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荧光定量PCR法研究重组病毒巨噬细胞炎症蛋白联合用药体外抗HIV-1的作用

中国药学杂志 2010年第11期45卷 814-817页

作者：孙晗笑莫雪梅闫莉李秀英张光暨南大学药学院基因组药物研究所广州510632

目的建立荧光定量PCR技术测定HIV-1病毒载量的方法 ,并用于研究重组病毒巨噬细胞炎症蛋白(rvMIP)联合用药前后的病毒载量变化。方法选择HIV-1的gag和env保守区域设计引物,建立荧光定量PCR测定HIV-1病毒载量的体系。分别设置rvMIP、AZT、... 详细信息

目的建立荧光定量PCR技术测定HIV-1病毒载量的方法 ,并用于研究重组病毒巨噬细胞炎症蛋白(rvMIP)联合用药前后的病毒载量变化。方法选择HIV-1的gag和env保守区域设计引物,建立荧光定量PCR测定HIV-1病毒载量的体系。分别设置rvMIP、AZT、T-20、rvMIP+AZT、rvMIP+T-20 5个不同用药组,运用荧光定量PCR法检测用药后各组病毒载量的变化。结果所建立的荧光定量PCR体系的检测下限为101拷贝,其标准曲线的相关系数为0.997 4,斜率为-2.524,截距为29.716;除了浓度6 ***-1的rvMIP组、AZT组、T-20组外,各用药组病毒载量值与阳性对照均有差别,且随药物浓度增加,病毒载量逐渐减小。各相同浓度用药组病毒载量相比,rvMIP+T-20组(rvMIP+AZT组(rvMIP组(T-20组(AZT组。结论所建立的荧光定量PCR检测体系可靠;rvMIP与T-20或AZT联用可以增强rvMIP对HIV-1病毒的抑制作用。

关键词：荧光定量PCR 重组病毒巨噬细胞炎症蛋白 HIV-1病毒载量

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SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测HIV-1前病毒方法的建立及应用

引用

山东医药 2010年第23期50卷 10-12页

作者：莫雪梅闫莉孙晗笑暨南大学药学院基因组药物研究所广州510632

目的建立SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR技术测定HIV-1前病毒载量方法,并以其观察相关病毒进入抑制剂对HIV-1前病毒的作用。方法选择HIV-1的gag和env保守区域设计引物,建立SYBR Green I荧光定量PCR测定HIV-1前病毒载量的体系,并以其观察6μg/... 详细信息

目的建立SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR技术测定HIV-1前病毒载量方法,并以其观察相关病毒进入抑制剂对HIV-1前病毒的作用。方法选择HIV-1的gag和env保守区域设计引物,建立SYBR Green I荧光定量PCR测定HIV-1前病毒载量的体系,并以其观察6μg/ml^6 ng/ml的重组病毒巨噬细胞炎症蛋白(rvMIP)、逆转录酶抑制剂(AZT)、膜融合抑制剂(T-20)、rvMIP+AZT、rvMIP+T-20对HIV-1前病毒载量的影响。结果所建立的荧光定量PCR体系的检测下限为101Copies,其标准曲线的相关系数为0.998 9,斜率为-4.925,截距为35.70;除6ng/ml的rvMIP、AZT、T-20外,三种药物处理后HIV-1前病毒载量均显著减小(P<0.05),并呈质量浓度依赖性;联合用药者前病毒载量显著低于单用rvMIP者(P<0.05),HIV-1前病毒载量rvMIP+T-20(rvMIP+AZT(rvMIP(T-20(AZT。结论本研究建立的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法具有灵敏、快速、准确及成本低廉等优点;与T-20或AZT联用可增强rvMIP对HIV-1前病毒的抑制作用。

关键词：聚合酶链反应,实时性重组病毒巨噬细胞炎症蛋白人类免疫缺陷病毒-1前病毒载量

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SYBR Green I荧光定量PCR检测HIV-1前病毒方法的建立及应用

引用

山东医药 2010年第23期50卷 10-12页

作者：莫雪梅闫莉孙晗笑暨南大学药学院基因组药物研究所

目的建立SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR技术测定HIV-11前病毒载量方法，并以其观察相关病毒进人抑制剂对HIV-1前病毒的作用。方法选择HIV-1的gag和env保守区域设计引物，建立SYBR Greenl荧光定量PCR测定HIV-1前病毒载量的体系，并以其观... 详细信息

目的建立SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR技术测定HIV-11前病毒载量方法，并以其观察相关病毒进人抑制剂对HIV-1前病毒的作用。方法选择HIV-1的gag和env保守区域设计引物，建立SYBR Greenl荧光定量PCR测定HIV-1前病毒载量的体系，并以其观察6 μg/ml~6 ng/ml的重组病毒巨噬细胞炎症蛋白(rvMIP)、逆转录酶抑制剂(AZT)、膜融合抑制剂(T-20)、rvMIP+AZT、rvMIP+T-20对HIV-1前病毒载量的影响。结果所建立的荧光定量PCR体系的检测下限为10^1 Copies，其标准曲线的相关系数为0.9989，斜率为－4.925，截距为35.70；除6 ng/ml的rvMIP、AZT、T-20外，三种药物处理后HIV-1前病毒载量均显著减小(P<0.05)，并呈质量浓度依赖性；联合用药者前病毒载量显著低于单用rvMIP者(P<0.05)，HIV-1前病毒载量rvMIP+T-20

关键词：聚合酶链反应实时性重组病毒巨噬细胞炎症蛋白人类免疫缺陷病毒-1前病毒载量

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