检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：崔恒宓薛松磊沈晖孙振欧阳娟徐慧 225009 江苏省扬州市大学南路88号

本发明公开了一种斑马鱼心脏特异表达模型的构建方法及相关载体。同源重组载体，包括插入原始载体的插入片段，插入片段包括斑马鱼心脏特异表达的启动子、融合LoxP位点序列的左侧同源臂和右侧同源臂、多克隆位点、内部核糖体进入位点、... 详细信息

标准号: CN108949756A

本发明公开了一种斑马鱼心脏特异表达模型的构建方法及相关载体。同源重组载体，包括插入原始载体的插入片段，插入片段包括斑马鱼心脏特异表达的启动子、融合LoxP位点序列的左侧同源臂和右侧同源臂、多克隆位点、内部核糖体进入位点、报告基因、转录终止信号片段；其中，所述启动子位于报告基因上游，所述终止信号位于报告基因下游，左侧同源臂位于启动子上游，右侧同源臂位于终止信号下游，同源臂的内侧含有LoxP序列，多克隆位点位于所述启动子和报告基因之间；左侧同源臂和右侧同源臂靶向斑马鱼色素基因。还提供了斑马鱼心脏特异表达模型的构建方法，本发明可用于快速建立斑马鱼心脏特异表达基因的转基因模型，同时可以调控插入片段的表达。

关键词：同源臂斑马鱼报告基因插入片段特异表达启动子心脏多克隆位点终止信号构建内部核糖体进入位点特异表达基因同源重组载体转录终止信号启动子上游转基因模型快速建立色素基因位点序列原始载体靶向可用融合上游调控

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质粒型载体、基因启动子活性的检测方法、及分析试剂盒

质粒型载体、基因启动子活性的检测方法、及分析试剂盒

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作者：赤星英一石原美津子日本枥木

质粒型载体、基因启动子活性的检测方法、及分析试剂盒本发明的课题是以高灵敏度检测基因启动子的活性。本实施方式中涉及的质粒型载体含：基因启动子、第1基因、第2基因、内部核糖体结合序列、转录终止信号序列、及复制起始序列。第1... 详细信息

标准号: CN104894249B

质粒型载体、基因启动子活性的检测方法、及分析试剂盒本发明的课题是以高灵敏度检测基因启动子的活性。本实施方式中涉及的质粒型载体含：基因启动子、第1基因、第2基因、内部核糖体结合序列、转录终止信号序列、及复制起始序列。第1基因编码配置在基因启动子之下游的，用于可视化基因启动子的活性的报告子蛋白质。第2基因编码配置在基因启动子之下游的复制起始蛋白质。内部核糖体结合序列配置在第1基因和第2基因之间。转录终止信号序列编码用于终止第1基因和第2基因的转录的信号。复制起始序列被复制起始蛋白质识别。

关键词：基因启动子基因复制起始蛋白质复制起始序列转录终止信号内部核糖体质粒型载体基因编码结合序列配置基因启动子活性分析试剂盒转录高灵敏度序列编码可视化检测蛋白质

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一种RNA甲基化酶TRDMT1基因敲除的HEK293细胞系及其构建方法

一种RNA甲基化酶TRDMT1基因敲除的HEK293细胞系及其构建方法

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作者：崔恒宓徐慧孙振薛松磊 225009 江苏省扬州市大学南路88号

本发明提供一个应用于一种RNA甲基化酶TRDMT1基因敲除的HEK293细胞系及其构建方法，该方法是通过两个分别包含抗生素筛选基因的同源重组载体、gRNA载体TRDMT1‑gRNA，以及表达Cas9的载体混合转染HEK293细胞，将两个抗生素筛选基因和转录... 详细信息

标准号: CN108148861A

本发明提供一个应用于一种RNA甲基化酶TRDMT1基因敲除的HEK293细胞系及其构建方法，该方法是通过两个分别包含抗生素筛选基因的同源重组载体、gRNA载体TRDMT1‑gRNA，以及表达Cas9的载体混合转染HEK293细胞，将两个抗生素筛选基因和转录终止信号片段整合到TRDMT1基因的第一外显子前，以终止其转录，通过抗性筛选，获得RNA甲基化酶TRDMT1基因敲除的HEK293细胞系。通过本发明所获得细胞系，性状稳定，为进一步为研究TRDMT1基因功能提供可靠的细胞模型，也为RNA甲基化功能研究提供一种有效的方法。

关键词：抗生素筛选基因基因敲除甲基化酶同源重组载体转录终止信号第一外显子转录功能研究基因功能抗性筛选片段整合细胞模型性状稳定甲基化构建转染基因应用研究

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一种表达细粒棘球蚴EG95蛋白的重组羊痘病毒

一种表达细粒棘球蚴EG95蛋白的重组羊痘病毒

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作者：刘拂晓王志亮吴晓东 266032 山东省青岛市南京路369号

本发明提供的转移载体pLSEG‑EG95的TK基因同源臂之间插入了EG95和两个筛选标记基因。所述的EG95基因开放阅读框(ORF)上游为p7.5K启动子，下游为ATTTTTAT早期转录终止信号。所述的转移载体使用了筛选标记eGFP基因，使得后期筛选更为便捷... 详细信息

标准号: CN108866097A

本发明提供的转移载体pLSEG‑EG95的TK基因同源臂之间插入了EG95和两个筛选标记基因。所述的EG95基因开放阅读框(ORF)上游为p7.5K启动子，下游为ATTTTTAT早期转录终止信号。所述的转移载体使用了筛选标记eGFP基因，使得后期筛选更为便捷；又由于引入了gpt基因，较大程度降低了亲本病毒的污染，使重组病毒的纯化更为容易。

关键词：转移载体筛选标记基因转录终止信号开放阅读框亲本病毒筛选标记重组病毒启动子同源臂筛选上游基因引入污染

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一种用于抑制肿瘤细胞生长的基因表达元件及其应用

一种用于抑制肿瘤细胞生长的基因表达元件及其应用

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作者：贾振宇曹江刘昊魏群 310013 浙江省杭州市天目山路182号

本发明公开了一种用于抑制肿瘤细胞生长的基因表达元件及其应用。所述基因表达元件由第一表达框和第二表达框组成，第一表达框由肿瘤特异性启动子、分别靶向DNA聚合酶α、δ、ε的三种mircoRNA的编码序列以及转录终止信号序列依次连接... 详细信息

标准号: CN104611334B

本发明公开了一种用于抑制肿瘤细胞生长的基因表达元件及其应用。所述基因表达元件由第一表达框和第二表达框组成，第一表达框由肿瘤特异性启动子、分别靶向DNA聚合酶α、δ、ε的三种mircoRNA的编码序列以及转录终止信号序列依次连接而成；第二表达框由肿瘤特异性启动子、凋亡因子基因以及转录终止信号序列依次连接而成。一方面，本发明以染色体复制必需的三个DNA聚合酶基因为靶点，对它们的表达同时进行有效抑制，使得肿瘤细胞因缺乏这三种DNA聚合酶而无法进行染色体复制，进而无法增殖；另一方面，利用凋亡因子促进停止增殖的肿瘤细胞凋亡，最终达到较为彻底的基因治疗的目的。

关键词：表达框肿瘤特异性启动子基因表达元件转录终止信号染色体复制凋亡因子依次连接抑制肿瘤细胞生长肿瘤细胞凋亡编码序列基因治疗有效抑制肿瘤细胞靶向DNA 聚合酶增殖的靶点增殖基因应用

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使用具有隐身性的RNA的基因表达系统以及包含该RNA的基因导入、表达载体

使用具有隐身性的RNA的基因表达系统以及包含该RNA的基因导入、表...

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作者：中西真人饭岛実日本东京都

本发明是由包含下述(1)至(8)的负单链RNA、单链RNA结合蛋白和RNA依赖性RNA合成酶构成的不使先天免疫机制激活的复合体，通过使用隐身型RNA基因表达系统，使多个外源基因同时且稳定地表达成为可能。(1)编码任意蛋白质或功能性RNA的目标RN... 详细信息

标准号: CN107109400A

本发明是由包含下述(1)至(8)的负单链RNA、单链RNA结合蛋白和RNA依赖性RNA合成酶构成的不使先天免疫机制激活的复合体，通过使用隐身型RNA基因表达系统，使多个外源基因同时且稳定地表达成为可能。(1)编码任意蛋白质或功能性RNA的目标RNA序列；(2)构成非编码区的源自在动物细胞中表达的mRNA的RNA序列；(3)前述RNA依赖性RNA合成酶所识别的转录起始信号序列；(4)该酶所识别的转录终止信号序列；(5)包含该酶所识别的复制起点的RNA序列；(6)编码该酶的RNA序列，并且是针对导入对象细胞所由来的生物物种进行了密码子优化的RNA序列；(7)编码调节该酶活性的蛋白质的RNA序列，并且是针对导入对象细胞所由来的生物物种进行了密码子优化的RNA序列；(8)编码前述单链RNA结合蛋白的RNA序列，并且是针对导入对象细胞所由来的生物物种进行了密码子优化的RNA序列。

关键词：密码子优化对象细胞生物物种单链RNA 结合蛋白蛋白质转录终止信号功能性RNA 转录表达系统动物细胞非编码区复制起点机制激活起始信号外源基因先天免疫复合体酶活性隐身

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质粒型载体、基因启动子活性的检测方法、及分析试剂盒

质粒型载体、基因启动子活性的检测方法、及分析试剂盒

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作者：赤星英一石原美津子日本枥木

标准号: CN102952819B

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基于RNA聚合酶Ⅰ的RSV微型复制基因组及其应用

基于RNA聚合酶Ⅰ的RSV微型复制基因组及其应用

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作者：何金生付远辉郑妍鹏刘亚茹 100044 北京市海淀区上园村3号

本发明公开一种基于RNA聚合酶Ⅰ的RSV微型复制基因组及其应用，该微型复制基因组包含RNA聚合酶Ⅰ启动子和终止子、Gaussia荧光素酶(Gaussialuciferase，Gluc)报告基因、RSV前导序列(Leaderregion/genomicpromotor)、转录起始信号(Genest... 详细信息

标准号: CN105200069A

本发明公开一种基于RNA聚合酶Ⅰ的RSV微型复制基因组及其应用，该微型复制基因组包含RNA聚合酶Ⅰ启动子和终止子、Gaussia荧光素酶(Gaussialuciferase，Gluc)报告基因、RSV前导序列(Leaderregion/genomicpromotor)、转录起始信号(Genestartsignal，GS)、转录终止信号(Geneendsignal，GE)和尾随序列(Trailerregion/antigenomicpromoter)等顺式作用元件(Cis-actingelements)；包含RSV微型复制基因组的pHM-RSV-Gluc表达载体，其包括基于RNA聚合酶Ⅰ的RSV微型复制基因组和pHM载体序列；利用所述筛选抗RSV化合物的方法，该方法包括如下步骤：接种宿主细胞，并加入RSV病毒和待筛选化合物；转染所述pHM-RSV-Gluc质粒到宿主细胞；检测Gaussia荧光素酶信号强度；评价待筛选化合物的抗RSV病毒的效果，通过该方法可对抗RSV的药物进行高通量筛选。

关键词：基因组复制筛选化合物宿主细胞抗RSV 顺式作用元件转录终止信号病毒高通量筛选转录报告基因表达载体起始信号前导序列尾随序列信号强度载体序列包含启动子终止子化合物一种质粒转染接种筛选对抗检测应用公开评价加入进行

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慢病毒载体转录“通读”改进研究进展

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生物工程学报 2011年第11期27卷 1541-1548页

作者：何佳平张敬之上海市儿童医院上海200040 上海交通大学附属儿童医院上海200040 上海交通大学医学遗传研究所上海200040

自2002年以来,在用γ-逆转录病毒载体治疗X连锁重度复合性免疫缺陷病(X-SCID)的10例病人中已有4例因载体整合在原癌基因lmo2等附近而得了白血病。这一事件提高了人们对基因治疗载体安全性的关注。与γ-逆转录病毒载体相比,慢病毒载体因... 详细信息

自2002年以来,在用γ-逆转录病毒载体治疗X连锁重度复合性免疫缺陷病(X-SCID)的10例病人中已有4例因载体整合在原癌基因lmo2等附近而得了白血病。这一事件提高了人们对基因治疗载体安全性的关注。与γ-逆转录病毒载体相比,慢病毒载体因尚未发现有整合在lmo2附近的现象,被认为是安全性较好的基因治疗载体。然而自灭活慢病毒载体与γ-逆转录病毒载体一样存在着转录"通读"的现象。近些年来,科学家们在改善自灭活慢病毒载体的通读率上做了一些工作并取得了一些积极成果。以下对慢病毒载体转录"通读"现象的发生机理和解决途径作了综合描述。

关键词：基因治疗载体自灭活慢病毒载体转录通读长末端重复序列转录终止信号

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