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T=题名（书名、题名），A=作者（责任者），K=主题词，P=出版物名称，PU=出版社名称，O=机构（作者单位、学位授予单位、专利申请人），L=中图分类号，C=学科分类号，U=全部字段，Y=年（出版发行年、学位年度、标准发布年）

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AND代表“并且”；OR代表“或者”；NOT代表“不包含”；(注意必须大写,运算符两边需空一格)

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范例一：(K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 AND Y=1982-2016
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73 篇 专利
18 篇 期刊文献
8 篇 会议
4 篇 学位论文
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104 篇 电子文献
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学科分类号

20 篇 医学
- 12 篇 临床医学
- 7 篇 基础医学(可授医学...
- 3 篇 药学(可授医学、理...
- 1 篇 公共卫生与预防医...
11 篇 农学
- 6 篇 兽医学
- 4 篇 畜牧学
- 3 篇 作物学
4 篇 理学
- 4 篇 生物学
4 篇 工学
- 4 篇 生物工程
- 1 篇 生物医学工程（可授...

主题

31 篇 重组真核表达载体
4 篇 真核表达质粒
3 篇 构建
2 篇 中和抗体
2 篇 pvax-vp0vp1vp3构...
2 篇 pcdna3
2 篇 rt-pcr检测
2 篇 人树突状细胞
2 篇 酶切鉴定
2 篇 病毒样颗粒
2 篇 电转染
2 篇 体外诱导
2 篇 蛋白表达
2 篇 报告基因
2 篇 pcdna3.1
2 篇 mage-a1
2 篇 egfp
2 篇 细胞核定位
2 篇 口蹄疫病毒
1 篇 技术检测

机构

9 篇 江南大学
4 篇 华南农业大学
4 篇 中国人民解放军空...
4 篇 中国农业科学院生...
4 篇 重庆医科大学附属...
3 篇 南京农业大学
3 篇 河南科技大学
3 篇 首都医科大学
3 篇 中山大学
2 篇 华南师范大学
2 篇 中国医学科学院基...
2 篇 甘肃农业大学
2 篇 兰州大学
2 篇 南方医科大学珠江...
2 篇 中国人民解放军第...
2 篇 圣太科医疗科技有...
2 篇 浙江海隆生物科技...
2 篇 山东省医学科学院...
2 篇 郑州师范学院
2 篇 天津医科大学附属...

作者

9 篇 邬敏辰
9 篇 陈伟
9 篇 吴静
7 篇 郑海军
5 篇 杨曌
5 篇 陆源
4 篇 张芳琳
4 篇 张宇宏
4 篇 刘波
4 篇 张亮
4 篇 强遵先
4 篇 胡永亮
4 篇 徐欣欣
4 篇 张宇微
4 篇 钟春梅
4 篇 程林峰
4 篇 张莲青
4 篇 叶伟
4 篇 刘赫
4 篇 张伟

语言

104 篇 中文

检索条件"主题词=重组真核表达载体"

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一种石斑鱼病毒性神经坏死病双顺反子DNA疫苗

一种石斑鱼病毒性神经坏死病双顺反子DNA疫苗

引用

作者：邢婧林天雯战文斌唐小千绳秀珍迟恒 266100 山东省青岛市崂山区松岭路238号

本发明提供一种石斑鱼病毒性神经坏死病双顺反子DNA疫苗，为一种重组真核表达载体，所述的重组真核表达载体能够同时表达神经坏死病毒衣壳蛋白的P‑domain和石斑鱼干扰素调节因子3蛋白的超家族结构域。本发明制备的抗神经坏死病毒的双顺... 详细信息

标准号: CN113322276A

本发明提供一种石斑鱼病毒性神经坏死病双顺反子DNA疫苗，为一种重组真核表达载体，所述的重组真核表达载体能够同时表达神经坏死病毒衣壳蛋白的P‑domain和石斑鱼干扰素调节因子3蛋白的超家族结构域。本发明制备的抗神经坏死病毒的双顺反子DNA疫苗转染到鱼体内能很好地表达神经坏死病毒衣壳蛋白P‑domain和宿主的干扰素调节因子3蛋白的超家族结构域。所制备的抗神经坏死病毒双顺反子DNA疫苗，增强了鱼体的抗神经坏死病毒感染能力、降低鱼体感染病毒后的死亡率，增强了疫苗所引起鱼体的体液免疫，引起鱼体全方位的免疫应答，提供给了鱼体一个良好的免疫保护效果。

关键词：鱼体抗神经坏死病毒双顺反子重组真核表达载体干扰素调节因子神经坏死病毒家族结构衣壳蛋白制备蛋白宿主免疫保护效果石斑鱼病毒免疫应答体液免疫坏死病石斑鱼感染转染死亡率疫苗体内病毒神经

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一种毕赤酵母表达长效猪源干扰素的方法

一种毕赤酵母表达长效猪源干扰素的方法

引用

作者：王荣左文峰卢英杰张磊杜恩岐 430075 湖北省武汉市东湖高新技术开发区高新二路388号武汉光谷国际生物医药企业加速器一期工程7号楼3层1室

本发明公开了一种制备猪源长效干扰素λ3的方法和应用，属于基因工程产品制备领域。包括编码猪源长效干扰素λ3基因的克隆，含猪源干扰素λ3基因和长效元件用不同Linker连接的真核表达载体的构建，用所述含不同Linker的猪源干扰素长效λ... 详细信息

标准号: CN108588111A

本发明公开了一种制备猪源长效干扰素λ3的方法和应用，属于基因工程产品制备领域。包括编码猪源长效干扰素λ3基因的克隆，含猪源干扰素λ3基因和长效元件用不同Linker连接的真核表达载体的构建，用所述含不同Linker的猪源干扰素长效λ3基因的重组真核表达载体转化GS115，PCR扩增筛选阳性克隆子，接种阳性克隆子于含0.02%生物素的BMGY培养基，28℃200 rpm培养48小时后离心，弃去上清后用等体积含0.02%生物素的BMMY培养基重悬，并加入1%28℃200 rpm甲醇诱导培养，每隔24 h加入终浓度1%甲醇，培养96 h后取上清，制备不同连接Linker的蛋白表达。所述制备的猪源长效干扰素λ3具有更长的半衰期，较报道的普通干扰素λ3半衰期（4 h以内）提高10倍以上。

关键词：猪源制备长效干扰素阳性克隆子半衰期生物素基因重组真核表达载体干扰素基因工程产品真核表达载体蛋白表达甲醇诱导构建甲醇重悬接种克隆筛选转化应用

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基于ANT1基因的靶向型免疫脂质体及其制备方法和应用

基于ANT1基因的靶向型免疫脂质体及其制备方法和应用

引用

作者：宋耀明黄岚耿召华 400037 重庆市沙坪坝区新桥正街138号

本发明公开了一种基于ANT1基因的靶向型免疫脂质体及其制备方法和应用，该免疫脂质体是在内部包封有ANT1重组真核表达载体的脂质体表面结合有抗SM22α单克隆抗体，ANT1重组真核表达载体中含有核苷酸序列如SEQIDNo.1所示的ANT1基因；本... 详细信息

标准号: CN102657875B

本发明公开了一种基于ANT1基因的靶向型免疫脂质体及其制备方法和应用，该免疫脂质体是在内部包封有ANT1重组真核表达载体的脂质体表面结合有抗SM22α单克隆抗体，ANT1重组真核表达载体中含有核苷酸序列如SEQIDNo.1所示的ANT1基因；本发明将ANT1重组真核表达载体有效地包封在脂质体中形成纳米级颗粒，再与抗SM22α单克隆抗体连接，借助抗SM22α单克隆抗体与VSMC表面的SM22α抗原的特异性结合，使脂质体主动靶向VSMC，进而在VSMC中释放ANT1重组真核表达载体并表达ANT1，诱导VSMC凋亡并抑制其增殖，来发挥抗血管狭窄的作用，具有高效、低毒、制备方法简单等优点，可用于制备抗血管狭窄的药物，在冠状动脉粥样性硬化等疾病的防治方面具有良好的应用前景。

关键词：重组真核表达载体单克隆抗体免疫脂质体脂质体靶向包封狭窄血管制备方法和应用核苷酸序列纳米级颗粒特异性结合脂质体表面冠状动脉制备方法结合有基因抗原凋亡增殖硬化诱导连接疾病内部

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白细胞介素－15基因修饰的自然杀伤细胞株及其制备方法

白细胞介素－15基因修饰的自然杀伤细胞株及其制备方法

引用

作者：田志刚张建魏海明张建华孙汭 230026 安徽省合肥市金寨路96号

本发明公开了一种白细胞介素－15基因修饰的自然杀伤细胞株及其制备方法，该细胞株表型为CD56强阳性，CD16和CD3均为阴性，其形态为分散的、半贴壁生长状态。其制备方法，是将IL－15的cDNA编码区插入pcDNA3真核表达载体，构建分泌型重... 详细信息

标准号: CN1493687A

本发明公开了一种白细胞介素－15基因修饰的自然杀伤细胞株及其制备方法，该细胞株表型为CD56强阳性，CD16和CD3均为阴性，其形态为分散的、半贴壁生长状态。其制备方法，是将IL－15的cDNA编码区插入pcDNA3真核表达载体，构建分泌型重组真核表达载体pcDNA3/IL－15；利用脂质体转染NK－92细胞；在筛选培养基中加入Geneticin(G418)进行筛选；有限稀释克隆化细胞，以IL－15的依赖细胞株测定克隆细胞培养上清中IL－15的活性，从中挑选出表达IL－15的阳性细胞克隆；将该克隆在20～100活性单位的IL－15的完全α－MEM培养基中进行扩增，得到具有临床应用价值的工程细胞株。适于临床用于过继免疫治疗肿瘤。

关键词：制备方法培养基细胞株细胞培养克隆重组真核表达载体临床应用价值阳性细胞克隆有限稀释克隆自然杀伤细胞筛选白细胞介素工程细胞株脂质体转染细胞表达载体活性单位基因修饰免疫治疗生长状态编码区分泌型扩增阴性肿瘤挑选依赖

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用于提高体外培养人肝细胞的生理性CYP3A4表达的嵌合基因及其构建方法

用于提高体外培养人肝细胞的生理性CYP3A4表达的嵌合基因及其构建...

引用

作者：汪艳饶小惠潘明新陈锋 510282 广东省广州市海珠区工业大道中253号

本发明公开一种用于提高体外培养人肝细胞的生理性CYP3A4表达的嵌合基因及其构建方法；所述嵌合基因，包括人核因子孕烷X受体基因全长序列和野生型P53基因的激活域序列。还有一种重组真核表达载体，其包括前所述的嵌合基因；一种如前所... 详细信息

标准号: CN103421831B

本发明公开一种用于提高体外培养人肝细胞的生理性CYP3A4表达的嵌合基因及其构建方法；所述嵌合基因，包括人核因子孕烷X受体基因全长序列和野生型P53基因的激活域序列。还有一种重组真核表达载体，其包括前所述的嵌合基因；一种如前所述的重组真核表达载体的构建方法，其中，其包括以下步骤：从正常人原代肝细胞来源的cDNA分别克隆所述人核因子孕烷X受体基因全长序列和野生型P53基因的激活域序列；将前述步骤获得的两段序列定向克隆到所述PCI-neo哺乳动物表达载体的β-globin/IgG嵌合内含子序列和SV40Late poly(A)信号序列之间，获得重组真核表达载体。本发明能够明显提高体外培养人肝细胞的生理性CYP3A4表达。

关键词：嵌合重组真核表达载体基因野生型P53 受体基因体外培养生理性孕烷激活内含子序列细胞表达载体定向克隆细胞来源信号序列哺乳动物正常人两段克隆

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毕赤酵母制备刀额新对虾精氨酸激酶的方法

毕赤酵母制备刀额新对虾精氨酸激酶的方法

引用

作者：陈伟郑海军尤春霞李静刘群英邬敏辰吴静 214122 江苏省无锡市蠡湖大道1800号

本发明提供了一种重组刀额新对虾精氨酸激酶的制备方法及表达重组刀额新对虾精氨酸激酶的毕赤酵母工程菌。本发明的具体制备方法包括以下步骤：1)人工合成引物；2)从刀额新对虾肌肉匀浆经反转录PCR得到精氨酸激酶的编码基因；3)构建含... 详细信息

标准号: CN102392042A

本发明提供了一种重组刀额新对虾精氨酸激酶的制备方法及表达重组刀额新对虾精氨酸激酶的毕赤酵母工程菌。本发明的具体制备方法包括以下步骤：1)人工合成引物；2)从刀额新对虾肌肉匀浆经反转录PCR得到精氨酸激酶的编码基因；3)构建含有刀额新对虾精氨酸激酶编码基因的重组真核表达载体，融合于毕赤酵母表达调控元件获得重组毕赤酵母工程菌；4)培养重组毕赤酵母工程菌，于培养液添加甲醇诱导毕赤酵母工程菌表达刀额新对虾精氨酸激酶；5)采用离子交换层析和分子筛层析从培养液上清纯化重组刀额新对虾精氨酸激酶。本发明构建的重组毕赤酵母工程菌可进行高密度培养并且分泌型表达重组刀额新对虾精氨酸激酶，适用于工业化制备重组刀额新对虾精氨酸激酶。

关键词：精氨酸激酶对虾工程菌重组毕赤酵母毕赤酵母培养液重组真核表达载体激酶编码基因具体制备方法离子交换层析分泌型表达分子筛层析高密度培养工程菌表达工业化制备编码基因调控元件发明构建合成引物肌肉匀浆甲醇诱导制备方法反转录融合培养

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猪圆环病毒2型3个Cap基因串联重组杆状病毒疫苗的构建和应用

猪圆环病毒2型3个Cap基因串联重组杆状病毒疫苗的构建和应用

引用

作者：李晓成张志吴发兴刘爽董雅琴邵卫星 266000 山东省青岛市市北区南京路369号

本发明提供一种了猪圆环病毒2型3个Cap基因重组杆状病毒疫苗的构建和应用。本发明将猪圆环病毒2型的3个Cap基因头尾相连，连接到杆状病毒载体pFastBacDual，得到了能够稳定表达3个Cap基因的重组真核表达载体pFBD‑3Cap，将该重组表达载... 详细信息

标准号: CN106566814A

本发明提供一种了猪圆环病毒2型3个Cap基因重组杆状病毒疫苗的构建和应用。本发明将猪圆环病毒2型的3个Cap基因头尾相连，连接到杆状病毒载体pFastBacDual，得到了能够稳定表达3个Cap基因的重组真核表达载体pFBD‑3Cap，将该重组表达载体转染sf9细胞，获得了能够表达猪圆环病毒Cap蛋白的重组杆状病毒。经PCR和western‑blot鉴定证实，该重组杆状病毒能够稳定表达3个Cap基因，能与猪圆环病毒免疫血清发生反应，表明本发明所制备的重组蛋白与猪圆环病毒天然抗原一样具有相同的抗原性。本发明所述疫苗是一种能够用于猪圆环病毒2型的安全、有效的重组杆状病毒疫苗。

关键词：重组杆状病毒猪圆环病毒2型猪圆环病毒稳定表达疫苗重组真核表达载体杆状病毒载体重组表达载体免疫血清天然抗原头尾相连重组蛋白抗原性构建转染制备应用安全

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一种人白细胞介素-29的重组变异体及其制备方法

一种人白细胞介素-29的重组变异体及其制备方法

引用

作者：陈伟陆源李利云邬敏辰吴静 214122 江苏省无锡市蠡湖大道1800号

本发明提供了一种人白细胞介素-29(hIL-29)成熟肽第33位赖氨酸定点突变为精氨酸的重组hIL-29变异体(rhIL-29L)及其制备方法，属于生物工程领域。本发明的具体制备方法包括以下步骤：1)人工设计合成hIL-29成熟肽的上下游引物和定点突变... 详细信息

标准号: CN104402988A

本发明提供了一种人白细胞介素-29(hIL-29)成熟肽第33位赖氨酸定点突变为精氨酸的重组hIL-29变异体(rhIL-29L)及其制备方法，属于生物工程领域。本发明的具体制备方法包括以下步骤：1)人工设计合成hIL-29成熟肽的上下游引物和定点突变引物；2)用上下游引物及突变引物对hIL-29成熟肽编码基因第98位碱基进行定点突变；3)构建含hIL-29变异体编码基因的重组真核表达载体，转化毕赤酵母，获得重组酵母工程菌；4)培养重组酵母工程菌，于培养液添加1.5％(v/v)甲醇诱导其表达hIL-29变异体；5)采用SP-Sepharose Fast Flow阳离子交换层析和Sephadex G-75凝胶过滤层析从培养液上清纯化hIL-29变异体。本发明构建的重组酵母工程菌可进行高密度培养并分泌表达rhIL-29L，适用于工业化制备rhIL-29成熟肽变异体。

关键词：成熟肽异体工程菌培养液重组酵母引物重组真核表达载体阳离子交换层析定点突变引物具体制备方法凝胶过滤层析培养重组酵母生物工程领域白细胞介素变异体编码高密度培养工业化制备毕赤酵母编码基因发明构建分泌表达甲醇诱导人工设计突变引物制备方法精氨酸赖氨酸碱基突变基因转化

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基于Isthmin基因的免疫脂质体及其制备方法和应用

基于Isthmin基因的免疫脂质体及其制备方法和应用

引用

作者：杨曌吴玉章 400038 重庆市沙坪坝区高滩岩正街30号

本发明公开了一种基于Isthmin基因的免疫脂质体及其制备方法和应用，该免疫脂质体由包封有Isthmin重组真核表达载体的脂质体和抗第VIII因子相关抗原单克隆抗体共价结合而成；其制备方法包括Isthmin重组真核表达载体的制备、Isthmin重组... 详细信息

标准号: CN101797229A

本发明公开了一种基于Isthmin基因的免疫脂质体及其制备方法和应用，该免疫脂质体由包封有Isthmin重组真核表达载体的脂质体和抗第VIII因子相关抗原单克隆抗体共价结合而成；其制备方法包括Isthmin重组真核表达载体的制备、Isthmin重组真核表达载体的脂质体包封、包封有Isthmin重组真核表达载体的脂质体与抗第VIII因子相关抗原单克隆抗体的连接共3个步骤；该免疫脂质体可以主动靶向肿瘤新生血管内皮细胞，在细胞中释放出Isthmin重组真核表达载体并表达Isthmin，从而发挥抗肿瘤血管生成的作用，具有高效、低毒、制备方法简单等优点，可用于制备抗肿瘤血管生成的药物。

关键词：重组真核表达载体免疫脂质体脂质体包封因子相关抗原单克隆抗体制备方法制备方法和应用血管肿瘤新生血管制备抗肿瘤细胞抗肿瘤靶向内皮基因连接

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靶向小胶质细胞的NLRP3基因RNAi免疫脂质体及其制备方法和应用

靶向小胶质细胞的NLRP3基因RNAi免疫脂质体及其制备方法和应用

引用

作者：杨曌 402160 重庆市永川区萱花路439号

本发明公开了靶向小胶质细胞的NLRP3基因RNAi免疫脂质体及其制备方法和应用，该脂质体是由包封有NLRP3基因的RNAi重组真核表达载体表面连接OX-42单克隆抗体而得，其制备方法简单，获得的免疫脂质体可以主动靶向小胶质细胞，在细胞中释... 详细信息

标准号: CN104306996A

本发明公开了靶向小胶质细胞的NLRP3基因RNAi免疫脂质体及其制备方法和应用，该脂质体是由包封有NLRP3基因的RNAi重组真核表达载体表面连接OX-42单克隆抗体而得，其制备方法简单，获得的免疫脂质体可以主动靶向小胶质细胞，在细胞中释放出并表达NLRP3基因的RNAi序列，抑制NLRP3的表达，从而发挥抗炎症的作用，具有高效、低毒、制备方法简单等优点，可用于制备抗炎症的药物，在抑制脑出血继发炎症反应方面具有良好的应用前景。

关键词：免疫脂质体胶质细胞制备方法靶向基因重组真核表达载体制备方法和应用单克隆抗体炎症反应脑出血脂质体包封细胞连接

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