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生物学
1 篇
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4 篇
输卵管定位表达
2 篇
鸡
2 篇
il-2基因cdna
2 篇
蜂毒肽
2 篇
dna药物
1 篇
融合启动子
1 篇
转染
1 篇
激素
1 篇
抗菌多肽
1 篇
鸡输卵管
1 篇
定位表达
1 篇
蛋传病
机构
2 篇
河南科技大学
2 篇
华南农业大学
作者
2 篇
张春杰
2 篇
吴庭才
2 篇
林崇韫
2 篇
李银聚
2 篇
程相朝
1 篇
刘一尘
1 篇
毕英佐
1 篇
陈峰
1 篇
谢青梅
1 篇
赵亚华
1 篇
贺聪
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"主题词=输卵管定位表达"
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防治蛋传病新型禽类DNA药物的研究——抗微生物肽类鸡
输卵管定位表达
系统的建立
防治蛋传病新型禽类DNA药物的研究——抗微生物肽类鸡输卵管定位...
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作者:
林崇韫
华南农业大学
学位级别:
硕士
蛋传病是病原通过染病或带菌母鸡传给子代所引起的疾病。由于种鸡蛋传性疾病的蔓延,种鸡养殖企业普遍采用定期投喂有效抗菌药物的方法控制疾病的发生,但滥用药物,致使耐药菌株迅速增加。于是,人们把目光投放到抗茵多肽方面,这是由...
详细信息
蛋传病是病原通过染病或带菌母鸡传给子代所引起的疾病。由于种鸡蛋传性疾病的蔓延,种鸡养殖企业普遍采用定期投喂有效抗菌药物的方法控制疾病的发生,但滥用药物,致使耐药菌株迅速增加。于是,人们把目光投放到抗茵多肽方面,这是由于抗菌多肽有着与青霉素等传统抗生素完全不同的作用机制,病原菌不易产生对这一大类抗微生物多肽的耐药性。\n 本研究主要探讨在鸡体内
输卵管
部位
定位
表达
抗菌多肽——蜂毒肽和鸡防御素9,使得抗菌多肽在鸡蛋形成过程中便开始抑制病原体的入侵,并一起组装入鸡蛋,使之存在于蛋清中,以期提高雏鸡的出生率及降低病菌在传代过程中的感染率。\n 本研究克隆了鸡卵清蛋白(Ovalbumin,ov)5’端调控序列1.1kb,将之取代载体pVAX1上的CMV启动子,并将蜂毒肽与鸡防御素9基因分别插入其下游,构建了
输卵管定位表达
抗菌多肽系统pOV1.1-MLT和pOV1.1-AvBD9。未替换启动子的载体也插入抗菌多肽基因,构建重组真核
表达
载体pVAXI-MLT和pVAXl-AvBD9。\n 将上述构建的多个重组载体分别转染CHO细胞和Vero细胞,经体外培养后,通过RT-PCR和免疫荧光检测,重组蛋白MLT和AvBD9在CHO细胞中均获得
表达
,在Vero细胞中只有非
定位
表达
载体获得
表达
,所得蛋白大小分别为MLT 5.36kD和AvBD9 5.24kD。将含
表达
产物的细胞浓缩上清液进行体外抑菌试验,结果表明MLT对大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌和金黄色葡萄球菌都有较高的抑制效果,AvBD9对金黄色葡萄球菌抑制较强,对大肠杆菌和鸡白痢沙门氏菌的抑制较弱。由ov序列驱动的
表达
比CMV驱动的
表达
水平略低。\n 为了能真实反映在鸡体内外源基因的
表达
以及被调控的状况,本研究采用脂质体包裹,经静脉注射的方法将重组质粒导入鸡体内,使
定位
表达
载体经血液到达
输卵管
组织,被
输卵管
细胞吸收后
表达
。在注射4天后宰杀鸡,取各内脏器官进行冰冻切片,并提取总RNA,经冰冻切片免疫荧光检测和RT-PCR检测,证明ov序列驱动的重组载体能在
输卵管
上皮细胞中
表达
,而在其他非
输卵管
组织,如肝、肾、肌肉、卵巢中都有
表达
,但与CMV驱动的
表达
量相比略低。\n 鸡卵清蛋白调控序列受固醇类激素的调节,因此在离体细胞中
表达
时,需要加入多种类固醇激素(如加入雌二醇、皮质酮和胰岛素),以提高
表达
水平。而在体内表(达,胸肌注射一定量的雌激素,也有利于
定位
表达
重组质粒的
表达
。\n 综上研究,鸡卵清蛋白调控的
输卵管定位表达
系统的建立,为深入研究防治蛋传性疾病,以及利用抗菌多肽开发新型DNA药物都有着重要的理论意义与实际应用价值。
关键词:
蛋传病
DNA药物
输卵管定位表达
蜂毒肽
鸡
输卵管
定位
表达
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抗菌多肽(蜂毒肽)的鸡
输卵管定位表达
及其抗菌活性研究
抗菌多肽(蜂毒肽)的鸡输卵管定位表达及其抗菌活性研究
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第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛
作者:
林崇韫
贺聪
陈峰
毕英佐
赵亚华
谢青梅
华南农业大学生命科学学院
华南农业大学动物科学学院
为实现外源抗菌多肽基因在鸡
输卵管
中的
表达
,抑制病原菌通过母鸡垂直传播给子代,本文克隆了鸡卵清蛋白(Ovalbumin,ov)5端的调控序列1.1kb,将之取代载体pVAX1的CMV启动子,并将蜂毒肽基因(melittin,MLT)插入其下游,构建了
输卵管
定位
...
详细信息
为实现外源抗菌多肽基因在鸡
输卵管
中的
表达
,抑制病原菌通过母鸡垂直传播给子代,本文克隆了鸡卵清蛋白(Ovalbumin,ov)5端的调控序列1.1kb,将之取代载体pVAX1的CMV启动子,并将蜂毒肽基因(melittin,MLT)插入其下游,构建了
输卵管定位表达
抗菌多肽重组载体pOV-MLT,将该重组质粒转染CHO细胞和导入鸡体内,皆成功检测到目的蛋白的
表达
,并显示出抗菌活性,实现了
输卵管定位表达
抗菌多肽基因。
关键词:
DNA药物
输卵管定位表达
抗菌多肽
蜂毒肽
来源:
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融合启动子调控下鸡IL-2基因cDNA
输卵管
组织特异性
表达
融合启动子调控下鸡IL-2基因cDNA输卵管组织特异性表达
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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会
作者:
李银聚
程相朝
张春杰
吴庭才
刘一尘
河南科技大学动物科技学院
将含有鸡卵清溶菌酶5′端激素受体结合位点的DNA片段和卵清蛋白基因5′端调控序列进行融合并与鸡IL-2基因cDNA以串联方式置于真核
表达
载体pcDNA3的CMV启动子下游,构建了鸡
输卵管定位表达
载体pcDNA3-LGP-OVP-IL2。将真核
表达
载体pcDNA3-...
详细信息
将含有鸡卵清溶菌酶5′端激素受体结合位点的DNA片段和卵清蛋白基因5′端调控序列进行融合并与鸡IL-2基因cDNA以串联方式置于真核
表达
载体pcDNA3的CMV启动子下游,构建了鸡
输卵管定位表达
载体pcDNA3-LGP-OVP-IL2。将真核
表达
载体pcDNA3-IL2和
输卵管定位表达
载体pcDNA3-OVP-IL2、pcDNA3-LGP-IL2及pcDNA3-LGP-OVP-IL2转染鸡
输卵管
上皮细胞,激素诱导64h后,以淋巴细胞转化试验来检测细胞培养液中IL-2的
表达
水平及生物学活性。结果显示,转染细胞均可
表达
IL-2,所
表达
的IL-2有促进T淋巴细胞转化和促进淋巴母细胞成熟的活性。转染pcDNA3-LGP-OVP-IL2和pcDNA3-OVP-IL2的
输卵管
上皮细胞
表达
产物在1:256稀释水平下仍具有促进T淋巴细胞转化和促进淋巴母细胞成熟的活性;在相同激素水平下,融合启动子的调控能力没有明显的提高;转染pcDNA3-LGP-IL2和pcDNA3-IL-2
输卵管
上皮细胞虽有IL-2的
表达
,但水平较低。
关键词:
鸡
融合启动子
IL-2基因cDNA
输卵管定位表达
激素
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鸡IL-2基因cDNA
输卵管
组织特异性
表达
载体的构建与
表达
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西北农林科技大学学报(自然科学版)
2005年 第10期33卷 71-74页
作者:
吴庭才
李银聚
张春杰
程相朝
河南科技大学动物科技学院
河南洛阳471003
将克隆并测序的鸡卵清蛋白基因5′端调控序列和鸡IL-2基因cDNA,以串联方式置于真核
表达
载体pcDNA3的CM V启动子下游,构建了鸡
输卵管定位表达
载体pcDNA3-OVP-IL 2。将真核
表达
载体pcDNA3-IL 2和构建的
输卵管定位表达
载体pcDNA3-OVP-IL 2...
详细信息
将克隆并测序的鸡卵清蛋白基因5′端调控序列和鸡IL-2基因cDNA,以串联方式置于真核
表达
载体pcDNA3的CM V启动子下游,构建了鸡
输卵管定位表达
载体pcDNA3-OVP-IL 2。将真核
表达
载体pcDNA3-IL 2和构建的
输卵管定位表达
载体pcDNA3-OVP-IL 2分别转染鸡
输卵管
上皮细胞,激素诱导72 h后,用淋巴细胞转化试验检测细胞培养液中IL-2的
表达
水平及生物学活性。结果显示,转染细胞均可
表达
IL-2,且所
表达
的IL-2有促进T淋巴细胞转化和淋巴母细胞成熟的活性;转染pcDNA3-OVP-IL 2的
输卵管
上皮细胞
表达
产物在1∶256稀释水平下仍具有促进T淋巴细胞转化和淋巴母细胞成熟的活性。转染pcDNA3-IL 2载体的
输卵管
上皮细胞虽有IL-2
表达
,但水平较低。
关键词:
鸡
IL-2基因cDNA
输卵管定位表达
转染
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