检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：汤驰沈阳农业大学

学位级别：硕士

马绒毛膜促性腺激素（equine Chorionic Gonadotropin,e CG）,是妊娠期32-150 d母马胎儿绒毛膜环带和子宫内膜杯滋养层双核细胞分泌的一种生殖激素,能够促进动物发情、排卵、诱发双胎、提高公畜精液品质。我国拥有丰富的马匹资源,但却对... 详细信息

马绒毛膜促性腺激素（equine Chorionic Gonadotropin,e CG）,是妊娠期32-150 d母马胎儿绒毛膜环带和子宫内膜杯滋养层双核细胞分泌的一种生殖激素,能够促进动物发情、排卵、诱发双胎、提高公畜精液品质。我国拥有丰富的马匹资源,但却对e CG的研究尚浅,e CG结构及如何行使功能目前还不明确。至今全世界e CG的规模化生产仍然单纯利用采集妊娠母马血液后提纯的方式,但相关方法还停滞在数十年前,亟待提高和创新。本研究通过生物信息学预测分析e CG的结构等分子特征,并根据e CG特殊生物学功能,预测出决定e CG发挥生物学功能的结构区域;开发一种新的蛋白质纯化技术从孕马血清中分离纯化出纯度较高且比活达到国家规定兽用标准的e CG,为研究e CG如何行使生物学功能奠定基础。使用生物信息学软件分析e CG的分子特征发现,e CGα和e CGβ的酸性氨基酸残基总数（Asp+Glu）相同,但e CGα碱性氨基酸残基总数（Arg+Lys）多于e CGβ,两个亚基均呈碱性且不稳定。e CGα呈亲水性,而e CGβ呈疏水性;e CGα和e CGβ均具有3个较强的疏水性区域和2个较强的亲水性区域;与e CGβ对比,d CGβ和z CGβ仅有12和9个氨基酸残基存在差异;马属动物CGβ的N-糖基化位点相似,但可能发生O-糖基化的位点及其发生的可能性均有差异;二级结构预测发现e CGα氨基起始端以α螺旋为主,伸展链、β转角、无规则卷曲交替排列;e CGβ无规则卷曲为整个序列的主体结构元件;成功对接得到e CG的三维结构,得到的复合体N端并未结合紧密,而C端向蛋白内核折叠,整个蛋白的中部呈现出亲水性表面包裹疏水性内核的特征。经过偏磷酸沉淀、阴离子交换层析、琼葡糖凝胶层析和阳离子交换层析等纯化步骤,并测定BCA总蛋白浓度、ELISA活性和SDS-PAGE纯度鉴定以及使用大鼠卵巢增重法测定活性,开发一种实验室用纯化e CG方法,最优纯化条件为加入0.5mol/L偏磷酸至p H3.5,0.1mol/L Na OH调HPO3上清液至p H 5.0;DEAE-FF层析中使用p H5.0 0.10mol/L Na Cl 0.01mol/L乙酸-乙酸钠缓冲液洗脱;琼葡糖凝胶层析中使用0.01mol/L乙酸-乙酸钠缓冲液洗脱,收集在90-150min洗脱液;SP-FF层析中,使用p H8.5 0.2mol/乙酸-乙酸铵缓冲液洗脱。最终纯化得到e CG比活为1490.33IU/mg,大鼠卵巢增重法测得e CG比活为1427.00±105.07 IU/mg,活性回收率为52.14%。综上,提出了e CG发挥生物学功能的预测结构区域,开发了一种实验室用低蛋白浓度高比活的e CG纯化方法。这对e CG结构与功能以及完善我国e CG纯化体系具有一定的指导意义。

关键词：马绒毛膜促性腺激素分子特征粗分离层析纯化性质鉴定

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马绒毛膜促性腺激素在动物繁殖中的应用研究进展

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黑龙江畜牧兽医 2017年第9期 89-92,95页

作者：祖卓鑫滑国华杨利国华中农业大学动物科技学院武汉430075 水牛产业技术湖北省工程研究中心武汉430075

马绒毛膜促性腺激素(eCG)又称为孕马血清促性腺激素(PMSG),由妊娠母马子宫内膜杯状细胞分泌。eCG对非马属动物具有促卵泡素(FSH)和促黄体生成素(LH)的双重活性,可用于母畜发情调控、超数排卵,增加其排卵数及受胎率,并可用于治疗卵巢机... 详细信息

马绒毛膜促性腺激素(eCG)又称为孕马血清促性腺激素(PMSG),由妊娠母马子宫内膜杯状细胞分泌。eCG对非马属动物具有促卵泡素(FSH)和促黄体生成素(LH)的双重活性,可用于母畜发情调控、超数排卵,增加其排卵数及受胎率,并可用于治疗卵巢机能障碍和提高公畜繁殖性能。笔者旨在对eCG生物学效应及作用机制进行总结分析,综述在不同动物上应用eCG进行发情调控、超数排卵的方法及措施,为动物繁殖技术的发展和推广应用提供一定的参考依据。

关键词：马绒毛膜促性腺激素发情调控同期发情超数排卵诱导多胎

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马绒毛膜促性腺激素的分离纯化研究

马绒毛膜促性腺激素的分离纯化研究

引用

作者：刘娟浙江大学

学位级别：硕士

马绒毛膜促性腺激素(Equine chorionic gonadotropin,eCG),又名孕马血清促性腺激素(Pregnant mare serum gonadotropin,PMSG),是一种糖蛋白激素,主要用于促进卵泡发育成熟、黄体生成及精子形成,可用于治疗牲畜死精、性欲不强、不孕等病... 详细信息

马绒毛膜促性腺激素(Equine chorionic gonadotropin,eCG),又名孕马血清促性腺激素(Pregnant mare serum gonadotropin,PMSG),是一种糖蛋白激素,主要用于促进卵泡发育成熟、黄体生成及精子形成,可用于治疗牲畜死精、性欲不强、不孕等病症。市售eCG均自孕马血清中分离纯化得到,但由于它在孕马血清中的浓度较低(约为60IU/mL),且具有不均一性及易失活的特点,eCG分离纯化难度较大、生产成本较高。本文对孕马血清中eCG的分离方法进行研究,探索了适宜的分离、纯化方法,考察了离子交换层析在eCG分离纯化中的作用;并创造性地利用疏水作用层析进行了 eCG的纯化和精制研究,取得较为理想的分离效果;最后考察了由卵巢增重法测定得到的eCG活性,eCG免疫活性与N-乙酰神经氨酸(N-acetyl neuraminic acid,Neu5Ac)的关系。1)对粗分离的方法进行筛选,通过条件优化,确定了最佳沉淀条件,探索了从孕马血清中粗分离得到eCG的适宜方法,所得eCG的比活为80-150IU/mg,活性回收率达到90%以上。2)利用离子交换层析,对eCG粗分离产物的进一步纯化进行了研究,筛选并确定适宜的介质,优选了上洗脱缓冲溶液条件。经一步离子交换层析,纯化产物比活达到1124.41 IU/mg,活性回收率为53.68%。3)探索了利用疏水作用层析进行eCG粗品纯化和精制的可行性,筛选比较了不同疏水作用层析介质的性能;考察了上样缓冲溶液组成及离子强度对eCG吸附性能的影响,确定最佳的上样缓冲溶液组成;优选适宜的分离条件。经一步疏水作用层析,纯化产物比活达到1429.86 IU/mg,活性回收率达到88.66%。相对于离子交换层析,纯化效果得到显著提高。4)探索了通过测定唾液酸(Neu5Ac)含量表征eCG活性的可行性。采用柱前衍生化方法,利用高效液相测定Neu5Ac的含量,优选最佳的衍生化温度、衍生化时间、衍生化反应物(O-phenylenediaminedihydrochloride,OPD)的浓度。通过考察优化了从eCG中水解释放Neu5Ac的水解反应方法和条件,并确定最佳水解时间、水解温度、水解反应物三氟乙酸(Trifluoroaceticacid,TFA)浓度;进行了水解液中Neu5Ac含量的HPLC测定,建立了孕马血清中Neu5Ac含量的测定方法;探讨了孕马血清中Neu5Ac含量与eCG活性的关系,研究表明由卵巢增重法测定得到eCG的活性,eCG免疫活性均与Neu5Ac含量呈正相关关系。

关键词：马绒毛膜促性腺激素离子交换层析疏水作用层析分离纯化 N-乙酰神经氨酸

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马绒毛膜促性腺激素分泌影响因素相关性分析

马绒毛膜促性腺激素分泌影响因素相关性分析

引用

2015中国（北京）国际马科技大会

作者：刘书琴杨云周付春正赵春江中国农业大学动物科技学院

引言马绒毛膜促性腺激素eCG（equine Chorionic Gonadotropin）,是在怀孕母马血清中发现的一种激素,妊娠马属动物（驴、斑马等）均能分泌此激素。它主要具有类似于促卵泡素和促黄体素双重作用,可促进卵泡的生成、成熟和排卵等。虽然许... 详细信息

引言马绒毛膜促性腺激素eCG（equine Chorionic Gonadotropin）,是在怀孕母马血清中发现的一种激素,妊娠马属动物（驴、斑马等）均能分泌此激素。它主要具有类似于促卵泡素和促黄体素双重作用,可促进卵泡的生成、成熟和排卵等。虽然许多研究关注影响eCG分泌量的因素,但至今未完全阐明。

关键词：马绒毛膜促性腺激素 ELISA 广义线性模型

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马绒毛膜促性腺激素间接竞争ELISA检测方法的建立与应用

马绒毛膜促性腺激素间接竞争ELISA检测方法的建立与应用

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中国畜牧兽医学会马学分会成立大会

作者：邓亮苏晓倩杨烁张翔解鹏韩国才吴常信沈阳农业大学畜牧兽医学院中国农业大学动物科技学院北京勤邦生物技术有限公司

引言马绒毛膜促性腺激素(eCG)旧称孕马血清促性腺激素(PMSG),主要由妊娠35—130天母马的血清或血浆中提纯制得,广泛用于家畜的同期发情、超数排卵等。我国现行规定使用大鼠卵巢增重法来检测eCG的含量,但操作费时、不经济、灵敏度低、准... 详细信息

引言马绒毛膜促性腺激素(eCG)旧称孕马血清促性腺激素(PMSG),主要由妊娠35—130天母马的血清或血浆中提纯制得,广泛用于家畜的同期发情、超数排卵等。我国现行规定使用大鼠卵巢增重法来检测eCG的含量,但操作费时、不经济、灵敏度低、准确度不高。酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)具有检测时间短、特异性强、操作简便、仪器化程度和分析成本低、样本前处理简单、样本容量大等优点,尤其适用于现场大规模样本的快速筛选。

关键词：马绒毛膜促性腺激素间接竞争 ELISA 建立与应用检测方法

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家畜繁殖学实验中马绒毛膜促性腺激素效价测定方法的改进

引用

现代农业科技 2021年第12期 213-214,217页

作者：邓亮姜午旗朱玉博王维沈阳农业大学畜牧兽医学院辽宁沈阳110866

家畜繁殖学实验教学中对马绒毛膜促性腺激素效价的测定,通常采用小鼠子宫增重等生物学方法,实验准备时间长、操作步骤多、影响因素多、饲养成本高、测定灵敏度不高。针对传统测定方法存在的不足,在长期从事相关科研和教学的基础上,对测... 详细信息

家畜繁殖学实验教学中对马绒毛膜促性腺激素效价的测定,通常采用小鼠子宫增重等生物学方法,实验准备时间长、操作步骤多、影响因素多、饲养成本高、测定灵敏度不高。针对传统测定方法存在的不足,在长期从事相关科研和教学的基础上,对测定方法进行了改进,建议使用酶联免疫吸附法,并提出了测定过程中的步骤与需要注意的事项,以期为提高家畜繁殖学实验教学效果提供参考。

关键词：家畜繁殖学马绒毛膜促性腺激素酶联免疫吸附法

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IL-6调控马绒毛膜带细胞侵袭和激素分泌的研究

IL-6调控马绒毛膜带细胞侵袭和激素分泌的研究

引用

作者：斯琴内蒙古农业大学

学位级别：硕士

马绒毛膜促性腺激素(Equine Chorionic Gonadotropin,e CG)也称为孕马血清促性腺激素(PMSG),是马属动物特有的糖蛋白激素,由妊娠母马的子宫内膜杯状组织分泌。子宫内膜杯是由30-40天左右的胎儿绒毛膜带细胞在短期内快速增殖、分化并侵... 详细信息

马绒毛膜促性腺激素(Equine Chorionic Gonadotropin,e CG)也称为孕马血清促性腺激素(PMSG),是马属动物特有的糖蛋白激素,由妊娠母马的子宫内膜杯状组织分泌。子宫内膜杯是由30-40天左右的胎儿绒毛膜带细胞在短期内快速增殖、分化并侵入子宫内膜增殖扩散形成的腺状组织,一旦这些细胞胀大变成双核,即开始分泌高浓度的e CG。e CG在维持马属动物正常妊娠以及动物临床和生产方面起着重要作用。实验室前期通过比对马妊娠30天胚胎绒毛膜带及妊娠45天子宫内膜杯组织的转录组发现,一些与免疫相关的基因在妊娠45天的子宫内膜杯组织中高表达,其中包括白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)。本研究通过在体外培养的马绒毛膜带细胞培养基中添加IL-6,与未添加组进行转录组测序分析,探索IL-6对马绒毛膜带细胞功能和e CG合成和分泌的影响。研究结果如下: 1.0、10、20、30、50和70ng/m L浓度的IL-6处理对马绒毛膜带细胞的形态及分化无显著影响。 2.10ng/m L IL-6在培养第四天可以显著促进马绒毛膜带细胞增殖,而70ng/m L IL-6在培养第四天抑制细胞增殖。 3.30 ng/m L IL-6处理显著提高CG细胞融合和激素相关基因m RNA水平的表达,而在70 ng/m L IL-6处理时相关基因表达被下调。但是所有浓度处理下e CG的胞内蛋白量及分泌量均未见显著上升。 ***-6处理可促进马绒毛膜带细胞的侵袭能力,并上调侵袭相关基因MMP2和MMP9的表达量。 ***-6处理对马绒毛膜带细胞迁移能力没有显著影响。 6.基于以上2和3的结果,选取0ng/m L、30ng/m L以及70ng/m L浓度组进行转录组对比分析,并对差异基因集进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析等,发现与免疫反应、炎症反应相关的NOD样受体信号通路以及JAK-STAT信号通路在IL-6组中显著富集;FGF12、MEGF11、SNX32、CTNNA2等与细胞增殖、黏附、迁移和蛋白质转运相关的基因在30ng/m L组中高表达;通过对30ng/m L组中上调表达,但在70ng/m L组下调表达的基因FGF12和SNX32两个基因进行RT-q PCR验证了测序结果的可靠性。

关键词：马马绒毛膜带细胞马绒毛膜促性腺激素白细胞介素-6 侵袭转录组测序

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批次化生产管理实践中如何高效使用PMSG

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猪业科学 2024年第3期41卷 43-47页

作者：方肆云王新朱清杰温氏食品集团股份有限公司广东云浮237300 宁波三生生物科技股份有限公司浙江宁波315000

孕马血清促性腺激素(Pregnant Mare Serum Gonadotropin,PMSG),又称马绒毛膜促性腺激素,是妊娠40~120d的母马“子宫内膜杯状结构”分泌的糖蛋白类激素,具有类似促卵泡激素(FSH)和促黄体素(LH)的双重活性,即较强的促卵泡生长作用,在规模... 详细信息

孕马血清促性腺激素(Pregnant Mare Serum Gonadotropin,PMSG),又称马绒毛膜促性腺激素,是妊娠40~120d的母马“子宫内膜杯状结构”分泌的糖蛋白类激素,具有类似促卵泡激素(FSH)和促黄体素(LH)的双重活性,即较强的促卵泡生长作用,在规模化猪场主要用于诱导母猪发情、超数排卵等处理,及治疗母猪乏情、安静发情或者不排卵等。

关键词：孕马血清促性腺激素超数排卵马绒毛膜促性腺激素母马子宫内膜杯 PMSG 卵泡生长不排卵

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马绒毛膜促性腺激素对豫丰黄兔繁殖性能的影响

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河南农业科学 2012年第12期41卷 149-152页

作者：张恒业张焕吉进卿白继武张长兴郑州牧业工程高等专科学校河南郑州450011 河南省畜禽改良站河南郑州450003 濮阳市畜禽改良站河南濮阳457000

为研究马绒毛膜促性腺激素对豫丰黄兔繁殖性能的影响,选择河南省地方优良品种豫丰黄兔初配母兔150只,平均分为5个试验组,采用标准化笼具饲养,人工授精、频密繁殖(繁殖周期为42d);每组在人工授精前48h对母兔分别注射20、30、40、50、0IU... 详细信息

为研究马绒毛膜促性腺激素对豫丰黄兔繁殖性能的影响,选择河南省地方优良品种豫丰黄兔初配母兔150只,平均分为5个试验组,采用标准化笼具饲养,人工授精、频密繁殖(繁殖周期为42d);每组在人工授精前48h对母兔分别注射20、30、40、50、0IU剂量的马绒毛膜促性腺激素(eCG),研究其对母兔同期发情及繁殖效果的影响,试验进行4个周期,共539次人工授精。结果表明,20、30、40、50IU的eCG均可显著提高豫丰黄兔产仔率,20IU和30IU的产仔率显著高于40IU和50IU的;30IU组活窝重显著高于20IU组和对照组;40IU组仔兔个体提质量显著低于20、30IU组和对照组。分析表明,eCG 30IU组综合表现最佳;在生产实际中使用eCG对母兔进行同期发情处理,20、30IU较40、50IU对豫丰黄兔母兔产仔率具有更好的提高作用。

关键词：豫丰黄兔同期发情繁殖性能马绒毛膜促性腺激素

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马绒毛膜促性腺激素单克隆抗体的制备及鉴定

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中国畜牧兽医 2012年第9期39卷 18-21页

作者：苏晓倩邓亮贾瑜韩国才中国农业大学动物科技学院北京100193 北京勤邦生物技术有限公司北京100026 中国农业大学马研究中心北京100193

本研究采用马绒毛膜促性腺激素(equine chorionic gonadotropin,eCG)纯品免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与同系小鼠骨髓瘤细胞SP2/0按1∶10融合,间接酶联免疫吸附法(ELISA)筛选阳性克隆和有限稀释法克隆,扩大培养后于小鼠腹腔制备腹水,共得... 详细信息

本研究采用马绒毛膜促性腺激素(equine chorionic gonadotropin,eCG)纯品免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与同系小鼠骨髓瘤细胞SP2/0按1∶10融合,间接酶联免疫吸附法(ELISA)筛选阳性克隆和有限稀释法克隆,扩大培养后于小鼠腹腔制备腹水,共得到8株能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,采用间接ELISA测定抗体效价,效价均达10-5以上。用获得的杂交瘤细胞株制备单克隆抗体,为eCG分泌水平的ELISA检测方法的建立确立了条件。

关键词：马绒毛膜促性腺激素杂交瘤细胞株单克隆抗体酶联免疫吸附法

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