检索结果-内蒙古大学图书馆

中国家禽 2014年第4期36卷 36-39页

作者：周生姜逸程旭沈欣悦李建梅尤素兰赵宝华戴亚斌中国农业科学院家禽研究所江苏扬州225125

鸡传染性支气管炎(IB)是由传染性支气管炎病毒(IBV)引起的严重危害世界养禽业的重要疫病。在规模化饲养条件下,IBV变异株的广泛流行给我国养禽业造成了巨大的经济损失。IBV反向遗传操作系统的建立和应用,给该病的预防和控制带来了新曙... 详细信息

鸡传染性支气管炎(IB)是由传染性支气管炎病毒(IBV)引起的严重危害世界养禽业的重要疫病。在规模化饲养条件下,IBV变异株的广泛流行给我国养禽业造成了巨大的经济损失。IBV反向遗传操作系统的建立和应用,给该病的预防和控制带来了新曙光。近几年,国内外在IBV的反向遗传技术上取得了较大发展,本文就IBV反向遗传操作系统的构建策略及利用该技术在IBV研究中所取得的最新成果进行综述。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒反向遗传技术研究

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鸡传染性支气管炎病毒抗体检测试剂盒

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中国兽医杂志 2005年第3期41卷 66-67页

作者：杨明

鸡传染性支气管炎病毒具有高度的传染性,能给雏鸡和防护较差的鸡群造成很高的死亡率.

关键词：鸡传染性支气管炎病毒雏鸡鸡群抗体检测试剂盒高度死亡率防护

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鸡传染性支气管炎病毒(M41)HI抗原的制备与初步应用

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安徽农业科学 2007年第30期35卷 9545-9546,9548页

作者：钱晓佳周欣薛邦玉杨大光王新卫河南农业大学牧医工程学院河南郑州450002

实验比较了不同方法制备IBV HI抗原,并比较不同PLC1处理浓度、不同保存时间等因素对制备IBV HI抗原的影响,筛选出制备抗原的最佳条件:选择10 U/ml的PLC1与等体积超速离心后的M41 IBV以及pH值7.40、.01 mol/L PBS稀释液混合,在37℃水浴作... 详细信息

实验比较了不同方法制备IBV HI抗原,并比较不同PLC1处理浓度、不同保存时间等因素对制备IBV HI抗原的影响,筛选出制备抗原的最佳条件:选择10 U/ml的PLC1与等体积超速离心后的M41 IBV以及pH值7.40、.01 mol/L PBS稀释液混合,在37℃水浴作用2 h并不断振荡,取出后加入β-丙内酯4℃灭活24 h。在HI实验中,该抗原不与AIVH5、AIVH9、ND单因子血清反应,仅与IB阳性血清反应,有高度特异性。用高岭土37℃处理1 h可明显降低SPF阴性血清非特异反应。上述抗原在4℃保存3周血凝价达到最高。应用该抗原检测免疫前后鸡群IBV抗体,取得良好效果,证明用该方法与条件所制备的抗原可以用于IB诊断及临床实验。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒 I型磷酸酯酶 β-丙内酯血凝实验

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鸡传染性支气管炎病毒核蛋白的研究进展

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黑龙江畜牧兽医 2007年第10期 26-28页

作者：苏磊蔡家利重庆工学院生物工程学院重庆400050

鸡传染性支气管炎(IB)是由鸡传染性支气管炎病毒(IBV)引起的鸡急性、高度接触性传染病.该病以气管损伤、母鸡产蛋量下降和产畸形蛋为特征.

关键词：鸡传染性支气管炎病毒核蛋白接触性传染病 IBV 产蛋量下降核衣壳蛋白经济损失纤突蛋白

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鸡传染性支气管炎病毒在鸡肾上皮细胞中培养条件的优化研究

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中国家禽 2016年第10期38卷 16-20页

作者：姜逸周生唐梦君俞燕程旭沈欣悦李建梅高明燕中国农业科学院家禽研究所江苏扬州225125

鸡传染性支气管炎病毒(IBV)具有严格的上皮细胞嗜性。由于缺乏可供IBV复制的传代细胞系,从而阻碍了从细胞水平研究其复制、致病等分子机制。掌握鸡肾上皮细胞等原代细胞的制备、纯化及培养技术显得尤为关键。本项目组通过选择不同日龄的... 详细信息

鸡传染性支气管炎病毒(IBV)具有严格的上皮细胞嗜性。由于缺乏可供IBV复制的传代细胞系,从而阻碍了从细胞水平研究其复制、致病等分子机制。掌握鸡肾上皮细胞等原代细胞的制备、纯化及培养技术显得尤为关键。本项目组通过选择不同日龄的SPF鸡胚或雏鸡进行肾上皮细胞的制备,同时对消化酶、纯化方式及培养条件进行筛选优化,进一步采用具有EGFP标签的r H120-EGFP/5a重组病毒鉴定培养的鸡肾上皮细胞。结果表明:选择1日龄雏鸡,通过胶原酶Ⅰ消化制备的鸡肾上皮细胞的活力最佳;采用多次离心法能有效去除大量单细胞,从而达到纯化上皮细胞的目的;3%胎牛血清足够提供上皮细胞生长所需的营养,并能抑制CEF的生长。试验探索并优化了鸡肾上皮细胞制备及培养的条件,为禽源上皮细胞系的建立和IBV分子致病机制的研究奠定了基础。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒鸡肾上皮细胞培养条件

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鸡传染性支气管炎病毒毒力变异的分子机制研究进展

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中国家禽 2016年第7期38卷 1-4页

作者：周生姜逸唐梦君俞燕程旭高明燕沈欣悦李建梅中国农业科学院家禽研究所江苏扬州225125

鸡传染性支气管炎(IB)是由传染性支气管炎病毒(IBV)引起的一种急性、高度接触性传染病,是危害世界养禽业的主要疫病之一。该病毒很容易发生变异,随着不同病变类型和组织嗜性毒株的不断出现,传统的疫苗株驯化方法已经不能满足当前IB防控... 详细信息

鸡传染性支气管炎(IB)是由传染性支气管炎病毒(IBV)引起的一种急性、高度接触性传染病,是危害世界养禽业的主要疫病之一。该病毒很容易发生变异,随着不同病变类型和组织嗜性毒株的不断出现,传统的疫苗株驯化方法已经不能满足当前IB防控的需要,以现代基因工程技术为基础,研制安全、高效的新型疫苗成为国内外发展的必然趋势。本文总结了国内外IBV毒力变异的分子机制研究进展,为IB新型疫苗的研制提供新的方向。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒毒力变异分子机制

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鸡传染性支气管炎病毒与白色念珠菌混合感染的诊断及病原分离鉴定

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黑龙江畜牧兽医 2017年第6期 189-192页

作者：马邯生林婧史瑞雅刘彦威刘娜赵诚睿河北工程大学农学院动物医学重点实验室河北邯郸056021

为了掌握发病鸡场的致病原及致病原的生物学特性,试验采用临床和实验室诊断、病原分离与鉴定等方法对临床疑似鸡传染性支气管炎病毒和念珠菌混合感染病例进行了研究。结果表明:临床组织病料经革兰氏染色镜检可见革兰氏阳性、圆形或卵圆... 详细信息

为了掌握发病鸡场的致病原及致病原的生物学特性,试验采用临床和实验室诊断、病原分离与鉴定等方法对临床疑似鸡传染性支气管炎病毒和念珠菌混合感染病例进行了研究。结果表明:临床组织病料经革兰氏染色镜检可见革兰氏阳性、圆形或卵圆形的酵母样细胞,经传染性支气管炎病毒和念珠菌特异性检测引物检测均为阳性;临床病料接种土豆琼脂培养基上可见圆形、乳白色、背面没有色素沉着的单个菌落,分离菌株革兰氏染色可见革兰氏阳性、菌体大小不一、圆形或椭圆形的酵母样菌,在玉米粉吐温培养基上可见厚膜孢子,在羊血清培养基上可见芽管,分离菌株的ITS基因与Gen Bank中白色念珠菌同源性高达97.4%;临床病料接种SPF鸡胚可呈现典型的"侏儒胚"现象,分离病毒的S1基因与Gen Bank中鸡传染性支气管炎病毒同源性高达99.7%。说明发病鸡场由鸡传染性支气管炎病毒和念珠菌混合感染所致。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒白色念珠菌混合感染临床诊断实验室诊断致病原分离鉴定

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鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定及其致病性的研究

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中国兽医科学 2019年第7期49卷 861-870页

作者：刘帆任广彩闫圆圆王楠楠陈展鸿陈瑞爱华南农业大学兽医学院广东广州510642 广东温氏大华农生物科技有限公司广东肇庆526238 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司广东肇庆526238

本研究从江苏省某鸡场疑似鸡传染性支气管炎(IB)的病料中,利用SPF鸡胚尿囊腔接种的方法分离出1株传染性支气管炎病毒(IBV),命名为CK/CH/JS/TZHY48。经RT-PCR检测,该株IBV的S1基因全长1638bp。遗传进化分析显示,分离株属于基因Ⅵ型,与常... 详细信息

本研究从江苏省某鸡场疑似鸡传染性支气管炎(IB)的病料中,利用SPF鸡胚尿囊腔接种的方法分离出1株传染性支气管炎病毒(IBV),命名为CK/CH/JS/TZHY48。经RT-PCR检测,该株IBV的S1基因全长1638bp。遗传进化分析显示,分离株属于基因Ⅵ型,与常规疫苗株H120和H52的同源性较远。分离株对鸡胚有明显的致矮小化作用;对新城疫病毒有显著的干扰作用。动物回归试验结果显示,该分离株对7日龄SPF鸡的发病率为100%,致死率为40%,发病鸡出现气管啰音,甩头流鼻涕等呼吸道症状;病死鸡的剖检病理变化主要表现为肾苍白肿大,花斑肾,有大量明显的白色尿酸盐沉积,气管环出血。本研究可为IBV的遗传进化、致病机制以及免疫防控提供参考。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒分离鉴定 S1基因致病性

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鸡传染性支气管炎病毒MM41株感染对干扰素调节因子7的影响

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中国家禽 2016年第15期38卷 15-20页

作者：何怡宁戴锦龙谢智文曹艳杰韦平韦天超磨美兰广西大学动物科学技术学院广西南宁530005

为探讨鸡传染性支气管炎病毒（IBV）感染对天然免疫关键分子干扰素调节因子7（IRF7）的影响，为IBV致病及免疫机制研究提供理论依据，应用实时荧光定量PCR和West-ernblot技术检测了IBV感染鸡气管和肾脏中鹏F7mRNA和蛋白表达水平，并用... 详细信息

为探讨鸡传染性支气管炎病毒（IBV）感染对天然免疫关键分子干扰素调节因子7（IRF7）的影响，为IBV致病及免疫机制研究提供理论依据，应用实时荧光定量PCR和West-ernblot技术检测了IBV感染鸡气管和肾脏中鹏F7mRNA和蛋白表达水平，并用免疫组化方法观察了IRF7在气管和肾脏中的定位，同时检测IBV载量及蛋白的表达。结果表明，IBV感染后气管中馏F7mRNA明显上调并在接种后3～5d（3-5dpi）显著上调（P〈0．05），分别上调13．42和6．16倍，蛋白水平在5和11dpi明显高于对照组，5～8dpi核转位明显，肾脏中侬F7mRNA仅在8dpi显著上调2．15倍（P〈0．05），蛋白水平在5和8dpi明显高于对照组，8dpi核转位明显。气管中IBV载量在1～11dpi迅速上升，5dpi达到峰值，肾脏中8dpi达到峰值。IRF7的表达和活化与IBV含量呈一致性。研究表明，IBVM41株感染后上调并激活了气管和肾脏中的IRF7，使其发生核转位，IRF7在抗IBV天然免疫反应中具有重要作用，气管和肾脏中的IRF7免疫应答存在一定差异性。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒干扰素调节因子7 天然免疫

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鸡传染性支气管炎病毒单克隆抗体的制备及其免疫学特性分析

鸡传染性支气管炎病毒单克隆抗体的制备及其免疫学特性分析

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作者：何小卫中国农业科学院

学位级别：硕士

鸡传染性支气管炎病毒(Infectious Bronchitis Virus,IBV)是冠状病毒科、冠状病毒属γ冠状病毒的代表成员。IBV感染可引起鸡群典型的呼吸道症状:喘气,咳嗽,打喷嚏,气管罗音和流鼻涕。迄今为止,世界范围内已经分离出了超过30种血清型的IB... 详细信息

鸡传染性支气管炎病毒(Infectious Bronchitis Virus,IBV)是冠状病毒科、冠状病毒属γ冠状病毒的代表成员。IBV感染可引起鸡群典型的呼吸道症状:喘气,咳嗽,打喷嚏,气管罗音和流鼻涕。迄今为止,世界范围内已经分离出了超过30种血清型的IBV变种,它们之间只有很少或者根本没有交叉保护力,这也是IBV难以控制的主要原因。通过杂交瘤技术制备针对IBV的单克隆抗体有助于建立疾病的快速诊断方法,加强疾病的防控。实验首先用一对特异性引物将IBV N蛋白基因从质粒模板上扩增出来,然后将其连接到表达载体pET-30a上,构建重组质粒pET-30a-N并将其转入大肠杆菌中诱导表达。SDS-PAGE分析,表达的重组N蛋白出现两条目的条带,大小分别为:60 kDa和49 kDa。用Ni-NTA纯化系统纯化重组N蛋白后将其转印至NC膜上,用鼠抗IBV阳性血清与其作用检测其抗原性,结果显示重组蛋白抗原性良好。同时诱导表达重组M蛋白,将其纯化后放入-70℃保存。用鸡传染性支气管炎病毒tl/CH/LDT3/03皮下多点免疫6-8周龄雌性BALB/c小鼠,待其产生足够的免疫力后,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合。分别用重组M、N蛋白包被ELISA板筛选阳性杂交瘤细胞,经过三次克隆得到两株杂交瘤细胞,命名为3G11、4F10。经鉴定,单克隆抗体3G11重链亚类为IgG1,轻链为κ链;单克隆抗体4F10重链亚类为IgG2b,轻链为κ链。ELISA及western blot显示单克隆抗体3G11能够特异性识别M蛋白,单克隆抗体4F10能够特异性识别N蛋白。两株单克隆抗体都能够与选取的不同IBV毒株反应,表明它们所针对的表位可能位于蛋白的保守区。为了进一步确定两株单克隆抗体所针对的表位区域,实验分别诱导表达了截短的M蛋白:MP3-1(99-172aa)、MP3-2(161-225aa)和截短N蛋白:GST-N(11-99aa)、GST-N(281-160aa)、GST-N3(145-255aa)、GST-N4(236-321aa)、GST-N5(303-409aa)。Western blot和ELISA均显示单克隆抗体3G11能够与HIS-M、MP3-1反应,与MP3-2、GST均不反应,说明了单克隆抗体3G11表位区域位于M蛋白的99-172位氨基酸;单克隆抗体4F10能够与GST-N3反应,而与GST-N1、GST-N2、GST-N4、GST-N5及GST阴性对照不反应,说明单克隆抗体4F10所针对的表位区域位于N蛋白的145-255位氨基酸。本研究对IBV新的诊断方法的建立及疫苗研制具有重要意义。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒 M蛋白 N蛋白单克隆抗体

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