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蓝舌病毒湖北株致人肝癌Hep-3B细胞和人肺腺癌A549细胞死亡机制的研究

中华肿瘤杂志 2007年第7期29卷 505-509页

作者：陈杰胡俊董长垣梁科戴莹高靖武汉大学基础医学院病毒学国家重点实验室

目的探讨蓝舌病毒湖北株(BTV-HbC3)致人肝癌Hep-3B和人肺腺癌A549细胞死亡的方式及其作用机制。方法观察细胞感染BTV-HbC3的病变效应;原位末端标记(TUNEL)法检测细胞感染BTV-HbC3是否出现凋亡;激光打描共聚焦显微镜检测荧光标记的细胞... 详细信息

目的探讨蓝舌病毒湖北株(BTV-HbC3)致人肝癌Hep-3B和人肺腺癌A549细胞死亡的方式及其作用机制。方法观察细胞感染BTV-HbC3的病变效应;原位末端标记(TUNEL)法检测细胞感染BTV-HbC3是否出现凋亡;激光打描共聚焦显微镜检测荧光标记的细胞核及内质网变化;萤光照度仪检测病毒诱导细胞caspase-3/7、caspase-8和caspase-9的活性变化。结果BTV-HbC3感染Hep-3B细胞后有明显的病变效应,大量细胞凋亡,细胞核染色质边聚,内质网大量空泡形成,caspase- 3/7活性升高,caspase-8和caspase-9未升高;BTV-HbC3感染A549细胞后有明显病变效应,仅见零星凋亡细胞,内质网有空泡形成,细胞核未见染色质边聚,caspase-3/7和caspase-9活性升高,caspase-8未升高。结论BTV-HbC3主要通过细胞内内质网途径诱导Hep-3B细胞凋亡而发挥其抑瘤作用,而对人肺腺癌的抑瘤作用则是通过诱导A549细胞的非凋亡性程序性死亡来实现的。

关键词：蓝舌病毒凋亡非凋亡性程序性死亡 Hep-3B细胞 A549细胞

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纳米羟基磷灰石诱导肝癌细胞死亡的作用靶点及机理研究

纳米羟基磷灰石诱导肝癌细胞死亡的作用靶点及机理研究

引用

作者：曹献英武汉理工大学

学位级别：博士

纳米粒了是指尺寸在在1～100nm之间的颗粒材料,其独特的物理化学特性已经引起了人们的极大研究兴趣。纳米技术是推动当今医学发展的主要动力之一,在肿瘤防治方面的工作已成为目前研究的热点。纳米羟基磷灰石抗肝癌的应用,得到了越... 详细信息

纳米粒了是指尺寸在在1～100nm之间的颗粒材料,其独特的物理化学特性已经引起了人们的极大研究兴趣。纳米技术是推动当今医学发展的主要动力之一, 在肿瘤防治方面的工作已成为目前研究的热点。纳米羟基磷灰石抗肝癌的应用,得到了越来越多的关注。本课题选用均匀沉淀法、溶胶-凝胶法制备了四种不同粒径的纳米羟基磷灰石,并应用激光粒度分析仪、X-射线衍射、傅立叶红外光谱仪、透射电镜及其电子衍射技术对其粒径、结晶度、成分、形貌等进行了表征。结果显示:纳米羟基磷灰石的粒径分别是59.9nm、170.7nm、288.9nm和421.1nm;红外光谱测试含有羟基磷灰石的特征吸收峰;随着粒径的逐渐增大,其结晶度越来越高,相应x-射线衍射的峰值越尖锐;透射电镜观察分散性越差的颗粒,电子衍射环越清晰。将制备的四种不同粒径的纳米羟基磷灰石,各以三种浓度通过MTT法进行体外抗人肝癌细胞的筛选,结果显示,肝癌细胞对59.9nm的纳米羟基磷灰石高度敏感,为非细胞毒介导的生长抑制效应,抑制率最高可达70%以上,面对人肝细胞的抑制作用明显降低(P<0.01);肝癌细胞对l70.7nm纳米羟基磷灰石比较敏感,但与前者(59.9nm)组比较具有显著性差异(P0.05)。首次采用透射电镜及其电子衍射技术定性研究了细胞内的纳米羟基磷灰石成分,发现外源性的纳米羟基磷灰石能够进入细胞内,并且首次发现其定位于内质网。进一步应用激光共聚焦显微镜技术定量检测了细胞内质网的变化,结果显示:肝痛细胞的内质网含量低于肝细胞(P<0.01);肝癌痛细胞经纳米羟基磷灰石作用后,内质网的含量降低(P<0.05),而肝细胞则变化不显著(P>0.05)。应用琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪检测初步排除了肌癌细胞的凋亡,吖啶橙荧光染色、透射电镜观察,首次提出肝癌细胞的死亡方式为非凋亡性程序性死亡,而且与caspase-9的活性升高有关;进一步研究c-myc、p53的mRNA表达,纳米羟基磷灰石抑制c-myc的表达、上调p53的表达,使肝癌细胞阻滞于

关键词：纳米羟基磷灰石肝癌细胞生长抑制非凋亡性程序性死亡内质网

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蓝舌病毒HbC3株致人肝癌Hep-3B和人肺腺癌A549细胞死亡机理的研究

蓝舌病毒HbC3株致人肝癌Hep-3B和人肺腺癌A549细胞死亡机理的研究

引用

2006年度学术研讨会

作者：胡俊陈杰梁科戴莹董长垣武汉大学基础医学院病毒学国家重点实验室分子病毒与癌研究室武汉大学基础医学院病毒学国家重点实验室分子病毒与癌研究室武汉大学基础医学院病毒学国家重点实验室分子病毒与癌研究室武汉大学基础医学院病毒学国家重点实验室分子病毒与癌研究室武汉大学基础医学院病毒学国家重点实验室分子病毒与癌研究室

本研究室在对蓝舌病毒中国湖北株3(BTV-HbC3)长期的研究过程中,已初步明确BTV-HbC3具备成为一种溶癌病毒的潜能。但该病毒抗肿瘤及体外诱导多种肿瘤细胞死亡的效应有所不同,其抗肿瘤的确切分子机制也不十分清楚,针对此问题,本研究选取... 详细信息

本研究室在对蓝舌病毒中国湖北株3(BTV-HbC3)长期的研究过程中,已初步明确BTV-HbC3具备成为一种溶癌病毒的潜能。但该病毒抗肿瘤及体外诱导多种肿瘤细胞死亡的效应有所不同,其抗肿瘤的确切分子机制也不十分清楚,针对此问题,本研究选取对蓝舌病毒较为敏感的人肝癌Hep-3B细胞和人肺腺癌A549细胞,以多种手段探讨了蓝舌病毒湖北株致肿瘤细胞死亡的方式及其潜在作用机制。

关键词：溶癌病毒蓝舌病毒湖北株3(BTV-HbC3) 凋亡非凋亡性程序性死亡 Hep-3B细胞 A549细胞

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