检索结果-内蒙古大学图书馆

中华肿瘤杂志 2025年第2期47卷 136-148页

作者：姜利时滕伟仇文进凌园果石学平龙妮娅出良钊刘健贵州医科大学临床医学院贵阳550000 贵州医科大学附属医院神经外科贵阳550000

目的探讨趋化素样因子样含marvel跨膜结构域3(CMTM3)对胶质母细胞瘤(GBM)细胞增殖和迁移的影响及可能机制。方法利用癌症基因组图谱(TCGA)和基因型-组织表达(GTEx)数据库中的CMTM3表达数据,分析CMTM3在GBM组织中的差异表达及其对GBM患... 详细信息

目的探讨趋化素样因子样含marvel跨膜结构域3(CMTM3)对胶质母细胞瘤(GBM)细胞增殖和迁移的影响及可能机制。方法利用癌症基因组图谱(TCGA)和基因型-组织表达(GTEx)数据库中的CMTM3表达数据,分析CMTM3在GBM组织中的差异表达及其对GBM患者预后的影响。通过对取自2022年11月3日至2023年3月15日贵州医科大学附属医院手术治疗的11例GBM患者的GBM组织和癌旁组织样本进行CMTM3的免疫组化染色和蛋白含量测定、对GBM细胞系U87、U251、LN229和人胶质细胞系NHA进行CMTM3的实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)、Western blot检测加以验证。利用U251细胞构建沉默和过表达CMTM3的稳转细胞株(sh-CMTM3组和OE-CMTM3组),采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)实验检测CMTM3表达对细胞增殖能力的影响,采用流式细胞术检测CMTM3表达对细胞周期的影响,采用Transwell实验检测CMTM3表达对细胞迁移能力的影响,采用生信分析方法、Western blot检测、核因子κB(NF-κB)激活-核转运实验以及NF-κB通路抑制剂吡咯烷二硫代甲酸铵(PDTC)来验证CMTM3对NF-κB通路的影响。最后通过裸鼠皮下成瘤实验观察CMTM3表达对U251细胞在体内生长的影响。结果生物信息学分析显示,CMTM3在GBM组织中高表达,CMTM3高表达组GBM患者的总生存率和无病生存率均低于CMTM3低表达组(P值分别为0.010和0.032)。11例GBM组织样本中,有10例CMTM3蛋白的表达量分别高于相应患者的癌旁组织,这10例GBM组织样本中CMTM3蛋白的表达量总体为0.44±0.09,高于癌旁组织中CMTM3蛋白的表达量(0.12±0.02;t=6.69,P<0.001)。只有1例GBM组织组织中CMTM3蛋白的表达量为0.15±0.01,其相应癌旁组织中CMTM3蛋白的表达量为0.17±0.08,差异无统计学意义(t=0.32,P=0.750)。RT-qPCR检测结果显示,人胶质细胞NHA中CMTM3 mRNA的表达量为1.0±0.1,GBM细胞U87、LN229和U251中CMTM3 mRNA的表达量分别为2.1±0.3、3.4±0.5和3.7±0.8,均高于NHA细胞(1.0±0.1,均P<0.01)。Western blot检测结果显示,GBM细胞U87、LN229和U251中CMTM3蛋白的表达量分别为1.5±0.2、1.8±0.2和1.9±0.1,均高于NHA细胞(0.7±0.2,均P<0.01),其中U251细胞中表达水平最高。CCK-8法、流式细胞术、Transwell细胞迁移实验检测结果显示,sh-CMTM3组细胞活性被抑制,G_(0)/G_(1)期细胞比例增多(P<0.01),S期细胞比例减少(P<0.01),细胞迁移数为(233.6±35.5)个,低于sh-NC组(P<0.001);OE-CMTM3组细胞活性增强,G_(0)/G_(1)期细胞比例减少(P<0.01),S期细胞比例增多(P<0.01),细胞迁移数为(1212.0±20.8)个,高于OE-NC组(P<0.001);OE-CMTM3+PDTC组细胞活性,G_(1)期、S期和G_(2)期细胞比例,细胞迁移数均无明显变化(均P>0.05)。Western blot检测和NF-κB激活-核转运实验结果显示,sh-CMTM3组细胞中p-p65/p65比值为0.51±0.04,p-IκBα/IκBα比值为0.39±0.03,均低于sh-NC组(均P<0.01),细胞质染色率为(49.29±1.98)%,高于sh-NC组(P<0.01)。OE-CMTM3组细胞中p-p65/p65比值为2.27±0.10,p-IκBα/IκBα为2.14±0.15,均高于OE-NC组(均P<0.01),细胞质染色率为(18.96±1.44)%,低于OE-NC组(P<0.01),OE-CMTM3+PDTC组细胞中p65/p65比值、p-IκBα/IκBα比值和细胞质染色率与OE-NC组差异均无统计学意义(均P>0.05)。裸鼠皮下成瘤实验显示,sh-CMTM3组肿瘤体积为(408.9±96.2)mm3,小于sh-NC组(P=0.003),OE-CMTM3组的肿瘤体积为(1514.5±251.5)mm3,大于OE-NC组(P=0.005)。结论在GBM中,CMMT3呈高表达并且CMTM3高表达GBM患者的总生存率和无病生存率降低。CMTM3可以通过NF-κB信号通路来调控U251细胞的增殖和迁移能力。

关键词：胶质母细胞瘤趋化素样因子样含marvel跨膜结构域3 核因子κB 细胞增殖细胞迁移

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