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T=题名（书名、题名），A=作者（责任者），K=主题词，P=出版物名称，PU=出版社名称，O=机构（作者单位、学位授予单位、专利申请人），L=中图分类号，C=学科分类号，U=全部字段，Y=年（出版发行年、学位年度、标准发布年）

检索规则说明：

AND代表“并且”；OR代表“或者”；NOT代表“不包含”；(注意必须大写,运算符两边需空一格)

检索范例：

范例一：(K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 AND Y=1982-2016
范例二：P=计算机应用与软件 AND (U=C++ OR U=Basic) NOT K=Visual AND Y=2011-2016

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文献类型

612 篇 专利
94 篇 期刊文献
44 篇 会议
11 篇 学位论文
2 篇 成果

馆藏范围

763 篇 电子文献
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日期分布

学科分类号

81 篇 医学
- 36 篇 基础医学(可授医学...
- 36 篇 临床医学
- 22 篇 药学(可授医学、理...
- 6 篇 公共卫生与预防医...
- 2 篇 口腔医学
72 篇 农学
- 38 篇 兽医学
- 35 篇 作物学
- 5 篇 畜牧学
- 2 篇 水产
- 1 篇 园艺学
- 1 篇 农业资源与环境
- 1 篇 植物保护
44 篇 理学
- 44 篇 生物学
- 1 篇 化学
42 篇 工学
- 35 篇 生物工程
- 7 篇 化学工程与技术
- 2 篇 食品科学与工程（可...
- 1 篇 轻工技术与工程
- 1 篇 农业工程
- 1 篇 生物医学工程（可授...

主题

151 篇 重组表达质粒
20 篇 构建
17 篇 大肠杆菌
16 篇 重组质粒
15 篇 基因片段
13 篇 纯化
13 篇 融合蛋白
12 篇 重组蛋白
12 篇 原核表达载体
11 篇 原核表达
10 篇 弓形虫
10 篇 克隆
9 篇 转染
9 篇 真核表达载体
8 篇 阳性克隆
8 篇 扩增
8 篇 转化大肠杆菌
8 篇 亚克隆
7 篇 小鼠
6 篇 免疫应答

机构

24 篇 华南农业大学
18 篇 江南大学
17 篇 华东理工大学
14 篇 中国农业科学院兰...
14 篇 浙江大学
14 篇 中山大学
13 篇 华中科技大学
13 篇 安徽师范大学
12 篇 深圳市疾病预防控...
11 篇 南京农业大学
11 篇 武汉大学
11 篇 天津科技大学
10 篇 广东医学院
10 篇 四川农业大学
10 篇 扬州大学
8 篇 凯赛生物产业有限...
8 篇 浙江工业大学
8 篇 苏州百福安酶技术...
8 篇 中国农业科学院哈...
8 篇 上海凯赛生物技术...

作者

24 篇 黄达娜
24 篇 吴少庭
23 篇 张仁利
23 篇 高世同
21 篇 袁仕善
17 篇 王鹏
15 篇 雷明军
14 篇 许建和
14 篇 秦莉
14 篇 潘江
13 篇 林绮萍
13 篇 徐蕾
12 篇 潘晖榕
12 篇 文斌
12 篇 朱国萍
11 篇 温见翔
10 篇 郭刚
9 篇 刘修才
9 篇 周豪宏
8 篇 赵建新

语言

763 篇 中文

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胞外表达人源Ly6d蛋白的重组表达质粒、重组细胞及构建方法

胞外表达人源Ly6d蛋白的重组表达质粒、重组细胞及构建方法

引用

作者：余乐程威盛鑫龙刘佩佩 430078 湖北省武汉市东湖新技术开发区高新二路388号武汉光谷国际生物医药企业加速器1.1期7栋4层01室

本发明属于人源Ly6d蛋白分泌表达技术领域，尤其涉及用于胞外表达人源Ly6d蛋白的重组表达质粒、重组细胞及构建方法。该重组表达质粒以包括基础质粒pcDNA3.1以及在所述基础质粒的酶切位点插入的用于表达人源Ly6d重组蛋白目的序列。该重... 详细信息

标准号: CN115873900A

本发明属于人源Ly6d蛋白分泌表达技术领域，尤其涉及用于胞外表达人源Ly6d蛋白的重组表达质粒、重组细胞及构建方法。该重组表达质粒以包括基础质粒pcDNA3.1以及在所述基础质粒的酶切位点插入的用于表达人源Ly6d重组蛋白目的序列。该重组表达质粒转入EXPI293F细胞构建的重组细胞，能够在胞外高表达人源Ly6d，表达量达到255.67mg/1000mLCells，十分利于纯化和收集该重组蛋白，为其后续研究进行生产工作提供帮助。

关键词：人源重组表达质粒重组蛋白重组细胞质粒胞外表达蛋白分泌酶切位点细胞构建表达量高表达构建蛋白转入帮助生产研究

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用于包装柯萨奇病毒B5假病毒的重组表达质粒、假病毒、试剂盒和方法

用于包装柯萨奇病毒B5假病毒的重组表达质粒、假病毒、试剂盒和方...

引用

作者：梁争论陈盼吴星李文辉隋建华 100050 北京市崇文区天坛西里2号

本发明涉及用于包装柯萨奇病毒B5假病毒的重组表达质粒、假病毒、试剂盒和方法。包装柯萨奇病毒B5假病毒的重组表达质粒，pEGFP‑CV‑B5/417质粒表达的CV‑B5结构蛋白在细胞中可以包装pCVB3‑复制子转录的CV‑B3亚基因组RNA，产生的假病毒可... 详细信息

标准号: CN106884017B

本发明涉及用于包装柯萨奇病毒B5假病毒的重组表达质粒、假病毒、试剂盒和方法。包装柯萨奇病毒B5假病毒的重组表达质粒，pEGFP‑CV‑B5/417质粒表达的CV‑B5结构蛋白在细胞中可以包装pCVB3‑复制子转录的CV‑B3亚基因组RNA，产生的假病毒可以用来检测中和抗体。本发明公开了一种安全，灵敏，快速，特异，简便且成本低廉的检测CV‑B5中和抗体的方法。本发明非常适合于快速，大规模地检测中和抗体的试验，对于病毒疫苗的研制及检测患者个体及人群CV‑B5特异性中和抗体水平有着重要的应用价值。

关键词：假病毒中和抗体重组表达质粒柯萨奇病毒检测特异性中和抗体亚基因组RNA 转录病毒疫苗结构蛋白质粒表达复制子试剂盒灵敏细胞人群试验应用安全

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一种烷基辅酶M还原酶重组表达质粒转化产甲烷古菌的方法

一种烷基辅酶M还原酶重组表达质粒转化产甲烷古菌的方法

引用

作者：茶桂宏承磊白丽萍代丽蓉冷欢杨清 610000 四川省成都市武侯区人民南路四段13号

本发明公开了一种烷基辅酶M还原酶重组表达质粒转化产甲烷古菌的方法，属于厌氧微生物技术领域，其中，在制备原生质体时采用聚乙二醇8000与醋酸锂进行处理，优选还采用二硫苏糖醇与蔗糖处理；本发明提供了一种全新的产甲烷古菌原生质... 详细信息

标准号: CN113528413B

本发明公开了一种烷基辅酶M还原酶重组表达质粒转化产甲烷古菌的方法，属于厌氧微生物技术领域，其中，在制备原生质体时采用聚乙二醇8000与醋酸锂进行处理，优选还采用二硫苏糖醇与蔗糖处理；本发明提供了一种全新的产甲烷古菌原生质体的制备方法，其转化效率高达1×10⁶CFU/μg质粒DNA，从而可以将大片段基因或质粒顺利转化到产甲烷古菌细胞中进行有效的基因编辑，并且能实现快速、准确、稳定地大规模定性和定量，为烷基辅酶M还原酶后续代谢途径的研究提供基础。

关键词：产甲烷古菌烷基原生质体还原酶辅酶制备重组表达质粒大片段基因二硫苏糖醇厌氧微生物代谢途径聚乙二醇蔗糖处理转化效率质粒DNA 醋酸锂质粒优选转化定性细胞基因研究

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TnaA-Opt-CYP450 DNA序列、重组表达质粒以及工程菌

TnaA-Opt-CYP450 DNA序列、重组表达质粒以及工程菌

引用

作者：魏麟何彰华袁小黎 410036 湖南省长沙市岳麓区学士街道学士路336号湖南省检验检测特色产业园A7栋03号

本发明提供了TnaA‑Opt‑CYP450DNA序列、重组表达质粒以及工程菌，其融合表达产物具有高效催化色氨酸合成吲哚，进而形成靛蓝的作用；大肠杆菌色氨酸酶基因和Opt‑CYP450DNA序列经化学合成后，运用分子克隆技术将其插入到原核表达载体pET‑... 详细信息

标准号: CN115125258A

本发明提供了TnaA‑Opt‑CYP450DNA序列、重组表达质粒以及工程菌，其融合表达产物具有高效催化色氨酸合成吲哚，进而形成靛蓝的作用；大肠杆菌色氨酸酶基因和Opt‑CYP450DNA序列经化学合成后，运用分子克隆技术将其插入到原核表达载体pET‑22b中构建重组表达质粒，将重组子转化大肠杆菌BL21(DE3)，获得基因工程菌BL21(DE3)/TnaA‑Opt‑CYP450。该工程菌可在大肠杆菌中实现以色氨酸为底物催化靛蓝色素生物合成，为后续应用生物合成技术实现靛蓝的工业化生产奠定基础。

关键词：重组表达质粒大肠杆菌工程菌色氨酸催化大肠杆菌色氨酸分子克隆技术融合表达产物原核表达载体基因工程菌合成技术化学合成生物合成应用生物酶基因重组子底物构建吲哚合成转化

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一种核糖体结合位点、重组表达质粒、转化子及其应用

一种核糖体结合位点、重组表达质粒、转化子及其应用

引用

作者：陈玲周豪宏刘修才 201203 上海市浦东新区上海市自由贸易试验区蔡伦路1690号5幢4楼

本发明第一方面涉及一种核糖体结合位点，第二方面涉及包含这种核糖体结合位点的重组表达质粒，第三方面涉及包含所述重组表达质粒的转化子，本发明还涉及这种转化子在发酵生产多肽，以及进一步发酵生产1,5‑戊二胺的方面的应用。本发明... 详细信息

标准号: CN108456669B

本发明第一方面涉及一种核糖体结合位点，第二方面涉及包含这种核糖体结合位点的重组表达质粒，第三方面涉及包含所述重组表达质粒的转化子，本发明还涉及这种转化子在发酵生产多肽，以及进一步发酵生产1,5‑戊二胺的方面的应用。本发明的技术要点在于所述核糖体结合位点的序列5’‑3’包含如下所示的序列之一：a)、GAGAGGAGGA；b)、AAGGGAAATT；c)、TTAAAGAGGG。本发明解决了目前的菌株的赖氨酸脱羧酶的表达量低，菌株体外转化赖氨酸的时间长的技术问题。

关键词：核糖体结合位点重组表达质粒转化子菌株发酵赖氨酸脱羧酶技术要点体外转化表达量赖氨酸多肽二胺生产应用

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短链脱氢酶的重组表达质粒、重组基因工程菌及其应用

短链脱氢酶的重组表达质粒、重组基因工程菌及其应用

引用

作者：欧志敏王延妮邓立霞王娜娜刘美陶紫娟戴艳梅张清宇黄长顺罗亮丽唐岚杜理华 310014 浙江省杭州市拱墅区潮王路18号

本发明公开一种短链脱氢酶的重组表达质粒、重组基因工程菌及其应用，所述应用为以所述重组基因工程菌经诱导培养获得的湿菌体或所述湿菌体经超声破碎、分离纯化提取的短链脱氢酶纯酶为催化剂在不对称还原羰基类化合物制备醇类化合物中... 详细信息

标准号: CN117757826A

本发明公开一种短链脱氢酶的重组表达质粒、重组基因工程菌及其应用，所述应用为以所述重组基因工程菌经诱导培养获得的湿菌体或所述湿菌体经超声破碎、分离纯化提取的短链脱氢酶纯酶为催化剂在不对称还原羰基类化合物制备醇类化合物中的应用，尤其是在不对称还原4‑氯乙酰乙酸乙酯制备(R)‑4‑氯‑3‑羟基丁酸乙酯中的应用。该催化剂具有广泛的底物谱，可高效高选择性催化多种前底物酮的不对称还原反应，并且对不同pH、温度均具有优异的适应能力。

关键词：不对称还原重组基因工程菌短链脱氢酶湿菌体应用底物制备催化剂氯乙酰乙酸乙酯重组表达质粒羟基丁酸乙酯羰基类化合物醇类化合物超声破碎分离纯化高选择性诱导培养纯酶催化

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一种适于大肠杆菌高效表达的IsDNA序列、制备方法、重组表达质粒及工程菌

一种适于大肠杆菌高效表达的IsDNA序列、制备方法、重组表达质粒...

引用

作者：魏麟何彰华袁小黎 518107 广东省深圳市光明区新湖街道圳美社区公常路229号8层

本发明提供了的一种适于大肠杆菌高效表达的IsDNA序列、制备方法、重组表达质粒及工程菌，其表达产物具有高效催化吲哚促进靛蓝形成的作用；基于马蓝植株细胞色素P450mRNA序列(GenbankID：MG857655.1)的核酸和氨基酸序列信息，经过大肠... 详细信息

标准号: CN114934057B

本发明提供了的一种适于大肠杆菌高效表达的IsDNA序列、制备方法、重组表达质粒及工程菌，其表达产物具有高效催化吲哚促进靛蓝形成的作用；基于马蓝植株细胞色素P450mRNA序列(GenbankID：MG857655.1)的核酸和氨基酸序列信息，经过大肠杆菌(***)密码子偏好优化获得；该IsDNA序列经化学合成后，运用亚克隆技术将合成的IsDNA序列插入到质粒pET‑22b中构建重组表达质粒，将重组表达质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)，获得基因工程菌BL21(DE3)/IsDNA。该工程菌可在大肠杆菌中实现靛蓝色素生物合成，为后续应用生物合成技术实现靛蓝的工业化生产奠定基础。

关键词：大肠杆菌重组表达质粒工程菌氨基酸序列信息基因工程菌密码子偏好表达产物高效表达合成技术化学合成生物合成应用生物植株细胞质粒pET 亚克隆构建核酸马蓝色素吲哚催化制备合成转化优化

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一种构建多位点突变重组表达质粒的高效方法

一种构建多位点突变重组表达质粒的高效方法

引用

作者：黄金光孙晓梅 266109 山东省青岛市城阳区长城路700号

本发明公开了一种构建多位点突变重组表达质粒的高效方法，包括如下步骤：将表达质粒pHAT2用双酶切方法采用两种限制性内切酶NcoI和XhoI酶切产生带有粘性末端5’‑CATG‑3’和5’‑AGCT‑3’线性片段，回收线性化质粒片段备用；PCR引物设计... 详细信息

标准号: CN105002200B

本发明公开了一种构建多位点突变重组表达质粒的高效方法，包括如下步骤：将表达质粒pHAT2用双酶切方法采用两种限制性内切酶NcoI和XhoI酶切产生带有粘性末端5’‑CATG‑3’和5’‑AGCT‑3’线性片段，回收线性化质粒片段备用；PCR引物设计；进行三轮PCR反应得到突变表达载体；进行连接反应；构建突变表达载体。本发明具有突变率高、简单易行的特点。

关键词：突变表达载体构建限制性内切酶重组表达质粒线性化质粒表达质粒连接反应线性片段粘性末端点突变双酶切多位备用回收

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褐黄孢链霉菌重组表达质粒及工程菌与应用

褐黄孢链霉菌重组表达质粒及工程菌与应用

引用

作者：刘浩孙春杰何希宏王海霞 300000 天津市河西区大沽南路1038号

本发明涉及褐黄孢链霉菌重组表达质粒及工程菌与应用，通过克隆褐黄孢链霉菌纳他霉素生物合成基因簇中的具有正调控作用的两个基因(pimM和pimE)及外源血红蛋白基因vgb，成功构建了表达载体pIMEP::pimE::pimM::vgb；通过带有表达载体pIME... 详细信息

标准号: CN105907778B

本发明涉及褐黄孢链霉菌重组表达质粒及工程菌与应用，通过克隆褐黄孢链霉菌纳他霉素生物合成基因簇中的具有正调控作用的两个基因(pimM和pimE)及外源血红蛋白基因vgb，成功构建了表达载体pIMEP::pimE::pimM::vgb；通过带有表达载体pIMEP::pimE::pimM::vgb的大肠杆菌ETZ与褐黄孢链霉菌的结合转移实验获得了褐黄孢链霉菌工程菌株；褐黄孢链霉菌工程菌株因纳他霉素生物合成基因簇中的调控基因pimM和胆固醇氧化酶基因pimE过表达的叠加效应，及血红蛋白基因vgb的耐贫氧性能，可提高纳他霉素生物合成基因簇的转录，从而显著提高纳他霉素的产量。

关键词：褐黄孢链霉菌纳他霉素生物合成基因簇血红蛋白基因表达载体工程菌株胆固醇氧化酶基因重组表达质粒大肠杆菌转录调控基因调控作用叠加效应工程菌构建贫氧外源克隆基因应用成功

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t10,c12-共轭亚油酸工程菌株及其重组表达质粒与构建方法和应用

t10,c12-共轭亚油酸工程菌株及其重组表达质粒与构建方法和应用

引用

作者：何希宏刘浩尚继领 300000 天津市河西区大沽南路1038号

本发明提供了t10,c12-共轭亚油酸工程菌株及其重组表达质粒与构建方法和应用，在产油霉菌拉曼被孢霉中高效表达来源于痤疮丙酸杆菌的亚油酸异构酶基因，首次建立和优化了农杆菌介导的以潮霉素为筛选标记的拉曼被孢霉的遗传转化系统，构... 详细信息

标准号: CN105039385A

本发明提供了t10,c12-共轭亚油酸工程菌株及其重组表达质粒与构建方法和应用，在产油霉菌拉曼被孢霉中高效表达来源于痤疮丙酸杆菌的亚油酸异构酶基因，首次建立和优化了农杆菌介导的以潮霉素为筛选标记的拉曼被孢霉的遗传转化系统，构建了一株通过亚油酸异构酶催化内源性亚油酸合成单一活性异构体t10,c12-CLA的拉曼被孢霉工程菌株，并利用该菌株成功发酵合成t10,c12-CLA，是一种能利用内源性亚油酸一步法生产单一CLA异构体的方法。本发明将亚油酸异构酶(PAI)在拉曼被孢霉中得到表达，以霉菌菌丝内的亚油酸为催化底物，生成t10,c12-共轭亚油酸。

关键词：拉曼被孢霉亚油酸亚油酸异构酶共轭亚油酸工程菌株内源性霉菌亚油酸异构酶基因重组表达质粒痤疮丙酸杆菌活性异构体农杆菌介导一步法生产催化底物发酵合成高效表达构建方法筛选标记遗传转化菌丝潮霉素异构体产油构建菌株一种催化生成合成表达应用优化成功建立

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