检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：柏银兰张芳琳宁唤唤梁璇康健任瑞白鹭谢燕玲彭钰君张婧瑶 710032 陕西省西安市新城区长乐西路169号

本发明涉及一种敲除毒力相关基因Ms esat‑6的重组耻垢分枝杆菌菌株，简称rMs‑ΔE6，其保藏编号为：CCTCC M 2021462。本发明还涉及上述重组耻垢分枝杆菌rMs‑ΔE6用于预防和/或治疗结核病的疫苗及制剂中的应用。rMs‑ΔE6菌株在巨噬细胞... 详细信息

标准号: CN113322221B

本发明涉及一种敲除毒力相关基因Ms esat‑6的重组耻垢分枝杆菌菌株，简称rMs‑ΔE6，其保藏编号为：CCTCC M 2021462。本发明还涉及上述重组耻垢分枝杆菌rMs‑ΔE6用于预防和/或治疗结核病的疫苗及制剂中的应用。rMs‑ΔE6菌株在巨噬细胞中存活率降低，且rMs‑ΔE6诱导的免疫应答对Mtb感染的保护作用高于Ms。因此，rMs‑ΔE6不仅可作为更安全的疫苗载体，用于预防或治疗性疫苗的载体；还具有诱导抗Mtb保护性免疫应答的特性，可用于免疫治疗剂的研制，因而具有良好的应用前景。

关键词：重组耻垢分枝杆菌菌株诱导保护性免疫应答免疫治疗剂治疗性疫苗保藏巨噬细胞免疫应答相关基因疫苗载体存活率结核病毒力可用敲除预防应用疫苗治疗安全

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一种产烟酸的超级重组耻垢分枝杆菌及其构建方法

一种产烟酸的超级重组耻垢分枝杆菌及其构建方法

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作者：詹玉心吴泽承周亚凤王绪德 528000 广东省佛山市禅城区江湾一路18号

本发明提供了一种产烟酸的超级重组耻垢分枝杆菌的构建方法，包括步骤：1）构建质粒pMHS‑NrtRms；2）构建质粒pHAGE‑NrtRms；3）制备重组TM4噬菌体；4）构建nrtRms基因缺失的耻垢分枝杆菌mc2100；5）nudC基因的扩增及构建质粒pMV361‑Nud... 详细信息

标准号: CN110551748B

本发明提供了一种产烟酸的超级重组耻垢分枝杆菌的构建方法，包括步骤：1）构建质粒pMHS‑NrtR_ms；2）构建质粒pHAGE‑NrtR_ms；3）制备重组TM4噬菌体；4）构建nrtR_ms基因缺失的耻垢分枝杆菌mc²100；5）nudC基因的扩增及构建质粒pMV361‑NudC_ms；6）构建nrtR_ms基因敲除且nudC基因过表达的超级重组耻垢分枝杆菌。本发明通过构建nrtR基因敲除且nudC基因过表达制得超级重组耻垢分枝杆菌，通过本发明制备得到的工程菌可以一步直接获得烟酸，而不依赖于添加3‑氰基吡啶，不仅避免了现有在烟酸化学合成过程中的各种缺点，而且生产条件简单，无污染，简便易行，易放大，成本低，适合于大规模工业化生产应用，有很大的推广应用的价值。

关键词：构建重组耻垢分枝杆菌构建质粒烟酸基因过表达基因敲除制备大规模工业化生产耻垢分枝杆菌化学合成过程基因缺失氰基吡啶生产条件工程菌噬菌体扩增放大基因应用

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一种抗高温胁迫的重组耻垢分枝杆菌的构建方法

一种抗高温胁迫的重组耻垢分枝杆菌的构建方法

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作者：周盈魏文静张晓莉王绪德周亚凤刘芳毕利军 528000 广东省佛山市禅城区江湾一路18号

本发明公开了一种抗高温胁迫的重组耻垢分枝杆菌的构建方法，其包括导入HtpG基因片段，使其重组耻垢分枝杆菌具有表达HtpG蛋白的功能。本发明通过向耻垢分枝杆菌中导入HtpG基因片段获得抗高温胁迫的重组耻垢分枝杆菌，解决了耻垢分枝杆... 详细信息

标准号: CN109022337A

本发明公开了一种抗高温胁迫的重组耻垢分枝杆菌的构建方法，其包括导入HtpG基因片段，使其重组耻垢分枝杆菌具有表达HtpG蛋白的功能。本发明通过向耻垢分枝杆菌中导入HtpG基因片段获得抗高温胁迫的重组耻垢分枝杆菌，解决了耻垢分枝杆菌表达体系中hsp60启动子需要高温来提高表达活性和高温不利于耻垢分枝杆菌生长的问题。本发明对以耻垢分枝杆菌作为宿主菌表达特定基因的分枝杆菌分子生物学研究、抗结核新疫苗、微生物反应器研发具有重要参考价值。本发明还公开了由该构建方法获得的抗高温胁迫的重组耻垢分枝杆菌及用于结核分枝杆菌HtpG基因片段PCR扩增的引物对。

关键词：重组耻垢分枝杆菌耻垢分枝杆菌基因片段抗高温胁迫构建分子生物学研究结核分枝杆菌微生物反应器表达体系分枝杆菌抗结核启动子宿主菌新疫苗研发引物蛋白参考基因生长

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流式细胞术检测胞内重组耻垢分枝杆菌的活力研究

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中国微生态学杂志 2011年第8期23卷 689-691,695页

作者：何子纯李升锦重庆医科大学附属第二医院呼吸科重庆400010

目的建立一种快速检测胞内分枝杆菌活力的方法。方法将一定量培养至对数生长期的含pMV-eis的重组耻垢分枝杆菌感染U937巨噬细胞,以含空质粒的耻垢分枝杆菌为对照,吞噬作用2 h后洗去胞外细菌,再分别培养4、12、24和48 h后收集细胞并裂解... 详细信息

目的建立一种快速检测胞内分枝杆菌活力的方法。方法将一定量培养至对数生长期的含pMV-eis的重组耻垢分枝杆菌感染U937巨噬细胞,以含空质粒的耻垢分枝杆菌为对照,吞噬作用2 h后洗去胞外细菌,再分别培养4、12、24和48 h后收集细胞并裂解之。获得的胞内细菌用FDA荧光染料染色后用流式细胞仪检测死亡率,并与平板菌落计数法进行比较。结果流式细胞仪检测出感染12 h后重组耻垢分枝杆菌胞内死亡率较对照组均有显著下降(P<0.05),流式细胞仪检测法与平板菌落计数法相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论流式细胞术与传统的平板计数法相比具有快速、敏感、方便的特点,可用于分枝杆菌活菌快速检测。

关键词：重组耻垢分枝杆菌 eis基因流式细胞仪平板菌落计数法乙酰乙酸荧光素

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髓样分化因子88抑制剂ST2825影响重组耻垢分枝杆菌感染的THP-1细胞炎性分泌功能

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中国微生态学杂志 2014年第10期26卷 1148-1150页

作者：胡少婷黄秦李升锦重庆医科大学附属第二临床学院呼吸内科重庆400010

目的通过观察髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,myd88)抑制剂ST2825对重组耻垢分枝杆菌感染的THP-1细胞的炎性分泌功能的抑制,来探讨髓样分化因子88在分枝杆菌促巨噬细胞分泌炎性因子功能中的作用。方法使用Myd88的抑... 详细信息

目的通过观察髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,myd88)抑制剂ST2825对重组耻垢分枝杆菌感染的THP-1细胞的炎性分泌功能的抑制,来探讨髓样分化因子88在分枝杆菌促巨噬细胞分泌炎性因子功能中的作用。方法使用Myd88的抑制剂ST2825干预重组耻垢杆菌感染的THP-1细胞为实验模型,分为三组:实验组(THP-1细胞+重组耻垢分枝杆菌+ST2825)、对照组(THP-1细胞+重组耻垢分枝杆菌)、空白组(THP-1细胞),用ELISA法检测三组TNF-α、IL-12和IL-6的分泌情况。结果实验组的TNF-α、IL-12和IL-6的量较对照组显著减少,其两者P值<0.05,差异具有统计学意义。结论髓样分化因子88抑制剂ST2825可抑制THP-1细胞的炎性分泌功能。

关键词：髓样分化因子88 ST2825 重组耻垢分枝杆菌

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表达幽门螺杆菌外膜蛋白的重组耻垢分枝杆菌疫苗菌对小鼠的免疫保护作用及机理研究

表达幽门螺杆菌外膜蛋白的重组耻垢分枝杆菌疫苗菌对小鼠的免疫保...

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中华医学会第七次全国消化病学术会议

作者：向廷秀重庆医科大学附属第一医院实验研究中心

目的幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,简称 Hp)是慢性胃炎、消化性溃疡及胃肠道淋巴瘤的主要致病因素,并与胃癌发生密切相关。Hp 疫苗接种被认为是预防 Hp 感染,降低 Hp 相关性疾病发病率的最佳选择。作者对表达幽门螺杆菌外膜蛋白的重... 详细信息

目的幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,简称 Hp)是慢性胃炎、消化性溃疡及胃肠道淋巴瘤的主要致病因素,并与胃癌发生密切相关。Hp 疫苗接种被认为是预防 Hp 感染,降低 Hp 相关性疾病发病率的最佳选择。作者对表达幽门螺杆菌外膜蛋白的重组耻垢分枝杆菌疫苗菌对小鼠的免疫保护作用及机理进

关键词：重组耻垢分枝杆菌幽门螺杆菌免疫保护作用外膜蛋白

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一种敲除毒力相关基因的重组耻垢分枝杆菌菌株及其应用

一种敲除毒力相关基因的重组耻垢分枝杆菌菌株及其应用

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作者：柏银兰张芳琳宁唤唤梁璇康健任瑞白鹭谢燕玲彭钰君张婧瑶 710032 陕西省西安市新城区长乐西路169号

标准号: CN113322221A

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一种表达甲基化HBHA蛋白的重组耻垢分枝杆菌菌株、制备方法及其应用

一种表达甲基化HBHA蛋白的重组耻垢分枝杆菌菌株、制备方法及其应...

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作者：马越云唐锦华黄嫄 100142 北京市海淀区阜成路30号院

本发明涉及一种表达甲基化HBHA蛋白的重组耻垢分枝杆菌菌株、制备方法及应用，将PCR法扩增获得的HBHA基因克隆于表达载体pMyCA中，之后将重组载体pMyCA‑HBHA采用电穿孔法转化于耻垢分支杆菌Mc2‑155菌株；以潮霉素筛选获得Mc2‑155‑mHBHA... 详细信息

标准号: CN112746051A

本发明涉及一种表达甲基化HBHA蛋白的重组耻垢分枝杆菌菌株、制备方法及应用，将PCR法扩增获得的HBHA基因克隆于表达载体pMyCA中，之后将重组载体pMyCA‑HBHA采用电穿孔法转化于耻垢分支杆菌Mc2‑155菌株；以潮霉素筛选获得Mc2‑155‑mHBHA重组耻垢分枝杆菌，其表达产物经提取、纯化，鉴定为甲基化HBHA蛋白，可刺激致敏T细胞释放IFN‑γ。本发明提供的重组耻垢分枝杆菌菌株用于制备甲基化HBHA蛋白，有效提高获得甲基化HBHA蛋白的效率，从而满足HBHA功能研究和体外诊断试验，特别是鉴别结核分枝杆菌潜伏感染与活动感染的需求。

关键词：重组耻垢分枝杆菌甲基化蛋白菌株耻垢分支杆菌结核分枝杆菌表达产物表达载体电穿孔法功能研究基因克隆体外诊断制备甲基重组载体感染潮霉素扩增致敏制备鉴别筛选释放刺激试验转化应用

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可表达结核分枝杆菌Ag85B和ESAT-6融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌株及其应用

可表达结核分枝杆菌Ag85B和ESAT-6融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌株...

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作者：徐志凯柏银兰王丽梅王平何俊杰康健张薇师长宏张海 710032 陕西省西安市长乐西路169号

本发明涉及一种可表达结核分枝杆菌Ag85B和ESAT-6融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌株及其应用。将包含Ag85B和ESAT-6融合蛋白基因的重组质粒电转化入耻垢分枝杆菌，简称为AE-MS，其保藏编号为：CCTCC M2010097。筛选获得的重组耻垢分枝杆菌株... 详细信息

标准号: CN101875913A

本发明涉及一种可表达结核分枝杆菌Ag85B和ESAT-6融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌株及其应用。将包含Ag85B和ESAT-6融合蛋白基因的重组质粒电转化入耻垢分枝杆菌，简称为AE-MS，其保藏编号为：CCTCC M2010097。筛选获得的重组耻垢分枝杆菌株AE-MS免疫小鼠，可诱导比耻垢分枝杆菌更强的免疫应答水平。本发明还涉及所构建菌株在制备结核病预防和治疗方面的制剂或药物中的应用。表达Ag85B和ESAT-6融合基因的重组分枝杆菌集中了靶抗原和活载体的优势，免疫接种后可刺激机体更强的免疫应答，提高机体的免疫保护力，因而具有良好的应用前景。

关键词：重组耻垢分枝杆菌耻垢分枝杆菌融合蛋白结核分枝杆菌免疫应答水平重组分枝杆菌结核病预防免疫保护力刺激机体免疫接种免疫小鼠免疫应答融合基因重组质粒诱导比抗原菌株筛选基因转化

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一种敲除c‑di‑AMP分解酶的重组耻垢分枝杆菌株及其应用

一种敲除c‑di‑AMP分解酶的重组耻垢分枝杆菌株及其应用

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作者：柏银兰徐志凯王立飞宁唤唤许艳慧康健路延之周洁薛莹陆翮高子招 710032 陕西省西安市长乐西路169号

本发明涉及一种敲除c‑di‑AMP分解酶的重组耻垢分枝杆菌株。将耻垢分枝杆菌c‑di‑AMP降解酶基因MSMEG_2630的上下游同源臂分别连入pMSG360载体，重组质粒转化含有重组酶gp60和gp61pJV53质粒的耻垢分枝杆菌感受态细胞，筛选并获得一株敲除c... 详细信息

标准号: CN107217026A

本发明涉及一种敲除c‑di‑AMP分解酶的重组耻垢分枝杆菌株。将耻垢分枝杆菌c‑di‑AMP降解酶基因MSMEG_2630的上下游同源臂分别连入pMSG360载体，重组质粒转化含有重组酶gp60和gp61pJV53质粒的耻垢分枝杆菌感受态细胞，筛选并获得一株敲除c‑di‑AMP分解酶的重组耻垢分枝杆菌株(rMS‑ΔCnpB)，其保藏编号为：CCTCC M 2016336。rMS‑ΔCnpB菌株免疫小鼠，可调节小鼠体液和细胞免疫应答，尤其是感染结核分枝杆菌后的Th1型细胞免疫应答，并提高机体抗分枝杆菌感染的保护力，因而可用于预防和/或治疗结核病的疫苗及制剂的研制，具有比较好的应用前景。

关键词：重组耻垢分枝杆菌耻垢分枝杆菌分解酶敲除体液和细胞免疫结核分枝杆菌重组质粒转化感受态细胞降解酶基因抗分枝杆菌保藏免疫小鼠免疫应答可调节同源臂重组酶感染结核病菌株可用小鼠应答质粒疫苗筛选预防治疗应用

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