检索结果-内蒙古大学图书馆

食品工业科技 2021年第16期42卷 344-352页

作者：关百婷李伟赵菲佟长青大连海洋大学食品科学与工程学院辽宁大连116023

为了探究大鲵活性肽抗衰老作用机制,利用非标记定量蛋白质组方法对去除高丰度蛋白质后的灌胃大鲵活性肽小鼠血清进行蛋白质组生物信息学分析。结果表明,去除高丰度蛋白质后的血清中共检测到425种蛋白质,其中26种蛋白质表达量变化显著(P&... 详细信息

为了探究大鲵活性肽抗衰老作用机制,利用非标记定量蛋白质组方法对去除高丰度蛋白质后的灌胃大鲵活性肽小鼠血清进行蛋白质组生物信息学分析。结果表明,去除高丰度蛋白质后的血清中共检测到425种蛋白质,其中26种蛋白质表达量变化显著(P<0.05)。这些差异表达的低丰度蛋白质参与14个生理过程、具有6种分子功能、存在于7种细胞组分中。其中胞质四氢叶酸合成酶和肌糖原磷酸化酶显著增加(P<0.05),分别增加了1.78和1.05倍,黄嘌呤脱氢酶显著减少(P<0.05),这些酶表达量的增加或降低,可以减少体内自由基的量。综上,大鲵活性肽抗衰老的机制是减少机体内自由基而发挥作用,本研究为大鲵活性肽的开发利用提供了基础数据。

关键词：大鲵活性肽非标记定量蛋白质组 D-半乳糖氧化损伤修复自由基抗衰老作用

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枣果实不同发育阶段蛋白质组动态研究

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西北林学院学报 2019年第4期34卷 82-90页

作者：陈昕陈蕊红黄建西北农林科技大学林学院陕西杨陵712100 延安大学生命科学学院陕西省黄土高原特色植物与生态重点实验室陕西延安716000

枣果实在发育和成熟过程中涉及多种复杂的生理生化变化。为了解枣果实在发育过程中蛋白质组的变化情况,利用液质联用(LC-MS)技术对主栽制干枣品种——骏枣幼果期、膨大期、白熟期、初红期和全红期5个阶段的果实进行了非标记定量蛋白质... 详细信息

枣果实在发育和成熟过程中涉及多种复杂的生理生化变化。为了解枣果实在发育过程中蛋白质组的变化情况,利用液质联用(LC-MS)技术对主栽制干枣品种——骏枣幼果期、膨大期、白熟期、初红期和全红期5个阶段的果实进行了非标记定量蛋白质组动态变化研究。结果表明,各时期果实与其前一阶段相比分别有差异表达蛋白189、356、82、69个。基因本体(GO)注释结果显示:幼果与膨大果的差异蛋白主要富集在核酸代谢过程,膨大期果实与白熟果的差异蛋白主要富集在碳水化合物代谢过程。从5个阶段的果实中分别鉴定到604、186、91、83、189个特异表达蛋白。Mercator注释和KEGG通路注释结果显示,幼果期特异表达蛋白主要参与了RNA转运通路。加权基因共表达网络(WGCNA)分析显示,幼果期高表达蛋白主要与核糖体合成相关。总之,枣果实在白熟期以前与细胞分裂和膨大相关的蛋白表达量和富集程度高,从白熟期开始与碳水化合物积累相关的蛋白质表达上调。本研究从蛋白质组学水平阐明了枣果实发育成熟过程中蛋白质组分的动态变化,为提高枣果实品质奠定了理论基础。

关键词：枣果实成熟非标记定量蛋白质组果实膨大果实糖积累

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基于蛋白质组学技术的大鼠心肌缺血气虚血瘀证相关生物学标志分子研究

基于蛋白质组学技术的大鼠心肌缺血气虚血瘀证相关生物学标志分子...

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作者：仇琪北京中医药大学

学位级别：博士

目的：建立稳定、可重复并能用于中药药效评价的心肌缺血大鼠病证结合动物模型,并应用非标记定量蛋白质组学研究策略对病证结合模型动物证候生物标志分子进行研究。通过心肌缺血气虚血瘀证证候特征性蛋白质或蛋白质群的发现,探究“气虚... 详细信息

目的：建立稳定、可重复并能用于中药药效评价的心肌缺血大鼠病证结合动物模型,并应用非标记定量蛋白质组学研究策略对病证结合模型动物证候生物标志分子进行研究。通过心肌缺血气虚血瘀证证候特征性蛋白质或蛋白质群的发现,探究“气虚-气虚血瘀-气虚”证候及证候转化过程中,心肌蛋白质表达的变化规律,为心肌缺血气虚血瘀证证候的生物学基础研究提供新的证据；为疾病证候的诊断提供新的标志物；为对证治疗提供新的靶标。通过对心肌缺血病证结合模型动物心肌蛋白质组的动态检测、鉴定和后续的生物信息学处理,将检出的蛋白质根据功能和表达水平发生改变的时间进行分类,为中药对证治疗策略的形成和治疗靶点的确定提供依据。方法： 1.采用基于Shannon熵互信息的方法对证候相关理化指标进行文献研究,筛选出与缺血性心脏病证候关系最为密切的理化指标； 2.采用左冠状动脉结扎法造成大鼠急性心肌缺血动物模型,运用病证结合的思路,对术后4、7、14、21、28、45、60d模型组和假手术组动物的宏观指标进行全面采集的同时进行理化指标跟踪检测,将宏观指标与理化指标相结合,对不同时间点模型动物的证候属性进行判定； 3.根据各时间点模型动物心肌组织HE染色和细胞凋亡检测结果选择进行蛋白质组检测的目的心肌组织； 4.采用非标记定量蛋白质组策略对术后4、14、28、45d,即两个气虚证时间点和两个气虚血瘀证时间点的模型组左心室梗死边缘区和假手术组左心室心肌样品进行蛋白质组分析检测；通过GO注释和KEGG信号通路注释对差异蛋白质进行生物学过程、细胞成分、分子功能分类和细胞信号通路注释,对差异蛋白的证候相关性进行初步阐释； 5.采用Western-blot法对部分差异蛋白的动态表达情况进行验证。结果： 1.现有文献中,有相关理化指标研究的证候要素包括气虚、血瘀、痰浊、阴虚、寒凝、阳虚、气滞等7个,涉及理化指标134个。其中,与气虚证最相关的理化指标为超声心动,血液流变学指标与血瘀证相关系数最高。 2.术后4d,模型组大鼠被毛竖立,懒动,易激惹；与同时间点假手术组大鼠比较,安静状态下呼吸频率明显减慢,应激后呼吸频率显著增快,左心室射血分数显著降低,左室短轴缩短率降低,舌、耳廓、足底色度以及血液流变学指标无显著差异。术后7-28d,模型组大鼠被毛无光泽,活动度明显减低,对外界刺激反应迟钝；与假手术组大鼠比较,模型组大鼠安静状态下呼吸频率明显减慢,应激后呼吸频率显著增快,游泳力竭时间明显缩短,左心室射血分数和左室短轴缩短率均显著降低,舌、耳廓、足底色度值及血液流变学指标与假手术组大鼠相比存在显著差异；术后45-60d,模型组大鼠被毛无光泽,活动度明显降低,对外界刺激反应逐渐迟钝,挣扎无力；与假手术组比较安静状态下呼吸频率明显减慢,应激后呼吸频率显著增快,左心室射血分数和左室短轴缩短率进一步降低,舌、耳廓、足底色度值及血液流变学指标与假手术组大鼠相比无显著差异。结合临床气虚血瘀证诊断标准,对左冠结扎术后不同时间点模型动物证候属性进行判定,术后4d为气虚证,术后7-28d为气虚血瘀证,术后45-60d为气虚证。Lars回归显示动物各部位色度改变与红细胞压积和血小板聚集率改变有关。 3.心肌组织HE染色和原位细胞凋亡检测可见,术后各时间,点模型组大鼠心肌梗死区以心肌坏死为主要改变,左心室梗死边缘区表现为炎细胞浸润、细胞凋亡、细胞肥大等一系列病理改变。 4.对术后4个时间点模型组大鼠左心室梗死边缘区和同时间点假手术组大鼠左心室心肌进行非标记定量蛋白质组分析检测结果为,在8组样品中共鉴定到526个蛋白。其中467个蛋白在4个时间点均被鉴定到。以蛋白表达量比值0.8～1.2作为阈值对4个时间点的蛋白进行筛选,得到45个差异蛋白可能与“气虚证-气虚血瘀证-气虚证”演变过程相关。通过GO功能注释、模糊聚类和KEGG细胞信号通路注释发现,差异蛋白质主要包括细胞骨架蛋白、代谢相关酶类、氧化应激相关蛋白和物质转运相关蛋白。这些蛋白质在维持细胞结构,增强心肌收缩力、调节细胞能量代谢、诱导细胞凋亡以及细胞内信号转导等方面发挥着重要的作用。 5.经Western-blot法对肌动蛋白、alphaB晶体蛋白、L-乳酸脱氢酶、热休克蛋白8表达的动态变化验证结果与蛋白质组检测分析结果基本一致。结论： 1.通过左冠状动脉结扎法造成的大鼠急性心肌缺血模型动物在术后不同时间段内表现为不同的证候。该模型能够应用于冠状动脉病变导致的心肌缺血气虚证和气虚血瘀证的生物学基础和中药药理研究。 2.心肌蛋白质组检测结果能够反映心肌缺血疾病的进展和证候演

关键词：心肌缺血心肌梗死气虚证气虚血瘀证非标记定量蛋白质组大鼠

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