检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：邓艳春秦娜 710032 陕西省西安市长乐西路17号

本发明提供了一种含有ndrg2基因的高效重组腺病毒及其药物用途。重组腺病毒含有ndrg2基因，构建过程中利用Gateway系统和腺病毒表达系统ViraPowerTM Adenoviral Expression System，体外重组方法包装腺病毒。即把目的基因克隆到入门载... 详细信息

标准号: CN101555469B

本发明提供了一种含有ndrg2基因的高效重组腺病毒及其药物用途。重组腺病毒含有ndrg2基因，构建过程中利用Gateway系统和腺病毒表达系统ViraPower^TM Adenoviral Expression System，体外重组方法包装腺病毒。即把目的基因克隆到入门载体后，不再依赖限制性内切酶，靠载体上存在的特定重组位点和重组酶，高效、快速地将目的基因克隆到其它的受体载体上。体外重组包装腺病毒，简便实验步骤，缩短操作时间，增殖效率、转基因效率、出毒效率均高，转导效率高达100％。本发明解决了ndrg2基因的体外重组和包装的技术问题，并探索和确定了该高效重组腺病毒对脑胶质瘤细胞、肺癌、肝癌、胃癌、结肠癌细胞的杀伤作用。可作为治疗脑胶质瘤、肺癌、肝癌、胃癌、结肠癌的药物。

关键词：重组腺病毒体外重组目的基因克隆胃癌基因肺癌肝癌病毒病毒表达系统限制性内切酶结肠癌细胞转基因效率脑胶质瘤实验步骤受体载体药物用途增殖效率胶质瘤结肠癌治疗脑重组酶转导细胞依赖探索

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斑马鱼两种转基因方法的比较

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生物技术通报 2011年第12期27卷 205-209页

作者：柳晓瑜王豪博仇雪梅于旭蓉刘洋王秀利大连海洋大学生命科学与技术学院大连116023

对斑马鱼(Danio rerio)的两种转基因方法进行比较,分别采用显微注射和电脉冲导入法将携带有GFP报告基因的表达载体质粒导入斑马鱼受精卵,得出电脉冲最佳导入条件为最适电压125 V/cm,电阻50Ω,最佳导入时期为1-2细胞期(40-50 min),以及... 详细信息

对斑马鱼(Danio rerio)的两种转基因方法进行比较,分别采用显微注射和电脉冲导入法将携带有GFP报告基因的表达载体质粒导入斑马鱼受精卵,得出电脉冲最佳导入条件为最适电压125 V/cm,电阻50Ω,最佳导入时期为1-2细胞期(40-50 min),以及最佳外源基因浓度为300 ng/μL。利用两种方法均得到转GFP基因的斑马鱼,而两种方法对比的结果表明,显微注射法耗时费力,但转基因阳性率高;电脉冲法一次可以处理大批量受精卵,但转基因阳性率远低于显微注射法。

关键词：斑马鱼显微注射电脉冲导入法转基因效率

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一种由PiggyBac转座子介导的诱导细胞永生化转基因载体、其构建方法及其应用

一种由PiggyBac转座子介导的诱导细胞永生化转基因载体、其构建方...

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作者：张智英张婷婷辛颖杨涵江张志强徐坤王令 712100 陕西省咸阳市杨凌区邰城路3号

本发明是一种由PiggyBac转座子介导的诱导细胞永生化转基因载体、其构建方法及其应用，属于基因工程技术领域。所述载体为PB-rtTA-NIT-STP，是通过下述方法构建：LoxP-SV40P nco-IRES-tk-PolyA-LoxP基因表达盒的构建；将基因表达盒的扩... 详细信息

标准号: CN102367450A

本发明是一种由PiggyBac转座子介导的诱导细胞永生化转基因载体、其构建方法及其应用，属于基因工程技术领域。所述载体为PB-rtTA-NIT-STP，是通过下述方法构建：LoxP-SV40P nco-IRES-tk-PolyA-LoxP基因表达盒的构建；将基因表达盒的扩增片段与PXL-Bccll连接，构建基本转基因载体PB-NIT；含有目的基因SV40T和p 53的转基因载体PB-NIT-STP的构建；含有Tet结合域rtTA的筛选载体PB-rtTA-NIT-STP的构建。本发明构建的转基因载体具有有效提高转基因效率、便于筛选的优点。

关键词：转基因载体基因表达盒基因工程技术筛选转基因效率发明构建目的基因诱导细胞结合域扩增连接

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一种小黑杨花粉植株转基因方法

一种小黑杨花粉植株转基因方法

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作者：李慧玉刘玲李园园姜静刘桂丰 150040 黑龙江省哈尔滨市香坊区和兴路26号

一种小黑杨花粉植株转基因方法，涉及一种小黑杨花粉植株转基因方法。是要解决现有小黑杨花粉植株转基因效率低的问题。方法：取抽茎培养基中的无根苗，移入生根培养基，植株作为外植体；取外植体上叶片，在基部和中间各切一刀，弃掉叶... 详细信息

标准号: CN102392046A

一种小黑杨花粉植株转基因方法，涉及一种小黑杨花粉植株转基因方法。是要解决现有小黑杨花粉植株转基因效率低的问题。方法：取抽茎培养基中的无根苗，移入生根培养基，植株作为外植体；取外植体上叶片，在基部和中间各切一刀，弃掉叶尖儿部位，接种于分化培养基上；挑取携带外源基因的农杆菌EHA105接种到LB培养基中培养得菌液，菌液用无菌水稀释；将预培养后的叶片放入菌液中浸泡，取出叶片吸去多余菌液；将叶片接种在分化培养基上培养；取出叶片将水分吸干，将叶片移至选择培养基培养，产生愈伤组织，将愈伤组织放入选择培养基中培养产生抗性芽，即完成。本方法获得的抗性芽多，转基因效率高。

关键词：叶片培养基菌液花粉植株接种选择培养基转基因方法转基因效率培养愈伤组织外植体抗性生根培养基根苗外源基因植株无菌水杆菌稀释浸泡

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一种获得转基因棉花的方法

一种获得转基因棉花的方法

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作者：华金平刘正杰王彦霞熊敏王玉美 100193 北京市海淀区圆明园西路2号

本发明公开了一种获得转基因棉花的方法。本发明的方法包括如下步骤：(1)切除棉花子叶苗的子叶、叶柄和部分下胚轴，下胚轴保留1-3cm，得到待侵染组织；25-30℃、相对湿度40％-60％、暗培养2-3天；(2)从茎尖顶部至下胚轴基部双面划伤，... 详细信息

标准号: CN101831459B

本发明公开了一种获得转基因棉花的方法。本发明的方法包括如下步骤：(1)切除棉花子叶苗的子叶、叶柄和部分下胚轴，下胚轴保留1-3cm，得到待侵染组织；25-30℃、相对湿度40％-60％、暗培养2-3天；(2)从茎尖顶部至下胚轴基部双面划伤，伤口深0.8-1.2mm；(3)在溶液A中浸染15-45分钟；溶液A中含携带外源基因的重组农杆菌；(4)共培养2-4天，然后进行抗性筛选，得到抗性棉花苗；(5)将抗性棉花苗嫁接在棉花砧木上，得到转基因棉花。本发明通过调整茎尖生长状态、确定农杆菌转化的茎尖侵染合适深度、加入乙酰丁香酮并调整适宜的pH值，提高转化效率。利用本发明的方法可以快速获得转基因植株且具有较高的转基因效率。

关键词：胚轴转基因棉花抗性棉花叶柄砧木重组农杆菌转基因效率转基因植株合适深度抗性筛选棉花子叶生长状态外源基因暗培养共培养丁香杆菌浸染子叶转化顶部伤口嫁接

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一种禽蛋开窗封口方法

一种禽蛋开窗封口方法

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作者：徐世永翟乐张宏晓陈维康戴鼎震王宪叶刘红林 210095 江苏省南京市栖霞区马群天泓山庄云山苑11-2-1101室

本发明属于转基因技术领域，公开了一种禽蛋开窗封口方法。本发明通过优化操作方案，有效阻隔外来空气进入开窗蛋壳内部，有效提高转基因禽蛋孵化率及转基因效率。优点包括：1、保证有足够量的封阻空气用液体，不会流淌，可完全避免空... 详细信息

标准号: CN102613109A

本发明属于转基因技术领域，公开了一种禽蛋开窗封口方法。本发明通过优化操作方案，有效阻隔外来空气进入开窗蛋壳内部，有效提高转基因禽蛋孵化率及转基因效率。优点包括：1、保证有足够量的封阻空气用液体，不会流淌，可完全避免空气的进入。2、由于热熔胶本身有疏水性，加液后可一直保持凸出状，有放大镜效果便于观察蛋内胚胎。3、由于热熔胶封闭圈是在加液及其它操作前先粘合于蛋壳之上，完全密闭，粘结牢固不会脱落。4、孵化率高，在已知慢病毒对细胞有毒性作用的前提下孵化率仍达48.9％。5、保证充裕试验操作时间。6、操作简单，过程易于控制。

关键词：蛋壳孵化率热熔胶开窗封口转基因技术转基因效率凸出毒性作用禽蛋孵化试验操作优化操作放大镜封闭圈慢病毒疏水性转基因粘合密闭禽蛋脱落阻隔胚胎细胞牢固内部

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动物转基因技术研究新进展及其在牛育种上的应用

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中国牛业科学 2011年第4期37卷 35-40,51页

作者：黄永震贺花陈宏西北农林科技大学动物科技学院陕西省农业分子生物学重点实验室陕西杨凌712100

动物转基因技术已应用于生命科学的各个领域,尤其在研究基因功能、转基因动物育种(抗病育种和提高生产性能)、治疗人类疾病(生产药用蛋白、干细胞治疗和种器官移植)等方面得到了广泛的应用。本文从转基因技术的历史和发展状况入手,简要... 详细信息

动物转基因技术已应用于生命科学的各个领域,尤其在研究基因功能、转基因动物育种(抗病育种和提高生产性能)、治疗人类疾病(生产药用蛋白、干细胞治疗和种器官移植)等方面得到了广泛的应用。本文从转基因技术的历史和发展状况入手,简要介绍了几种传统的转基因技术方法,重点综述了近几年为提高转基因效率和转基因精确调控的一些新技术。另外,本文就转基因技术在牛育种方面的研究现状,以及对转基因技术在牛新品种培育和生物制药等领域的应用和前景进行了综述。

关键词：动物转基因技术转基因效率转基因精确调控

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花生转基因的方法

花生转基因的方法

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作者：邓向阳 410125 湖南省长沙市芙蓉区马坡岭远大二路1071号

本发明公开了一种花生转基因的方法，其步骤是首先建立花生的重复体细胞胚发生培养物；其次是将外源DNA或基因构建在植物表达框或表达载体中，抽提、纯化和确定外源DNA的浓度；第三是微粒轰击转化重复体细胞胚发生培养物和筛选独立抗性... 详细信息

标准号: CN101186910B

本发明公开了一种花生转基因的方法，其步骤是首先建立花生的重复体细胞胚发生培养物；其次是将外源DNA或基因构建在植物表达框或表达载体中，抽提、纯化和确定外源DNA的浓度；第三是微粒轰击转化重复体细胞胚发生培养物和筛选独立抗性细胞系；第四是再生植株和传代；第五是转基因植株和转基因后代分子分析。本发明采用保存0-6年的成熟花生种子诱导的，启始培养后1-10个月的重复体细胞胚发生培养物为转基因受体；转基因效率高，转化通量高；轰击后筛选效率高，无逃逸，无嵌合体；整个过程不存在基因型依赖，且再生植株高效容易，可大量获得转基因后代种子，且外源基因可稳定整合、表达遗传。

关键词：体细胞胚发生培养物转基因再生植株花生筛选抗性细胞系转基因受体转基因效率转基因植株表达载体后代分子后代种子花生种子基因构建外源基因微粒轰击稳定整合植物表达基因型抽提合体转化逃逸诱导依赖培养分析

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一种通过精原干细胞获得动物永久转基因的方法、重组质粒和永久转基因的生殖细胞

一种通过精原干细胞获得动物永久转基因的方法、重组质粒和永久转...

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作者：曹文广 100193 北京市海淀区圆明园西路2号

本发明一种通过精原干细胞获得动物永久转基因的方法、重组质粒和永久转基因的生殖细胞，属于基因工程技术领域。本发明所述的通过精原干细胞获得动物永久转基因的方法包括下述步骤：(1)扩增目的基因片段；(2)将扩增的目的基因片段与Len... 详细信息

标准号: CN102212526A

本发明一种通过精原干细胞获得动物永久转基因的方法、重组质粒和永久转基因的生殖细胞，属于基因工程技术领域。本发明所述的通过精原干细胞获得动物永久转基因的方法包括下述步骤：(1)扩增目的基因片段；(2)将扩增的目的基因片段与Lenti-GFP-T2A载体连接，获得重组质粒；(3)将步骤(2)的重组质粒在293T细胞中进行高效包装；(4)将步骤(3)的外源包装质粒分别注入曲细精管和睾丸其它部位，获得永久转基因的生殖细胞。本发明具有超高转基因效率，整体转基因效率可达90％以上；能够持续产生转基因精子；而且转基因精子应用方便；可以形成稳定的永久性的转基因的优点。

关键词：转基因重组质粒生殖细胞目的基因片段转基因效率干细胞精子扩增基因工程技术包装质粒高效包装睾丸精管细胞连接

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水稻愈伤组织质量评价方法

水稻愈伤组织质量评价方法

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作者：李阳李阳生 430072 湖北省武汉市武昌珞珈山

本发明公开了一种水稻愈伤组织质量评价方法，其步骤是：1)本评估系统以愈伤组织颗粒；2)颗粒指标；3)所描述颗粒散碎；4)愈伤组织色泽指标；5)所描述的5个颜色指标；6)愈伤组织水化；7)愈伤组织有分化趋势；8)颗粒指标的权重系数Pc＝15... 详细信息

标准号: CN102081031A

本发明公开了一种水稻愈伤组织质量评价方法，其步骤是：1)本评估系统以愈伤组织颗粒；2)颗粒指标；3)所描述颗粒散碎；4)愈伤组织色泽指标；5)所描述的5个颜色指标；6)愈伤组织水化；7)愈伤组织有分化趋势；8)颗粒指标的权重系数Pc＝15；9)颗粒系数的状态；10)愈伤组织色泽指标的得分系数；11)愈伤组织水化指标的得分系数；12)愈伤组织分化指标的得分系数：13)愈伤组织质量得分的计算；14)描述的CS值低于70以下愈伤组织质量较差，得分90分以上的愈伤组织适合农杆菌转化操作，有最高的分化率。建立了水稻愈伤组织的评价模型，评价结果和转基因效率一致，有利于实验和生产的评估，比较和质量控制。

关键词：愈伤组织得分水稻愈伤组织愈伤组织质量愈伤组织颗粒质量评价方法转基因效率评估系统评价模型颜色指标质量控制杆菌评估转化评价

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