检索结果-内蒙古大学图书馆

东南大学学报（自然科学版） 2024年第3期54卷 789-798页

作者：谢浩高雨欣王楠韩俊海东南大学生命科学与技术学院南京210096

为了深刻理解神经示踪技术,综述了其演进历程、原理、应用及其在神经科学和其他领域中的应用价值和局限.首先,回顾了传统的神经示踪技术,以肽类标志物、传统染料等为例,分析了顺行和逆行标记2种方法.然后,介绍了用于示踪神经环路的病毒... 详细信息

为了深刻理解神经示踪技术,综述了其演进历程、原理、应用及其在神经科学和其他领域中的应用价值和局限.首先,回顾了传统的神经示踪技术,以肽类标志物、传统染料等为例,分析了顺行和逆行标记2种方法.然后,介绍了用于示踪神经环路的病毒工具的最新进展,包括狂犬病毒、伪狂犬病毒、单纯孢疹病毒、腺相关病毒等,揭示了其如何帮助理解大脑复杂的工作机制,探讨了其演化历史、类型以及在大脑科学和神经环路研究中的应用价值.最后,展望了神经环路示踪技术在脑连接组学、人类疾病研究和药物开发等领域的发展前景.这些技术的创新将有助于更深入地理解大脑的奥秘,改善神经健康,并应对神经相关疾病的挑战.

关键词：神经示踪技术神经科学病毒工具顺行标记逆行标记

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禽类海马结构直接投射于小脑各叶的神经元定位—辣根过氧化物酶（HRP）逆行追踪法研究

禽类海马结构直接投射于小脑各叶的神经元定位—辣根过氧化物酶（...

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作者：袁文菊河南农业大学

学位级别：硕士

本试验研究以粤禽黄鸡、成年鸽、仙湖白鸭为试验材料,采用HRP逆行追踪法,将50% HRP溶液分别注射青年鸡小脑Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ各叶,成年鸡、鸽、鸭同时注射小脑Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ三叶,逆行追踪直接投射于禽类小脑各叶的起始神经元。对端脑... 详细信息

本试验研究以粤禽黄鸡、成年鸽、仙湖白鸭为试验材料,采用HRP逆行追踪法,将50% HRP溶液分别注射青年鸡小脑Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ各叶,成年鸡、鸽、鸭同时注射小脑Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ三叶,逆行追踪直接投射于禽类小脑各叶的起始神经元。对端脑及间脑、脑干及小脑进行冰冻切片,TMB呈色,观察脑内标记细胞出现的位置。结果表明: (1)在青年鸡小脑分别注射Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ各叶,除第Ⅸ叶外,双侧端脑的海马结构的旁海马内侧区(APHm)出现大量标记细胞,海马(HP)、旁海马中间内侧区(APHim)、旁海马中间外侧区(APHil)、旁海马外侧区(APHl)以及后背外侧区(CDL)均无标记细胞出现。标记细胞集中而密度稍大,在APHm分布范围长约5～11㎜,海马被标记区域约占海马总长度的40%以上。横断面观,见标记细胞分布于一个较小的区域,集中而密度稍大。细胞以球形为主,以接近脑室面一侧标记渐浅,细胞内酶标物不完全充满细胞,多在核周呈半月状分布,标记细胞直径大小为18.78±2.79μm。 (2)在青年鸡小脑分别注射Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ叶,在隔核偶尔出现少量逆标细胞,主要见于外侧隔核的背侧部,标记较疏淡。标记细胞体积较小,细胞直径平均大小约12.84±1.54μm。 (3)在青年鸡随着注射点由Ⅳ叶到Ⅸ叶的后移,APHm出现标记细胞的可能性渐小。小脑前核群,包括延髓大细胞网状核、前庭降束核、下橄榄核、三叉下核、内外侧桥核、中脑的内侧螺旋核、被盖背侧核、豆状核等标记的可能性相应地增大。 (4)在成年鸡将HRP同时注射于Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ三叶,APHm和外侧隔核以及小脑前核群中的大细胞网状核、前庭降束核、下橄榄核、内外侧桥核、中脑的豆状核、内侧螺旋核等均出现标记细胞。 (5)在鸽将HRP同时注射于Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ三叶,在端脑内海马区无标记细胞出现,而外侧隔核有标记细胞出现,小脑前核群中的大细胞网状核、前庭降束核、下橄榄核、内外侧桥核、楔束外侧核、三叉神经脊束核、中脑的豆状核、内侧螺旋核等亦有标记细胞。 (6)在鸭将HRP同时注射于Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ三叶,在端脑内海马区和外侧隔核均无标记细胞出现,小脑前核群中的中脑的豆状核、内侧螺旋核等有标记细胞。用辣根过氧化物酶(HRP)逆行追踪法对直接投射于禽类小脑各叶的起始神经元进行定位研究,研究结果表明,在端脑,鸡存在海马向小脑的直接投射,这种投射主要终止于小脑的前叶、中叶;鸡和鸽存在隔核向小脑的直接投射。此外,在小脑前核群,对于几种实验动物均不同程度地有向小脑的直接投射,结果与前人对哺乳动物的研究相似。本研究结果还表明,在成年鸽和鸭端脑不存在海马向小脑的直接投射,关于该问题还有待于进一步深入研究。

关键词：海马结构端——小脑直接投射小脑前核群 HRP 逆行标记隔核禽

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大鼠视神经不同程度量化损伤模型的建立和评价

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中华创伤杂志 2004年第12期20卷 747-750页

作者：黄厚斌张卯年马志中解放军总医院眼科全军眼科中心北京100853 北京大学眼科中心

目的　建立一种标准化的大鼠视神经不同程度部分损伤动物模型 ,对致伤强度和损伤程度以及它们之间的关系进行量化分析。　方法　用压力为 1 4 8.0g的反向镊夹持大鼠视神经3,6 ,1 2 ,30 ,6 0s,或用压力为 32 .4g的微型动脉夹夹持大鼠视神... 详细信息

目的　建立一种标准化的大鼠视神经不同程度部分损伤动物模型 ,对致伤强度和损伤程度以及它们之间的关系进行量化分析。　方法　用压力为 1 4 8.0g的反向镊夹持大鼠视神经3,6 ,1 2 ,30 ,6 0s,或用压力为 32 .4g的微型动脉夹夹持大鼠视神经 5 ,1 0 ,1 5s,建立不同程度视神经损伤的动物模型 ,用经颅荧光金逆行标记视网膜节细胞 (retinalganglioncell,RGC)的方法 ,观察损伤后 1个月RGC的变化 ,以RGC数目的变化衡量损伤程度 ,并用坚牢蓝经心脏灌注的方法 ,评价该致伤模型中眼部血供的变化。　结果　用致伤冲量和平均冲量能全面地反映致伤强度 ,荧光金逆行标记RGC计数是衡量损伤程度的良好指标。微型动脉夹夹持大鼠视神经 1 5s与反向镊夹持3s的平均致伤冲量相等 ,引起的RGC数目的变化也相似。随着致伤强度的增加 ,RGC数目减少 ,RGC的数目与致伤冲量之间呈幂函数曲线关系。短时间的视神经夹持不会引起视网膜的缺血损伤。　结论　利用反向镊夹持的方法可以很简便地建立一种易于标准化的视神经部分损伤模型 ,该模型可以用冲量、平均冲量和RGC计数的方法来评价。

关键词： RGC 视神经大鼠荧光金逆行标记动脉动物模型冲量目的结论

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持续性疼痛中“应对反应”行为相关通路的确定

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中国疼痛医学杂志 2019年第7期25卷 481-482页

作者： Huang TW 陈丹南京中医药大学

动物和人类对伤害刺激表现出两种类型的反应,一种是"反射性防御反应(reflexive defensive re-sponses)",另一种是"应对反应(coping responses)";然而,产生这两种行为的神经通路却仍然不清楚.在该研究中,研究人员通... 详细信息

动物和人类对伤害刺激表现出两种类型的反应,一种是"反射性防御反应(reflexive defensive re-sponses)",另一种是"应对反应(coping responses)";然而,产生这两种行为的神经通路却仍然不清楚.在该研究中,研究人员通过基因消融、电生理、逆行标记、免疫染色、行为学测试等手段对小鼠两种行为反应神经通路进行了研究.结果表明:TAC1Cre和LBX1Flpo在脊髓共表达的神经元是疼痛相关反应所必需的,此类神经元的消融会导致引起持续性疼痛刺激(包括皮肤捏伤和烧伤)所诱发的"应对反应"行为丧失,但不影响任何"反射性防御反应".该研究揭示了皮肤体感系统中与"应对反应"相关的一个基本通路,并首次尝试使用"反射防御反应"来测量持续性疼痛的有效性,为疼痛医学的创新发展提供了新的依据和思路.

关键词：持续性疼痛防御反应神经通路行为反应行为学测试反射性研究人员逆行标记

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骨髓间充质干细胞对成年大鼠视网膜节细胞再生的影响

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解剖学杂志 2005年第3期28卷 252-254,272页

作者：项平黄锦桃李海标蚌埠医学院附属医院中心实验室蚌埠233004 中山大学中山医学院组织学与胚胎学教研室

目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)对受损成年大鼠视网膜节细胞(RGCs)轴突再生的影响。方法:切断大鼠视神经,缝接自体坐骨神经(AG)。动物分对照组、AG+MSCs组、AG+MSCs+tPNS(三七总皂苷)组。各组动物存活3、4周,用粒蓝逆行标记再生的RGCs... 详细信息

目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)对受损成年大鼠视网膜节细胞(RGCs)轴突再生的影响。方法:切断大鼠视神经,缝接自体坐骨神经(AG)。动物分对照组、AG+MSCs组、AG+MSCs+tPNS(三七总皂苷)组。各组动物存活3、4周,用粒蓝逆行标记再生的RGCs,荧光镜下观察视网膜平铺片中再生RGCs的数量变化。免疫组化检测MSCs在玻璃体内的分化。结果:动物存活3、4周,再生的RGCs数目实验组与对照组有显著性差异。AG+MSC组和AG+MSCs+tPNS组,存活的细胞表达Vimentin、NF和GFAP,Laminin无表达。结论:玻璃体植入MSCs可促进受损伤的视网膜节细胞轴突再生。

关键词：骨髓间充质干细胞视网膜节细胞再生成年大鼠 Vimentin Laminin RGCs 免疫组化检测轴突再生 MSCs 三七总皂苷显著性差异玻璃体植入坐骨神经逆行标记数量变化镜下观察玻璃体内细胞表达 GFAP 对照组视神经动物

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经颈上节传递心脏痛感觉信息的迷走神经传入通路

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解剖学报 2002年第2期33卷 140-143页

作者：张文斌熊抗辉张宇飞马文领第四军医大学解剖学教研室梁銶琚脑研究中心西安710032

目的　观察经颈上节至结状节传递心脏感觉信息的迷走神经传入通路。　方法　逆行追踪及逆行追踪结合免疫组织化学方法。　结果　HRP注射入颈上节后 ,逆行标记的一小团细胞恒定地出现在结状节上段 ,其数量较少且分布局限。将荧光金 (fluo... 详细信息

目的　观察经颈上节至结状节传递心脏感觉信息的迷走神经传入通路。　方法　逆行追踪及逆行追踪结合免疫组织化学方法。　结果　HRP注射入颈上节后 ,逆行标记的一小团细胞恒定地出现在结状节上段 ,其数量较少且分布局限。将荧光金 (fluorogold ,FG)注射入颈上节后并结合免疫荧光组织化学染色 ,观察到结状节内约 18 5 %的SP阳性标记细胞同时呈阳性FG逆行标记。　结论　结合以往文献 ,研究结果提示。

关键词：颈上节结状节 P物质内脏传入逆行标记心脏迷走神经传入通路动物实验痛感觉信息

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鲤鱼脊髓的上行通路与脑至脊髓的下降通路

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解剖学杂志 1992年第5期15卷 363-365页

作者：徐玉东钟淑琦徐晓春房伟男哈尔滨医科大学解剖教研室组胚教研室哈尔滨150086

应用赖氨酸钴复合物顺行、逆行标记方法,分别研究了鲤鱼脊髓上升的和下降至脊髓的纤维联系。把赖氮酸钴复合物注入脊髓第1——3节段,然后分别观察标记纤维与标记细胞。标记纤维主要在三叉神经脊剩束、网状结构、迷走神经运动核和半圆隆... 详细信息

应用赖氨酸钴复合物顺行、逆行标记方法,分别研究了鲤鱼脊髓上升的和下降至脊髓的纤维联系。把赖氮酸钴复合物注入脊髓第1——3节段,然后分别观察标记纤维与标记细胞。标记纤维主要在三叉神经脊剩束、网状结构、迷走神经运动核和半圆隆起。发现标记细胞主要于脊髓的前角和后角、脑的迷走神经运动核、网状结构和内耳侧线区等部位。本文与其他鱼类、其他脊椎动物及哺乳类动物进行了比较。

关键词：脊髓顺行标记逆行标记

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适用于非人灵长类神经环路标记的工具病毒开发及特性比较

适用于非人灵长类神经环路标记的工具病毒开发及特性比较

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作者：朱续涛中国科学院大学

学位级别：博士

非人灵长类(non-human primates，NHP)是指除人以外的灵长类动物，由于其具有许多与人类相似的生物学特性，因此是基础研究、药物研发和筛选、药效评估等过程中很重要的实验模式动物。研究非人灵长类神经环路是理解大脑工作机制，治疗... 详细信息

非人灵长类(non-human primates，NHP)是指除人以外的灵长类动物，由于其具有许多与人类相似的生物学特性，因此是基础研究、药物研发和筛选、药效评估等过程中很重要的实验模式动物。研究非人灵长类神经环路是理解大脑工作机制，治疗精神疾病，模拟大脑功能以及优化人工智能等工作的基础。嗜神经工具病毒(neurotropic virus)是研究神经环路非常有效的方法之一。但是目前用于研究神经环路的工具病毒主要应用在啮齿类动物上，在非人灵长类动物上的应用有限。同时它们多样的标记属性在非人灵长类上是否适用也不得而知。因此，本文主要针对适用于标记非人灵长类神经环路的工具病毒开展了以下工作:　　1)基于塞姆利基森林病毒(Semliki forest Virus，SFV)可高效感染灵长类神经系统的事实，我们开发出了能够原位可视化标记非人灵长类神经细胞的SFV系统。利用分子生物学的手段对复制缺陷型SFV病毒E3蛋白上的三个精氨酸进行突变，得到突变型（Mutant）的SFV-VLP-M-EGFP。同时用α胰凝乳蛋白酶对SFV-VLP-M-EGFP进行处理可以恢复其感染性并得到SFV-VLP-W-EGFP。在体研究结果表明，利用SFV-VLP-M-EGFP和SFV-VLP-W-EGFP可以快速、高亮地标记小鼠和猕猴的神经元。同时在优化标记条件后，利用SFV-VLP-M-EGFP可以标记小鼠及猕猴神经元的精细形态。此外，利用免疫组化染色对被病毒感染的神经元进行细胞类型鉴定，结果显示SFV-VLP-M-EGFP可以标记猕猴大脑皮层兴奋性神经元。这些结果显示，SFV病毒系统可以用来标记非人灵长类神经环路。　　2)本文系统比较了两种常用的可逆行标记投射神经网络的工具病毒rAAV2-retro及RV在小鼠中的感染特性，挑选出其中更优的工具病毒用于非人灵长类神经网络的逆行标记。首先，利用狂犬病毒(rabies virus，RABV)SAD毒株及另一攻击型毒株(Challenge Virus Strain，CVS)的糖蛋白(glycoprotein，G)分别包装G基因缺陷型的SAD-RV病毒，可分别获得SAD-RV-B19(G)及SAD-RV-N2C(G)假病毒载体。将这两种病毒分别注射C57小鼠特定脑区，结果显示SAD-RV-N2C(G)相比于SAD-RV-B19(G)有更高的逆行标记效率。随后，SAD-RV-B19(G)与另一种常用的、高滴度的能够逆行标记长程投射神经元的rAAV2-retro病毒分别被注射到小鼠的不同脑区进行比较，结果显示，SAD-RV-N2C(G)与rAAV2-retro具有相似的逆行标记效率，但前者具有更局限的病毒扩散范围和对于不同区域和不同类型长程投射神经元更广谱的神经嗜性。基于上述结果，本文进一步将SAD-RV-N2C(G)注射在猕猴大脑顶叶(Parietal lobe)，结果显示，SAD-RV-N2C(G)可以高效逆行地标记猕猴的长程投射神经网络。

关键词：医用实验动物神经环路工具病毒逆行标记

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视网膜神经节细胞标记方法的研究进展

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国际眼科杂志 2012年第6期12卷 1091-1093页

作者：林俊朱益华福建医科大学附属第一医院眼科中国福建省福州市350005

目前对视网膜神经节细胞(RGCs)进行标记研究的基本方法有多种。逆行标记法是标记研究RGCs的常用方法,但存在许多不足之处。近年来,人们发现RGCs内或胞体上存在某些特异的抗原,因此尝试使用免疫标记的方法标记检测RGCs。本文综述近年来对... 详细信息

目前对视网膜神经节细胞(RGCs)进行标记研究的基本方法有多种。逆行标记法是标记研究RGCs的常用方法,但存在许多不足之处。近年来,人们发现RGCs内或胞体上存在某些特异的抗原,因此尝试使用免疫标记的方法标记检测RGCs。本文综述近年来对RGCs进行标记的研究进展。

关键词：视网膜神经节细胞逆行标记免疫标记

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血府逐瘀汤对外伤性视神经病变神经节细胞作用的实验研究

血府逐瘀汤对外伤性视神经病变神经节细胞作用的实验研究

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作者：崔红培中国中医科学院

学位级别：博士

目的建立外伤性视神经病变(traumatic optic neuropathies,TON)大鼠模型,从视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)存活状态、组织形态学、轴突修复影响因素三个方面观察血府逐瘀汤及其拆方对TON大鼠RGCs的影响,探讨其部分作用... 详细信息

目的建立外伤性视神经病变(traumatic optic neuropathies,TON)大鼠模型,从视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)存活状态、组织形态学、轴突修复影响因素三个方面观察血府逐瘀汤及其拆方对TON大鼠RGCs的影响,探讨其部分作用机制,为临床用药提供客观依据和指导。方法 1.以钳夹伤大鼠视神经为TON动物模型,观察血府逐瘀汤及其拆方对大鼠RGCs存活状态的影响,计算存活率,筛选血府逐瘀汤最佳组方。 2.采用组织病理学技术观察血府逐瘀汤最佳组方干预后3天、1周、2周、4周,钳夹伤大鼠视网膜厚度和视神经超微结构变化。 3.采用免疫组织化学方法观察药物干预后3天、1周、2周、4周,生长相关蛋白GAP-43(growth associated protein 43,GAP-43)、Rho激酶(rho-associated coiled-coilforming protein kinase,ROCKⅡ)在钳夹伤大鼠视网膜、视神经组织中的表达情况。视网膜表达强度以平均光密度(average optical density,AOD)表示,视神经表达强度以积分光密度(integrated optical density,IOD)表示。结果 1.血府逐瘀汤对TON大鼠RGCs存活率的影响各组RGCs平均存活率分别为:蒸馏水组62.84%±10.96%;灯盏细辛组75.76%±8.87%;血府逐瘀汤全方组89.18%±10.59%;血府逐瘀汤活血组69.68%±5.26%;血府逐瘀汤理气组66.95%±9.12%。血府逐瘀汤全方组RGCs存活率明显高于其它各组(P<0.01),血府逐瘀汤全方为最佳方药。 2.血府逐瘀汤对TON大鼠视网膜视神经组织形态学的影响 (1)视网膜厚度 ①3天视网膜内层(retinal length,RL)、神经纤维层(nerve fiber layer,NFL)、节细胞层(ganglion cell layer,GCL)、内丛状层(inner plexiform layer,IPL)和内核层(inner nuclearlayer,INL):各组均增加,组间同层比较没有显著性差异(P>0.05)。 ②1周 RL和IPL:各组继续增加,组问同层比较没有显著性差异(P>0.05);NFL:各组轻度降低,组间同层比较没有显著性差异(P>0.05);GCL:治疗组和阳性对照组降低,模型组增加,治疗组明显低于模型组(P<0.05);INL:各组轻度增加,治疗组明显低于模型组(P<0.05)。 ③2周 RL、IPL和INL:各组继续增加,组间同层比较没有显著性差异(P>0.05);NFL:各组均降低,组间没有显著性差异(P>0.05);GCL:各组均增加,阳性对照组低于模型组(P<0.05),治疗组和模型组没有显著性差异(P>0.05)。 ④4周 RL、NFL和INL:各组明显降低,组间同层比较没有显著性差异(P>0.05);GCL:各组厚度降低,治疗组和阳性对照组均高于模型组(P<0.05);IPL:各组明显降低,治疗组高于模型组、阳性对照组(P<0.05)。 (2)视神经超微结构 ①3天:模型组、治疗组均可见髓鞘板层分离、崩解,轴膜回缩,或外凸卷曲;轴突数目减少,部分轴突崩解呈空泡状,或退变形似蜂窝状;微丝微管数目明显减少,线粒体肿胀,嵴间隙增宽,嵴模糊不清,或完全崩解、消失。 ②1周:模型组、治疗组均可见髓鞘板层分离范围进一步扩大,结构疏松,部分向内、外突起,泡状解离,出现大量崩解产物;部分神经纤维塌陷形成“洋葱样”小体;微丝微管数目进一步减少,排列紊乱,线粒体肿胀,数目减少。 ③2周:模型组、治疗组上述改变继续加重,髓鞘呈薄膜样结构,泡状解离,巨噬细胞内见含有大量髓鞘碎片的吞噬泡;部分轴突空虚透明;微丝微管数目继续减少,线粒体溶解消失。胶质细胞增生明显,核质浓缩成块,胞质更为疏松,大部分线粒体溶解消失,存在大量吞噬了髓鞘碎屑的溶酶体。 ④4周:模型组髓鞘板层结构有所修复,比正常明显变薄,结构疏松;部分轴突恢复,少量变性消失;微管、微丝及线粒体数目有所增多,但较正常减少,线粒体结构模糊。胶质细胞形态不规则,胞核呈不规则形,染色质固缩成块,胞质内线粒体增多,可见大量胶质纤维。治疗组髓鞘板层结构明显修复,较模型组增厚、致密;大量轴突逐渐恢复,电子密度增高;微管、微丝数目明显较模型组增多,分布均匀,线粒体结构清晰。胶质细胞形态基本正常,胞核呈

关键词：血府逐瘀汤外伤性视神经病变视网膜神经节细胞逆行标记 FG GAP-43 ROCKⅡ

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