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氧化应激环境中长链非编码rna klhl7-as1对髓核细胞增殖和凋亡的影响及其机制

中华医学杂志 2025年第5期105卷 379-384页

作者：杨钊琦孙中仪戴健马健李瑶孙宇唐晓明南京医科大学附属淮安第一医院骨科淮安223300 南京江北医院骨科南京210048

目的研究氧化应激环境中长链非编码rna klhl7-as1(Lncrna klhl7-as1)对髓核细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法应用人髓核细胞HUM-iCell-s012对细胞进行分组处理,未氧化的髓核细胞转染pcDNA空载体(pcDNA-control)以构建空白对照组(pcDN... 详细信息

目的研究氧化应激环境中长链非编码rna klhl7-as1(Lncrna klhl7-as1)对髓核细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法应用人髓核细胞HUM-iCell-s012对细胞进行分组处理,未氧化的髓核细胞转染pcDNA空载体(pcDNA-control)以构建空白对照组(pcDNA-control)。参考以往氧化应激诱导椎间盘髓核细胞衰老的研究及前期实验,以400μmol/L的H_(2)O_(2)处理髓核细胞,建立氧化应激环境。氧化的髓核细胞分别转染pcDNA-control、klhl7-as1干扰rna(sirna-klhl7-as1)和klhl7-as1过表达质粒(pcDNA-klhl7-as1)以构建模型对照组(H_(2)O_(2)+pcDNA-control)、模型沉默组(H_(2)O_(2)+sirna-klhl7-as1)以及模型过表达组(H_(2)O_(2)+pcDNA-klhl7-as1)。依上处理后,检测比较各组(n=3)klhl7-as1表达、细胞增殖及细胞凋亡情况,并检测比较各组细胞淋巴瘤基因-2蛋白(BCL-2)以及BCL-2相关蛋白(BAX)表达情况。结果模型对照组的klhl7-as1表达高于空白对照组(7.716±0.851比0.996±0.086),模型过表达组高于模型沉默组(19.592±1.747比4.222±0.039)(均P<0.001)。模型沉默组细胞活性与空白对照组相当(0.125±0.006比0.127±0.010,P=0.390),但细胞凋亡率较高(17.2%±1.7%比11.5%±1.0%),BCL-2蛋白表达亦较高(0.897±0.025比0.730±0.026),BAX蛋白表达较低(0.250±0.030比0.523±0.015)(均P<0.05)。模型沉默组的细胞活性高于模型对照组(0.125±0.006比0.076±0.008),细胞凋亡率较低(17.2%±1.7%比30.7%±2.3%),BCL-2蛋白表达较高(0.730±0.026比0.440±0.036),BAX蛋白表达较低(0.523±0.015比0.723±0.021),差异均有统计学意义(均P<0.001)。模型沉默组的细胞活性高于模型过表达组(0.125±0.006比0.039±0.006),细胞凋亡率较低(17.2%±1.7%比43.1%±1.9%),BCL-2蛋白表达较高(0.730±0.026比0.227±0.021),BAX蛋白表达较低(0.523±0.015比1.147±0.035),差异均有统计学意义(均P<0.001)。结论下调klhl7-as1的表达可促进髓核细胞的增殖,抑制髓核细胞的凋亡,其机制可能是通过调节蛋白BCL-2和BAX的合成,进而延缓椎间盘退变的发展。

关键词：椎间盘氧化应激长链非编码rna klhl7-as1 髓核细胞

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