检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：张天宇刘燕孙彩军潘恩祥王邦兴郭灵敏陈凌刘志勇 510530 广东省广州市科学城开源大道190号A132

本发明公开了一种重组质粒，其含有猴免疫缺陷病毒的gp120基因和结核分枝杆菌的至少一种细胞壁载体蛋白的基因；本发明还公开了一种重组的耻垢分枝杆菌，其能稳定表达猴免疫缺陷病毒的gp120基因和结核分枝杆菌的至少一种细胞壁载体蛋白... 详细信息

标准号: CN108823232A

本发明公开了一种重组质粒，其含有猴免疫缺陷病毒的gp120基因和结核分枝杆菌的至少一种细胞壁载体蛋白的基因；本发明还公开了一种重组的耻垢分枝杆菌，其能稳定表达猴免疫缺陷病毒的gp120基因和结核分枝杆菌的至少一种细胞壁载体蛋白的基因；本发明还公开了一种艾滋病疫苗及其制备方法，该疫苗含有重组的耻垢分枝杆菌。本发明制备的艾滋病疫苗，易于培养，生长迅速，节省时间、人力、物力和财力；本发明的三株表面展示SIV gp120抗原蛋白的重组耻垢分枝杆菌ZWY2疫苗可以将抗原蛋白gp120稳定地表面展示在耻垢分枝杆菌ZWY2表面，其在C57小鼠体内的免疫效果远远优于将抗原蛋白gp120表达在胞内及目前已发表的基于腺病毒载体构建的表面展示gp120的艾滋病疫苗。

关键词：耻垢分枝杆菌艾滋病疫苗细胞壁猴免疫缺陷病毒结核分枝杆菌表面展示抗原蛋白载体蛋白制备疫苗重组耻垢分枝杆菌腺病毒载体免疫效果稳定表达重组质粒基因地表面构建小鼠蛋白体内生长展示

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微生物发酵生产9α-羟基雄烯二酮的方法

微生物发酵生产9α-羟基雄烯二酮的方法

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作者：宋浩雷张敏然张耀勋周利坤 050000 河北省石家庄市新华区中华北大街345号26栋3单元501室

本发明提出了一种微生物发酵生产9α‑羟基雄烯二酮的方法，利用重组耻垢分枝杆菌发酵转化植物甾醇生产9α‑羟基雄烯二酮，包括如下步骤：重组表达载体pMV261‑ksh的构建；重组菌株的构建；菌种繁殖及发酵转化。本发明通过基因工程手段获... 详细信息

标准号: CN104232722B

本发明提出了一种微生物发酵生产9α‑羟基雄烯二酮的方法，利用重组耻垢分枝杆菌发酵转化植物甾醇生产9α‑羟基雄烯二酮，包括如下步骤：重组表达载体pMV261‑ksh的构建；重组菌株的构建；菌种繁殖及发酵转化。本发明通过基因工程手段获得3‑甾酮‑9α‑羟基化酶基因(ksh)过表达的基因工程菌株，该菌株经过120h发酵可以使植物甾醇的转化率高达95％以上，具有产率高、副产物少、发酵时间短，且提取简单、污染小、环保压力小等特点，极具工业生产的优势。

关键词：发酵雄烯二酮构建羟基重组耻垢分枝杆菌基因工程菌株基因工程手段重组表达载体羟基化酶基因微生物发酵环保压力菌种繁殖植物甾醇重组菌株转化植物副产物产率菌株甾醇甾酮生产污染转化

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微生物发酵生产去氢表雄酮的方法

微生物发酵生产去氢表雄酮的方法

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作者：宋浩雷刘倩孟祥雷张亚朋 050000 河北省石家庄市新华区中华北大街345号26栋3单元501室

本发明提出了一种微生物发酵生产去氢表雄酮的方法，利用重组耻垢分枝杆菌单水相发酵转化植物甾醇生产去氢表雄酮，包括如下步骤：敲除原件5228up‑kan‑5228down的构建；重组菌株的构建；菌种繁殖及发酵转化。本发明利用分子生物学方法敲... 详细信息

标准号: CN104232673B

本发明提出了一种微生物发酵生产去氢表雄酮的方法，利用重组耻垢分枝杆菌单水相发酵转化植物甾醇生产去氢表雄酮，包括如下步骤：敲除原件5228up‑kan‑5228down的构建；重组菌株的构建；菌种繁殖及发酵转化。本发明利用分子生物学方法敲除3β‑羟基类固醇脱氢酶编码基因MSMEG_5228，得到重组耻垢分枝杆菌，之后在单水相发酵体系中以植物甾醇为原料生产去氢表雄酮。本发明降低了生产成本，去氢表雄酮质量收率达90％以上，同时简化了提取工艺，降低了提取成本，污染小、环保压力小、极具工业生产的优势。

关键词：去氢表雄酮重组耻垢分枝杆菌单水构建敲除发酵羟基类固醇脱氢酶分子生物学微生物发酵编码基因发酵体系环保压力菌种繁殖植物甾醇重组菌株转化植物收率甾醇生产成本生产污染转化

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源头阻断包虫病病原细粒棘球绦虫传播的疫苗

源头阻断包虫病病原细粒棘球绦虫传播的疫苗

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作者：张文宝李军张壮志郑雪婷何黎齐文静郭刚王俊伟郭宝平 830054 新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市鲤鱼山南路137号

本发明公开了一种源头阻断包虫病病原细粒棘球绦虫传播的疫苗。本发明所提供的疫苗为CTB‑EgM123疫苗或由其与EgM123蛋白重组耻垢分枝杆菌疫苗亚单位疫苗组成的成套疫苗。所述CTB‑EgM123疫苗的活性成分为由霍乱毒素B亚单位和细粒棘球绦虫... 详细信息

标准号: CN107510841A

本发明公开了一种源头阻断包虫病病原细粒棘球绦虫传播的疫苗。本发明所提供的疫苗为CTB‑EgM123疫苗或由其与EgM123蛋白重组耻垢分枝杆菌疫苗亚单位疫苗组成的成套疫苗。所述CTB‑EgM123疫苗的活性成分为由霍乱毒素B亚单位和细粒棘球绦虫EgM123蛋白融合而成的融合蛋白；所述EgM123蛋白重组耻垢分枝杆菌疫苗的活性成分为能够表达细粒棘球绦虫EgM123蛋白的重组耻垢分枝杆菌。本发明所提供的疫苗能够刺激宿主体内免疫应答，提高宿主的免疫水平，增强肠道黏膜免疫反应，在抗包虫病感染中起到重要的保护作用。

关键词：疫苗细粒棘球绦虫耻垢分枝杆菌宿主蛋白重组重组耻垢分枝杆菌霍乱毒素B亚单位病原包虫病感染疫苗亚单位肠道黏膜蛋白融合免疫水平融合蛋白体内免疫包虫病应答蛋白刺激源头传播

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可表达结核分枝杆菌Ag85B和ESAT-6融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌株及其应用

可表达结核分枝杆菌Ag85B和ESAT-6融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌株...

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作者：徐志凯柏银兰王丽梅王平何俊杰康健张薇师长宏张海 710032 陕西省西安市长乐西路169号

本发明涉及一种可表达结核分枝杆菌Ag85B和ESAT-6融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌株及其应用。将包含Ag85B和ESAT-6融合蛋白基因的重组质粒电转化入耻垢分枝杆菌，简称为AE-MS，其保藏编号为：CCTCC M2010097。筛选获得的重组耻垢分枝杆菌株... 详细信息

标准号: CN101875913A

本发明涉及一种可表达结核分枝杆菌Ag85B和ESAT-6融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌株及其应用。将包含Ag85B和ESAT-6融合蛋白基因的重组质粒电转化入耻垢分枝杆菌，简称为AE-MS，其保藏编号为：CCTCC M2010097。筛选获得的重组耻垢分枝杆菌株AE-MS免疫小鼠，可诱导比耻垢分枝杆菌更强的免疫应答水平。本发明还涉及所构建菌株在制备结核病预防和治疗方面的制剂或药物中的应用。表达Ag85B和ESAT-6融合基因的重组分枝杆菌集中了靶抗原和活载体的优势，免疫接种后可刺激机体更强的免疫应答，提高机体的免疫保护力，因而具有良好的应用前景。

关键词：重组耻垢分枝杆菌耻垢分枝杆菌融合蛋白结核分枝杆菌免疫应答水平重组分枝杆菌结核病预防免疫保护力刺激机体免疫接种免疫小鼠免疫应答融合基因重组质粒诱导比抗原菌株筛选基因转化

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抗生素预处理后口服Der p2重组耻垢分枝杆菌调节免疫应答的研究

抗生素预处理后口服Der p2重组耻垢分枝杆菌调节免疫应答的研究

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作者：侯美娜第四军医大学

学位级别：硕士

背景哮喘是一种全球范围内的发病率和死亡率逐渐上升的慢性疾病，严重威胁人类健康，降低患者生活质量，给病人及社会造成了巨大的经济负担。哮喘被认为是具有一定遗传学基础的个体，受环境中过敏原反复刺激导致体内免疫紊乱，以呼吸道... 详细信息

背景哮喘是一种全球范围内的发病率和死亡率逐渐上升的慢性疾病，严重威胁人类健康，降低患者生活质量，给病人及社会造成了巨大的经济负担。哮喘被认为是具有一定遗传学基础的个体，受环境中过敏原反复刺激导致体内免疫紊乱，以呼吸道慢性炎症和一系列临床症状为表现的一种病理状态。Th2优势的Th1/Th2平衡紊乱是过敏性哮喘的免疫学本质。而许多研究证明分枝杆菌采用多种免疫途径均可调节Th1/Th2平衡。本研究小组前期构建了Derp2-rBCG，经口服接种免疫小鼠可诱导Derp2特异性的Th1优势免疫应答。因分枝杆菌不是肠道固有菌，很难在肠道粘附定植，免疫效果不佳，而加大剂量则会引起肠道菌群失调和口咽部感染。研究发现肠道正常菌群能够竞争性抑制并排斥外来细菌的粘附和定植，起到一种生物屏障的作用。因此我们设想利用抗生素破坏这种生物屏障，从而提高分枝杆菌与肠道黏膜的亲和力进而增强其免疫调节作用。目的 1.利用电穿孔技术，构建以胞壁形式表达屋尘螨抗原Derp2的重组耻垢分枝杆菌疫苗pCW-Derp2-rMS。 2.给小鼠饮用低浓度抗生素溶液，观察其对肠道细菌数的影响，探索使用抗生素减少肠道菌群又不引起肠道菌群失调的最佳用药时间。 3.小鼠饮用抗生素溶液处理后，分别给予灌胃口服MS和pCW-Derp2-rMS免疫，比较两者对Th细胞免疫应答的调节。实验方法和结果 ***2-rMS的构建及鉴定采用电穿孔技术，将鉴定好的Derp2质粒转化到耻垢分枝杆菌(MS)，经潮霉素抗性筛选rMS阳性克隆，通过PCR特异性扩增目的基因片段，鉴定目的基因在rMS中的表达，证实Derp2质粒成功转化入MS，构建了以胞壁形式表达外源蛋白的重组耻垢分枝杆菌（pCW-Derp2-rMS）。 2.口服抗生素对肠道菌群的影响小鼠在SPF级别饲养环境下，分别给予10％蔗糖(Suc)溶液、终浓度2mg/ml替硝唑(Tin)溶液、终浓度5mg/ml氨苄青霉素(Amp)溶液饮用，连续7天。分别在第3、5、7天处死部分小鼠，无菌状态下取小鼠回盲部肠内容物，匀浆稀释后涂LB琼脂培养基和BHI琼脂培养基平板(简易厌氧环境中)，培养并计数生长的菌落数目（CFU）。结果显示：Amp组小鼠肠内容物中需氧菌数目随着饮用氨苄青霉素溶液时间的增长而逐渐减少（CFU3d>CFU5d>CFU7d），Amp组小鼠肠内容物中需氧菌数量与同时间点Suc组、Tin组相比均有统计学差异（p﹤0.05）。Tin组小鼠肠内容物中厌氧菌数目也随着饮用替硝唑溶液时间的增长而逐渐减少（CFU3d>CFU5d>CFU7d），Tin组小鼠肠内容物中厌氧菌数量与同时间点Suc组、Amp组相比均有统计学差异（p﹤0.05）。饮用抗生素溶液7天后小鼠粪便变软变稀增多，肠道菌群失调症状明显，故考虑连续饮用抗生素溶液5天为宜。 3.抗生素预处理后口服MS/pCW-Derp2-rMS调节BALB/c小鼠Th细胞免疫应答的研究抗生素如前预处理小鼠后，每组分为3组，分别给予100μlMS、pCW-Derp2-rMS(1×1010CFU/ml)和甘油灌胃免疫小鼠。于末次免疫后4周、8周分别收集外周血血清和脾脏淋巴细胞培养上清，用相应ELISA试剂盒检测其中IFN-γ、IL-2、IL-4水平。于8周时收集外周血和脾脏淋巴细胞，用流式细胞术检测其中Th1/Th2的分布。结果表明：氨苄青霉素或替硝唑处理后可使Th1型细胞因子IFN-γ、IL-2水平下降，Th2型细胞因子IL-4水平轻微升高，使外周血和脾脏淋巴细胞中Th1型细胞所占比例下降，即可致Th1型免疫反应呈下降趋势。口服MS或pCW-Derp2-rMS可使Th1型细胞因子IFN-γ、IL-2水平升高（P﹤0.05），Th2型细胞因子IL-4水平轻微下降，使外周血和脾脏淋巴细胞中Th1型细胞所占比例升高，Th2型细胞所占比例下降，产生Th1优势的免疫应答，且这种应答是Derp2特异性的。抗生素预处理后接种pCW-Derp2-rMS与接种MS相比可使Th1型细胞因子IFN-γ、IL-2水平上升，外周血和脾脏淋巴细胞中Th1型细胞所占比例升高，即可使Th1型免疫反应呈升高趋势，且这种趋势是Derp2特异性的。结论： 1.小鼠饮用低浓度抗生素溶液，连续饮用5天为减少肠道菌群又不引起肠道菌群失调的最佳时间。 2.经饮用抗生素溶液预处理的BALB/c小鼠分别给予MS和rMS口服免疫，观察其对小鼠免疫应答的影响。结果显示氨苄青霉素和替硝唑可使Th1型免疫反应呈下降趋势；抗生素预处理后口服pCW-Derp2-rMS与口服MS相比可使Th1型免疫应答呈上升趋势，且这种趋势是Derp2特异性的。

关键词：抗生素肠道菌群 Der p2 重组耻垢分枝杆菌

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表达NY-ESO-1重组耻垢分枝杆菌的制备及应用

表达NY-ESO-1重组耻垢分枝杆菌的制备及应用

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作者：陈丹丹徐帆洪高丹 200052 上海市长宁区延安西路1262号

本发明涉及表达NY-ESO-1重组耻垢分枝杆菌的制备及应用。具体而言，本发明提供了一种用于重组肿瘤-睾丸抗原NY-ESO-1蛋白表达的质粒，其包含：β-半乳糖苷酶信号肽编码序列或β-半乳糖苷酶编码序列；和NY-ESO-1编码序列。本发明还提供... 详细信息

标准号: CN102839186A

本发明涉及表达NY-ESO-1重组耻垢分枝杆菌的制备及应用。具体而言，本发明提供了一种用于重组肿瘤-睾丸抗原NY-ESO-1蛋白表达的质粒，其包含：β-半乳糖苷酶信号肽编码序列或β-半乳糖苷酶编码序列；和NY-ESO-1编码序列。本发明还提供了包含本发明质粒的重组耻垢分枝杆菌、组合物及它们的用途。采用本发明的重组耻垢分枝杆菌可对表达NY-ESO-1的肿瘤细胞可产生显著杀伤效应，由此可用于这些肿瘤的有效预防和/或治疗。

关键词：重组耻垢分枝杆菌编码序列半乳糖质粒信号肽编码序列制备及应用蛋白表达有效预防肿瘤细胞重组肿瘤睾丸抗原组合物肿瘤

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微生物发酵生产去氢表雄酮的方法

微生物发酵生产去氢表雄酮的方法

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作者：宋浩雷刘倩孟祥雷张亚朋 050000 河北省石家庄市新华区中华北大街345号26栋3单元501室

本发明提出了一种微生物发酵生产去氢表雄酮的方法，利用重组耻垢分枝杆菌单水相发酵转化植物甾醇生产去氢表雄酮，包括如下步骤：敲除原件5228up-kan-5228down的构建；重组菌株的构建；菌种繁殖及发酵转化。本发明利用分子生物学方法敲... 详细信息

标准号: CN104232673A

本发明提出了一种微生物发酵生产去氢表雄酮的方法，利用重组耻垢分枝杆菌单水相发酵转化植物甾醇生产去氢表雄酮，包括如下步骤：敲除原件5228up-kan-5228down的构建；重组菌株的构建；菌种繁殖及发酵转化。本发明利用分子生物学方法敲除3β-羟基类固醇脱氢酶编码基因MSMEG_5228，得到重组耻垢分枝杆菌，之后在单水相发酵体系中以植物甾醇为原料生产去氢表雄酮。本发明降低了生产成本，去氢表雄酮质量收率达90％以上，同时简化了提取工艺，降低了提取成本，污染小、环保压力小、极具工业生产的优势。

关键词：氢表雄酮重组耻垢分枝杆菌发酵转化植物甾醇单水羟基类固醇脱氢酶分子生物学方法微生物发酵编码基因发酵体系环保压力菌种繁殖质量收率重组菌株原件生产成本污染

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微生物发酵生产9α-羟基雄烯二酮的方法

微生物发酵生产9α-羟基雄烯二酮的方法

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作者：宋浩雷张敏然张耀勋周利坤 050000 河北省石家庄市新华区中华北大街345号26栋3单元501室

本发明提出了一种微生物发酵生产9α-羟基雄烯二酮的方法，利用重组耻垢分枝杆菌发酵转化植物甾醇生产9α-羟基雄烯二酮，包括如下步骤：重组表达载体pMV261-ksh的构建；重组菌株的构建；菌种繁殖及发酵转化。本发明通过基因工程手段获... 详细信息

标准号: CN104232722A

本发明提出了一种微生物发酵生产9α-羟基雄烯二酮的方法，利用重组耻垢分枝杆菌发酵转化植物甾醇生产9α-羟基雄烯二酮，包括如下步骤：重组表达载体pMV261-ksh的构建；重组菌株的构建；菌种繁殖及发酵转化。本发明通过基因工程手段获得3-甾酮-9α-羟基化酶基因(ksh)过表达的基因工程菌株，该菌株经过120h发酵可以使植物甾醇的转化率高达95％以上，具有产率高、副产物少、发酵时间短，且提取简单、污染小、环保压力小等特点，极具工业生产的优势。

关键词：发酵转化植物甾醇重组耻垢分枝杆菌基因工程菌株基因工程手段重组表达载体羟基化酶基因微生物发酵发酵时间环保压力菌种繁殖重组菌株副产物产率菌株发酵污染

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牛分枝杆菌PE_PGRS62基因克隆及在耻垢分枝杆菌中的表达

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中国预防兽医学报 2011年第2期33卷 110-113页

作者：黄瑛王洋王志刚杨利峰赵德明中国农业大学动物医学院/国家动物海绵状脑病实验室北京100193 中国动物疫病预防控制中心北京100125

为构建表达牛分枝杆菌(***)PE_PGRS62蛋白的重组耻垢分枝杆菌,本研究以***基因组DNA为模板PCR扩增PE_PGRS62基因,获得大小约为1 515 bp的目的片段,并克隆到大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达载体pMV261中,将重组pMV-PE_PGRS62穿梭表达载体电转... 详细信息

为构建表达牛分枝杆菌(***)PE_PGRS62蛋白的重组耻垢分枝杆菌,本研究以***基因组DNA为模板PCR扩增PE_PGRS62基因,获得大小约为1 515 bp的目的片段,并克隆到大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达载体pMV261中,将重组pMV-PE_PGRS62穿梭表达载体电转化到耻垢分枝杆菌内,42℃热诱导重组耻垢分枝杆菌,通过SDS-PAGE和免疫印迹分析表达产物并鉴定其生物学活性。经SDS-PAGE分析,表达的PE_PGRS62蛋白分子量约为60 ku,免疫印迹结果表明,表达的PE_PGRS62蛋白与兔抗***阳性血清反应形成一条特异性蛋白条带。本实验为进一步研究***致病机理奠定了基础。

关键词：牛分枝杆菌 PE_PGRS62基因克隆重组耻垢分枝杆菌

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