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长链非编码rna lbx2-as1调控微小rna-491-5p影响骨肉瘤细胞增殖及凋亡的机制

中华实验外科杂志 2020年第3期37卷 504-508页

作者：曹亚伟肖鹏孙金鹏宋晓东郑飞吴学建郑州大学第一附属医院骨科 450052

目的探讨长链非编码rna((lncrna)lbx2-as1靶向调控微小rna(mirna,miR)-491-5p影响骨肉瘤细胞增殖及凋亡的分子机制。方法采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测2017年10月至2018年12月郑州大学第一附属医院收集的骨肉瘤组织与瘤... 详细信息

目的探讨长链非编码rna((lncrna)lbx2-as1靶向调控微小rna(mirna,miR)-491-5p影响骨肉瘤细胞增殖及凋亡的分子机制。方法采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测2017年10月至2018年12月郑州大学第一附属医院收集的骨肉瘤组织与瘤旁组织中lbx2-as1、miR-491-5p的表达量。选取人骨肉瘤细胞U2OS为研究对象,按照数字表法随机分为4组:si-NC组(转染si-NC)、si-lbx2-as1组(转染si-lbx2-as1)、si-lbx2-as1+anti-miR-NC组(共转染si-lbx2-as1与anti-miR-NC)、si-lbx2-as1+anti-miR-491-5p组(共转染si-lbx2-as1与anti-miR-491-5p),分别将si-NC、si-lbx2-as1、si-lbx2-as1与anti-miR-NC、si-lbx2-as1与anti-miR-491-5p转染至U2OS细胞。噻唑蓝(MTT)检测细胞存活率;应用流式细胞仪检测细胞周期;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验验证lbx2-as1与miR-491-5p的靶向关系;蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞周期蛋白1(Cyclin D1)、p21、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)蛋白表达量。两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果瘤旁组织与骨肉瘤组织组织中lbx2-as1的表达量分别为(1.01±0.10)、(3.56±0.35),miR-491-5p的表达量分别为(1.02±0.10)、(0.16±0.02),与瘤旁组织比较,骨肉瘤组织中lbx2-as1的表达水平显著升高(t=35.027,P<0.05),miR-491-5p的表达水平显著降低(t=42.165,P<0.05),差异均有统计学意义;si-NC组与si-lbx2-as1组细胞存活率分别为(100.02±10.00)%、(55.67±5.54)%,G1期比例分别为(38.51±2.55)%、(52.27±4.68)%,S期比例分别为(30.10±2.14)%、(15.36±1.26)%,细胞凋亡率分别为(8.28±0.92)%、(24.11±2.37)%,与si-NC组比较,si-lbx2-as1组细胞存活率显著降低(t=11.638,P<0.05),细胞周期G1期比例明显升高(t=7.745,P<0.05),S期比例明显降低(t=17.806,P<0.05),细胞凋亡率显著升高(t=18.680,P<0.05),Cyclin D1表达量显著降低(t=20.871,P<0.05),p21、Caspase-3表达量显著升高(t=22.687,P<0.05;t=20.871,P<0.05),差异均有统计学意义;双荧光素酶报告实验证实lbx2-as1能够靶向结合miR-491-5p;抑制miR-491-5p表达能减弱抑制lbx2-as1表达对U2OS细胞增殖的抑制作用,还能减弱抑制lbx2-as1表达对U2OS细胞凋亡的促进作用。结论lncrna lbx2-as1通过调控miR-491-5p从而促进骨肉瘤细胞增殖,抑制细胞凋亡。

关键词：长链非编码rna lbx2-as1 微小rna-491-5p 骨肉瘤增殖脱噬作用

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长链非编码rna lbx2-as1通过表皮生长因子受体信号通路调控胶质瘤细胞增殖、迁移及凋亡的研究

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中国医师进修杂志 2022年第11期45卷 992-997页

作者：王松涛王明磊曹崇威同济大学附属普陀人民医院神经外科上海200060

目的探讨长链非编码rna(lncrna)lbx2-as1通过表皮生长因子受体(EGFR)信号通路调控胶质瘤细胞增殖、迁移及凋亡的机制。方法2018年4月至2021年8月,将脑胶质瘤U251细胞(简称U251细胞)分为对照组和观察组,每组4株,对照组采用常规培养,观察... 详细信息

目的探讨长链非编码rna(lncrna)lbx2-as1通过表皮生长因子受体(EGFR)信号通路调控胶质瘤细胞增殖、迁移及凋亡的机制。方法2018年4月至2021年8月,将脑胶质瘤U251细胞(简称U251细胞)分为对照组和观察组,每组4株,对照组采用常规培养,观察组利用靶向lbx2-as1的特异性小干扰rna(sirna)转染。采用四甲基偶氮唑盐法检测U251细胞增殖能力,划痕实验检测U251细胞转移率,流式细胞仪检测U251细胞凋亡率,蛋白印迹法检测U251细胞总蛋白及血管内皮生长因子(VEGF)、磷酸化磷酸肌醇3激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、磷酸化Ras(p-Ras)和磷酸化Raf(p-Raf)蛋白的表达。结果观察组U251细胞增殖能力、转移率明显低于对照组[(27.15±1.38)%比(63.54±2.47)%、(37.09±3.74)%比(82.17±9.24)%],U251细胞凋亡率明显高于对照组[(69.17±5.83)%比(17.58±1.22)%],差异有统计学意义(P<0.01)。观察组U251细胞总蛋白及VEGF、p-PI3K、p-Akt、p-Ras、p-Raf蛋白表达水平明显低于对照组(1.52±0.23比2.39±0.31、0.73±0.08比1.68±0.45、0.57±0.11比1.89±0.31、0.68±0.06比1.74±0.51、0.84±0.12比1.99±0.63和0.71±0.08比1.52±0.37),差异有统计学意义(P<0.01)。结论lncrna lbx2-as1在胶质瘤细胞中高表达,沉默lncrna lbx2-as1的表达通过EGFR通路抑制脑胶质瘤细胞的增殖和转移。

关键词：神经胶质瘤长链非编码rna lbx2-as1 表皮生长因子受体通路

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Lncrna lbx2-as1在结肠癌中生物信息学分析及初步验证

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中国医药科学 2024年第13期14卷 4-7,28页

作者：李梦婷韦柳萍张志杰广西壮族自治区柳州市中医医院(柳州市壮医医院)消化内科广西柳州545001

目的基于生物信息学角度探讨长链非编码rna(Lncrna)lbx2反义rna1(lbx2-as1)对结肠癌预后的影响并进行初步验证。方法在基因表达交互分析(GEPIA)数据库查找并明确与结肠癌预后密切相关的基因lbx2-as1,在UCSCxena数据库中下载结肠癌数据集... 详细信息

目的基于生物信息学角度探讨长链非编码rna(Lncrna)lbx2反义rna1(lbx2-as1)对结肠癌预后的影响并进行初步验证。方法在基因表达交互分析(GEPIA)数据库查找并明确与结肠癌预后密切相关的基因lbx2-as1,在UCSCxena数据库中下载结肠癌数据集(TCGA-COAD)及生存信息,并分为lbx2-as1高低表达组后绘制生存曲线。分别检测临床标本结肠癌及癌旁组织中lbx2-as1的表达并分析其与结肠癌临床病理特征的相关性。沉默SW480细胞株lbx2-as1表达后,通过细胞增殖实验、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验检测各组细胞的增殖、侵袭和转移能力。结果通过GEPIA数据库检索发现lbx2-as1与结肠癌患者的预后密切相关。UCSCxena数据库下载TCGA-COAD的生存信息分析提示,随着生存时间延长,高表达lbx2-as1组存活例数明显少于低表达组;与癌旁组织比较,lbx2-as1在结肠癌组织中明显高表达,且表达水平与患者年龄、性别临床参数无关,与结肠癌的病理分期及淋巴结转移呈正相关。沉默lbx2-as1后结肠癌细胞SW480细胞增殖率明显降低,划痕距离明显增宽,侵袭细胞数明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论基于生物信息学分析,结合临床数据及细胞实验验证,Lncrna lbx2-as1在结肠癌中起促癌作用。

关键词：长链非编码rna lbx2-as1 结肠癌侵袭转移

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布比卡因调控Lncrna lbx2-as1对宫颈癌细胞SiHa增殖及凋亡的影响

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中国药师 2021年第10期24卷 1829-1832,1852页

作者：封雪赵滨滨王咏强黑龙江中医药大学附属第一医院麻醉手术科哈尔滨150040 哈尔滨市红十字中心医院门诊部

目的:探讨布比卡因对宫颈癌细胞SiHa增殖、凋亡的影响及其对Lncrna lbx2-as1的调控作用。方法:体外培养人宫颈癌细胞SiHa,分别加入不同剂量的布比卡因处理细胞,分别将si-NC、si-lbx2-as1转染至SiHa细胞,分别将pcDNA、pcDNA-lbx2-as1转染... 详细信息

目的:探讨布比卡因对宫颈癌细胞SiHa增殖、凋亡的影响及其对Lncrna lbx2-as1的调控作用。方法:体外培养人宫颈癌细胞SiHa,分别加入不同剂量的布比卡因处理细胞,分别将si-NC、si-lbx2-as1转染至SiHa细胞,分别将pcDNA、pcDNA-lbx2-as1转染至SiHa细胞后使用布比卡因处理;采用MTT实验检测细胞增殖;应用流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡率;采用qRT-PCR法检测lbx2-as1的表达量;Western blot法检测Cleaved-caspase3、pro-caspase3蛋白表达量。结果:布比卡因可明显降低光密度(OD)值、S期细胞比例、lbx2-as1的表达水平及pro-caspase3蛋白水平(P<0.05),提高凋亡率、G0-G1期细胞比例及Cleaved-caspase3蛋白水平(P<0.05);转染si-lbx2-as1可明显降低OD值、S期细胞比例及pro-caspase3蛋白水平(P<0.05),提高凋亡率、G0-G1期细胞比例及Cleaved-caspase3蛋白水平(P<0.05);转染pcDNA-lbx2-as1可明显逆转布比卡因对SiHa细胞增殖、细胞周期及凋亡的作用(P<0.05)。结论:布比卡因可通过下调lbx2-as1的表达从而抑制宫颈癌细胞增殖、诱导细胞周期阻滞于G0-G1期细胞比例及促进细胞凋亡。

关键词：布比卡因长链非编码rna lbx2-as1 宫颈癌增殖凋亡

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