检索结果-内蒙古大学图书馆

病毒学报 2002年第1期18卷 71-73页

作者：侯义龙张开春胡文玉吴禄平林珂尹淑萍大连大学生物工程学院北京市林业果树研究所沈阳农业大学

为调查主要果树携带苹果褪绿叶斑病毒 (ACLSV)、苹果茎沟病毒 (ASGV)、苹果茎痘病毒 (ASPV)和李属坏死环斑病毒 (PNRSV)的情况 ,以指示植物为试材 ,优化了四种病毒的逆转录 -聚合酶链式反应 (RT—PCR)检测体系。使用该优化体系检测了苹... 详细信息

为调查主要果树携带苹果褪绿叶斑病毒 (ACLSV)、苹果茎沟病毒 (ASGV)、苹果茎痘病毒 (ASPV)和李属坏死环斑病毒 (PNRSV)的情况 ,以指示植物为试材 ,优化了四种病毒的逆转录 -聚合酶链式反应 (RT—PCR)检测体系。使用该优化体系检测了苹果树、樱桃树、桃树中携带上述四种病毒的情况。结果 :建立了特异性强、灵敏度高、成本低的RT—PCR检测体系 ;同时又证明主要果树被这几种病毒单独感染和复合感染的程度均较高。

关键词：逆转录-聚合酶链式反应优化果树病毒检测 RNA病毒

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逆转录—聚合酶链式反应技术检测“歇马杏”李矮缩病毒

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广西植物 2006年第6期26卷 626-627页

作者：侯义龙于亚军张立娟赵洋于大永大连大学生命科学多功能工作室辽宁大连116622 大连大学生物工程学院辽宁大连116622

为选择不携带主要病毒的植株,利用作者已建立的PDVRT-PCR检测体系对辽宁省大连市地方特产“歇马杏”田间植株携带PDV的情况进行了调查,结果表明,被检植株PDV的感染率达90%,但程度不同。

关键词：逆转录-聚合酶链式反应 PDV 检测

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逆转录—聚合酶链式反应技术检测“歇马杏”主要病毒

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生物技术 2005年第6期15卷 42-43页

作者：侯义龙大连大学生物工程学院辽宁大连116622

目的:调查“歇马杏”携带主要病毒的情况。方法:利用作者已建立的ACLSV、PNRSV和PDV RT-PCR检测体系对辽宁省大连市地方特产“歇马杏”田间植株携带三种病毒的情况进行了调查。结果:被检植株ACLSV、PNRSV和PDV的单独感染率分别为83.33%... 详细信息

目的:调查“歇马杏”携带主要病毒的情况。方法:利用作者已建立的ACLSV、PNRSV和PDV RT-PCR检测体系对辽宁省大连市地方特产“歇马杏”田间植株携带三种病毒的情况进行了调查。结果:被检植株ACLSV、PNRSV和PDV的单独感染率分别为83.33%、83.33%和90%,复合感染率达到76.67%,但带毒程度不同。

关键词：逆转录-聚合酶链式反应苹果绿叶斑病毒李属坏死环斑病毒李矮缩病毒检测

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逆转录-聚合酶链式反应检测大肠癌患者淋巴结微转换

逆转录-聚合酶链式反应检测大肠癌患者淋巴结微转换

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2000全国肿瘤学术大会

作者：刘忠民叶欣毕维民王明玉李毅刘君陈廷武山东省泰安市中心医院山东省泰安市中心医院山东省泰安市中心医院山东省泰安市中心医院山东省泰安市中心医院山东省泰安市中心医院山东省泰安市中心医院

目的:探讨大肠癌患者淋巴结的微转换及其临床意义．方法:采用苏木素-伊红（HE）病理切片染色和细胞角蛋白20（CK20）的 RT-PCR 法检测了经病理证实的39例大肠癌患者的260枚淋巴结的肿瘤转换情况。10枚正常淋巴结为阴性对照,HT29结肠癌... 详细信息

目的:探讨大肠癌患者淋巴结的微转换及其临床意义．方法:采用苏木素-伊红（HE）病理切片染色和细胞角蛋白20（CK20）的 RT-PCR 法检测了经病理证实的39例大肠癌患者的260枚淋巴结的肿瘤转换情况。10枚正常淋巴结为阴性对照,HT29结肠癌细胞和5 例大肠癌标本为阳性对照。结果:10枚正常淋巴结 CK20表达阴性, HT29细胞和大肠癌标本 CK20表达阳性。HE 染色查见转换的16例患者的29枚淋巴结 CK20mPNA 全部阳性,而在组织学未查见转换的淋巴结中,有5例患者的28枚呈 CK20阳性表达,即存在癌转换,显示两种方法的检则结果差异显著（11.1%和21.9%,p＜0.01）．按照 HE 染色结果,DukesA、B、C 和 D 期的病例数分别为3、20、12和4例, 在20例 Dukes B 期患者中,5例有 CK20表达阳性的淋巴结．结论: CK20的 PT-PCR 检测是发现肿瘤淋巴结微转换的敏感、特异和简便的方法。大肠癌患者淋巴结 CK20 mPNA 的检测可用于大肠癌的准确分期和围手术期辅助治疗方案的选择,但需进一步研究加以证实．

关键词：结直肠肿瘤肿瘤转换淋巴结角蛋白逆转录-聚合酶链式反应

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Detection of occult metastases in lymph nodes from patients with colorectal carcinoma by reverse transcriptase-polymerase chain reaction

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Chinese Medical Journal 2002年第4期115卷 529-531页

作者：刘忠民毕维民王明玉陈廷武叶欣李毅山东省泰安市中心医院泰山医学院第一教学医院普外科泰安271000 山东省泰安市中心医院泰山医学院第一教学医院中心实验室泰安271000

目的探讨大肠癌患者淋巴结的微转移及其临床意义.方法采用苏木素-伊红(HE)病理切片染色和细胞角蛋白20(CK20)的RT-PCR 法检测了经病理证实的39例大肠癌患者的260枚淋巴结的肿瘤转移情况.10 枚正常淋巴结为阴性对照,HT29结肠癌细胞和5例... 详细信息

目的探讨大肠癌患者淋巴结的微转移及其临床意义.方法采用苏木素-伊红(HE)病理切片染色和细胞角蛋白20(CK20)的RT-PCR 法检测了经病理证实的39例大肠癌患者的260枚淋巴结的肿瘤转移情况.10 枚正常淋巴结为阴性对照,HT29结肠癌细胞和5例大肠癌标本为阳性对照.结果 10枚正常淋巴结CK20表达阴性,HT29细胞和大肠癌标本CK20表达阳性.HE 染色查见转移的1 6例患者的29枚淋巴结CK20 mRNA全部阳性,而在组织学未见转移的淋巴结中,有5例患者的28枚呈CK20阳性表达,即存在癌转移,显示两种方法的检测结果差异显著(11.1%和21.9 %,P<0.01).按照HE染色结果,Dukes' A、B、 C和D期的病例数分别为3、20、12和4 例,在20例Dukes' B期患者中,5例有CK20表达阳性的淋巴结.结论 CK20的RT-PCR检测是发现肿瘤淋巴结微转移的敏感、特异和简便的方法.大肠癌患者淋巴结CK20 mRNA 的检测可用于大肠癌的准确分期和围手术期辅助治疗方案的选择,但需进一步研究加以证实.

关键词：大肠癌结直肠肿瘤肿瘤转移淋巴结角蛋白逆转录-聚合酶链式反应

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EMA RT-PCR法检测鸡肉中鼠伤寒沙门氏菌活菌

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中国食品学报 2015年第10期15卷 179-184页

作者：颜成英汤晓艳康大成李朋颖龚艳中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所农业部农产品质量安全重点实验室北京100081 南京农业大学教育部肉品加工与质量控制重点实验室南京210095

目的:叠氮溴乙锭(Ethidium monoazide bromide,EMA)具有特异性抑制死菌DNAPCR扩增而对活菌细胞无影响的特点,将其应用于鸡肉中鼠伤寒沙门氏菌活菌检测。方法:待测样品中加入EMA至终质量浓度为50μg/m L,卤素灯曝光处理10 min,提取DNA进... 详细信息

目的:叠氮溴乙锭(Ethidium monoazide bromide,EMA)具有特异性抑制死菌DNAPCR扩增而对活菌细胞无影响的特点,将其应用于鸡肉中鼠伤寒沙门氏菌活菌检测。方法:待测样品中加入EMA至终质量浓度为50μg/m L,卤素灯曝光处理10 min,提取DNA进行RT-PCR反应,根据Ct值和标准曲线计算样品中活菌的数量。结果:相同细胞浓度条件下,活菌经EMA处理后其Ct值与未经EMA处理组的Ct值无显著性差异(P>0.05),且细胞浓度与Ct值均呈显著负相关性,相关系数分别是0.9916和0.9832;死菌经EMA处理后其Ct值与活菌经EMA处理后的Ct值有显著性差异(P﹤0.05),而与阴性对照组无显著性差异(P>0.05);死/活鼠伤寒沙门氏菌混合菌液污染鸡肉样品检测结果显示,与直接RT-PCR方法相比,EMART-PCR方法的检测结果更接近于平板计数结果。结论:EMA与RT-PCR相结合的方法可以快速、准确地检测鸡肉中鼠伤寒沙门氏菌活菌的数量,避免假阳性结果,具有实用意义。

关键词：叠氮溴乙锭逆转录-聚合酶链式反应鼠伤寒沙门氏菌鸡肉

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肠缺血/再灌注损伤对leptin及orexin-A水平的影响

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南方医科大学学报 2006年第6期26卷 719-724页

作者：林季颜光涛高晓宁廖杰郝秀华张凯解放军总医院生化研究室北京100853 解放军总医院小儿内科北京100853 解放军总医院医学实验测试中心北京100853

目的研究肠缺血/再灌注(I/R)损伤对外周血及中枢分泌组织leptin及orexin-A水平的影响,探讨leptin及orexin-A在急性炎症反应中的作用。方法建立大鼠肠I/R损伤模型,设立缺血60min后不同时间的再灌注损伤组。采用放射免疫分析法测量血清及... 详细信息

目的研究肠缺血/再灌注(I/R)损伤对外周血及中枢分泌组织leptin及orexin-A水平的影响,探讨leptin及orexin-A在急性炎症反应中的作用。方法建立大鼠肠I/R损伤模型,设立缺血60min后不同时间的再灌注损伤组。采用放射免疫分析法测量血清及脂肪组织leptin、血浆及下丘脑orexin-A蛋白水平的变化,并用逆转录-聚合酶链式反应法检测脂肪组织leptin、下丘脑orexin-AmRNA表达水平的变化。结果与损伤前自身对照相比,缺血60min/再灌注30min组(I60'R30')血清leptin显著降低,I60'R360'组显著增高。与损伤后假手术组(sham)相比,I60'R360'组血清Leptin水平显著增高。与损伤后sham组相比,I60'R30'、I60'R90'组脂肪leptin蛋白水平显著降低,I60'R360'组显著增高。与损伤后Sham组相比,I60'R30'、I60'R240'、I60'R360'组脂肪leptinmRNA表达显著增高,I60'R150'组显著降低。各组损伤前、后的血浆及下丘脑orexin-A蛋白水平无显著性差异。与损伤后sham组相比,I60'R30'、I60'R90'组下丘脑orexin-AmRNA表达逐步降低,I60'R150'组最低,I60'R240'、I60'R360'组逐步回升但仍低于sham组。结论Leptin及orexin-A对肠I/R损伤的应答具有时间依赖效应,leptin比orexin-A的应答较迅速,两者可能在急性炎症反应的能量代谢障碍中发挥一定的作用。

关键词：缺血肠再灌注损伤 leptin orexin-A 脂肪下丘脑放射免疫分析逆转录-聚合酶链式反应

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应激性高血压大鼠脑干及下丘脑-垂体-肾上腺轴中肾上腺髓质素及其受体mRNA表达的改变(英文)

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生理学报 2004年第6期56卷 723-729页

作者：李霞李良沈霖霖钱源曹银祥朱大年复旦大学上海医学院生理与病理生理教研室上海200032

采用逆转录- 聚合酶链式反应检测了慢性足底电击结合噪声应激致高血压大鼠下丘脑、延髓、中脑、垂体和肾上腺等组织中编码肾上腺髓质素的肾上腺髓质素前肽原(preproadrenomedullin, ppADM) 基因以及ADM 的特异性受体组件降钙素受体样受... 详细信息

采用逆转录- 聚合酶链式反应检测了慢性足底电击结合噪声应激致高血压大鼠下丘脑、延髓、中脑、垂体和肾上腺等组织中编码肾上腺髓质素的肾上腺髓质素前肽原(preproadrenomedullin, ppADM) 基因以及ADM 的特异性受体组件降钙素受体样受体(calcitonin-receptor-like receptor,CRLR)和受体活性调节蛋白2 和3(receptor-activity-modifying proteins, RAMP2 和RAMP3)表达的变化。我们观察到:与对照组相比,以 3- 磷酸甘油醛脱氢酶作为内参照,15 d 足底电击结合噪声应激引起下丘脑、垂体和肾上腺中ppADM mRNA表达上调,而在延髓和中脑表达明显下调(P<0.01 或 P<0.05); CRLR基因表达量正常时在下丘脑相对较高,应激15 d 后CRLR 表达在延髓、中脑和下丘脑下调(P<0.01 或 P<0.05), 而在垂体和肾上腺的表达无明显变化;应激后RAMP2 基因在延髓和下丘脑表达上调,而在肾上腺表达显著下调(P <0.01), 其他部位无明显变化;RAMP3 基因在对照组大鼠的中脑和下丘脑表达较高,在应激性高血压大鼠的下丘脑和垂体表达上调(P<0.01 或P<0.05), 而在中脑和肾上腺表达下调(P<0.05), 在延髓中的表达变化无统计学差异。上述结果提示:慢性足底电击结合噪声应激引起明显的中枢和下丘脑- 垂体-肾上腺轴ADM 及其受体组件CRLR/RAMP2

关键词：肾上腺髓质素受体脑干下丘脑-垂体一肾上腺轴逆转录-聚合酶链式反应应激高血压大鼠

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甲状腺功能减退大鼠脑海马组织T_3核受体基因表达

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中国地方病学杂志 2005年第3期24卷 262-263页

作者：方邦江周爽张荣华上海中医药大学附属龙华医院实验中心 200032 上海中医药大学第三军医大学

目的了解甲状腺功能减退(简称甲减)大鼠海马组织T3核受体(T3NR)α、β亚型mRNA的特异性变化,探讨甲状腺激素对脑发育及功能调控的分子机制。方法采用丙基硫氧嘧啶(PTU)腹腔注射诱发甲减动物模型,运用RT-PCR检测技术测定实验性甲减大鼠... 详细信息

目的了解甲状腺功能减退(简称甲减)大鼠海马组织T3核受体(T3NR)α、β亚型mRNA的特异性变化,探讨甲状腺激素对脑发育及功能调控的分子机制。方法采用丙基硫氧嘧啶(PTU)腹腔注射诱发甲减动物模型,运用RT-PCR检测技术测定实验性甲减大鼠脑海马组织T3NRα1mRNA、T3NRβ1mRNA的表达水平。结果甲减大鼠海马组织T3NRα1mRNA、T3NRβ1mRNA的表达水平明显下调,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论甲减时脑组织T3NRα、β亚型mRNA的表达水平下调,T3NR的合成减少,导致甲状腺激素的生物效应的降低,可能是甲减性脑损害发生的重要病理机制之一。

关键词：甲状腺功能减退 T3核受体 mRNA 逆转录-聚合酶链式反应大鼠海马组织基因表达

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半定量RT-PCR检测钙调磷酸酶抑制剂对IL-2，IL-4，IFN-γmRNA表达的影响

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中国药学杂志 2008年第4期43卷 248-252页

作者：吴悦赵莉向青徐波杨志豪张相林中日友好医院药学部中日友好临床医学研究所生化室北京100029 中日友好医院泌尿外科北京100029

目的利用半定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,测定细胞因子白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)mRNA表达水平,研究其在肾移植患者术后,钙调磷酸酶抑制剂治疗的疗效评价中的应用。方法取肾移植后患者外周... 详细信息

目的利用半定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,测定细胞因子白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)mRNA表达水平,研究其在肾移植患者术后,钙调磷酸酶抑制剂治疗的疗效评价中的应用。方法取肾移植后患者外周血分离淋巴细胞,提取总RNA,进行RT-PCR反应,通过光密度扫描进行半定量分析;结合治疗药物监测结果分析。结果他克莫司(FK506)组3种细胞因子表达显著低于环孢素(CsA)组,且离散程度小。血药浓度谷值(ρ0)与细胞因子表达相关性不强。CsA组3种细胞因子之间的相关性比FK506组好。尿蛋白阳性的患者较阴性患者血清肌酐(Cr)显著升高,且IL-4表达显著升高。结论钙调磷酸酶抑制剂的个体敏感性差异很大。IL-2,IL-4,IFN-γmRNA的表达可以作为血药浓度的重要补充,为个体化给药提供依据。

关键词：钙调磷酸酶抑制剂肾移植白细胞介素-2 白细胞介素-4 干扰素-γ 逆转录-聚合酶链式反应

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