检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：单晶晶中国医科大学

学位级别：硕士

近年来，量子点凭借其自身独特的光谱特征和光化学稳定性越来越受到人们的重视。量子点（quantum dots，QDs）是一种半导体纳米晶体，与传统荧光染料相比，具有激发光谱宽、发射光谱窄、发光效率高，发光颜色可调，并且具有较高的荧光... 详细信息

近年来，量子点凭借其自身独特的光谱特征和光化学稳定性越来越受到人们的重视。量子点（quantum dots，QDs）是一种半导体纳米晶体，与传统荧光染料相比，具有激发光谱宽、发射光谱窄、发光效率高，发光颜色可调，并且具有较高的荧光强度和光稳定性，能够承受多次的激发和光发射等一系列优点，在实验室诊断中有着广泛的应用前景。 　　肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae，Mp)不仅引起急性呼吸道疾病，还引起其它多系统、多器官的肺外并发症。由于Mp无细胞壁，故其引起感染的治疗与其它细菌和病毒感染在治疗方法上有所不同，因此，Mp感染的病原学诊断对于疾病的及时正确治疗有重要意义。对Mp的实验室诊断，主要是通过支原体分离培养、血清学检测和分子生物学等方法，而这些方法存在着各自不同的优缺点，因此，到目前为止，国内外对Mp的实验室诊断没有统一的标准。本研究基于QDs标记技术，针对Mp抗原建立了一种快速、简易可靠，而且特异的诊断方法。 　　方法: 　　 1、肺炎支原体P1重组蛋白多克隆抗体的制备与纯化 　　经P1重组蛋白免疫家兔获得抗血清后，采用硫酸铵沉淀法和离子交换层析法对其进行纯化，通过聚丙烯凝胶电泳检测其分子量与纯度。 　　 2、量子点与肺炎支原体P1重组蛋白多克隆抗体的偶联 　　采用碳二亚胺盐连接法，使量子点QD605的羧基与抗体上的氨基反应，形成肽键。然后用离心法纯化偶联产物，纯化后采用膜直接免疫荧光法验证量子点QD605与抗体的偶联，并采用荧光分光光度法对其荧光效率进行检测。 　　 3、偶联产物检测肺炎支原体 　　采用直接免疫荧光法用偶联产物与待检测抗原反应，洗去偶联产物后进行荧光检测。同时对其敏感性和特异性进行检测。 　　结果: 　　 1、肺炎支原体P1重组蛋白多克隆抗体的纯化鉴定结果 　　 P1重组蛋白免疫家兔获得的抗血清经硫酸铵沉淀法和离子交换层析法纯化后，在聚丙烯凝胶电泳上可见在58KD处有明显的一条带。 　　 2、量子点与肺炎支原体P1重组蛋白多克隆抗体的偶联结果 　　膜直接免疫荧光法表明只有偶联产物与Mp抗原反应在紫外灯下发荧光，单独的量子点QD605、未标记的抗体及其它对照与Mp抗原反应在紫外灯下均不发荧光，验证了量子点QD605与抗体的偶联。然后采用荧光分光光度法对量子点QD605及偶联产物的荧光效率进行检测，结果显示两者并没有明显的改变，说明偶联产物的荧光强度没有受到偶联过程的影响。 　　 3、本研究敏感性及特异性检测结果 　　 (1)敏感性检验采用棋盘滴定的方法最后确定的抗原检测浓度为1ng/ml。 　　 (2)特异性检验用上述偶联产物分别与金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、甲链、乙链反应，结果显示未阴性，可用作诊断使用。 　　结论: 　　本研究成功建立了用量子点检测肺炎支原体抗原的方法，该方法具有较好的特异性和敏感性，并且操作简便、快速。

关键词：肺炎支原体量子点标记技术检测方法多克隆抗体

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基于新型量子点标记技术的超敏肌钙蛋白T检测试剂在临床早期诊断急性心肌梗死和心肌损伤中的应用价值

引用

药物生物技术 2019年第5期26卷 393-397页

作者：赵领会贾支俊王志荣徐州医科大学江苏徐州221000 徐州医科大学附属医院江苏徐州221000 南京大学医学院附属鼓楼医院江苏南京210000

分析基于新型量子点标记技术的超敏肌钙蛋白T(hs-cTnT)检测试剂在临床早期诊断心肌损伤中的应用价值。描述了该检测试剂的制备工艺,对其测定肌钙蛋白进行重复性、精密度、检出限(Lo D)、线性、第99百分位值和10%不精密度(CV)考察,并与... 详细信息

分析基于新型量子点标记技术的超敏肌钙蛋白T(hs-cTnT)检测试剂在临床早期诊断心肌损伤中的应用价值。描述了该检测试剂的制备工艺,对其测定肌钙蛋白进行重复性、精密度、检出限(Lo D)、线性、第99百分位值和10%不精密度(CV)考察,并与已上市的同类检测试剂进行了性能比对。线性范围5~10 000 ng/L,线性关系良好。重复性和精密度试验的CV均<10%,重复性和精密度良好。检测结果与罗氏高敏心肌肌钙蛋白T的检测结果的回归方程是y=0. 992 4x+22. 058,r2=0. 995 8,具有较好的一致性。在临床早期心肌损伤诊断中超敏肌钙蛋白T较c Tn I、CK-MB有更高敏感性和灵敏度。基于新型量子点标记技术的hs-cTnT检测试剂其检测性能达到临床使用的要求,为急性心肌梗死和心肌损伤的早期诊断提供一种更加快速方便的检测方法,有良好临床应用价值。

关键词：量子点标记技术超敏肌钙蛋白T 急性心肌梗死心肌损伤早期临床诊断

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量子点标记肺炎支原体重组蛋白抗体检测抗原方法的建立

引用

中国人兽共患病学报 2011年第8期27卷 704-707页

作者：曾晶晶何梦博赵芝娜周世冠王桂珍中国医科大学基础医学院病原生物学教研室沈阳110001

目的建立一种用CdSe/ZnS量子点标记技术用于肺炎支原体检测的方法。方法用重组Mp P1蛋白免疫动物制备免疫血清,硫酸铵沉淀法及离子层析法纯化IgG抗体,纯化抗体用CdSe/ZnS量子点标记,离心沉淀法纯化标记产物。用标记抗体检测Mp抗原。结... 详细信息

目的建立一种用CdSe/ZnS量子点标记技术用于肺炎支原体检测的方法。方法用重组Mp P1蛋白免疫动物制备免疫血清,硫酸铵沉淀法及离子层析法纯化IgG抗体,纯化抗体用CdSe/ZnS量子点标记,离心沉淀法纯化标记产物。用标记抗体检测Mp抗原。结果量子点标记抗体直接玻片荧光法检测Mp抗原具有较高的敏感性(检测灵敏度在0.001μg/mL),且与呼吸道常见病原菌无交叉反应。结论成功建立量子点标记技术检测肺炎支原体抗原方法,具有操作简单、检测快速的优良,适用于Mp感染的早期诊断。

关键词：肺炎支原体量子点标记技术抗原检测

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