检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：聂文琦大连工业大学

学位级别：硕士

苹果采后运输和贮藏期间,苹果果实经常受到病原微生物侵染,既危害食用者健康,又导致果实腐烂带来严重经济损失。目前苹果采后病害的防治主要采用物理和化学防治,但物理方法费用较高,而化学方法存在农药残留,产生抗药性并对环境造成污染... 详细信息

苹果采后运输和贮藏期间,苹果果实经常受到病原微生物侵染,既危害食用者健康,又导致果实腐烂带来严重经济损失。目前苹果采后病害的防治主要采用物理和化学防治,但物理方法费用较高,而化学方法存在农药残留,产生抗药性并对环境造成污染,因此利用植物源抑菌剂在苹果采后病害防治中具有十分重要的意义。银杏外种皮（Ginkgo biloba exocarp）含有丰富的抑菌作用物质,对常见致病真菌具有良好的抑制作用,然而银杏的研究多集中在银杏叶及银杏白果上,而外种皮通常被当作废物丢弃,不仅造成资源损失,还污染环境,利用银杏外种皮提取物的抑菌作用防治苹果黑腐病,目前还未取得较大成果,需要继续研究。因此,本论文利用废弃的银杏外种皮为主要原料,研究了银杏外种皮提取物对苹果链格孢霉菌的抑制作用以及对苹果贮藏品质的影响,具体研究结果如下: （1）研究了不同溶剂提取银杏外种皮的抑菌效果。用水、80%甲醇和80%乙醇三种溶剂提取银杏外种皮活性物质,研究不同提取物的抑制效果,发现乙醇提取物（GBEE）的抑菌效果最好,抑菌率可达61.39%,显著高于水提取物（GBEW）和甲醇提取物（GBEM）。（2）研究了银杏外种皮提取物中有效抑菌成分。通过测量其总黄酮和总酚含量发现GBEE中的总黄酮含量最高,含量可达0.57 mg/m L,而GBEW中总酚含量最高,可达2.01 mg/m L,说明对苹果链格孢霉起到主要抑制作用的可能是黄酮类物质;通过对三种提取物中黄酮的HPLC分析中发现GBEE比GBEW和GBEM多了一种黄酮类化合物—山奈酚,而在GBEE和GBEM这两种醇提物中没有发现槲皮素,只在水提取物GBEW中发现。综上,GBEE的抑菌效果好可能是因为其总黄酮含量高,而且比GBEW和GBEM中的黄酮种类多。（3）研究了GBEE对苹果链格孢霉的抑制作用。通过对GBEE处理苹果链格孢霉菌进行形态学观察,结果发现GBEE对苹果链格孢霉菌细胞壁具有明显破坏作用,改变了细胞膜结构,菌丝出现断裂、变细、变形且无细胞壁间隔,能破坏链格孢霉细胞壁和细胞膜的完整性。同时,GBEE能够显著抑制苹果链格孢霉菌孢子萌发和芽管伸长,GBEE处理显著提高了胞外电导率,使苹果链格孢霉菌体细胞膜通透性增加,膜脂过氧化程度加剧,MDA和H2O2含量升高,胞内核酸、蛋白质外泄,抑制POD、PPO和CAT抗性相关酶的活性,同时还抑制了PG和PL致病相关酶活性,使苹果链格孢霉菌的抗逆性下降,致病力减弱,从而起到抑菌的作用。（4）研究了GBEE对苹果贮藏品质的影响。GBEE对苹果黑腐病发病率的防治呈剂量依赖性,GBEE的浓度越高,其防治效果越好,发病率越低。GBEE可减缓苹果果实的失重和硬度的下降。GBEE显著抑制了苹果的呼吸速率,减缓果实衰老的速度。GBEE处理可以延缓苹果果实中TSS和TA含量的下降,使果实保持较好的贮藏品质。GBEE处理后减缓了苹果中类黄酮和总酚含量的下降。GBEE可有效增强苹果果实中POD、CAT、PAL和GLU酶的活性,可见,GBEE处理能够有效提高苹果果实防御相关酶活性,提高自身抗病、抗氧化能力,从而保持良好的贮藏品质,延长货架期。本研究为银杏外种皮的资源利用提供了思路,并为研发具有高效、强抑菌性、低毒、低残留、绿色环保型的植物源抑菌剂替代化学抑菌剂奠定了基础,具有重要的研究意义。

关键词：银杏外种皮提取物苹果链格孢霉菌抑菌

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银杏外种皮提取物干预肿瘤抗原致敏淋巴细胞对Heps的杀伤作用

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生物化工 2024年第1期10卷 87-90页

作者：周鹭许爱华张立虎江苏医药职业学院江苏盐城224005 扬州大学江苏扬州225000

目的:研究在银杏外种皮提取物(GBEE)干预下,肿瘤抗原致敏淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。方法:用正常小鼠的脾脏制备脾淋巴细胞悬液(Lc);用反复冻融法处理肝癌Heps细胞,取其离心上清液制成肿瘤抗原(Ag);以脾淋巴细胞与肿瘤抗原体积比=2... 详细信息

目的:研究在银杏外种皮提取物(GBEE)干预下,肿瘤抗原致敏淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。方法:用正常小鼠的脾脏制备脾淋巴细胞悬液(Lc);用反复冻融法处理肝癌Heps细胞,取其离心上清液制成肿瘤抗原(Ag);以脾淋巴细胞与肿瘤抗原体积比=2∶1配成的肿瘤抗原致敏淋巴细胞溶液(AgLc)和浓度为480μg/mL的GBEE充分混合置于6孔板中,培养箱中培养后,将其加入接种了Heps细胞的孔板中再培养。此为GBEE+AgLc+Heps细胞组,同时设置Heps组、Lc+Heps组、AgLc+Heps组、GBEE+Heps组、GBEE+Lc+Heps组等组别,用MTT法测定各组淋巴细胞对Heps肝癌细胞的体外杀伤活性。结果:肝癌Heps肿瘤抗原致敏的淋巴细胞对Heps细胞的杀伤作用增强,杀伤率为10.63%,与Lc+Heps对照组比较具有统计学差异(P<0.05),GBEE+AgLc+Heps组杀伤肿瘤细胞作用最为明显,杀伤率为50.59%,显著高于其他组(P<0.05)。结论:GBEE能促进肿瘤抗原致敏淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。

关键词：银杏外种皮提取物脾淋巴细胞肝癌细胞抗原

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银杏外种皮提取物对桑叶及蚕茧产质量的影响

银杏外种皮提取物对桑叶及蚕茧产质量的影响

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作者：张笑聪南京林业大学

学位级别：硕士

银杏是我国特有的一种生态经济树种,其果叶花均具有较高价值,已经作为果用林、叶用林和用材林进行大面积栽培。银杏外种皮占银杏种实重量的2/3,目前均作为废弃物丢弃,尚未进行开发利用,而且污染环境,因此对银杏外种皮进行开发利用具有... 详细信息

银杏是我国特有的一种生态经济树种,其果叶花均具有较高价值,已经作为果用林、叶用林和用材林进行大面积栽培。银杏外种皮占银杏种实重量的2/3,目前均作为废弃物丢弃,尚未进行开发利用,而且污染环境,因此对银杏外种皮进行开发利用具有重要的经济和生态价值。本研究以银杏外种皮为试验材料,以桑树和蚕为研究对象,采用田间试验方法,探究不同浓度银杏外种皮提取液对桑叶产质量的影响,同时用处理后的桑叶喂饲家蚕,分析其对蚕生长及蚕茧、茧丝质量的影响;通过盆栽试验,研究银杏外种皮中多糖、黄酮和银杏酚酸与桑叶产量和质量的关系。研究结果能够为银杏外种皮的开发利用提供一定的理论依据,具有一定的应用价值。主要研究结果如下:（1）喷施适宜浓度的银杏外种皮提取液对桑树的生长及桑叶的品质均有显著的促进作用,当浓度在5-20 g·L-1范围内时,叶面积、叶产量、全氮含量、蛋白含量及总黄酮含量的促进效果最为明显。（2）养蚕试验发现,喷施银杏外种皮提取液的桑叶饲喂蚕,蚕茧的茧层量、茧层率和茧丝产量均显著高于对照。当浓度为10-20 g·L-1时,对蚕茧质量及茧丝质量的促进效果最为明显。（3）喷施银杏外种皮多糖提取液能显著提高桑树枝条和叶子的生长量,以浓度为2.0g·L-1的效果最佳;喷施银杏外种皮黄酮提取液能显著提高桑叶叶片中可溶性蛋白和可溶性糖含量,且均以浓度为1.0 g·L-1的效果最佳;喷施银杏外种皮酚酸提取液对桑叶的影响表现为低浓度促进生长,高浓度抑制生长,浓度为0.25 g·L-1时,对桑树的生长、光合作用以及桑叶相关代谢物的指标均有促进作用;喷施银杏外种皮活性成分混合提取液能显著促进桑叶光合作用的进行,提高桑叶叶片中叶绿素含量、总黄酮含量和γ-氨基丁酸含量,且均以浓度为1.5 g·L-1的效果最佳。因此,适宜浓度的银杏外种皮提取物能够促进桑树生长和提高蚕茧质量,银杏外种皮中的多糖和黄酮的共同作用是银杏外种皮提取液能促进桑叶产质量提升的重要原因。

关键词：银杏外种皮提取物桑树蚕茧叶产量叶品质

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银杏外种皮提取物诱导小鼠Lewis肺癌细胞凋亡和自噬的作用及其分子机制研究

银杏外种皮提取物诱导小鼠Lewis肺癌细胞凋亡和自噬的作用及其分...

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作者：曹晨洁扬州大学

学位级别：硕士

目的:通过体内建立C57BL/6J小鼠Lewis肺癌(Lewis lung cancer,LLC)实体瘤模型及体外培养LLC细胞,研究银杏外种皮提取物(Ginkgo biloba exocarp extracts,GBEE)诱导LLC细胞凋亡和自噬的作用及其分子机制。方法:采用C57BL/6J小鼠建立LLC... 详细信息

目的:通过体内建立C57BL/6J小鼠Lewis肺癌(Lewis lung cancer,LLC)实体瘤模型及体外培养LLC细胞,研究银杏外种皮提取物(Ginkgo biloba exocarp extracts,GBEE)诱导LLC细胞凋亡和自噬的作用及其分子机制。方法:采用C57BL/6J小鼠建立LLC实体瘤模型。将荷瘤小鼠随机分为5组,另设不接种肿瘤细胞的正常对照组,每组10只。接种瘤细胞24 h后各组小鼠分别给药。GBEE 3个组(50、100、200mg/kg体重)灌胃(i.g.)给药,阳性对照组腹腔注射(i.p.)环磷酰胺(20mg/kg体重),模型对照组和正常对照组灌胃(i.g.)给予生理盐水(NS)。0.1mL/10g体重,每天1次,连续18 d。停止给药的次日,剥离小鼠的移植瘤并称取瘤质量和计算抑瘤率。体外实验,采用MTT法检测GBEE对LLC细胞及原代培养的小鼠肺细胞增殖的影响。采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;采用Rhodamine 123法检测线粒体膜电位(mitochondrial transmembrane potential,MTP);采用 MDC(Dansylcadaverine)染色法观察细胞中嗜酸性液泡的形成;使用透射电镜确认自噬体的形成;采用qRT-PCR法检测细胞Beclinl及Atg5 mRNA的表达;采用Western blot方法检测细胞相应部位的Bax、Bcl-2、Cyt C、Caspase-3、Fas、FasL、Beclin1、Atg5、LC3 Ⅰ/Ⅱ、MAPK 信号通路蛋白、p-AMPK、AMPK、p-mTOR、mTOR、p-p70S6k 及 p70S6K 蛋白的表达。结果:GBEE可抑制小鼠LLC移植瘤生长,在50-200mg/kg剂量下其抑制率具有量效关系。GBEE(5-160μg/mL)体外可抑制 LLC 细胞增殖,IC50 为 162.43 μg/mL。在 5-160μg/mL浓度下GBEE对原代培养的小鼠肺细胞无明显抑制作用。GBEE(10,20和40μg/mL)作用后LLC细胞凋亡率增加,线粒体膜电位降低,Bax/Bcl-2比值升高,同时其也促进线粒体膜上的Bax/Bcl-2易位以及Cyt C从线粒体释放到胞浆;此外,GBEE使LLC细胞cleaved-Caspase-3蛋白表达上调,Fas及其配体FasL的蛋白表达水平皆提高。另外,GBEE(10,20和40μG/mL)可促进LLC细胞中嗜酸性液泡的产生与活化,并使细胞中自噬体产生增多。同时,GBEE显著上调Beclin1和Atg5 mRNA及其蛋白表达,并下调LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ蛋白比值。结果还显示,在10,20和40μg/mL浓度下,GBEE使LLC细胞p-p38和p-AMPK蛋白表达水平上调,p-ERK1/2、p-JNK1/2、p-mTOR及p-p70S6K 蛋白的表达水平显著下调,而 ERK1/2、JNK1/2、p38、AMPK、mTOR 及 p70S6K的表达无明显变化。结论:GBEE对Lewis肺癌的抗肿瘤作用与其诱导LLC细胞凋亡和自噬有关。该效应涉及对LLC细胞MAPK信号通路与AMPK/mTOR/p70S6k信号通路的调控。

关键词：银杏外种皮提取物 Lewis肺癌细胞凋亡自噬 MAPK AMPK/mTOR/p70S6k

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银杏外种皮提取物抑制B16-F10黑色素瘤转移及其对PI3K/Akt相关信号通路的影响

银杏外种皮提取物抑制B16-F10黑色素瘤转移及其对PI3K/Akt相关信...

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作者：苏雅扬州大学

学位级别：硕士

目的:研究银杏外种皮提取物(Ginkgobiloba exocarp extracts,GBEE)体内外抗B16-F10黑色素瘤转移作用及相关机制。方法:建立C57BL/6J小鼠B16-F10黑色素瘤肺转移模型,将C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组(不接种肿瘤细胞)、模型对照组、阳... 详细信息

目的:研究银杏外种皮提取物(Ginkgobiloba exocarp extracts,GBEE)体内外抗B16-F10黑色素瘤转移作用及相关机制。方法:建立C57BL/6J小鼠B16-F10黑色素瘤肺转移模型,将C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组(不接种肿瘤细胞)、模型对照组、阳性对照组、GBEE各治疗组,每组10只。正常对照组和模型对照组灌胃(ig)给予0.1mL/10g生理盐水(NS),每天1次,连续17d;阳性对照组隔日腹腔注射(ip)给予5mg/kg顺铂(DDP),连续7d;GBEE各治疗组分别ig给予GBEE50、100、200 mg/kg,每天1次,连续17d。给药结束后第2天,剥瘤称量移植瘤重量,计算抑瘤率;摘取肺组织,于解剖显微镜下观察肺转移灶,计算肺转移率和抗转移率;制备肺组织和移植瘤组织切片,苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理学变化;免疫组织化学法检测移植瘤组织CD34的表达并计算微血管密度(MVD),同时检测HIF-1α、VEGF、MMP-9的表达水平。体外培养B16-F10细胞和人脐静脉内皮细胞(HUVEC),采用MTT比色法检测GBEE对B16-F10细胞体外增殖的影响,:通过细胞黏附实验观察GBEE对B16-F10细胞与HUVEC异质黏附作用的影响;采用细胞划痕法检测GBEE对B16-F10细胞迁移的影响。采用qRT-PCR法和Western Blot法检测GBEE在体内外对HIF-1α、VEGF、VEGFR2、NF-κB、MMP-9、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt 表达水平的影响。结果:体内实验结果显示,GBEE(50、100、200 mg/kg)可抑制B16-F10黑色素瘤移植瘤生长和肺转移,使移植瘤组织MMP-9表达减少,并抑制CD34表达、使MVD降低,且效应皆具有剂量依赖性;同时,可抑制B16-F10移植瘤组织HIF-1α、VEGF和VEGFR2 mRNA和蛋白表达,且其抑制作用具有量效关系;还可使B16-F10移植瘤组织p-PI3K、p-Akt的蛋白表达水平呈剂量依赖性降低,但对PI3K、Akt总蛋白表达水平无明显影响。体外实验结果表明,在5-320 μg/mL浓度范围内,GBEE可显著抑制B16-F10细胞增殖,且随着药物浓度的增加其抑制率呈增长趋势;GBEE(10、20、40 μg/mL)呈浓度依赖性抑制B16-F10细胞迁移及B16-F10细胞与HUVEC的异质黏附;在mRNA和蛋白水平,GBEE(10、20、40 μg/mL)对B16-F10细胞NF-κB、MMP-9、p-PI3K、p-Akt的表达具有抑制作用,并呈浓度依赖效应,但对PI3K、Akt表达无明显影响。结论:GBEE抗B16-F10黑色素瘤转移的作用机制可能涉及影响PI3K/Akt/NF-κB/MMP-9信号通路而抑制肿瘤细胞增殖、迁移、异质黏附、细胞外基质(ECM)和基底膜(BM)降解以及干预PI3K/Akt/HIF-1α/VEGF信号通路而抑制血管生成。

关键词：银杏外种皮提取物黑色素瘤转移作用机制 PI3K/Akt

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银杏外种皮提取物重金属元素与银杏酸测定

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世界科学技术-中医药现代化 2016年第1期18卷 65-68页

作者：王俊尹萌韩东冬茅蕾蕾许爱华扬州大学医学院扬州225001 江苏省扬州市药品检验所扬州225009

目的:本研究旨在检测银杏外种皮提取物(Ginkgo Biloba Exocarp Extracts,GBEE)中,5种重金属元素和银杏酸的含量。方法:实验采用水提醇沉法制备6个不同产地的GBEE;采用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定铅、镉、铜、砷4种重金属元素含... 详细信息

目的:本研究旨在检测银杏外种皮提取物(Ginkgo Biloba Exocarp Extracts,GBEE)中,5种重金属元素和银杏酸的含量。方法:实验采用水提醇沉法制备6个不同产地的GBEE;采用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定铅、镉、铜、砷4种重金属元素含量,原子荧光光度法(AFS)测定汞元素含量;采用HPLC法检测银杏酸含量。结果:6个产地的GBEE中,铅、镉、铜、砷、汞的含量均在《中国药典》限量水平以下;且均不含任何银杏酸。结论:GBEE中不含银杏酸成分,其重金属元素含量符合《中国药典》限量规定。

关键词：银杏外种皮提取物重金属元素银杏酸

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银杏外种皮提取物联合顺铂对S180荷瘤小鼠抗肿瘤增效减毒作用

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中国新药杂志 2014年第13期23卷 1569-1573页

作者：陈颖茅蕾蕾胡碧原陈华圣许爱华扬州大学医学院

目的:研究银杏外种皮提取物(GBEE)联合化疗药物顺铂(DDP)对S180荷瘤小鼠抗肿瘤的增效减毒作用。方法:建立小鼠S180移植性实体瘤模型,随机分组,每组10只。实验14 d后,称取体重,处死小鼠,剥离瘤块并称取瘤质量,计算抑瘤率;分离脾脏并称取... 详细信息

目的:研究银杏外种皮提取物(GBEE)联合化疗药物顺铂(DDP)对S180荷瘤小鼠抗肿瘤的增效减毒作用。方法:建立小鼠S180移植性实体瘤模型,随机分组,每组10只。实验14 d后,称取体重,处死小鼠,剥离瘤块并称取瘤质量,计算抑瘤率;分离脾脏并称取脾质量,计算脾脏指数;采用MTT法检测ConA诱导的小鼠脾脏T细胞增殖;采用血液细胞分析仪对小鼠外周血进行血常规分析;采用双抗夹心ELISA法测定小鼠血清IL-3,IL-18及IFN-γ的含量。结果:GBEE与DDP联合应用可显著提高对小鼠的抗肿瘤作用(P<0.01),可明显改善DDP化疗所致荷瘤小鼠外周血WBC数的减少及免疫功能低下等毒副作用(P<0.01或0.05),可显著提升DDP所抑制的荷瘤小鼠血清IL-3,IL-18和IFN-γ的表达水平(P<0.01或0.05),初步发现GBEE 100 mg·kg-1中剂量为最佳增效减毒剂量。结论:GBEE联合DDP对S180荷瘤小鼠抗肿瘤具有增效减毒作用,其机制涉及GBEE上调IL-3,IL-18和IFN-γ的表达水平。

关键词：银杏外种皮提取物顺铂 S180 增效减毒

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银杏外种皮提取物浸种对三种植物种子萌发和幼苗生长的影响

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首都师范大学学报（自然科学版） 2014年第4期35卷 49-52页

作者：张红梅江苏省运河高等师范学校江苏邳州221300

本文研究了不同浓度银杏外种皮提取物浸种对小麦、玉米、大豆萌发和幼苗生长的影响.结果表明:低浓度提取物可提高小麦、大豆和玉米种子的萌发率、发芽率;促进幼苗地上和地下部分生长,其中作用最明显的为500倍提取物的稀释液.在萌发期,50... 详细信息

本文研究了不同浓度银杏外种皮提取物浸种对小麦、玉米、大豆萌发和幼苗生长的影响.结果表明:低浓度提取物可提高小麦、大豆和玉米种子的萌发率、发芽率;促进幼苗地上和地下部分生长,其中作用最明显的为500倍提取物的稀释液.在萌发期,500倍稀释液浸种液处理:提高小麦和玉米幼苗的淀粉酶和叶绿素的含量,促进大豆幼苗叶绿素和蛋白质含量提高,而高浓度的银杏外种皮提取物稀释液处理则降低小麦和玉米幼苗的淀粉酶和叶绿素的含量,也使大豆幼苗叶绿素和蛋白质含量降低.

关键词：银杏外种皮提取物淀粉酶叶绿素氨基酸株高根长

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银杏外种皮提取物对C_(57)BL/6J小鼠Lewis肺癌转移的抑制作用及其机制

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中国药理学与毒理学杂志 2013年第1期27卷 67-71页

作者：沈婷婷许爱华郑媛媛陈华圣扬州大学医学院药理学教研室江苏扬州225001

目的研究银杏外种皮提取物(GBEE)对小鼠Lewis肺癌转移的抑制作用及其作用机制。方法制备C57BL/6J小鼠Lewis肺癌转移模型,随机分为正常对照、模型对照、替加氟80 mg·kg-1(阳性对照)和GBEE 50,100和200 mg·kg-1治疗组。正常和... 详细信息

目的研究银杏外种皮提取物(GBEE)对小鼠Lewis肺癌转移的抑制作用及其作用机制。方法制备C57BL/6J小鼠Lewis肺癌转移模型,随机分为正常对照、模型对照、替加氟80 mg·kg-1(阳性对照)和GBEE 50,100和200 mg·kg-1治疗组。正常和模型对照组ig给予等体积生理盐水,给药组分别ig给予相应药物,每天1次,连续15 d。给药结束后第2天剥瘤称取瘤质量,计算抑瘤率;摘取肺组织,Bouin's液固定后于解剖显微镜下计数肺表面转移灶,计算肺癌转移率和抗转移率;放射免疫法测定血清Ⅳ型胶原(ColⅣ)和透明质酸(HA)的含量;免疫组织化学法检测移植瘤细胞CD44和nm23-H1蛋白的表达。结果 GBEE 50,100和200 mg·kg-1对C57BL/6J小鼠Lewis肺癌移植瘤生长具有明显的抑制作用(P<0.05,P<0.01),移植瘤瘤质量分别为2.6±0.4,2.3±0.4和(2.3±0.6)g,抑瘤率分别为21.3%,32.2%和29.6%。模型对照组小鼠Lewis肺癌转移率为70%,GBEE 50,100和200 mg·kg-1治疗组肺癌转移率分别为50%,30%和40%。与模型对照组比较,GBEE 100 mg·kg-1治疗组小鼠肺癌转移灶明显减少(P<0.01),抗转移率为87.5%;50和200 mg·kg-1无明显影响。与模型对照组比较,GBEE 50,100和200 mg·kg-1可明显降低小鼠血清中ColⅣ和HA含量(P<0.01),抑制小鼠Lewis肺癌移植瘤细胞CD44蛋白表达,并促进nm23-H1蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论 GBEE对Lewis肺癌转移模型小鼠具有抗肿瘤转移作用,其机制可能与增加肿瘤转移抑制基因nm23-H1表达、抑制肿瘤细胞黏附分子CD44表达并降低血清ColⅣ和HA含量有关。

关键词：银杏外种皮提取物 Lewis肺癌肿瘤转移 Ⅳ型胶原透明质酸 CD44 nm23-H1

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GBEE抑制Lewis肺癌肿瘤血管生成及其对Wnt/β-catenin-VEGF信号通路的影响

GBEE抑制Lewis肺癌肿瘤血管生成及其对Wnt/β-catenin-VEGF信号通...

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作者：韩东冬扬州大学

学位级别：硕士

目的:本研究通过体外培养Lewis肺癌(Lewis lung cancer,LLC)细胞及体内建立C57BL/6J小鼠LLC转移模型,研究银杏外种皮提取物(Ginkgo biloba exocarp extracts,GBEE)体内外抗肿瘤血管生成作用及其对Wnt/β-catenin(β-链蛋白)-VEGF(vascular endothelial growth factor,血管内皮生长因子)信号通路及PKB(protein kinase B,蛋白激酶B)的影响,揭示GBEE抑制肿瘤血管生成的部分作用机制。方法:MTT法检测GBEE对LLC细胞体外增殖的影响。建立小鼠LLC转移模型。将C57BL/6J小鼠随机分为正常组、模型组、阳性组和GBEE(50、100、200 mg/kg)治疗组,每组10只。正常组不接种肿瘤细胞悬液。正常组和模型组***0.1mL/10g,阳性组i.p.环磷酰胺(cyclophosphamide,CPA)20 mg/kg,GBEE 治疗组分别 *** 50、100、200 mg/kg。皆每天1次,连续20 d。给药结束后,计算抑瘤率、肺转移率和抗转移率。HE染色对肺及移植瘤组织进行组织学观察,免疫组化法观察移植瘤微血管密度(microvessel density,MVD)。体内外 VEGF、VEGFR2(Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 2,血管内皮生长因子受体 2)mRNA 或 Wnt、β-catenin、VEGF、VEGFR2 和 p-PKB(phospho-protein kinase B,磷酸化蛋白激酶B)/PKB蛋白表达水平分别通过qRT-PCR或Western Blot测定。结果:GBEE 5、10、20、40、80和160 μg/mL对体外培养的LLC细胞具有浓度依赖性生长抑制作用。GBEE(10、20、40 μg/mL)作用于LLC细胞48 h,能显著抑制LLC细胞中Wnt 和 β-catenin 蛋白表达及 VEGF、VEGFR2 mRNA 的表达。GBEE(50、100、200 mg/kg)体内给药,可显著抑制C57BL/6J小鼠LLC移植瘤生长和LLC肺转移,并使移植瘤中CD34表达减少,MVD降低,且效应皆具有剂量依赖性。此外,GBEE能抑制LLC移植瘤中Wnt、β-catenin、VEGF、VEGFR2 和 p-PKB/PKB 蛋白表达,下调 VEGF、VEGFR2mRNA的表达水平。结论:GBEE对LLC荷瘤小鼠抗肿瘤及抗肿瘤转移效应具有量效关系,其机制与抑制肿瘤血管形成作用有关,涉及干扰Wnt/β-catenin信号通路,抑制下游靶基因VEGF和VEGFR2的表达,进而影响VEGF下游信号分子PKB蛋白磷酸化的表达。

关键词：银杏外种皮提取物 Wnt β-catenin VEGF VEGFR2 血管生成 Lewis肺癌细胞

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