检索结果-内蒙古大学图书馆

中国临床康复 2005年第9期9卷 210-212页

作者：董晓先刘金保董燕湘何慧华董伟华梁仲培肖庆忠广州医学院病理生理学教研室广东省广州市510182

背景:体外定向诱导分化可使骨髓间质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)转化为成骨细胞、脂肪细胞、软骨、肌肉细胞、神经元样细胞等,而中药是否能对大鼠骨髓间质干细胞有诱导分化作用呢?目的:研究SD大鼠MSCs体外扩增培养及用中药定向... 详细信息

背景:体外定向诱导分化可使骨髓间质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)转化为成骨细胞、脂肪细胞、软骨、肌肉细胞、神经元样细胞等,而中药是否能对大鼠骨髓间质干细胞有诱导分化作用呢?目的:研究SD大鼠MSCs体外扩增培养及用中药定向诱导分化为神经元样细胞的功效。设计:以细胞为研究对象,重复观察测量,探索性研究。单位:一所医学院病理生理学教研室。材料:实验用骨髓取自经检验健康的SD雄性大鼠。方法:通过贴壁法分离大鼠MSCs,体外扩增培养,流式细胞仪检测其表面抗原表达,多种中药成分定向诱导MSCs分化为神经元样细胞。光镜下观察细胞形态,免疫细胞化学法检测神经细胞特异性抗原标志。主要观察指标:①MSCs分离和扩增结果。②MSCs表面抗原及神经元样细胞鉴定结果。结果:大鼠MSCs可通过贴壁法成功分离并可在体外大量扩增。流式细胞仪检测结果显示CD14,CD11α,CD34,CD38,CD45,CD80,CD86为阴性,CD29,CD44,CD90,CD105,CD166呈阳性。黄芪、天麻、人参、当归、脑新舒、人参蜂王浆等多种中药诱导1～3h后大部分MSCs转变为神经元样细胞,出现胞体和突起,免疫细胞化学染色神经元特异性烯醇酶、巢蛋白呈阳性,胶质纤维酸性蛋白阴性。结论:SD大鼠骨髓间质干细胞是具多向分化潜能的细胞,具有较强的增殖、自我更新能力?

关键词：骨髓细胞/药物作用神经元/药物作用:细胞分化/药物作用

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左归丸促进骨髓形成肝细胞的分子机制研究

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中医杂志 2006年第10期47卷 778-780页

作者：李瀚旻高翔晏雪生明安萍彭亚琴湖北中医学院附属医院肝病研究所武汉市武昌区花园山4号430061

目的:探讨左归丸促进骨髓形成肝细胞的分子机制。方法:采用交叉性别骨髓移植模型,雌性BALB/c小鼠接受9.0Gy60Co源γ射线照射后,经尾静脉注射输入同种系雄性小鼠骨髓细胞,分左归丸组和模型组,6个月后处死实验动物,取肝组织标本。选用小... 详细信息

目的:探讨左归丸促进骨髓形成肝细胞的分子机制。方法:采用交叉性别骨髓移植模型,雌性BALB/c小鼠接受9.0Gy60Co源γ射线照射后,经尾静脉注射输入同种系雄性小鼠骨髓细胞,分左归丸组和模型组,6个月后处死实验动物,取肝组织标本。选用小鼠基因表达谱寡核苷酸芯片,观察实验小鼠肝组织基因表达谱的变化。结果:左归丸组小鼠在骨髓移植6个月后肝组织的基因表达谱与模型组比较有显著不同,差异表达基因有1147条,已知功能基因有533条,其中上调基因264条,下调基因269条。结论:左归丸可能是通过影响肝组织基因表达谱的变化促进骨髓形成肝细胞。

关键词：骨髓细胞/药物作用左归丸/治疗应用

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补骨合剂对大鼠骨髓基质细胞增殖、分化及凋亡的分子调控机理研究

补骨合剂对大鼠骨髓基质细胞增殖、分化及凋亡的分子调控机理研究

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作者：李楠福建中医学院

学位级别：博士

目的：应用体外培养骨髓基质细胞，在细胞和分子水平观察补骨合剂对细胞增殖、分化和凋亡的影响，探讨补骨合剂治疗骨质疏松症的机理。方法：分离SD大鼠骨髓基质细胞，培养后应用MTT法测定补骨合剂对细胞增殖的影响；通过形态学、细胞... 详细信息

目的：应用体外培养骨髓基质细胞，在细胞和分子水平观察补骨合剂对细胞增殖、分化和凋亡的影响，探讨补骨合剂治疗骨质疏松症的机理。方法：分离SD大鼠骨髓基质细胞，培养后应用MTT法测定补骨合剂对细胞增殖的影响；通过形态学、细胞超微结构观察、碱性磷酸酶、细胞内骨钙素、β转化生长因子1基因表达等指标，对骨髓基质细胞向成骨细胞转化的程度进行探讨；通过形态学、细胞超微结构、流式细胞术检测凋亡细胞周期和线粒体膜电位改变、bcl-2、bax蛋白基因表达等进行观察，对补骨合剂在细胞凋亡过程中的作用进行评价。结果：一定浓度的补骨合剂对体外培养骨髓基质细胞增殖有显著促进作用；可促进转化中的骨髓基质细胞分泌碱性磷酸酶和骨钙素，增强骨形态发生蛋白的活性，促进转化中的骨髓基质细胞表达β转化生长因子1，补骨合剂的这种促进骨髓基质细胞转化作用与密钙息基本相同。补骨合剂的早期应用可以使阻滞于G0／G1期的细胞减少，进入S期进行DNA合成的细胞增多，诱导凋亡的细胞在补骨合剂组bcl-2表达明显高于诱导组，而bax表达明显低于诱导组，且补骨合剂组线粒体的膜电位下降均非常显著低于诱导组。结论：补骨合剂治疗骨质疏松症的机理有三：其一，补骨合剂中可能含有直接刺激骨髓基质细胞增殖的成分，使其数量不断增加，进而使向成骨细胞分化的数量增加，从而促进骨形成；其二，补骨合剂可以增强重组人骨形态发生蛋白2的活性，促进转化中的骨髓基质细胞表达β转化生长因子1，大量分泌Ⅰ型胶原，以利于钙盐沉积。补骨合剂可以促进重组人骨形态发生蛋白2诱导的骨髓基质细胞分泌碱性磷酸酶和骨钙素，促进骨髓基质细胞向成骨细胞表型转化，从而促进钙、磷在骨表面沉积；其三，补骨合剂的早期应用可以使全反式维甲酸诱导的凋亡细胞減少，从而促进细胞有丝分裂，抑制细胞凋亡；对骨髓基质细胞线粒体膜上的bcl-2具有保护作用，同时通过阻止bax从胞浆中移至线粒体膜上而使bcl-2在与bax形成的同源二聚体中占据优势来阻止线粒体膜上的PT孔道开放，从而阻止线粒体释放凋亡诱导因子造成的线粒体膜电位改变和生物合成的破坏，达到抑制凋亡的目的。

关键词：骨质疏松/中药疗法骨髓细胞/药物作用成骨细胞/药物作用细胞凋亡/药物作用转化生长因子β/药物作用 bcl-2/药物作用线粒体/药物作用膜电位/药物作用

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体外诱导人骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化

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安徽医科大学学报 2005年第2期40卷 129-132页

作者：韩永生褚俊翟志敏严激周德存胡闻陈柯严中亚安徽医科大学附属省立医院心内科合肥230001 安徽医科大学附属省立医院中心实验室合肥230001 安徽医科大学附属省立医院心外科合肥230001 安徽医科大学附属省立医院病理科合肥230001

目的　探索在体外诱导人骨髓间充质干细胞(hMSC)向心肌细胞分化的方法。方法　以5 杂氮胞苷( 5 Aza)对hMSC诱导,利用结蛋白抗体、房性利钠肽抗体以及闰盘蛋白抗体进行免疫组化染色,并进行超薄切片透射电镜观察。结果　经反复多次传代后... 详细信息

目的　探索在体外诱导人骨髓间充质干细胞(hMSC)向心肌细胞分化的方法。方法　以5 杂氮胞苷( 5 Aza)对hMSC诱导,利用结蛋白抗体、房性利钠肽抗体以及闰盘蛋白抗体进行免疫组化染色,并进行超薄切片透射电镜观察。结果　经反复多次传代后,细胞形态及抗原表达无改变,始终保持未分化状态和稳定扩增。利用5 Aza对其诱导后第2周始,免疫组化染色发现细胞结蛋白、闰盘蛋白以及房性利钠肽表达均为阳性,不同浓度5 Aza诱导组之间差异无显著性。电镜观察发现这些细胞具有心肌细胞的特点。结论　在体外利用5 Aza可以诱导hMSC向心肌细胞分化。

关键词：骨髓祖代细胞/细胞学骨髓细胞/药物作用间质干细胞/细胞学免疫组织化学细胞分化/药物作用显微镜检查电子心肌/细胞学脱氧胞苷

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体外诱导人骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化

体外诱导人骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化

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作者：韩永生安徽医科大学

学位级别：硕士

目的:(1)通过体外分离、培养人骨髓间充质干细胞(hMSCs),观察其生物学特性;(2)对培养的hMSCs行体外药物诱导,促其向心肌样细胞分化。方法:采用Ficoll淋巴细胞分离液分离人骨髓单个核细胞,所获取的细胞置于含10%胎牛血清的L-DMEM中培... 详细信息

目的:(1)通过体外分离、培养人骨髓间充质干细胞(hMSCs),观察其生物学特性;(2)对培养的hMSCs行体外药物诱导,促其向心肌样细胞分化。方法:采用Ficoll淋巴细胞分离液分离人骨髓单个核细胞,所获取的细胞置于含10%胎牛血清的L-DMEM中培养,通过传代获得纯度较高的hMSCs,应用流式细胞仪鉴定hMSCs。在第四代传代时加入5μmol/L、10μmol/L、15μmol/L 5-杂氮胞苷对hMSCs进行诱导,24h后更换为完全培养基继续培养。分别在诱导后第2～8W利用结蛋白抗体、心钠素抗体以及闰盘蛋白抗体进行免疫组化染色,并于第2～4W利用超薄切片透射电镜观察诱导细胞的超微结构。结果:诱导前hMSCs表面抗原CD34、CD45、CD31阴性,CD90为弱阳性,经反复多次传代后(15代以上),细胞形态及抗原表达无改变,始终保持未分化状态和稳定扩增。利用5-杂氮胞苷对其诱导后第2W始,免疫组化染色发现细胞结蛋白、闰盘蛋白的阳性率为20%～30%,心肌细胞特异性抗原心钠素也为阳性,不同浓度5-杂氮胞苷诱导组之间无显著差异。超薄切片透射电镜观察发现这些细胞的细胞核位于中央,少数细胞为双核或者多核,细胞核周围聚集有丰富的房性颗粒样结构,直径为100～200nm;部分细胞中可见细小的肌丝样结构。结论:(1)以Ficoll分离液分离人骨髓单个核细胞,同时利用hMSCs贴壁生长的特性,可以有效获得hMSCs。(2)hMSCs具有很强的自我复制能力,并能够在连续的体外培养过程中保持未分化状态。(3)hMSCs具有多向分化潜能,在体外利用5-杂氮胞苷可以诱导hMSCs向心肌样细胞分化。

关键词：骨髓祖代细胞/细胞学骨髓细胞/药物作用间质干细胞/细胞学免疫组织化学细胞分化/药物作用显微镜检查电子心肌/细胞学脱氧胞苷

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A novel proteolytic cleavage involved in Notch signaling:: The role of the disintegrin-metalloprotease TACE

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MOLECULAR CELL 2000年第2期5卷 207-216页

作者： Brou, C Logeat, F Gupta, N Bessia, C LeBail, O Doedens, JR Cumano, A Roux, P Black, RA Israël, A Inst Pasteur CNRS URA 1773 Unite Biol Mol Express Gen F-75724 Paris 15 France Inst Pasteur CNRS URA 1961 Unite Dev Lymphocytes F-75724 Paris 15 France Inst Pasteur CNRS URA 1773 F-75724 Paris 15 France Immunex Corp Dept Prot Chem Seattle WA 98101 USA

The Notch1 receptor is presented at the cell membrane as a heterodimer after constitutive processing by a furin-like convertase. Ligand binding induces the proteolytic release of Notch intracellular domain by a gamma-secretase-like activity. This domain translocates to the nucleus and interacts with the DNA-binding protein CSL, resulting in transcriptional activation of target genes. Here we show that an additional processing event occurs in the extracellular part of the receptor, preceding cleavage by the gamma-secretase-like activity. Purification of the activity accounting for this cleavage in vitro shows that it is due to TACE (TNF alpha-converting enzyme), a member of the ADAM (a disintegrin and metalloprotease domain) family of metalloproteases. Furthermore, experiments carried out on TACE(-/-) bone marrow-derived monocytic precursor cells suggest that this metalloprotease plays a prominent role in the activation of the Notch pathway.

关键词： ADAM蛋白质类氨基酸序列骨髓细胞/细胞学骨髓细胞/药物作用钙结合蛋白质类细胞分化分解素类/代谢胞间信号肽类和蛋白质类膜蛋白质类/代谢金属内肽酶类/代谢分子序列数据单核细胞/细胞学单核细胞/药物作用蛋白质生物合成蛋白质加工转译后蛋白质类受体 Notch1 受体细胞表面/代谢信号传导十四酰佛波乙酯/药理学转录因子动物小鼠

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Identification of human asparaginyl endopeptidase (legumain) as an inhibitor of osteoclast formation and bone resorption

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JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY 1999年第39期274卷 27747-27753页

作者： Choi, SJ Reddy, SV Devlin, RD Menaa, C Chung, HY Boyce, BF Roodman, GD Audie L Murphy Mem Vet Adm Med Ctr Res Serv 151 San Antonio TX 78284 USA Univ Texas Hlth Sci Ctr Dept Med Hematol San Antonio TX 78284 USA Univ Texas Hlth Sci Ctr Dept Pathol San Antonio TX 78284 USA

We screened a human osteoclast (OCL) cDNA expression library for OCL inhibitory factors and identified a clone that blocked both human and murine OCL formation and bone resorption by more than 60%. This clone was identical to human legumain, a cysteine endopeptidase. Legumain significantly inhibited OCL-like multinucleated cell formation induced by 1,25-dihydroxyvitamin D-3 (1,25-(OH)(2)D-3) and parathyroid hormone-related protein (PTHrP) in mouse and human bone marrow cultures, and bone resorption in the fetal rat long bone assay in a dose-dependent manner. Legumain was detected in freshly isolated marrow plasma from normal donors and conditioned media from human marrow cultures. Furthermore, treatment of human marrow cultures with an antibody to legumain induced OCL formation to levels that were as high as those induced by 1,25-(OH)(2)D-3. Implantation in nude mice of 293 cells transfected with the legumain cDNA and constitutively expressing high levels of the protein significantly reduced hypercalcemia induced by PTHrP by about 50%, and significantly inhibited the increase in OCL surface and in OCL number expressed per mm(2) bone area and per mm bone surface induced by PTHrP. These results suggest that legumain may be a physiologic local regulator of OCL activity that can negatively modulate OCL formation and activity.

关键词：骨髓细胞/细胞学骨髓细胞/药物作用骨髓细胞/生理学骨质吸收/酶学骨质吸收/病理生理学降钙素/药理学骨化三醇/药理学细胞培养的培养基条件性半胱氨酸内肽酶类/遗传学半胱氨酸内肽酶类/代谢胎儿基因表达调控酶学/药物作用基因文库高钙血症/病理生理学高钙血症/预防和控制白细胞介素1/药理学动力学小鼠近交C57BL 器官培养技术破骨细胞/细胞学破骨细胞/酶学骨生成/生理学甲状旁腺激素相关蛋白质植物蛋白质类蛋白质类/药理学转录遗传/药物作用动物人类小鼠大鼠

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WR-151327 increases resistance to Klebsiella pneumoniae infection in mixed-field- and γ-photon-irradiated mice

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INTERNATIONAL JOURNAL OF RADIATION BIOLOGY 2000年第2期76卷 261-271页

作者： Ledney, GD Elliott, TB Harding, RA Jackson, WE Inal, CE Landauer, MR Armed Forces Radiobiol Res Inst Dept Radiat Med Bethesda MD 20889 USA

Purpose: To determine the efficacy of WR-151327 (WR) [S-3-(3-methylaminopropylamino) propylphosphorothioic acid;(CH3-HN-(CH2)(3)-NH-(CH2)(3)-S-PO3H2)] in increasing resistance to bacterial infection after a sublethal dose of gamma-photons or mired-field neutrons plus gamma-photons. Materials and methods: B6D2F1/J female mice received 200 mg/kg WR i.p. or saline vehicle 20-30 min before or after sham (0 Gy) ol 7.0 Gy Co-60 gamma-photon irradiation. WR or saline vehicle was given only before 3.5 Gy TRIGA-reactor-produced mixed-field [n/(n + gamma) = 0.67] irradiation. Four days after drug treatment or drug treatment and irradiation, graded doses of Klebsiella pneumoniae were injected s.c. into mice, and 30-day survival was recorded. To assess haemopoietic changes other unirradiated and irradiated mice not injected with bacteria were given WR or saline. Peripheral blood (PB) and femoral bone marrow (BM) cells were measured 1, 3 or 1, 7, 10 and 14 or 15 days later. Results: WR pretreatment increased resistance to infection in irradiated but nor in unirradiated mice. Bacterial CFU-LD50/30 values for 0 Gy saline-treated mice were 1.20 x 10(6);for 0 Gy WR-treated mice 1.16 x 10(6);for gamma-photon-irradiated saline-treated mice 3.02 x 10(1) for gamma-photon-irradiated WR-treated mice 1.24 x 10(4);for mixed-field-irradiated saline-treated mice 1.94 x 10(2);and for mixed-field-irradiated WR-treated mice 6.13 x 10(3). WR-induced resistance to infection parallaled increased numbers of PB white cells, neutrophils, platelets, femoral BM cells and granulocyte macrophage colony-forming cells (GM-CFC) in irradiated mice not given bacteria. Conclusions: These studies quantify the resistance to bacterial infection in mice treated with WR before sublethal irradiation. The findings suggest that WR treatment increases resistance to infection in immunocompromised hosts.

关键词：血细胞计数骨髓细胞/药物作用骨髓细胞/辐射效应 γ射线免疫天然/药物作用免疫天然/辐射效应克雷伯菌感染/免疫学克雷伯菌感染/死亡率克雷伯菌肺炎有机硫磷化合物/药理学辐射防护剂/药理学相对生物学效应动物女(雌)性小鼠

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Atypical antipsychotic-induced neutropenia in dogs

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TOXICOLOGY AND APPLIED PHARMACOLOGY 1999年第3期155卷 227-236页

作者： Lorenz, M Evering, WE Provencher, A Blue, JT Lewis, HB Hazelette, JR Rajagopalan, P Meunier, PC Car, BD Dupont Co Stine Haskell Res Ctr Safety Assessment Newark DE 19714 USA AHDL Endocrine Diag Sect Lansing MI 48909 USA Cornell Univ New York State Coll Vet Med Ithaca NY 14853 USA Med Management Int VetSmart Portland OR 97230 USA Dupont Merck Pharmaceut Co Expt Stn Wilmington DE 19880 USA

DMP 406 is an atypical antipsychotic, antischizophrenic drug, biochemically related to clozapine, which exerts its desired pharmacologic effects through selective antagonism of 5-hydroxytryptamine and dopamine-receptor subtypes. Clozapine therapy is clinically associated with severe granulocytopenia in a small subset of patients. In the course of a 3-month toxicity study in dogs, severe neutropenia, thrombocytopenia, marked myeloid and erythroid left-shifted bone marrow hyperplasia with increased erythrophagocytosis, positive Coombs' tests, and hypergammaglobulinemia occurred in individual females dosed with 30 mg/kg/day of DMP 406. Related but less severe changes were also observed in males. Sera or purified immunoglobulins from affected and control dogs were tested in methylcellulose-based, canine hematopoietic colony-forming unit (CFU) assays with or without DMP 406, Neither size nor number of erythroid or myeloid CFUs differed between cultures containing control or affected dog serum components. Sera from individual affected dogs but not controls resulted in moderate numbers of fibroblast-like CFUs, suggesting DMP 406-associated marrow stromal cell-modifying, serum activities to be present. DMP 406 alone resulted in a concentration-dependent reduction of erythroid and myeloid CFUs with an approximate IC50 of 3.0 mu g/mL. Taken together, DMP 406-induced granulocytopenia and bone marrow dyscrasia appear likely to result from both immune-mediated and direct drug-induced myelotoxicity. (C) 1999 Academic Press.

关键词：抗精神病药/毒性苯二氮|艹卓|类/毒性骨髓细胞/药物作用细胞分裂/药物作用培养基条件性造血干细胞免疫球蛋白类/代谢中性粒细胞减少/血液中性粒细胞减少/化学诱导中性粒细胞减少/免疫学中性粒细胞减少/病理学脾/药物作用脾/代谢脾/病理学干细胞/药物作用动物狗女(雌)性男(雄)性

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Modulation of transforming growth factor β-1 gene expression by interleukin-12

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SCANDINAVIAN JOURNAL OF IMMUNOLOGY 2000年第3期52卷 271-277页

作者： Wilkinson, KA Aung, H Wu, M Toossi, Z Case Western Reserve Univ Dept Med Div Infect Dis Cleveland OH 44106 USA

The interaction of cytokines and their net balance with regard to macrophage activation (or deactivation) and immune stimulation (or suppression), ultimately determines the success of host-immune response at sites of active infection. A regulatory role for interleukin (IL)-12 in production of transforming growth factor (TGF)-beta 1 has been suggested, however, remains controversial. In this study, we analyzed the effect of IL-12 on TGF-beta 1 expression in the human lines, K562 and A549, and in primary human monocytes and macrophages. We found that IL-12 down-regulates TGF-beta 1 mRNA expression in K562, monocytes and bone marrow cells, and to a lesser extent in the A549 cells. Using constructs containing different regions of the first promoter of the TGF-beta 1 gene and a reporter gene, we also demonstrate that this effect is mediated through the TGF-beta 1 gene promoter in the K562 and monocytic cell types. In conclusion, the critical role of IL-12 in the early activation of the immune response to pathogens may include down-modulation of TGF-beta 1 gene activity.

关键词：自身分泌性细胞间通讯骨髓细胞/药物作用癌/病理学基因表达调控/药物作用基因表达调控白血病/药物作用白细胞介素12/药理学 K562细胞/药物作用 K562细胞/代谢肺肿瘤/病理学巨噬细胞/药物作用巨噬细胞/代谢巨噬细胞肺泡/药物作用巨噬细胞肺泡/代谢单核细胞/药物作用单核细胞/代谢肿瘤蛋白质类/生物合成启动区遗传 RNA 信使/生物合成 RNA 肿瘤/生物合成重组蛋白质类/药理学调控序列核酸转化生长因子β/遗传学转化生长因子β/药理学肿瘤细胞培养的/药物作用肿瘤细胞培养的/代谢人类

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