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第三军医大学学报 2009年第19期31卷 1887-1889页

作者：姜珂覃容欣朱仝飞周红郑江第三军医大学西南医院综合实验研究中心重庆400038 第三军医大学医学检验系暨药学院药理学教研室重庆400038

目的研究山楂提取物与β-内酰胺类抗生素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)的体外联合抗菌作用。方法干燥山楂去核切片75%乙醇提取,依次经乙酸乙酯、正丁醇萃取,取正丁醇层经D-101大孔树... 详细信息

目的研究山楂提取物与β-内酰胺类抗生素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)的体外联合抗菌作用。方法干燥山楂去核切片75%乙醇提取,依次经乙酸乙酯、正丁醇萃取,取正丁醇层经D-101大孔树脂、硅胶柱色谱分离得到组分CP,体外药敏试验验证其联合4种β-内酰胺类抗生素(苯唑西林、舒氨西林、氨苄西林、头孢唑啉)抑制MRSA的作用。结果单独应用苯唑西林、舒氨西林、氨苄西林、头孢唑啉及组分CP对实验株MRSA的最低抑菌浓度(MIC)分别为256、512、512、128、1024μg/ml;联合用药时,亚MIC浓度的组分CP(128μg/ml)使苯唑西林、舒氨西林、氨苄西林、头孢唑啉MIC分别降低至2、32、16、2μg/ml,部分抑菌指数(FIC)分别为0.13、0.16、0.19、0.14,均小于0.5。结论山楂活性组分CP与β-内酰胺类抗生素具有显著的体外协同抑制MRSA的作用。

关键词：山楂 β-内酰胺类抗生素最低抑菌浓度部分抑菌指数耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

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山楂活性组份CP联合β-内酰胺类抗生素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抗菌作用

山楂活性组份CP联合β-内酰胺类抗生素对耐甲氧西林金黄色葡萄球...

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作者：姜珂第三军医大学

学位级别：硕士

背景耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)是医院感染的重要病原菌,也是引起烧伤、严重创伤后感染的最常见致病菌之一。在金黄色葡萄球菌感染中,MRSA所致的医院感染越来越流行,尤其在ICU、和... 详细信息

背景耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)是医院感染的重要病原菌,也是引起烧伤、严重创伤后感染的最常见致病菌之一。在金黄色葡萄球菌感染中,MRSA所致的医院感染越来越流行,尤其在ICU、和烧伤病房等，MRSA的检出率都有明显增高的趋势,最高可达90%以上,成为临床亟待解决的难题。 MRSA的耐药机制主要与其大量表达PBP2a蛋白有关,该蛋白由668个氨基酸组成,分子量为76.1 kDa,其C-末端功能域(327-668 aa),具有转肽酶(TPase)功能,能有效促进细菌细胞壁的合成与修复,且活性不受β-内酰胺类抗生素的抑制,从而表现出耐药性。寻找能够消解MRSA的耐药性来控制其感染的措施具有重要的临床意义。目的本研究旨在以MRSA主要耐药蛋白PBP2a为靶点,应用生物传感器技术及体外药敏实验,筛选出具有通过拮抗PBP2a活性而增强β-内酰胺类抗生素抗菌作用的中药,并对其进行分离纯化,以期得到具有联合抗菌生物活性的组份或单体化合物。方法 1.以PBP2a C-末端功能域(327-668 aa)为靶点,利用生物传感器技术筛选与PBP2a具有特异性结合力的中药;2.通过体外药敏实验,筛选具有联合β-内酰胺类抗生素-苯唑西林发挥协同抗菌作用的中药;3.对于筛选到的药物,以联合苯唑西林的抗菌活性为追踪,进行成分的分离纯化,制备活性组份或活性单体化合物;4.通过体外药敏实验,评价分离制备的活性组份或单体化合物与多种β-内酰胺类抗生素的联合抗菌活性。结果 1.在对78种中药进行PBP2a C-末端的生物传感器结合实验中,我们发现雷公藤、山楂、鱼腥草、赤芍、侧柏叶、黄连、藏青果、石榴皮、大黄等9种中药具有高于200RU的PBP2a C-末端特异性结合力;2.体外药敏实验证实,在78种中药中,山楂、石榴皮、丁香、儿茶等4种与苯唑西林的部分抑菌指数值(FIC)小于1,具有联合抑菌作用。在这4种药物中,山楂与PBP2a的特异结合值最高,为365.22RU。因此,将山楂为作为下步研究对象,进行活性成分的分离提取。 3.对山楂进行75%乙醇水提取,经萃取、大孔树脂柱色谱、硅胶柱色谱进行成分分离,获得具有明显增强苯唑西林抗MRSA活性的组份CP;4.通过与苯唑西林、舒氨西林、氨苄西林、头孢唑林等4种抗生素的联合药敏试验,进一步证实CP组份与四种抗生素对MRSA的部分抑菌指数值(FIC)分别为0.31、0.37、0.31、0.26,提示CP组份具有对β-内酰胺类抗生素的抗菌增敏作用。结论本研究通过生物传感器实验和体外药敏实验,筛选到与PBP2a具有较高特异性结合力,且具有联合β-内酰胺类抗生素抑制MRSA作用的药物山楂;以体外联合药敏实验作为活性追踪,对山楂组份进行系统分离提取,从中获得具有较强的联合抗菌活性的CP组分;并证实了该组份与β-内酰胺类抗生素对临床分离的MRSA菌株具有协同抗菌作用。由此提示CP组份可能通过与PBP2a的结合,发挥对β-内酰胺类抗生素的抗菌增敏作用,为临床MRSA感染的治疗提供了新的途径和策略。

关键词：耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌 β-内酰胺类抗生素山楂提取分离药敏实验最低抑菌浓度部分抑菌指数

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TMP与几种合成抗菌药联合应用的抗菌增效作用观察

TMP与几种合成抗菌药联合应用的抗菌增效作用观察

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十次研讨会

作者：赵振升王国永白东英李凤琴吴明明河南科技大学

试验采用液体试管法和棋盘法,观察甲氧苄啶(TMP)与磺胺间甲氧嘧啶(SMM)、磺胺嘧啶(SD)、磺胺甲恶唑(SMZ)等磺胺药联合应用和与恩诺沙星、环丙沙星、氧氟沙星3种氟喹诺酮类合成抗菌药联合应用对金黄色葡萄球菌、β-溶血性链球菌、大肠杆... 详细信息

试验采用液体试管法和棋盘法,观察甲氧苄啶(TMP)与磺胺间甲氧嘧啶(SMM)、磺胺嘧啶(SD)、磺胺甲恶唑(SMZ)等磺胺药联合应用和与恩诺沙星、环丙沙星、氧氟沙星3种氟喹诺酮类合成抗菌药联合应用对金黄色葡萄球菌、β-溶血性链球菌、大肠杆菌和枯草杆菌的抗菌增效作用,以TMP和6种药物单独或联合应用对几种细菌的最低抑菌浓度(MIC)和部分抑菌指数(FIC)为主要观察指标,评价联合用药的抗菌增效作用。结果显示,对于葡萄球菌,TMP与SMM、SD、SMZ联合应用的FIC分别为0.5、0.5和0.75,呈现协同作用或相加作用(SMZ),均增效4倍,最佳配伍比例均为1:4,TMP与环丙沙星、恩诺沙星、氧氟沙星联合应用的FIC均为0.5,亦均呈现协同作用,增效4倍,最佳配伍比例分别为4:1,2:1和8:1:对于β-溶血性链球菌,TMP与SMM、SD、SMZ联合应用的FIC分别为0.375、0.25和0.25,均呈现协同作用,增效4倍(SMM)到8倍,最佳配伍比例均为1:4,TMP与环丙沙星、恩诺沙星、氧氟沙星联合应用的FIC分别为0.3125、0.75和0.5625,呈现相加作用和协同作用(环丙沙星),增效2倍(氧氟沙星)到4倍,最佳配伍比例分别为1:1、8:1和1:1;对于枯草杆菌,TMP与SMM、SD、SMZ联合应用的FIC分别为1、0.75和1,均呈现相加作用,增效2倍到4倍(SD),最佳配伍比例均为1:4,TMP与环丙沙星、恩诺沙星联合应用的FIC均为1.5.呈现无关作用,TMP与氧氟沙星联合应用的FIC为0.75,呈现相加作用,增效4倍,最佳配伍比例为4:1:对于大肠杆菌,TMP与SMM、SD、SMZ联合应用的FIC均为0.5,呈现协同作用,增效4倍,最佳配伍比例均为1:4。

关键词：甲氧苄啶抗菌增效作用最低抑菌浓度部分抑菌指数

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山楂活性组份CP联合β-内酰胺类抗生素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抗菌作用

山楂活性组份CP联合β-内酰胺类抗生素对耐甲氧西林金黄色葡萄球...

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中国药理学会第十次全国学术会议

作者：郑新川姜柯郑江周红第三军医大学药学院药理学教研室

目的:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)是医院感染的重要病原菌。MRSA所致的医院感染越来越流行,成为临床亟待解决的难题。MRSA的耐药机制主要与其大量表达PBP2a蛋白有关。本研究旨在以MRS... 详细信息

目的:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)是医院感染的重要病原菌。MRSA所致的医院感染越来越流行,成为临床亟待解决的难题。MRSA的耐药机制主要与其大量表达PBP2a蛋白有关。本研究旨在以MRSA主要耐药蛋白PBP2a为靶点,应用生物传感器技术及体外药敏实验,筛选出具有通过拮抗PBP2a活性而增强β-内酰胺类抗生素抗菌作用的中药,并对其进行分离纯化,以期

关键词：耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌 β-内酰胺类抗生素山楂提取分离药敏实验最低抑菌浓度部分抑菌指数

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