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荣筋拈痛方通过LncRNA H19/miR-675-3p促进软骨细胞增殖防治膝骨关节炎

江西中医药 2025年第1期56卷 53-58页

作者：罗清清郑若曦戴雨婷吴广文付长龙陈俊中医骨伤及运动康复教育部重点实验室福州350122 福建中医药大学中医学院福州350122 福建中医药大学中西医结合学院福州350122

目的:探究荣筋拈痛方通过调控LncRNA H19/miR-675-3p对膝骨关节炎(KOA)大鼠软骨细胞基质代谢及增殖的影响。方法:30只大鼠分为空白血清组和荣筋拈痛方含药血清组,每组15只,分别给予等量生理盐水和荣筋拈痛方药液灌胃,制备空白血清和荣... 详细信息

目的:探究荣筋拈痛方通过调控LncRNA H19/miR-675-3p对膝骨关节炎(KOA)大鼠软骨细胞基质代谢及增殖的影响。方法:30只大鼠分为空白血清组和荣筋拈痛方含药血清组,每组15只,分别给予等量生理盐水和荣筋拈痛方药液灌胃,制备空白血清和荣筋拈痛方含药血清。提取原代软骨细胞并采用Ⅱ型胶原免疫细胞化学法和甲苯胺蓝染色进行鉴定。采用IL-1β10 ng/mL干预24 h构建软骨细胞退变模型,分为空白组、模型组和荣筋拈痛方组。观察各组软骨细胞中lncRNA H19、miR-675-3p、CollagenⅡ、Aggrecan、PCNA基因相对表达水平,CollagenⅡ、Aggrecan、PCNA蛋白表达情况,EdU细胞增殖试剂盒检测各组软骨细胞增殖情况。结果:原代软骨细胞成簇生长,胞核清晰可辨,胞浆丰富,软骨细胞活力随传代次数的增加而下降。软骨细胞细胞外基质中的CollagenⅡ被染成棕黄色,苏木素将细胞核染成蓝色;甲苯胺蓝染色后细胞整体呈现蓝紫色。与空白组比较,模型组中LncRNA H19、miR-675-3p基因相对表达水平均下降(P<0.05);与模型组比较,荣筋拈痛方组LncRNA H19、miR-675-3p基因相对表达水平上升(P<0.05)。与空白组比较,模型组CollagenⅡ、Aggrecan、PCNA基因和蛋白相对表达水平均下降(P<0.05);与模型组比较,荣筋拈痛方组CollagenⅡ、Aggrecan、PCNA基因和蛋白相对表达水平均上升(P<0.05)。与空白组比较,模型组中软骨细胞EdU阳性细胞率降低(P<0.05);与模型组比较,荣筋拈痛方组EdU阳性细胞率上升(P<0.05)。结论:荣筋拈痛方可通过上调LncRNA H19/miR-675-3p促进CollagenⅡ、Aggrecan、PCNA表达,抑制细胞外基质降解,促进软骨细胞增殖,起到治疗KOA的作用。

关键词：膝骨关节炎荣筋拈痛方 LncRNA H19 miR-675-3p 软骨细胞增殖

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MiR⁃365a⁃5p通过靶向FOXO1基因调控膝骨关节炎软骨细胞增殖和凋亡的机制探讨

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骨科 2025年第1期16卷 49-56页

作者：王向英刘勇山东第二医科大学山东潍坊261053 山东第二医科大学附属医院创伤骨科与急诊科山东潍坊261033

目的挖掘miR-365a-5p在促进膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)进展中的靶向基因,并研究其作用机制。方法纳入2020年3月至2022年3月我院收治的10例KOA病人和10例健康人群,并通过qRT-PCR方法检测KOA病人和正常人软骨细胞C-28/I2中miR-3... 详细信息

目的挖掘miR-365a-5p在促进膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)进展中的靶向基因,并研究其作用机制。方法纳入2020年3月至2022年3月我院收治的10例KOA病人和10例健康人群,并通过qRT-PCR方法检测KOA病人和正常人软骨细胞C-28/I2中miR-365a-5p的差异表达。通过CTD和GeneCards数据库获取KOA相关的基因,并运用miRDB数据库预测miR-365a-5p的靶基因。使用Cytoscape软件的ClueGO插件进行miR-365a-5p靶向的KOA相关的基因功能富集分析。蛋白质-蛋白质相互作用构建挖掘关键基因。最后通过细胞实验进行验证。结果miR-365a-5p在KOA病人的血清中高表达。通过公共数据库分析预测了FOXO1是miR-365a-5p的关键靶基因并与KOA相关。细胞的功能缺失实验证实miR-365a-5p的抑制能够促进KOA条件下软骨细胞的增殖并抑制凋亡。双荧光素酶报告验证了miR-365a-5p和FOXO1的靶向关系。结论miR-365a-5p通过靶向FOXO1促进了KOA的进展。miR-365a-5p或许能成为KOA治疗的潜在靶点。

关键词：膝骨关节炎 miR-365a-5p FOXO1 软骨细胞增殖凋亡

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软骨细胞增殖与胰岛素和氢化可的松联合应用的关系(英文)

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中国临床康复 2005年第22期9卷 242-244页

作者：钟灿灿唐毅沈雁陈鸿辉粱伟国李斯明广州市创伤外科研究所广东省广州市510220 广州市红十字会医院骨科广东省广州市510220 广州市第十二人民医院广东省广州市510620

背景:关节腔内激素注射治疗关节炎能迅速缓解关节疼痛,但可发生进行性软骨损害。加用具有生长因子样作用的胰岛素,是否可产生对关节软骨细胞的保护作用?目的:观察胰岛素和氢化可的松联合作用对软骨细胞生长的影响。设计:分组对比观察,1... 详细信息

背景:关节腔内激素注射治疗关节炎能迅速缓解关节疼痛,但可发生进行性软骨损害。加用具有生长因子样作用的胰岛素,是否可产生对关节软骨细胞的保护作用?目的:观察胰岛素和氢化可的松联合作用对软骨细胞生长的影响。设计:分组对比观察,1种药物单独作用采用单因素方差分析,2种药物复合作用采用多因素实验设计资料方差分析的析因分析。单位:广州市创伤外科研究所。材料:4～6周龄的新西兰大白兔膝关节软骨。方法:实验于2000-02/2001-05在广州市创伤外科研究所完成。将软骨碎片分别用透明质酸酶,胰酶及Ⅱ型胶原酶消化,获得软骨单细胞悬液,予以不同作用及其不同剂量的药物干预。根据应用干预药物剂量的不同将其分为4组及相应亚组。对照组(不加氢化可的松和胰岛素),胰岛素(0.035,0.35,3.5,35mg/L)组,氢化可的松(1,5,10,50,100mg/L)组,胰岛素(0.35mg/L)+氢化可的松(50mg/L)组,应用四氮甲基唑蓝比色分析法观察其对软骨细胞增殖的影响。主要观察指标:①胰岛素对软骨细胞增殖的影响。②氢化可的松对软骨细胞增殖的影响。③氢化可的松与胰岛素联合使用对软骨细胞增殖的影响。结果:①胰岛素可促进软骨细胞增殖:单独使用0.035mg/L即可发挥效应,当浓度增至0.35mg/L时,其促进作用达到最大值。②氢化可的松对软骨细胞增殖的抑制作用:单独使用10mg/L时即可发挥效应,随着浓度增大抑制作用显著,当浓度增大至100mg/L,软骨细胞几乎全部死亡。③0.35mg/L胰岛素与50mg/L氢化可的松联合使用:存在着负协同作用(F=164.9,P<0.01)。结论:低浓度胰岛素对软骨细胞的增殖有促进作用。但氢化可的松对软骨细胞的增殖有抑制作用。二者联合使用时,氢化可的松可拮抗胰岛素的作用。

关键词：软骨细胞增殖氢化可的松单因素方差分析激素注射治疗关节软骨细胞新西兰大白兔联合使用抑制作用创伤外科膝关节软骨透明质酸酶单细胞悬液比色分析法关节疼痛关节腔内软骨损害生长因子保护作用细胞生长

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软骨细胞增殖调控机制的研究进展

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广东医学 2012年第20期33卷 3177-3180页

作者：赵振国王泉王成双李传郡邹亮鲍同柱三峡大学第一临床医学院骨科湖北宜昌443003

软骨细胞位于软骨陷窝内,在关节运动、负重中的缓冲过程中起到支持和保护作用,对损伤修复、应激、外界刺激起到修复和增殖作用。关节软骨中软骨细胞占总体积的1%,关节软骨损伤后主要由软骨细胞增殖、分化来修复,而软骨细胞的增殖能力极... 详细信息

软骨细胞位于软骨陷窝内,在关节运动、负重中的缓冲过程中起到支持和保护作用,对损伤修复、应激、外界刺激起到修复和增殖作用。关节软骨中软骨细胞占总体积的1%,关节软骨损伤后主要由软骨细胞增殖、分化来修复,而软骨细胞的增殖能力极有限,其质与量直接影响修复作用。

关键词：软骨细胞增殖细胞增殖调控关节软骨损伤损伤修复关节运动保护作用增殖作用增殖能力

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以多糖为主要部位的6种腰痛宁衍生方对巨噬细胞中炎症因子表达及软骨细胞增殖的影响

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中草药 2015年第24期46卷 3710-3716页

作者：张立国赵丽丽倪力军程佳佳华东理工大学化学与分子工程学院上海200237

目的以腰痛宁胶囊组方药材有效部位为基础,考察6种以多糖活性部位为主的腰痛宁衍生方的细胞药理活性,为风湿骨病处方候选药物筛选提供依据。方法分别以甘草多糖、苍术多糖、川牛膝多糖、麻黄多糖、淫羊藿多糖、桑寄生多糖为主要部位(组... 详细信息

目的以腰痛宁胶囊组方药材有效部位为基础,考察6种以多糖活性部位为主的腰痛宁衍生方的细胞药理活性,为风湿骨病处方候选药物筛选提供依据。方法分别以甘草多糖、苍术多糖、川牛膝多糖、麻黄多糖、淫羊藿多糖、桑寄生多糖为主要部位(组方中比例50%)组成6种腰痛宁衍生方,酶联免疫方法测定脂多糖(LPS)诱导的Ana-1细胞中前列腺素E_2(PGE_2)及Ana-1细胞中自细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,CCK8法检测软骨细胞增殖活性。采用半数抑制浓度(IC_(50))及半数有效浓度(EC_(50))评价各样品的活性,通过比较各组方实验EC_(50)/IC_(50)与其理论叠加值的差异,分析样品中活性部位间的相互作用。结果 6个腰痛宁衍生方中,以桑寄生多糖或淫羊藿多糖为主的2个组方抑制LPS诱导的Ana-l细胞分泌PGE2、促进Arna-I细胞分泌IL-6、IL-1β及TNF-α及促进软骨细胞增殖的活性显著弱于腰痛宁全方,其余由腰痛宁处方药材多糖为主的4个组方的相关活性优于腰痛宁全方或与腰痛宁全方相当,无统计学差异。其中川牛膝多糖占50%的组方在抑制LPS诱导的Ana-1细胞分泌PGE2、促进Ana-1细胞分泌IL-6、IL-1β及促进IL-1β诱导的软骨细胞增殖方面均具有良好效果。结论以川牛膝多糖为主的腰痛宁衍生方具有良好的细胞抗炎、免疫调节和促进软骨细胞增殖活性,可作为风湿骨病处方中多糖的优选部位。

关键词：风湿骨病腰痛宁胶囊多糖前列腺素E_2 白细胞介素-6 白细胞介素-1β 肿瘤坏死因子-α 软骨细胞增殖

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5种淫羊藿对软骨组织生长和软骨细胞增殖影响的对比研究

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中国中药杂志 2006年第24期31卷 2065-2067页

作者：冯坤谢文陈宝龙王健智郭建刚河南省正骨研究院河南省洛阳正骨医院河南洛阳471002

目的：对比研究心叶淫羊藿、箭叶淫羊藿、朝鲜淫羊藿、巫山淫羊藿和川西淫羊藿对软骨生长和软骨细胞增殖活性的影响。方法：以鸡胚股骨组织为研究对象,采用配对试验设计,把同一鸡胚的两个股骨组织分别分入对照组或实验组,每组共10个股... 详细信息

目的：对比研究心叶淫羊藿、箭叶淫羊藿、朝鲜淫羊藿、巫山淫羊藿和川西淫羊藿对软骨生长和软骨细胞增殖活性的影响。方法：以鸡胚股骨组织为研究对象,采用配对试验设计,把同一鸡胚的两个股骨组织分别分入对照组或实验组,每组共10个股骨组织。对照组股骨组织在不含中药的培养液中培养,实验组股骨组织在含3%淫羊藿提取物的培养液中培养。以软骨长度、软骨重量、软骨细胞增殖(MTT法)为指标观察5个品种淫羊藿的软骨生物活性。结果：心叶淫羊藿和箭叶淫羊藿实验组的股骨长度、股骨湿重、股骨干重及细胞增殖量指标均高于对照组(P＜0．01),而朝鲜淫羊藿、巫山淫羊藿和川西淫羊藿实验组的股骨长度、股骨湿重、股骨干重及细胞增殖指标与对照组结果相近,差异无显著性。结论：心叶淫羊藿和箭叶淫羊藿具有明确的促进体外软骨生长和软骨细胞增殖的作用,而朝鲜淫羊藿、巫山淫羊藿和川西淫羊藿品种没有表现出这种生物活性。

关键词：淫羊藿软骨生长软骨细胞增殖组织培养鸡胚

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骨关节炎软骨细胞增殖相关信号通路研究进展

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中国矫形外科杂志 2018年第23期26卷 2163-2166页

作者：柳海平周明旺李盛华叶丙霖吉星柴喜平陈威吴献毅甘肃省中医院兰州730050 甘肃中医药大学兰州730000

骨关节炎的发病率逐年升高,近年来通过信号通路探讨骨关节炎发病机制的研究逐渐深入。在目前的研究中与软骨细胞增殖相关信号通路较为成熟,其中主要包括Notch信号通路和Wnt信号通路,研究发现这些信号通路对骨关节炎的影响主要表现在对... 详细信息

骨关节炎的发病率逐年升高,近年来通过信号通路探讨骨关节炎发病机制的研究逐渐深入。在目前的研究中与软骨细胞增殖相关信号通路较为成熟,其中主要包括Notch信号通路和Wnt信号通路,研究发现这些信号通路对骨关节炎的影响主要表现在对干细胞的成软骨及成骨分化、软骨细胞的增殖及肥大化、MMPs的合成、破骨细胞的增殖及分化等过程的调控,本文综述了这些信号通路与骨关节炎发病的相关机制,从而为骨关节炎的研究及治疗提供新的思路。

关键词：骨关节炎软骨细胞增殖 Notch信号通路 wnt信号通路

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体外培养半月板纤维软骨细胞增殖和胶原表达特性的研究

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中华创伤杂志 2001年第1期17卷 14-16页

作者：崔一民曹谊林商庆新崔磊上海第二医科大学组织工程研究中心上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科200011

目的　研究体外单层培养条件下猪半月板纤维软骨细胞增殖和胶原的表达 ,为构建自体组织工程化半月板奠定基础。　方法　采用改良的Klagsbrun法 ,从 8只 45d龄长枫杂交仔猪的半月板消化获取细胞进行体外单层培养。形态学观察、群体倍增时... 详细信息

目的　研究体外单层培养条件下猪半月板纤维软骨细胞增殖和胶原的表达 ,为构建自体组织工程化半月板奠定基础。　方法　采用改良的Klagsbrun法 ,从 8只 45d龄长枫杂交仔猪的半月板消化获取细胞进行体外单层培养。形态学观察、群体倍增时间 (populationdoubletime,PDT)、增殖速度趋势图、原位杂交及免疫细胞化学染色法作为评定指标。　结果　半月板组织的平均细胞获得率为 (2 .31± 0 .6 6 )× 10 6 g ;0～ 6代细胞的PDT维持在 2～ 11d之间 ,且胶原表达稳定。　结论　半月板纤维软骨细胞同时表达Ⅰ、Ⅱ型胶原 ;第 3代和第

关键词：半月板损伤软骨细胞增殖组织工程胶原细胞培养

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SMAD3介导TGF-β1刺激软骨细胞增殖和抑制软骨细胞肥大性分化(英文)

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中国生物化学与分子生物学报 2002年第3期18卷 282-286页

作者：吴忆贫冯怡杨晓黄翠芬军事医学科学院生物工程研究所北京100071

为研究TGF β1 SMAD3信号对小鼠软骨细胞增殖和分化的影响 ,分离了野生型与Smad3基因剔除 (Smad3ex8 ex8)突变纯合子小鼠肋骨软骨细胞并进行了体外培养 .通过3 H TdR参入实验检测了体外培养软骨细胞的增殖能力 .TGF β1可以刺激野生型... 详细信息

为研究TGF β1 SMAD3信号对小鼠软骨细胞增殖和分化的影响 ,分离了野生型与Smad3基因剔除 (Smad3ex8 ex8)突变纯合子小鼠肋骨软骨细胞并进行了体外培养 .通过3 H TdR参入实验检测了体外培养软骨细胞的增殖能力 .TGF β1可以刺激野生型软骨细胞的增殖 ,Smad3基因缺失导致小鼠软骨细胞丧失对TGF β1刺激生长作用的应答 .Northern杂交显示 ,TGF β1促进野生型小鼠软骨细胞表达Ⅱ型胶原 ,而Smad3基因缺失突变纯合子软骨细胞大量表达肥大性软骨细胞的分子标记物X型胶原 .结果表明 ,SMAD3介导转化生长因子TGF

关键词： SMAD3 介导 TGF-β1 刺激软骨细胞增殖抑制软骨细胞肥大性分化

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成纤维细胞生长因子和胰岛素对小鼠软骨细胞增殖的影响

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中国病理生理杂志 2003年第3期19卷 394-396,T008页

作者：崔蕴霞狄静芳曾耀英曾山冯铮王一飞暨南大学生命科技学院广东广州510632

目的 :探讨碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)和胰岛素对小鼠原代软骨细胞的影响。方法 :在低血清培养基培养条件下进行小鼠原代软骨细胞培养 ,采用WST1比色法和荧光染色法观察bFGF和胰岛素对软骨细胞增殖的影响。结果 :原代软骨细胞在 0 ... 详细信息

目的 :探讨碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)和胰岛素对小鼠原代软骨细胞的影响。方法 :在低血清培养基培养条件下进行小鼠原代软骨细胞培养 ,采用WST1比色法和荧光染色法观察bFGF和胰岛素对软骨细胞增殖的影响。结果 :原代软骨细胞在 0 .4%胎牛血清培养基培养条件下 ,不同浓度的bFGF和胰岛素对软骨细胞的增殖有剂量相关性。形态学观察表明 ,bFGF和胰岛素不仅促进细胞增殖 ,而且可使细胞分泌基质增多。结论

关键词：成纤维细胞生长因子胰岛素小鼠软骨细胞增殖

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