于检测转基因植物的探针、表面等离子共振生物传感器及检测转基因植物的方法

一种用于检测转基因植物的探针、表面等离子共振生物传感器及检测...

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作者：李亮金芜军安娜宛煜嵩刘卫晓郑子繁温洪涛 100081 北京市海淀区中关村南大街12号

本公开涉及一种用于检测转基因植物的探针、表面等离子共振生物传感器及检测转基因植物的方法。所述探针的核苷酸序列为SEQ ID NO：1所示的序列。本公开的探针及含有该探针的表面等离子共振生物传感器能够特异地检测CaMV35S启动子，检... 详细信息

标准号: CN110093439A

本公开涉及一种用于检测转基因植物的探针、表面等离子共振生物传感器及检测转基因植物的方法。所述探针的核苷酸序列为SEQ ID NO：1所示的序列。本公开的探针及含有该探针的表面等离子共振生物传感器能够特异地检测CaMV35S启动子，检测灵敏度高且可再生，便于使用。采用该探针及含有该探针的表面等离子共振生物传感器能够灵敏高效特异性地检测含有CaMV35S启动子的转基因植物及其相关产品。

关键词：探针表面等离子共振生物传感器转基因植物检测检测灵敏度核苷酸序灵敏再生

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一种用于检测转基因植物的探针、表面等离子共振生物传感器及检测转基因植物的方法

一种用于检测转基因植物的探针、表面等离子共振生物传感器及检测...

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作者：张晓李亮金芜军安娜张玉昆文婷婷丁佳麒 130022 吉林省长春市卫星路7186号(南)

本公开涉及一种用于检测转基因植物的探针、表面等离子共振生物传感器及检测转基因植物的方法。所述探针的核苷酸序列为SEQ ID NO：1所示的序列。本公开的探针及含有该探针的表面等离子共振生物传感器能够特异性地检测cry1A基因，检测... 详细信息

标准号: CN110093438A

本公开涉及一种用于检测转基因植物的探针、表面等离子共振生物传感器及检测转基因植物的方法。所述探针的核苷酸序列为SEQ ID NO：1所示的序列。本公开的探针及含有该探针的表面等离子共振生物传感器能够特异性地检测cry1A基因，检测灵敏度高、样品无需标记且可再生，便于使用；该传感器克服了传统转基因检测PCR方法的耗时长、费用高且不可重复检测的缺点，且实践证明对于物种间存在差异的DNA序列，同样可设计简并单链核酸探针用于转基因检测，可以实现多种抗虫(cry1A)基因的转基因产品大规模、高通量检测。

关键词：探针表面等离子共振生物传感器转基因检测转基因植物检测单链核酸探针高通量检测检测灵敏度转基因产品核苷酸序重复检测基因传感器简并抗虫耗时物种再生

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用于检测转基因植物的探针、探针组、表面等离子共振生物传感器及检测转基因植物的方法

用于检测转基因植物的探针、探针组、表面等离子共振生物传感器及...

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作者：李亮金芜军安娜宛煜嵩刘卫晓郑子繁 100081 北京市海淀区中关村南大街12号

本公开涉及一种用于检测转基因植物的探针、探针组、表面等离子共振生物传感器及检测转基因植物的方法。所述探针的核苷酸序列为SEQ ID NO：1所示的序列。本公开的探针及含有该探针的表面等离子共振生物传感器能够特异性地检测NOS终止... 详细信息

标准号: CN110093440A

本公开涉及一种用于检测转基因植物的探针、探针组、表面等离子共振生物传感器及检测转基因植物的方法。所述探针的核苷酸序列为SEQ ID NO：1所示的序列。本公开的探针及含有该探针的表面等离子共振生物传感器能够特异性地检测NOS终止子，检测灵敏度高且可再生，便于使用。采用该探针及含有该探针的表面等离子共振生物传感器能够灵敏高效特异性地检测含有NOS终止子的转基因植物。本公开的方法克服了传统转基因检测PCR方法耗时长、费用高且不可重复再生检测的缺点，具有灵敏度高、重复性及稳定性好的优点。整个样品分析过程中芯片表面探针活性和结构不受影响，因此可实现传感器的重复利用。

关键词：探针表面等离子共振生物传感器转基因植物检测检测灵敏度转基因检测再生表面探针核苷酸序样品分析重复利用灵敏度探针组中芯片传感器耗时灵敏重复

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定量检测核酸的方法及表面等离子共振生物传感器

定量检测核酸的方法及表面等离子共振生物传感器

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作者：李亮金芜军安娜宛煜嵩刘卫晓郑子繁 100081 北京市海淀区中关村南大街12号

本公开涉及一种定量检测核酸的方法及表面等离子共振生物传感器。本公开的无标样定量检测核酸的方法基于表面等离子共振原理和分析物的扩散性与分析物绝对浓度之间的关系，实现了特异性定量检测核酸，克服了传统实时荧光定量PCR方法的... 详细信息

标准号: CN110129418A

本公开涉及一种定量检测核酸的方法及表面等离子共振生物传感器。本公开的无标样定量检测核酸的方法基于表面等离子共振原理和分析物的扩散性与分析物绝对浓度之间的关系，实现了特异性定量检测核酸，克服了传统实时荧光定量PCR方法的耗时长、费用高、不能绝对定量且不可再生、不能实时监控的缺点，具有灵敏度高、特异性强、无需标记及可绝对定量等优点。整个样品分析过程包括结合、平衡/解离、再生三个过程，其中芯片的再生即分析物离开芯片表面探针的过程，该过程中芯片表面探针活性和结构不受影响，因此可实现传感器的重复利用。

关键词：分析物核酸定量检测再生表面等离子共振生物传感器实时荧光定量PCR 表面等离子共振特异性定量表面探针实时监控特异性强芯片表面样品分析重复利用扩散性灵敏度中芯片传感器标样解离探针耗时芯片检测平衡

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SPR生物传感器检测过敏致死动物血清类胰蛋白酶

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传感器与微系统 2013年第9期32卷 39-41页

作者：李倩楠熊兴良邢扬李广单改仙邓世雄重庆医科大学法医学与生物医学信息研究室重庆400016

应用表面等离子共振(SPR)技术检测过敏性休克死亡豚鼠血清类胰蛋白酶,试图为过敏性休克死亡提供客观诊断依据。首先,将16只健康豚鼠随机均分为实验组和对照组,每组再分为死亡即时组和冷冻3 d组。以人混合血清诱发动物过敏性休克致死。... 详细信息

应用表面等离子共振(SPR)技术检测过敏性休克死亡豚鼠血清类胰蛋白酶,试图为过敏性休克死亡提供客观诊断依据。首先,将16只健康豚鼠随机均分为实验组和对照组,每组再分为死亡即时组和冷冻3 d组。以人混合血清诱发动物过敏性休克致死。采用分子自组装方法将抗类胰蛋白酶单克隆抗体(Anti-TPSAB1)固定在SPR生物传感器芯片表面,检测豚鼠血清中类胰蛋白酶。实验结果表明:实验组类胰蛋白酶SPR响应值比对照组显著升高,在冷冻3 d的条件下对豚鼠血清类胰蛋白酶的表达无明显影响。因此,基于SPR生物传感器在动物血清类胰蛋白酶方面具有很好的应用前景,可作为诊断过敏性休克死亡的一项依据。

关键词：类胰蛋白酶过敏性休克表面等离子共振生物传感器法医病理学

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P-糖蛋白潜在抑制剂高效筛选方法的建立及其体内外评价研究

P-糖蛋白潜在抑制剂高效筛选方法的建立及其体内外评价研究

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作者：曹雨虹中国人民解放军海军军医大学

学位级别：博士

多药耐药（Multidrug resistance,MDR）是一种严重的肿瘤细胞耐药现象,是化疗失败的重要原因。P-糖蛋白（P-Glycoprotein,P-gp）为最早被发现的ABC转运蛋白,肿瘤细胞P-gp过表达是发生MDR的常见机制之一,会导致临床化疗的失败。抗癌药物... 详细信息

多药耐药（Multidrug resistance,MDR）是一种严重的肿瘤细胞耐药现象,是化疗失败的重要原因。P-糖蛋白（P-Glycoprotein,P-gp）为最早被发现的ABC转运蛋白,肿瘤细胞P-gp过表达是发生MDR的常见机制之一,会导致临床化疗的失败。抗癌药物与P-gp抑制剂的联合使用可提高肿瘤细胞当中化疗药物的累积,从而提高化疗药物的治疗效果,实现逆转MDR。目前P-gp抑制剂已开发至第三代,因严重毒副作用而止步于临床前或临床研究。因此,开发高选择性、低毒副作用的P-gp抑制剂,对逆转肿瘤治疗中P-gp所介导的MDR具有重大意义。中药（Traditional Chinese Medicine,TCM）具有化学结构新颖,毒性较小等优点,是P-gp抑制剂筛选重要来源。目前小分子与P-gp之间的相互作用研究主要停留于细胞层面,实验手段耗时费力,且准确性有限,缺少精确快速的筛选方法。另外,对于P-gp抑制剂的评价还停留在体外阶段,体内研究相对较少。针对P-gp抑制剂筛选所面临的问题,本论文以P-gp为研究核心,运用多种膜蛋白稳定策略,获得构象正确且活性良好的P-gp蛋白,结合表面等离子共振（Surface Plasmon Resonance,SPR）技术专属性高及快速等优点,建立P-gp抑制剂高效筛选新方法以及从体外到体内的潜在抑制剂与P-gp相互作用评价体系。本课题研究内容主要分为以下三个部分:1、基于慢病毒载体膜蛋白稳定策略结合SPR的中药P-gp潜在抑制剂筛选方法的建立将慢病毒（Lentiviral particles,LVP）稳定膜蛋白策略与SPR技术相结合,构建P-gp特异性配体筛选系统,从TCM中筛选P-gp潜在抑制剂,进行体外验证其生物学活性。首先,构建了不同P-gp表达水平的慢病毒颗粒,并鉴定了慢病毒上P-gp的表达。然后,将P-gp高低表达的慢病毒颗粒固定在CM5芯片的不同通道上进行亲和力检测。测定了阳性药Valspodar和环孢素（Cyclosporine A,Cs A）与芯片上P-gp之间结合的KD值分别为14.09μM和16.41μM。采用此筛选系统从40种中药单体中筛选出3个化合物为潜在的P-gp配体。亲和力实验表明,厚朴酚、和厚朴酚、白藜芦醇与芯片上P-gp结合的KD值分别为15.88,6.44和70.01μM。随后进行体外验证实验,罗丹明123（Rhodamine 123,Rh123）双向转运实验表明,这3个化合物均能抑制Rh123的外排。此外,和厚朴酚和白藜芦醇可将Adr对MCF-7/ADR细胞的IC50值由17.54±4.54μg/m L分别降低至9.56±0.60μg/m L和8.00±1.60μg/m L,表明这两种化合物具有逆转MCF-7/ADR细胞MDR的活性。蛋白印迹（Western blot,WB）和流式细胞仪分析结果表明,厚朴酚与和厚朴酚均能下调耐药癌细胞中P-gp的表达水平。本实验基于慢病毒膜蛋白稳定技术结合SPR生物传感器构建了一种新型P-gp配体筛选系统,以慢病毒作为P-gp的载体,可保持其天然构象,方法专属性较强,用于体外研究小分子与P-gp的相互作用。相较于传统细胞实验筛选,大大缩短了实验时间。2、SMA聚合物萃取细胞膜蛋白策略结合SPR建立P-gp潜在抑制剂快速筛选新方法研究应用苯乙烯马来酸聚合物（Styrene-co-maleic acid,SMA）膜蛋白稳定策略,将P-gp固定在其内源性的脂质环境当中,结合SPR技术建立快速筛选P-gp潜在抑制剂方法。首先,以正常乳腺癌细胞MCF-7和耐阿霉素（Adriamycin,Adr）的乳腺癌细胞MCF-7/ADR为模型,采用SMA聚合物技术从细胞膜当中萃取出膜蛋白,获得相应的蛋白脂质体（SMA lipid particles,SMALPs）。同时对SMA聚合物萃取膜蛋白前处理方法进行了优化,并对筛选系统进行方法学考察,包括脂质体稳定性、芯片饱和性、芯片特异性及SMA聚合物对筛选结果的干扰。实验结果表明,SMA聚合物前处理最佳条件为细胞膜超声破碎20 s,反应时间4 h,膜浓度为40 mg/m L,阳性药Valspodar与芯片结合KD值为26.12μM,表明芯片具有良好特异性。芯片中脂质体稳定性为24 h,且样品中残留的SMA聚合物对测试结果无干扰。将SMALPs偶联至L1芯片的不同通道上进行亲和力检测,由此构建P-gp潜在抑制剂筛选体系（P-gp-SMALP-SPR）。应用此筛选系统从50种中药单体中筛选出9个单体成分作为目标化合物,并对它们进行体外生物活性验证。结果发现粉防己碱、防己诺林碱、白花前胡乙素、黄芩新素和淫羊藿素可以显著降低Adr对MCF-7/ADR细胞的IC50值。其中粉防己碱,白花前胡乙素和黄芩新

关键词：表面等离子共振生物传感器 P-糖蛋白抑制剂膜蛋白稳定慢病毒载体苯乙烯马来酸高效筛选

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基于表面等离子共振的活性成分筛选系统的建立及应用

基于表面等离子共振的活性成分筛选系统的建立及应用

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作者：陈朗东中国人民解放军海军军医大学

学位级别：博士

药物分析是药学中的“眼睛科学”,作为药学研究的重要工具,药物分析学已深入到药物研发的各个阶段。目前,随着分析技术的发展,药物分析学的研究理念发生了重大的转变,药物分析学的研究范畴不再局限于含量分析与质量控制,而是与生命科学... 详细信息

药物分析是药学中的“眼睛科学”,作为药学研究的重要工具,药物分析学已深入到药物研发的各个阶段。目前,随着分析技术的发展,药物分析学的研究理念发生了重大的转变,药物分析学的研究范畴不再局限于含量分析与质量控制,而是与生命科学深入结合,从以化学分析为导向转移到以生物活性分析为导向。在这一背景下,药物活性筛选自然被纳入了药物分析的研究范畴。建立分析速度快、通量高、准确性高的分析方法,寻找活性成分,是药物分析的新任务。因此,建立能够分析化合物-靶点相互作用的活性筛选技术,针对特定靶点筛选先导化合物,能够为开发有效的治疗药物奠定坚实的基础。然而,现有的技术方法难以同时满足特异性强、灵敏度高、通量高、维持靶蛋白天然构象等要求,因此亟待建立新型的药物活性筛选技术,以满足药物研发的迫切需求。表面等离子体共振（Surface Plasmon Resonance,SPR）生物传感器可用于实时监测生物分子间的相互作用,包括表征小分子与蛋白靶点的结合。SPR技术具有无标记、实时监测和专属性强等优点。目前,SPR技术已经被广泛用于中药活性成分的研究中。经典的基于SPR的筛选方法需要先将中药中的化合物进行分离纯化,再逐一检测其与蛋白靶点间的亲和力,因此其检测通量有限。本课题基于SPR生物传感器,建立了一种基于SPR生物传感器的活性成分筛选系统（Surface plasmon resonance biosensor-based active ingredients recognition syste,SPR-AIRS）。该系统不需要对中药提取物中的成分作预先分离,可直接用于筛选中药提取物中能与特定靶蛋白结合的活性成分,与经典的SPR筛选方法相比,SPR-AIRS具有检测通量高、富集能力强、结构信息明确等优势。本课题充分发挥了SPR技术的优势,为针对中药或其他复杂体系药物展开靶向筛选提供了一种有效的分析方法。本课题的主要研究内容分为以下四个部分:1.基于表面等离子共振生物传感器的活性成分筛选系统的建立及方法学考察本章节的研究建立了基于SPR传感器的活性成分筛选系统,从以下四个方面对筛选系统的方法学进行了考察:（1）特异性,考察结果表明STAT3小分子配体在芯片上具有良好的响应,而非STAT3配体则无响应,检测到STAT3阳性小分子stattic与STAT3间亲和力为26.97μM,证明STAT3芯片具有良好的特异性,可用于检测STAT3小分子配体的亲和力;（2）检测限和线性,考察结果显示SPR-AIRS准确鉴定到样品中的STAT3小分子配体所需要的最小回收循环数为5,线性考察结果显示从5到100个回收循环之间,回收到的stattic的量与回收循环数之间呈现良好的线性关系（R2=0.9917）;（3）饱和性,饱和性考察结果表明化合物在芯片表面的回收量随回收循环数上升呈现饱和的趋势,因此选择适当的中药提取物浓度进行筛选可提高筛选的效率;（4）稳健性,设计了两种模型考察了SPR-AIRS的稳健性,实验结果证明中药提取物中的非活性化合物不会干扰活性化合物的筛选与鉴定。上述方法学考察结果证明了SPR-AIRS具有良好的灵敏性、特异性和稳健性,能够针对特定蛋白靶点从中药复杂体系中筛选活性成分。2.基于SPR的活性成分筛选系统在筛从中药中筛选STAT3小分子配体的应用本章节的研究将SPR-AIRS应用于从中药提取物中筛选信号转导子和转录激活子3（Signal transducer and activator of transcription 3,STAT3）的小分子配体。共选取32味中药进行初筛,选择与STAT3蛋白芯片响应值较好的9种中药用于进一步的活性化合物筛选,从中药提取物中共筛选到9个候选化合物。随后进行SPR亲和力测试,验证候选化合物对STAT3的结合作用,发现有7个化合物与STAT3蛋白具有良好的亲和力。分子对接结果显示,有5个化合物能有效结合于STAT3蛋白的功能结构域,将这5个化合物选为STAT3的候选小分子配体。流式细胞术实验结果表明,5个候选小分子配体能诱导Hep G2和MCF-7细胞系的凋亡。荧光素酶报告基因实验结果表明5个化合物均可以抑制STAT3调控的转录活性。蛋白质印迹实验结果显示,新黄芩素与虎杖苷均可以抑制STAT3的磷酸化过程,并调节凋亡相关蛋白的表达。综上,本章节的研究证明了SPR-AIRS是一种有效的能从中药复杂体系中靶向筛选活性化合物的技术。本研究也为将SPR应用于从其他复杂药物体系中筛选活性成分提供借鉴。3.基于SPR的活性成分筛选系统在从中药中筛选MAPK14小分子配体的应用本章节的研究将SPR-AIRS用于从中药提取物中筛选丝裂原活化蛋白激酶14（Mitogen-activated protein kinase 14,MAPK1

关键词：表面等离子共振生物传感器活性化合物筛选 STAT3 MAPK14 膜蛋白 CXCR4 慢病毒

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