检索结果-内蒙古大学图书馆

食品与生物技术学报 2024年第6期43卷 40-49页

作者：谈婷罗毅皓孙万成孙祥祥青海大学农牧学院青海西宁810016

为了检测青海部分地区7家不同牧场牦牛乳κ-酪蛋白和αs1-酪蛋白基因多态性,作者分析了基因多态性对奶酪凝乳特性的影响。通过提取牦牛乳体细胞,采用限制性片段长度多态性聚合酶链式反应(polymerase chain reaction-restrition fragment... 详细信息

为了检测青海部分地区7家不同牧场牦牛乳κ-酪蛋白和αs1-酪蛋白基因多态性,作者分析了基因多态性对奶酪凝乳特性的影响。通过提取牦牛乳体细胞,采用限制性片段长度多态性聚合酶链式反应(polymerase chain reaction-restrition fragment length polymophism,PCR-RFLP)分析技术,对提取的DNA进行PCR扩增及酶切,对电泳条带进行基因分型;提取牦牛乳蛋白,采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)分析各样品与标准品色谱图,对出峰时间和出峰形状进行基因分型。利用流变仪测定不同基因型牦牛乳凝乳过程中流变特性,记录奶酪凝乳时间,计算奶酪得率。牦牛乳κ-酪蛋白基因有AA型、AB型和BB型3种基因型,3种基因型与凝乳特性的分析表明,在凝乳时间方面A等位基因为有利等位基因。牦牛乳αs1-酪蛋白存在AA型、AB型和BB型3种类型,3种基因型与凝乳特性的分析表明,在凝乳时间、奶酪得率、最大动力黏度和最大剪切速率方面B等位基因为有利等位基因。以上结果表明,青海7家牧场牦牛乳κ-酪蛋白和αs1-酪蛋白均存在基因多态性,κ-酪蛋白A等位基因和αs1-酪蛋白B等位基因是影响牦牛乳凝乳特性的主效基因。

关键词：牦牛乳蛋白质多态性高效液相色谱法限制性片段长度多态性聚合酶链式反应凝乳特性

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胃癌患者TYMS、ERCC1基因型在外周血和肿瘤组织中的多态性

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世界华人消化杂志 2013年第18期21卷 1760-1765页

作者：王珊珊沈燕李慧莲卫肖郑州大学第一附属医院河南省郑州市450052 河南省军区门诊部河南省郑州市450000

目的:检测胃癌(gastric cancer,GC)患者外周血和肿瘤组织中胸苷酸合成酶基因(thymidylatesynthase,TYMS)和切除修复交叉互补基因1(excision repair cross-complementing 1,ERCC1)的多态性,比较各基因型在外周血和肿瘤组织中是否一致.方法:收集43例GC患者术前抗凝外周血及肿瘤组织,将其分为外周血组与肿瘤组织组.应用PCR法和限制性片段长度多态性聚合酶链式反应(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)法分别检测外周血与肿瘤组织中TYMS和ERCC1基因的基因型.结果:TYMS和ERCC1基因各基因型与GC患者临床病理因素无显著相关(P>0.05).外周血与肿瘤组织中TYMS基因3R/3R、(2R/2R、2R/3R)基因型检出率76.7%、23.3%,ERCC1基因C/C、(T/T、C/T)基因型检出率为81.3%、18.7%,差别有统计学意义(P<0.01).结论:GC患者外周血和肿瘤组织中TYMS与ERCC1基因各基因型检出率一致,提示外周血标本可代替肿瘤组织标本对TYMS与ERCC1基因多态性进行检测.

关键词：胃癌聚合酶链式反应限制性片段长度多态性聚合酶链式反应基因多态性胸苷酸合成酶基因切除修复交叉互补基因1

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X连锁先天性视网膜劈裂症家系的RS1基因变异分析

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中华医学遗传学杂志 2022年第4期39卷 378-382页

作者：罗萍刘艳秋邢雪莎刘琦罗阳中国医科大学生命科学学院医学基因组学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室沈阳110122 鞍山市中心医院立山院区眼科鞍山114000

目的探讨一个X连锁先天性视网膜劈裂症家系的遗传学病因。方法收集X连锁先天性视网膜劈裂症家系临床资料,采用聚合酶链式反应和Sanger测序法筛查先证者RS1基因外显子及其侧翼序列的变异位点,采用限制性片段长度多态性聚合酶链式反应分... 详细信息

目的探讨一个X连锁先天性视网膜劈裂症家系的遗传学病因。方法收集X连锁先天性视网膜劈裂症家系临床资料,采用聚合酶链式反应和Sanger测序法筛查先证者RS1基因外显子及其侧翼序列的变异位点,采用限制性片段长度多态性聚合酶链式反应分析家系成员和100名无关正常人的相应位点,应用生物信息学方法预测该变异位点致病性。结果该家系中的患者均有RS1基因c.458T>G(***153Gly)变异,家系内正常人及无关正常对照者不含该变异,携带者存在杂合变异,生物信息学分析表明该变异具有致病性。结论RS1基因c.458T>G(***153Gly)变异可导致X连锁先天性视网膜劈裂症。

关键词： X连锁先天性视网膜劈裂症基因变异 RS1基因限制性片段长度多态性聚合酶链式反应

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外周血中肿瘤化疗敏感基因TYMS和ERCC1对胃肠道肿瘤患者化疗效果的评估作用

外周血中肿瘤化疗敏感基因TYMS和ERCC1对胃肠道肿瘤患者化疗效果...

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作者：王珊珊郑州大学

学位级别：硕士

胃肠道肿瘤如胃癌、大肠癌、结肠癌等是世界范围内最常见的恶性肿瘤,我国是胃肠道肿瘤高发区。早期肿瘤手术切除为主,辅以化疗,晚期则以化疗为主,可见化疗是肿瘤治疗中占有重要地位。目前在临床治疗中,5-氟尿嘧啶(5-Fu)与铂类药物作为... 详细信息

胃肠道肿瘤如胃癌、大肠癌、结肠癌等是世界范围内最常见的恶性肿瘤,我国是胃肠道肿瘤高发区。早期肿瘤手术切除为主,辅以化疗,晚期则以化疗为主,可见化疗是肿瘤治疗中占有重要地位。目前在临床治疗中,5-氟尿嘧啶(5-Fu)与铂类药物作为一线化疗药物被广泛应用。不同患者对相同化疗方案的反应性不同,预后也存在差异,说明不同患者对化疗的敏感性不同。造成这种化疗敏感性差异的重要原因之一是遗传变异,这种个体基因的遗传多态性可改变化疗药物作用的关键酶的表达及其生物学活性,从而调节化疗药物代谢与作用靶点的功能,最终影响个体对化疗的反应。随着肿瘤对化疗药物耐药性的出现,寻找能够衡量肿瘤对化疗药物敏感度的标记物和如何逆转肿瘤耐药逐渐成为研究的热点。胸苷酸合成酶基因(thymidylatesynthase, TYMS)和切除修复交叉互补基因1(excision repair cross-complementing1,ERCC1)是最早引起人们关注的肿瘤化疗敏感基因,其多态性与肿瘤化疗药物代谢密切关联。国内外大量报道证实TYMS基因5’端非编码区增强子区域存在一个28bp的串联重复序列,根据此序列的重复次数,主要分为重复两次的2R型和重复3次的3R型,最常见的基因型为3R/3R,2R/3R和2R/2R,由于不同的基因型TYMS mRNA的稳定性不同,表达的蛋白产物的量也不一样,因此造成携带不同基因型TYMS的个体对5氟尿嘧啶(5-Fu)反应性存在差异。ERCC1基因表达产物可以修复铂类化疗药物引起的DNA损伤,但是,如果ERCC1基因第4外显子的118位密码子中出现由C→T碱基的突变(C118T), ERCC1蛋白的表达量就会下降,从而增强铂类化疗药物对肿瘤的杀伤作用。目前,临床上对于化疗敏感基因检测多采用肿瘤组织标本,但患者病程存在个体差异,可能存在不适合进行手术切除等原因,导致肿瘤组织比较难以获得。并且,组织在提取核酸过程中有很多的影响因素,对目的基因多态性的检测存在一定的局限性。因此,寻求一种方便易取的标本类型检测肿瘤化疗敏感基因多态性迫在眉睫,这对肿瘤患者个体化治疗方案的制定将有重要的理论和实践意义。近年来有研究报道,在大肠癌、直结肠癌等消化道肿瘤患者外周血中检测到TYMS和ERCC1基因多态性,但是,对于胃癌患者外周血中是否能够检测到TYMS合ERCC1基因多态性,以及这些基因多态性是否与胃癌组织中存在一致性,目前尚不清楚。本研究首先检测胃癌患者肿瘤组织与外周血中TYMS和ERCC1基因多态性,研究此两种基因在肿瘤组织与外周血中的多态性是否一致,探究外周血基因多态性检测代替组织检测的可行性,在此基础上,收集经5-Fu和铂类药物化疗的消化道肿瘤如大肠癌、胃癌、结肠癌等患者外周血,研究外周血TYMS基因与ERCC1基因多态性在评估肿瘤患者化疗疗效中的作用,为肿瘤患者个体化治疗提供一个简便的实验室评估检测指标。方法 1.实验分组：(1)未化疗患者标本分组：收集43例未经化疗胃癌患者术前抗凝外周血及肿瘤组织,将其分为外周血组与肿瘤组织组。(2)化疗患者标本分组：收集76例采用5-Fu和铂类药物进行化疗的肿瘤患者的外周血,按照实体肿瘤的疗效评价标准(RECIST)对化疗患者的近期疗效进行评价,分为化疗有效组与无效组,有效组包括完全缓解(CR)和部分缓解(PR)例数,无效组包括病情无变化(SD)和病情恶化(PD)例数。 2.应用PCR法和限制性片段长度多态性聚合酶连式反应(PCR-RFLP)法分别检测外周血与肿瘤组织中TYMS和ERCC1基因的基因型。 3.应用SPSS17.0软件进行统计分析,所得资料均用样本例数表示,Spearman法进行样本组间相关性分析,两组问的比较用卡方连续校正法检验,Fisher精确检验法分析基因型与化疗疗效的关系,双侧检验。以P<0.05为差异有统计学意义。结果 ***和ERCC1基因各基因型与胃癌患者临床病理因素无显著相关(P>0.05)。 2.未化疗患者外周血与肿瘤组织中TYMS基因3R/3R、(2R/2R、2R/3R)基因型检出率均为72.09%(31/43)、27.91%(12/46),差别有统计学意义(P<0.01)；ERCC1基因C/C、(T/T、C/T)基因型检出率均为81.39%(35/43)、18.61%(8/43),差别有统计学意义(P<0.01)。 3.按照RECIST标准对化疗患者的近期疗效进行评价,CRO例,PR24例,SD18例,PD34例。 4.化疗患者中TYMS基因3R/3R、(2R/2R、2R/3R)基因型检出率分别为65.79%(50/76)、34.21%(26/76)。携带3R/3R基因型的患者共50例,其中CR

关键词：聚合酶链式反应限制性片段长度多态性聚合酶链式反应肿瘤化疗敏感基因 TYMS ERCC1

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两种生化制药用原材料粗品中动物源成分的PCR检测

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中国药师 2019年第5期22卷 932-935页

作者：李松播王自强邵泓陈钢中国医药工业研究总院上海201203 上海市食品药品检验所

目的:基于限制性片段长度多态性聚合酶链式反应(PCR-RFLP)技术及TaqMan探针实时荧光PCR技术,对三批垂体前叶粗品和2批糜蛋白酶原粗品的动物源性成分进行鉴定。方法:用DNA提取试剂盒提取样品DNA,以DNA提取液为模板分别进行PCR-RFLP及Taq... 详细信息

目的:基于限制性片段长度多态性聚合酶链式反应(PCR-RFLP)技术及TaqMan探针实时荧光PCR技术,对三批垂体前叶粗品和2批糜蛋白酶原粗品的动物源性成分进行鉴定。方法:用DNA提取试剂盒提取样品DNA,以DNA提取液为模板分别进行PCR-RFLP及TaqMan探针实时荧光PCR,检测样品中所含动物源性成分是否与标称动物来源一致。结果:经两种PCR方法检测后确认,3批垂体前叶样品与2批糜蛋白酶原样品所含有的动物源性成分与标称来源一致。结论:生化制药用垂体前叶粗品和糜蛋白酶原粗品可采用PCR-RFLP方法和TaqMan探针实时荧光PCR方法鉴别种属来源。

关键词：垂体前叶糜蛋白酶原种属鉴别限制性片段长度多态性聚合酶链式反应实时荧光聚合酶链式反应

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