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中国老年学杂志 2021年第6期41卷 1248-1252页

作者：王富军贾峰张世华淄博市第一医院骨伤科山东淄博255200 山东省中医院关节骨科

目的探究龙胆苦苷(GPS)对骨关节炎大鼠软骨组织损伤和软骨细胞凋亡的作用。方法选取75只6周龄SPF级大鼠体重(180±20)g,并随机分为5组:假手术(Sham)组、模型(OA)组、GPS 50 mg/kg组、GPS 100 mg/kg组、GPS 200 mg/kg组。采用Hulth... 详细信息

目的探究龙胆苦苷(GPS)对骨关节炎大鼠软骨组织损伤和软骨细胞凋亡的作用。方法选取75只6周龄SPF级大鼠体重(180±20)g,并随机分为5组:假手术(Sham)组、模型(OA)组、GPS 50 mg/kg组、GPS 100 mg/kg组、GPS 200 mg/kg组。采用Hulth法复制大鼠骨关节炎模型,按照分组剂量使用龙胆苦苷对大鼠灌胃,每日1次,共8 w;采用苏木素-伊红(HE)染色和番红染色分别观察大鼠骨关节情况,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测血清中白细胞介素(IL)-6、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量,使用Western印迹检测大鼠基质金属蛋白酶(MMP)-13、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(cl-caspase)-3、金属肽酶含血小板反应蛋白(ADAMTs)-4、转化生长因子(TGF)β活化激酶(TAK)1、TGF-β、胰岛素样生长因子(IGF)1、p-p65蛋白表达情况。结果HE染色和番红染色结果显示,GPS组软骨基质染色均匀,钙化层细胞正常排列有序。与Sham组比较,OA组大鼠cl-caspase-3、IGF1水平显著降低(P<0.05);MMP-13、ADAMTs-4、TAK1、TGF-β、p-p65水平显著升高(P<0.05)。与OA组比较,GPS组大鼠cl-caspase-3、IGF1水平显著升高,且GPS 200 mg/kg组显著高于GPS 100 mg/kg组,GPS 100 mg/kg组显著高于GPS 50 mg/kg组(P<0.05),MMP-13、ADAMTs-4、TAK1、TGF-β、p-p65水平显著降低,且GPS 200 mg/kg组显著低于GPS 100 mg/kg组,GPS 100 mg/kg组显著低于GPS 50 mg/kg组(P<0.05)。结论GPS可以降低体内炎症因子、平衡软骨细胞外基质的合成与降解达到保护骨关节大鼠软骨组织的效果。

关键词：骨关节炎软骨组织损伤龙胆苦苷细胞凋亡

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犬脂肪间充质干细胞修复犬膝关节软骨组织损伤的试验研究

犬脂肪间充质干细胞修复犬膝关节软骨组织损伤的试验研究

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作者：滕鑫西北农林科技大学

学位级别：硕士

干细胞分化程度低,具有自我复制能力和多向分化的潜能,被认为是治疗各类疾病的“种子细胞”。犬脂肪间充质干细胞(Adipose mesenchymal stem cells,AD-MSCs)来源于中胚层,在不同的体外诱导条件下,可以分化为其他同源的中胚层间质细胞,... 详细信息

干细胞分化程度低,具有自我复制能力和多向分化的潜能,被认为是治疗各类疾病的“种子细胞”。犬脂肪间充质干细胞(Adipose mesenchymal stem cells,AD-MSCs)来源于中胚层,在不同的体外诱导条件下,可以分化为其他同源的中胚层间质细胞,还可以向骨细胞、软骨细胞、上皮样细胞等方向分化。关节软骨的成分是透明软骨,具有良好的弹性和耐磨性,在运动系统中起到缓冲减压的作用。但是成熟后的关节软骨是以Ⅱ胶原蛋白为主要成分的细胞外基质,细胞含量少,并且其所处的环境缺乏血管的营养。因此,关节软骨因外伤或炎症等病变因素损伤后难以修复。因此,使用AD-MSCs作为“种子细胞”对软骨组织损伤进行修复成为了一个值得期待的解决方案。本试验研究采用标记有绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)的犬AD-MSCs对人工建立的犬关节软骨组织损伤模型进行修复治疗,旨在探究犬AD-MSCs应用于软骨组织损伤的可行性。本试验使用3只健康犬作为实验动物,1只1岁雌性实验犬用于分离AD-MSCs,2只2岁雌性实验犬用于建立软骨组织损伤的病理模型。以手术方法建立2对共4处关节软骨组织损伤;使用无血清细胞培养液为对照,以标记有GFP的原代犬AD-MSCs进行移植治疗。在病理模型进行常规饲养14周后,对病理模型进行手术采样并做检测如下:(1)大体观察:试验组比对照组能够更好的填充软骨组织的缺损,新生组织更大更厚。(2)新生软骨样组织的GFP荧光阳性:证明通过注射移植进入关节腔的犬AD-MSCs成功附植于软骨组织缺损位置;(3)HE染色证明:试验组与对照组的新生组织内都形成多量的陷窝状细胞团,但是试验组的ECM染色均一,基质切面平整,提示试验组的新生组织成分更接近于原位的透明软骨。(4)Ⅱ型胶原蛋白的免疫荧光染色:试验组可见较强的Ⅱ型胶原蛋白阳性染色,而对照组仅有少量微弱的阳性染色,证明试验组的新生组织具有更高含量的Ⅱ型胶原蛋白成分,这符合透明软骨的特性。(5)实时荧光定量PCR检测COL 2a1的m RNA水平:试验组的COL 2a1含量明显高于对照组,差异显著(P<0.05)。这一结果也支持了Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光染色的试验结果,证明试验组的新生软骨样组织更接近于原位的透明软骨。本试验明确了直接移植原代犬AD-MSCs到关节腔进行修复软骨组织缺损的可行性,为以后的干细胞治疗软骨组织损伤提供了临床依据。

关键词：间充质干细胞软骨组织损伤干细胞移植治疗犬

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燃煤型氟中毒大鼠骺板软骨组织损伤与TGF-β/Smad传导通路关系研究

燃煤型氟中毒大鼠骺板软骨组织损伤与TGF-β/Smad传导通路关系研究

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作者：林少凯贵阳医学院

学位级别：硕士

目的：模拟病区人群生活情况，复制燃煤型氟中毒、燃煤型氟中毒伴低蛋白低钙及燃煤型氟中毒伴高铝的大鼠模型，动态观察燃煤型氟中毒大鼠不同时期骺板软骨形态结构改变情况，以及氟对大鼠软骨生长过程中转化生长因子β1（TGF-β1）、大... 详细信息

目的：模拟病区人群生活情况，复制燃煤型氟中毒、燃煤型氟中毒伴低蛋白低钙及燃煤型氟中毒伴高铝的大鼠模型，动态观察燃煤型氟中毒大鼠不同时期骺板软骨形态结构改变情况，以及氟对大鼠软骨生长过程中转化生长因子β1（TGF-β1）、大鼠骨成型蛋白2（BMP-2）、大鼠母亲DPP同源物4（Smad-4）表达的影响，探讨燃煤型氟中毒大鼠软骨损伤发生的可能发病机制及伴有低蛋白低钙、高铝时对软骨组织损伤的影响。　　方法：　　1.将150只断乳两周的SD大鼠按体重随机分入对照组、中氟组、高氟组、高氟伴低蛋白低钙组、高氟伴高铝组。每组30只（组内雌雄各半），分笼喂养，自由饮食，饲料配方如下：　　（1）对照组：食用自然晒干玉米加麦麸、大豆粉等制成的饲料（其中玉米所占比例68％，饲料含氟5.2mg/kg，含蛋白质0.18Kg/Kg，含钙8g/Kg），　　（2）中氟组：食用自然晒干玉米与病区含氟煤烘干玉米混合后加麦麸、大豆粉等制成饲料（其中病区含氟煤烘干玉米所占比例30%，自然晒干玉米所占比例38%，饲料含氟47.8mg/kg，含蛋白质0.18Kg/Kg，含钙8g/Kg）。　　（3）高氟组及高氟伴高铝组：食用病区含氟煤烘干玉米加麦麸、大豆粉等制成的饲料（其中病区含氟煤烘干玉米所占比例68%，饲料含氟96mg/kg，含蛋白质0.18Kg/Kg，含钙8g/Kg）。　　（4）高氟伴低钙低蛋白组：食用病区含氟煤烘干玉米加麦麸、自然晒干玉米等制成的饲料（其中病区含氟煤烘干玉米占比例68%，自然晒干玉米12%，饲料含氟96mg/kg，含蛋白质0.09Kg/Kg，含钙4g/Kg）。　　饮水配方如下：　　（1）对照组、中氟组、高氟组、高氟伴低蛋白低钙组饮用自来水（含氟0.699mg/L,含铝0.2mg/L）。（贵阳市供水总公司）。　　（2）高氟伴高铝组饮用自来水（贵阳市供水总公司）加AlCl3（含氟0.699mg/L,含铝90mg/L）。　　2．动态观察各组大鼠染氟期间牙齿的变化情况：每周定时检查大鼠氟斑牙情况，根据对大鼠氟斑牙分度方法，判定大鼠氟斑牙的严重情况。　　3．每组30只大鼠均随机分成三批，每批10只（雌雄各半），分别于第60天、第120天、第180天处死。处死之前收集24小时尿液，用于尿氟测定。取左侧膝关节，利用HE染色观察大鼠的骺板软骨组织形态结构，测骺板软骨厚度、骺板软骨增值层细胞数和肥大层细胞数。取右侧膝关节，利用酶联免疫吸附剂法（ELISA）测定大鼠软骨组织SMAD-4、TGF-β1、BMP2的表达。　　4．大鼠骨氟、尿氟测：采用离子选择电极法、高温灰化-氟离子选择电极法测定大鼠尿氟、骨氟含量　　结果：　　1.大鼠的一般情况　　实验期间，对照组精神较好，毛色有光泽，各实验组大鼠较之对照组精神较为萎靡，毛色光泽度下降。各个实验组体重增长较对照组较为缓慢，在染毒第60天、120天、180天时高氟伴低蛋白低钙组体重较对照组、中氟组、高氟组、高氟伴高铝组差别均有统计学差异（p＜0.05）。　　2.大鼠氟斑牙检查及氟斑牙分度方法　　在染氟第四周，观察到高氟组、高氟伴低蛋白低钙组开始出现轻度氟斑牙。在染氟第60d、第120d、第180d，中氟组、高氟组、高氟组伴高氟营养不良、高氟伴高铝组较对照组氟斑牙发生率更高（p＜0.05）;在染氟第120d、180d高氟组、高氟组伴高氟营养不良、高氟伴高铝组较中氟组差别有统计学意义（p＜0.05）。　　3．大鼠尿氟、骨氟含量　　在染氟各个时期各染氟组大鼠尿氟、骨氟含量均高于对照组，且高氟组、高氟伴低蛋白低钙组和高氟伴高铝组与对照组差别有统计学意义（p＜0.05）;高氟伴低蛋白低钙组大鼠尿氟、骨氟高于高氟组，差别有统计学意义（p＜0.05）;在染毒第120d、180d高氟组尿氟、骨氟浓度高于高氟伴高铝组，差别有统计学意义（p＜0.05）。　　对与同一个实验组，随着染毒时间增长，大鼠尿氟、骨氟浓度逐渐增高。　　4.观察实验大鼠软骨组织病理学改变　　（1）大鼠骺板软骨的组织形态学观察　　实验各个时期，对照组大鼠的骺板软骨边缘整齐，增值层细胞纵向堆积成柱，肥大层软骨细胞体积较增值层细胞大，程空泡状，细胞核固缩;染氟组与对照组相比，骺板边缘不齐，骺板厚度普遍增厚，软骨细胞钙化延迟，增值层和肥大层细胞层数增多，高氟伴低蛋白低钙组骺板增厚，细胞柱排列紊乱。高氟伴高铝组增值层软骨偶尔可见结节样增生;随染氟时间延长，大鼠骺板组织病变加重，高氟伴低蛋白低钙组出现大量坏死区。　　（2）各组大鼠骺板厚度测量　　对于同一实验组不同时期比较，随着大鼠饲养时间延长，所有组别大鼠骺板厚度均呈现下降趋势。不同时期三批大鼠各染氟组骺板厚度与对照组比较均明显增厚，差异均有统计学意义（P＜0.05），且随着染氟剂量越高，骺板厚度逐渐增厚，三批大鼠高氟组骺板厚度均高于

关键词：氟中毒软骨组织损伤传导通路发病机制动物模型

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兔膝骨关节炎软骨组织损伤及发病机制的探讨

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华夏医学 2023年第5期36卷 24-28页

作者：罗娆珊余立志唐青梅罗秉庆梁伟明广西科技大学第一附属医院广西柳州545000

目的:观察兔膝骨关节炎(KOA)的组织病理变化并探讨其发病机制。方法:健康雄性新西兰兔膝关节强迫伸直位制动建立KOA模型,实验设对照组和模型组。4周后造模结束,取膝关节进行组织HE染色和免疫组织化学检测,观察并分析膝骨关节损伤及相关... 详细信息

目的:观察兔膝骨关节炎(KOA)的组织病理变化并探讨其发病机制。方法:健康雄性新西兰兔膝关节强迫伸直位制动建立KOA模型,实验设对照组和模型组。4周后造模结束,取膝关节进行组织HE染色和免疫组织化学检测,观察并分析膝骨关节损伤及相关蛋白因子白细胞介素⁃1β(IL⁃1β)、基质金属蛋白酶⁃13(MMP⁃13)、带有血小板凝血酶敏感蛋白样模体的解整链蛋白金属蛋白酶⁃4(ADAMTS⁃4)的表达情况。结果:HE染色显示,模型组膝骨关节滑膜组织均存在不同程度增生、纤维化、淤血和炎性细胞浸润;软骨增生、有裂隙,软骨细胞排列紊乱、簇集,细胞形态多样,表层细胞纤维化等。IL⁃1β、MMP⁃13、ADAMTS⁃4在对照组、模型组软骨细胞均有表达,而模型组表达明显高于对照组。结论:关节软骨的退变、滑膜组织的炎症是KOA的病理学特征,其发病机制与软骨细胞IL⁃1β、MMP⁃13、ADAMTS⁃4蛋白表达异常有关。

关键词：膝骨关节炎软骨组织损伤发病机制

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修复软骨组织损伤的中药组合物、制剂、制备方法和应用

修复软骨组织损伤的中药组合物、制剂、制备方法和应用

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作者：张喜文 154700 黑龙江省佳木斯市汤原县汤原镇北靠山村

本发明涉及一种修复软骨组织损伤的中药组合物，各原料的重量份数为：血竭7~9份、三七4~6份、姜黄5~7份、冰片20~25份、珍珠3~6份、琥珀8~10份、轻粉10~15份、接骨木5~8份、赤石脂4~7份、石膏6~10份、骨碎补8~10份、白矾5~7份、红丹15~2... 详细信息

标准号: CN104784639B

本发明涉及一种修复软骨组织损伤的中药组合物，各原料的重量份数为：血竭7~9份、三七4~6份、姜黄5~7份、冰片20~25份、珍珠3~6份、琥珀8~10份、轻粉10~15份、接骨木5~8份、赤石脂4~7份、石膏6~10份、骨碎补8~10份、白矾5~7份、红丹15~25份、续断6~8份、蛇床子6~8份、龙骨8~10份、蓖麻子30~40份、千年健7~9份和大黄6~8份。其具备活血化瘀、消肿止痛、拔毒去腐生肌的疗效。并同时提供其临床制剂、制备方法和应用，本发明提供的膏药有很强的穿透性直达病变部位修复损伤的软骨组织。

关键词：制备方法和应用软骨组织损伤修复中药组合物病变部位活血化瘀临床制剂去腐生肌软骨组织消肿止痛重量份数膏药龙骨蓖麻子赤石脂穿透性骨碎补接骨木千年健蛇床子拔毒白矾冰片大黄红丹姜黄轻粉续断血竭琥珀石膏珍珠损伤

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软骨源性形态发生蛋白-2与软骨组织修复

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中华创伤杂志 2008年第11期24卷 945-948页

作者：朱文辉王予彬同济大学附属东方医院运动医学科上海200120

随着高能、高速创伤的不断增多及人口老龄化进程，导致和加速人体各种软骨损伤和退变的疾患也显著增加。日益突出的软骨组织损伤与退变已成为创伤外科、骨科、运动医学科以及老年医学科等多学科面临的严峻挑战。软骨组织损伤或退变后很... 详细信息

随着高能、高速创伤的不断增多及人口老龄化进程，导致和加速人体各种软骨损伤和退变的疾患也显著增加。日益突出的软骨组织损伤与退变已成为创伤外科、骨科、运动医学科以及老年医学科等多学科面临的严峻挑战。软骨组织损伤或退变后很难修复，原因之一是由于软骨的代谢活跃而修复能力有限，没有血管的供应，在损伤后不能形成纤维凝块，没有炎性细胞浸润，

关键词：骨组织修复形态发生蛋白骨源性软骨组织损伤软骨损伤炎性细胞浸润创伤外科人口老龄化

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低强度脉冲超声在肌肉骨骼疾病中的研究进展

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第二军医大学学报 2020年第2期41卷 194-199页

作者：张子程胡建辉杨依林周潇逸魏显招李明海军军医大学(第二军医大学)长海医院脊柱外科上海200433 海军军医大学(第二军医大学)长海医院医务处上海200433

低强度脉冲超声(LIPUS)是一种非侵入性的治疗方式,其被广泛应用于肌肉骨骼系统疾病的治疗。早期LIPUS主要应用于新鲜骨折、骨不连的治疗,近年来发现LIPUS对软骨组织损伤、椎间盘退变等软组织疾病也有治疗作用。此外,LIPUS也应用于骨科... 详细信息

低强度脉冲超声(LIPUS)是一种非侵入性的治疗方式,其被广泛应用于肌肉骨骼系统疾病的治疗。早期LIPUS主要应用于新鲜骨折、骨不连的治疗,近年来发现LIPUS对软骨组织损伤、椎间盘退变等软组织疾病也有治疗作用。此外,LIPUS也应用于骨科手术中,如牵拉成骨术和脊柱融合术。随着对LIPUS作用机制研究的逐渐深入,其临床应用前景将更广泛。本文对LIPUS在肌肉骨骼系统疾病中的研究及应用进展作一综述。

关键词：低强度脉冲超声骨折骨不连软骨组织损伤椎间盘退变肌肉骨骼疾病

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中药在组织工程化骨及软骨组织构建过程中的作用

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中国组织工程研究与临床康复 2010年第11期14卷 1954-1954页

1透骨消痛颗粒诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞的分化吴追乐,刘献祥,李西海,李明波,李民,林久茂（福建中医学院骨伤系,福建省福州市350108）推荐理由：实验证明,骨髓间充质干细胞在骨及软骨组织损伤中的应用能较好地刺激骨及软骨修复再生,

关键词：骨组织构建组织工程化骨骨髓间充质干细胞中药透骨消痛颗粒福建中医学院软骨组织损伤软骨细胞

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软骨组织工程中种子细胞的应用②：本刊中文部

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中国组织工程研究与临床康复 2010年第33期14卷 6116-6116页

5脂肪干细胞与软骨细胞的共培养张勇（解放军第二军医大学南京临床医学院，解放军南京军区南京总医院骨科，江苏省南京市210002）推荐理由：成熟的关节透明软骨组织损伤后，自身难以修复。虽然结合组织工程，采用自身软骨细胞增殖构建... 详细信息

5脂肪干细胞与软骨细胞的共培养张勇（解放军第二军医大学南京临床医学院，解放军南京军区南京总医院骨科，江苏省南京市210002）推荐理由：成熟的关节透明软骨组织损伤后，自身难以修复。虽然结合组织工程，采用自身软骨细胞增殖构建软骨来修复此类损伤，

关键词：软骨组织工程种子细胞解放军第二军医大学南京军区南京总医院软骨组织损伤软骨细胞增殖中文应用

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膝关节骨关节炎的非手术治疗现状

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中华骨科杂志 2015年第7期35卷 774-780页

作者：沈梓维林子洪郑秋坚汕头大学医学院 515041 广东省人民医院

膝关节软骨损伤的发病率很高,Curl等[1]对31 516例关节镜手术病例进行回顾性分析,结果发现有19 827例存在53 569处软骨损伤;Widuchowski等[2]研究发现,膝关节软骨缺损的病灶常位于髌骨关节面及股骨内侧髁,OuterbridgeⅡ级损伤最为多见.... 详细信息

膝关节软骨损伤的发病率很高,Curl等[1]对31 516例关节镜手术病例进行回顾性分析,结果发现有19 827例存在53 569处软骨损伤;Widuchowski等[2]研究发现,膝关节软骨缺损的病灶常位于髌骨关节面及股骨内侧髁,OuterbridgeⅡ级损伤最为多见.因软骨组织缺乏血供,且高度分化的软骨细胞缺乏迁移、增殖的能力,故软骨组织损伤后极难修复.另外,关节软骨组织一旦损伤,将会导致级联放大关节损害,最终发展为骨关节炎（osteoarthritis,OA）[3].

关键词：膝关节骨关节炎非手术治疗膝关节软骨损伤软骨组织损伤膝关节软骨缺损关节镜手术股骨内侧髁骨关节面

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