检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：王富妍四川农业大学

学位级别：硕士

鸡传染性支气管炎(IB)是一种由传染性支气管炎病毒(IBV)引起的高度接触性急性传染病,本病广泛流行于世界各地。它主要引起病鸡咳嗽、喷嚏和气管罗音,导致产蛋鸡产蛋减少、质量变劣,肉鸡饲料利用率降低、增重缓慢等,严重危害着世界养禽业... 详细信息

鸡传染性支气管炎(IB)是一种由传染性支气管炎病毒(IBV)引起的高度接触性急性传染病,本病广泛流行于世界各地。它主要引起病鸡咳嗽、喷嚏和气管罗音,导致产蛋鸡产蛋减少、质量变劣,肉鸡饲料利用率降低、增重缓慢等,严重危害着世界养禽业。IBV是一种典型的冠状病毒,具有抗原性复杂、易发生点突变和基因重组、血清型众多的特点,导致了IBV的分型、诊断和防控比较困难。单克隆抗体具有稳定性、高纯一性、能够持续获得抗体,并且具有严格的识别特异性,因此单抗在研究IBV的生物学特性和检测IBV方面比常规血清更加优越。IBV不断有多种新的基因型和变异株出现,近年来LX4基因型IBV在中国和欧洲国家主要流行,Sczy3毒株于2009年从四川雅安地区分离,S1基因进化树分析推出其属于LX4型。M蛋白是IBV重要的结构蛋白,M基因及其蛋白在进化过程中比较保守,M蛋白对病毒感染力具有一定的影响,同时M蛋白可能存在重要的抗原表位。因此,本试验将Sczy3毒株全病毒作为免疫原用于制备出抗IBVM蛋白的单克隆抗体,对提高目前IBV的诊断水平和抗原表位等研究具有重要的意义。本试验将鸡传染性支气管炎病毒Sczy3通过鸡胚接种增殖培养和差速离心后,利用纯化的Sczy3病毒免疫6-8周龄雄性BALB/c小鼠,采用建立的间接ELISA方法测定小鼠的血清抗体效价,待其效价大于104后,取小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞SP/20进行融合,利用间接ELISA方法对杂交瘤细胞及时筛选,强阳性孔经有限稀释法亚克隆4次以后,获得了2株能够稳定分泌抗IBV单克隆抗体的杂交瘤细胞株,将其命名为2C10和7H6。采用腹水制备法大量制备单克隆抗体,2C10采用辛酸-低温乙醇沉淀法进行纯化,7H6采用辛酸-硫酸铵沉淀法进行纯化,纯化效果良好；采用间接ELISA方法对2株单克隆抗体的细胞培养上清及纯化后的腹水的抗体效价进行测定,2C10单抗细胞培养上清的效价大于1：5120,腹水效价大于106；7H6单抗细胞培养上清的效价大于1：2560,腹水效价大于105；经亚型鉴定2C10为IgM,7H6为IgG1；经测定,2株杂交瘤细胞株具有良好的传代稳定性；western blot分析表明2株单抗都特异性识别IBV M蛋白；间接ELISA方法鉴定单抗的特异性,结果表明2株单抗只与IBV发生特异性反应,与新城疫病毒(NDV)、H9亚型禽流感病毒(H9AIV)、H5亚型禽流感病毒(H9AIV)抗原和鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)均不发生反应；2株单抗与选取的5种基因型的其他10株IBV毒株均有良好的交叉反应性。本试验成功制备了2株抗IBV M蛋白的单克隆抗体具有重要意义,该单抗为下一步进行IBV M蛋白的研究及IBV诊断试剂的研究提供了物质条件,可用于IBV抗原捕获ELISA方法的建立。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒单克隆抗体 M蛋白

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

鸡传染性支气管炎病毒tl/CH/LDT3/03的鸡胚传代致弱及其免疫效力的初步评价

鸡传染性支气管炎病毒tl/CH/LDT3/03的鸡胚传代致弱及其免疫效力...

引用

作者：聂磊东北农业大学

学位级别：硕士

鸡传染性支气管炎病毒（Infectious Bronchitis Virus，IBV）血清型众多，不同血清型之间交叉反应小或不具有交叉反应性，因此世界各国均选择与本地区流行血清型相匹配的毒株进行鸡传染性支气管炎（Infectious Bronchitis，IB）弱毒疫... 详细信息

鸡传染性支气管炎病毒（Infectious Bronchitis Virus，IBV）血清型众多，不同血清型之间交叉反应小或不具有交叉反应性，因此世界各国均选择与本地区流行血清型相匹配的毒株进行鸡传染性支气管炎（Infectious Bronchitis，IB）弱毒疫苗的研制。我国目前至少存在3种血清型的IBV，即Mass型，LX4型以及tl／CH／LDT3／03型，但现有的商品化疫苗不能对现地流行毒株提供有效的保护作用，导致IB在我国免疫鸡群中流行和传播。因此IB新弱毒疫苗的研制，对于预防和控制我国IB的发生和流行具有重要意义。本研究以tl／CH／LDT3／03毒株为研究对象，通过SPF鸡胚连续传代致弱，以期制备一株IB弱毒疫苗的候选毒株。每个代次毒经尿囊腔接种3枚9～11日龄的SPF鸡胚，37℃孵育，每日观察鸡胚两次。72h后观察鸡胚病变情况，无菌收集鸡胚尿囊液，并选择72h未死，但病变典型，尿囊液清亮的鸡胚进行下一次传代。根据鸡胚死亡时间及病变情况确定是否进行稀释及稀释倍数，一般稀释10-1～10-4。 tl／CH／LDT3／03毒株在SPF鸡胚传代过程中，病毒滴度较高，接种鸡胚病变典型，毒株高度适应鸡胚。与之相反，其对SPF雏鸡的致病力随鸡胚传代次数的增加而逐渐降低。tl／CH／LDT3／03第3代病毒（P3）对雏鸡的发病率和死亡率分别高达100％和80％；而当tl／CH／LDT3／03第120代病毒（P120）接种SPF雏鸡后，无临诊发病症状，表明tl／CH／LDT3／03毒株在SPF鸡胚上传至P120时已经充分致弱。本研究通过免疫鸡血清抗体变化情况、攻毒后临诊症状观察以及气管和肾脏的保护效果三个方面对弱毒株tl／CH／LDT3／03 P120的免疫效力进行初步评价。结果显示，tl／CH／LDT3／03 P120接种雏鸡后20天，抗体阳性率为100％，而对照组鸡血清抗体均为阴性，tl／CH／LDT3／03 P120可诱导良好的体液免疫应答；使用同源强毒tl／CH／LDT3／03 P3攻击后，免疫组雏鸡无发病症状，而对照组雏鸡表现明显的呼吸道症状，且在攻毒后第4天有2只鸡死亡，第5天有4只鸡死亡，初步表明tl／CH／LDT3／03 P120弱毒株可对同源强毒提供有效的保护作用；对攻毒后5天的雏鸡气管和肾脏进行病毒分离发现，tl／CH／LDT3／03 P120可对70.1％的雏鸡气管和肾脏提供保护，这可能分别与病毒诱导的粘膜免疫及IB特异性循环抗体有关。综上所述，弱毒株tl／CH／LDT3／03 P120具有良好的免疫原性，可对雏鸡提供较好的免疫保护作用，是理想的疫苗培育候选毒。 IBV S1蛋白能诱导机体产生病毒中和抗体、血凝抑制抗体，在病毒致病性和组织嗜性等方面均具有重要作用，因此目前对于IBV致病力的研究主要集中于S1基因。为了分析IBV tl／CH／LDT3／03毒株致病力变化与S1基因核苷酸及推导氨基酸序列的相关性，本研究对tl／CH／LDT3／03 P3毒株及P120毒株的S1基因序列进行了比较，发现传代后有两个核苷酸发生变异（361位和656位），并导致第121位氨基酸残基由G突变为W，第219位氨基酸残基由Q突变为R，其中第121位氨基酸残基位于S1基因高变区内。S1蛋白两个氨基酸的变异是否和IBV tl／CH／LDT3／03致病力的下降具有相关性，还有待进一步研究。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒弱毒疫苗 S1基因

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

鸡传染性支气管炎病毒变异株的分离及其S1基因序列分析

引用

中国病毒学 2005年第3期20卷 283-287页

作者：杨杰华刁有祥于申业刘霞姜世金刘悦竹陈庆普山东农业大学动物科技学院山东泰安271018 山东明发兽药研究所山东济南250036

本实验对山东省泰安地区某蛋鸡场产蛋下降鸡群发生的临床症状疑似鸡传染性支气管炎病例,无菌采集气管、肺脏、肾脏等组织,接种SPF鸡胚,经病毒形态观察、血凝特性试验、动物回归试验等证实,我们鉴定到一株鸡传染性支气管炎病毒(IBV);病... 详细信息

本实验对山东省泰安地区某蛋鸡场产蛋下降鸡群发生的临床症状疑似鸡传染性支气管炎病例,无菌采集气管、肺脏、肾脏等组织,接种SPF鸡胚,经病毒形态观察、血凝特性试验、动物回归试验等证实,我们鉴定到一株鸡传染性支气管炎病毒(IBV);病毒中和试验表明,该病毒为一株变异毒株,使用国外针对IBV793/B血清型发表的血清型特异性引物经RTPCR方法获得了该毒株的免疫原基因S1基因,初步确定该传染性支气管炎病毒变异毒株为793/B血清型。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒 TA03分离株 S1基因序列分析

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

鸡传染性支气管炎病毒M41株、Conn株联合免疫研究

鸡传染性支气管炎病毒M41株、Conn株联合免疫研究

引用

作者：阮武营河南农业大学

学位级别：硕士

鸡传染性支气管炎(Infectious Bronchitis, IB)是由套式目冠状病毒科、冠状病毒属的鸡传染性支气管炎病毒(Infectious Bronchitis Virus, IBV)引起的一种急性、高度接触性传染病。上世纪30年代在美国爆发以来,现在已经成为世界各地流行... 详细信息

鸡传染性支气管炎(Infectious Bronchitis, IB)是由套式目冠状病毒科、冠状病毒属的鸡传染性支气管炎病毒(Infectious Bronchitis Virus, IBV)引起的一种急性、高度接触性传染病。上世纪30年代在美国爆发以来,现在已经成为世界各地流行的主要禽病。IBV是单股RNA病毒,该病毒基因可由于点突变和重组而发生变异,因此IBV的血清型较多,已达30余种之多,不同血清型毒株之间仅有部分或无交叉保护作用,从而给本病的防治带来困难。我国目前虽然已广泛使用IB疫苗,但由于IBV的易变异型,IB仍然呈高度流行趋势,尤其是在已免疫鸡群中也常常爆发IB,造成严重的经济损失。 IBV本身无血凝性,经胰蛋白酶、磷脂酶C、魏氏梭菌培养液及神经氨酸酶等处理后显示出血凝性。但由于制备鸡传染性支气管炎病毒HI抗原影响因素复杂,国内长期以来没有稳定的商品化的IB抗原用于IB血清学检测和疫苗免疫效果监测,国内学者对IBV抗体研究,由于抗原滴度低,处理抗原所用的酶不同、制备方法不同等因素影响,检测结果有很大差异。为了更好有效的预防鸡传染性支气管炎,我们购买了M41株、Conn株标准抗原,用系统HI交叉试验及血清交叉中和试验对鸡传染性支气管炎病毒M41株、Conn株抗体区分进行了初步探讨,并对其联合免疫进行了研究。用系统HI交叉试验,对其进行抗体区分。结果表明,M41,Conn株标准抗原与M41阳性血清HI抗体效价值,免疫后21天分别为8㏒ 2,5㏒ 2,相差3㏒ 2,免疫后28天分别为8㏒ 2,5㏒ 2,相差3㏒ 2,免疫后35天分别为8㏒ 2,5㏒ 2,相差3㏒ 2;M41,Conn株标准抗原与Conn阳性血清HI抗体效价值,免疫后21天分别为4㏒ 2,8㏒ 2,相差4㏒ 2,免疫后28天分别为4㏒ 2,8㏒ 2,相差4㏒ 2,免疫后35天分别为4㏒ 2,9㏒ 2,相差5㏒ 2。证明用血清HI交叉试验能够将抗M41株,Conn株抗体区分开来。为了进一步验证M41株、Conn株抗体区分情况,用气管环测定了M41株,Conn株的毒价TOC-ID50,进行血清交叉中和试验。结果表明:高免血清与M41株,Conn株病毒进行血清交叉中和试验,能够将抗M41株,Conn株抗体明显区分开来,进一步证明了HI交叉试验结果正确性。利用HI试验及中和试验对鸡传染性支气管炎病毒M41株、Conn株进行了联合免疫研究,结果表明,中和试验的抗原相关系数(3.12%)远远小于HI试验的抗原相关系数(6.25%),两种检测方法都能将M41株、Conn株分属不同血清型,为临床应用提供了一种比较方便的手段;免疫血清HI试验效价与中和试验效价呈正相关,M41株相关系数r=0.873174,Conn株相关系数r= 0.843948;用IB乳化抗原做免疫时,必须用活毒做基础免疫,才能产生较高的抗体;IB M41株的M41+Conn组与M41组的抗体差异不显著(p>0.05),与空白对照组的抗体差异极显著(p<0.01);IB Conn株的M41+Conn组与Conn组的抗体差异不显著(p>0.05),与空白对照组的抗体差异极显著(p<0.01)。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒 M41株 Conn株抗体区分联合免疫

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定及S1基因的分子特征

引用

畜牧与兽医 2013年第2期45卷 66-69页

作者：毕研丽苗立中王金良郭广君吕素芳沈志强山东绿都生物科技有限公司山东滨州256600 山东省滨州畜牧兽医研究院山东滨州256600

本研究于2011年8月从山东省某鸡场鸡群中分离一株病毒,通过对分离株进行病毒致鸡胚矮小化试验、RT-PCR、动物回归试验等方法证实分离到鸡传染性支气管炎病毒(AIBV),命名为SDLVS株。根据GenBank上发表的AIBV的S1基因序列,用Oligo6.0设计... 详细信息

本研究于2011年8月从山东省某鸡场鸡群中分离一株病毒,通过对分离株进行病毒致鸡胚矮小化试验、RT-PCR、动物回归试验等方法证实分离到鸡传染性支气管炎病毒(AIBV),命名为SDLVS株。根据GenBank上发表的AIBV的S1基因序列,用Oligo6.0设计引物,对分离株SDLVS株S1基因进行序列扩增,测序及序列分析。将分离的AIBV毒株与中国常用疫苗毒株、其他血清型参考毒株分别进行核苷酸和氨基酸系统发生进化关系分析。SDLVS S1基因由1611个核苷酸组成,编码含537个氨基酸残基的多肽。SDLVS株与55株参考毒株的同源性比较,核苷酸同源性在72.4%～99.6%之间,推导氨基酸序列同源性在71.2%～99.3%之间。从进化树分析中SDLVS株与Mass型参考毒株核苷酸同源性最高,特别是与H120核苷酸同源性最高为99.6%,进化亲缘关系最近,提示这2株毒株的存在可能与长期使用Mass血清型AIBV疫苗,从而产生疫苗的免疫压力有关。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒 S1基因序列遗传进化分析

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

鸡传染性支气管炎病毒RT-PCR快速检测方法的建立

引用

中国农学通报 2011年第3期27卷 342-346页

作者：刘金朋商艳红陈红英王淑娟王子馨王亚丹师丽刚河南农业大学牧医工程学院郑州450002 洛阳市动物疫病预防控制中心河南洛阳471002

根据鸡传染性支气管炎病毒(IBV)N基因序列(FJ767920),利用引物软件Premier5.0,设计并合成了1对特异引物,通过RT-PCR扩增条件的优化,建立了一种快速检测IBV的RT-PCR方法。应用该方法成功地从IBV M41和河南株HN99中扩增出318bp的目的片段... 详细信息

根据鸡传染性支气管炎病毒(IBV)N基因序列(FJ767920),利用引物软件Premier5.0,设计并合成了1对特异引物,通过RT-PCR扩增条件的优化,建立了一种快速检测IBV的RT-PCR方法。应用该方法成功地从IBV M41和河南株HN99中扩增出318bp的目的片段,而传染性喉气管炎病毒、新城疫病毒及马立克病毒基因组均未扩增出相应的片段。将回收的RT-PCR产物克隆到pGEM-T Easy载体后测序,进一步证实RT-PCR检测方法的特异性。对IBV的最低检出量为0.6pg的cDNA。经初步应用表明,该方法的建立为IBV的早期诊断和临床检测奠定基础。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒 RT-PCR 检测

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

鸡传染性支气管炎病毒H52株TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR检测方法的建立

引用

中国畜牧兽医 2012年第4期39卷 169-173页

作者：梁耀峰郭霄峰宋立刘洋华南农业大学兽医学院广东广州510642 中国兽医药品监察所北京100081 扬州大学兽医学院江苏扬州225009

本研究建立了一种快速的鸡传染性支气管炎病毒(IBV)H52株定量检测方法,为进一步研究疫苗的效价检测和质量监控新方法奠定基础。针对IBV核蛋白(N)基因,设计特异的H52株荧光定量PCR检测引物和TaqMan-MGB探针,优化反应体系和条件后进行特... 详细信息

本研究建立了一种快速的鸡传染性支气管炎病毒(IBV)H52株定量检测方法,为进一步研究疫苗的效价检测和质量监控新方法奠定基础。针对IBV核蛋白(N)基因,设计特异的H52株荧光定量PCR检测引物和TaqMan-MGB探针,优化反应体系和条件后进行特异性、敏感性、重复性试验,探讨荧光定量RT-PCR与EID50方法测定病毒含量的相关性,并通过体外转录技术对病毒基因拷贝数进行定量分析。该方法特异性强,与其他禽源病毒均无交叉反应;该方法可检测到5.60×101拷贝/μL的病毒核酸,与常规PCR相比,敏感性高10倍;重复性试验的变异系数为0.9%～3.2%;与EID50检测结果的相关系数r=0.934,两种方法在检测H52株病毒效价上具有很好的相关性。本研究建立的TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR方法,适合于对鸡传染性支气管炎病毒H52株病毒含量的快速定量检测。

关键词：荧光定量RT-PCR TaqMan-MGB探针鸡传染性支气管炎病毒 H52

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

鸡传染性支气管炎病毒S1基因的原核表达及生物活性分析

引用

安徽农业科学 2010年第20期38卷 10692-10694页

作者：王春丽王宏俊赵权吉林农业大学动物科技学院吉林长春130118 北京市农林科学院畜牧兽医研究所北京100097

[目的]研究鸡传染性支气管炎病毒S1基因的原核表达及反应原性鉴定。[方法]将S1基因克隆到pMD18-T质粒载体上构建pMD18-T-IBV-S1载体;将目的基因插入原核表达载体pET-32a(+)的多克隆位点区,并将构建的重组质粒转化至宿主菌BL21中;IPTG诱... 详细信息

[目的]研究鸡传染性支气管炎病毒S1基因的原核表达及反应原性鉴定。[方法]将S1基因克隆到pMD18-T质粒载体上构建pMD18-T-IBV-S1载体;将目的基因插入原核表达载体pET-32a(+)的多克隆位点区,并将构建的重组质粒转化至宿主菌BL21中;IPTG诱导后的蛋白做SDS-PAGE电泳、免疫印迹分析。[结果]S1基因在大肠杆菌中成功地进行了表达,表达的融合蛋白约为66kD,以包涵体形式存在。免疫印迹试验显示,重组蛋白可被IBV多克隆抗体识别。[结论]S1重组蛋白具有反应原性,为进一步研究IBV的新型疫苗奠定了基础。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒 S1基因原核表达免疫印迹

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

鸡传染性支气管炎病毒生产用种毒的分子生物学鉴定方法的研究

鸡传染性支气管炎病毒生产用种毒的分子生物学鉴定方法的研究

引用

作者：于静中国兽医药品监察所

学位级别：硕士

鸡传染性支气管炎(Avian Infectious Bronchitis,IB)是由鸡传染性支气管炎病毒(Avian Infectious Bronchitis Virus,IBV)引起的一种急性、高度接触传染性疾病,其临床特征为病鸡咳嗽、喷嚏、气管啰音；幼鸡流鼻液；蛋鸡产蛋数量和品质下... 详细信息

鸡传染性支气管炎(Avian Infectious Bronchitis,IB)是由鸡传染性支气管炎病毒(Avian Infectious Bronchitis Virus,IBV)引起的一种急性、高度接触传染性疾病,其临床特征为病鸡咳嗽、喷嚏、气管啰音；幼鸡流鼻液；蛋鸡产蛋数量和品质下降,是严重危害养禽业的主要传染病之一。疫苗免疫是当前预防和控制鸡传染性支气管炎的主要措施,针对不同致病型或血清型的病毒,国内外均有多种疫苗毒株和疫苗效力评价用强毒株。一些毒株用传统的种毒鉴定方法很难准确鉴别,尤其是血清型相同的毒株,因此有必要建立分子生物学鉴别方法,进一步完善IBV特异性检验方法,从而对IBV种毒进行鉴定,并对国内外疫苗进行纯净性检测。本研究以中国兽医药品监察所菌种中心保存的不同年代的32株H120株、H52株和M41株种毒为研究对象,采用自行设计的特异性引物经RT-PCR技术扩增得到病毒的S1蛋白基因片段。经过序列分析,种毒H52中,1993年3月25日与1993年3月28日冻干的H52种毒的S1基因序列与其他代次不同,但与M41株一致。查阅种毒原始记录,该批次种毒检定不合格,安全检验表明接种该批次H52病毒的鸡出现了呼吸啰音、甩头等症状。1983年10月7日和1992年12月冻干的种毒与其他几株相比,分别存在2个和9个核苷酸突变。H120种毒中未发现明显碱基变异。M41株可分成两组：79年、88年、91年、96年、93年4月、01年冻干的种毒序列一致；而76年、93年3月、06年冻干的种毒序列一致,与H120相似。将从GenBank上下载的H52株、H120株、M41株以及欧洲使用的疫苗4/91株的全基因序列(全长27.6kb)进行比对分析,从中找出他们之间序列差异较明显的区域,使用自行设计的四对引物(引物对A、引物对B、引物对C、引物对D)对这四种毒株进行扩增。用引物对A时,能扩增出M41株全基因组序列中2900-4690bp处长度为1791bp的目的片断,所需的M41株最低病毒滴度为103.5EID50/mL,而无法扩增出H52株和H120株,因此用该对特异性引物能够区分M41株与H52株、H120株。用引物对B时,能够扩增出H52株和H120株全基因组序列中21588bp-23288bp处长度为1700bp的目的片断,所需的H120(H52)株最低病毒滴度为1035EID50/mL,再利用限制性内切酶Nae Ⅰ对PCR纯化产物进行酶切,H120株能够被切成1000bp和700bp两个片断,而H52株的扩增产物由于不存在该酶切位点,所以无法切开。因此利用特异性引物对B并结合酶切的方法可以区分H52株和H120株。使用引物对C时,能够扩增出4/91毒株S1基因序列中长度为1351bp的目的片断,所需的4/91株最低病毒滴度为1025EID50/mL,并结合使用引物对D进行套式PCR就能扩增出4/91株Sl基因中1066bp的目的片断,而无法扩增H52株、H120株和M41株,因此使用引物对C和引物对D能够有效区分4/91疫苗株和H52株、H120株、M41株,三对引物A、B、C均具有很好的特异性。从全国疫苗企业中随机抽取了19个疫苗企业共75批IBV活疫苗、从市场上抽取了11个企业的共16批IBV活疫苗、从5个外国企业(中国代理)中共抽取了15批IBV活疫苗,对其进行S1基因测序并使用上述建立的分了牛物学鉴别方法进行检测。结果显示：H120株疫苗和H52株疫苗用引物对B进行检测时,结果符合率为100%,用引物对C和引物对D检测发现,国内禽苗企业的75批疫苗中有6个企业9批疫苗、市场上抽取的16批禽疫苗中有1批疫苗出现了4/91株特异性片段,而从外企抽取的活疫苗均未出现4/91株特异性片段。综上所述,木研究通过对中国兽医药品监察所菌种中心保存的1BV种毒株的主要免疫原性基因Sl基因进行测序分析,并对IBV的H52株、H120株、M41株及国外流行疫苗毒株4/91株的全基因组进行分析,建立的鸡传染性支气管炎病毒种毒的分子生物学鉴别方法,进一步完善了种毒特异性检验方法。并将该方法应用于国内外市场中的鸡传染性支气管炎病毒活疫苗的纯净性检测,为今后IBV疫苗种毒、疫苗鉴别检验技术支撑。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒分子生物学鉴别方法疫苗序列分析

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

鸡传染性支气管炎病毒Sczy3株的致弱及其免疫效力的评价

鸡传染性支气管炎病毒Sczy3株的致弱及其免疫效力的评价

引用

作者：吴瑞婷四川农业大学

学位级别：硕士

鸡传染性支气管炎(IB)是由鸡传染性支气管炎病毒(IBV)引起的一种急性、高度接触传染性疾病,是危害养禽业的主要传染病之一。其血清型众多,且不同血清型之间的交叉反应小甚至不存在交叉反应,而且现有的商品化疫苗对流行毒株无法提供有效... 详细信息

鸡传染性支气管炎(IB)是由鸡传染性支气管炎病毒(IBV)引起的一种急性、高度接触传染性疾病,是危害养禽业的主要传染病之一。其血清型众多,且不同血清型之间的交叉反应小甚至不存在交叉反应,而且现有的商品化疫苗对流行毒株无法提供有效的免疫保护作用,使得IB在免疫鸡群仍不断流行传播。因此,在本地区流行毒株当中培育弱毒疫苗,对防治IB的发生和流行有重要的意义。Sczy3为本实验室2009年分离的一株LX4型IBV毒株,将其在非免疫鸡胚连续传至100代(P100)以致弱,希望制备出一株致病力减弱但具有良好免疫原性的IB疫苗株。试验结果显示：毒株在鸡胚传代过程中,病毒滴度逐渐升高,接种鸡胚出现典型病变,毒株能够高度适应鸡胚；与之相反,取不同代次毒进行动物试验,结果显示该毒株对非免疫雏鸡的致病力随着鸡胚传代次数的增加会逐渐降低。P100代毒接种鸡群后,未出现临床发病症状,发病率和死亡率均为0%,说明Sczy3毒株在鸡胚连续传至P100代时已充分致弱。为了观察四川地区近年来IBV的流行特点,本试验在2012-2013年期间对四川部分地区IBV进行了分离鉴定,共分离鉴定出10株IBV野毒株。对毒株S1基因进行克隆测序,并与GenBank上公布的30株参考毒株的相应序列进行比较分析。结果发现：分离株与参考株之间S1核苷酸序列的同源性为71.0%-99.8%；而10株IBV分离株彼此之间的S1基因核苷酸序列的同源性为74.5%-98.7%。建立遗传发育进化树发现：40株毒株可分为6个基因型,10株四川分离株分属于3个基因型,其中7株与近年国内主要流行株LX4属同一基因群,还有2株与台湾地区特有流行株TW2296/95、TW2575/98属同一基因群。大部分毒株与当前常用疫苗株的亲缘关系比较远。这一结果表明：目前在四川IBV的流行仍是以LX4型为主,但TW型IBV也逐渐开始流行起来。为评价Sczy3 P100对同源毒株及近年四川IBV流行毒株的免疫保护效力。取Sczy3 P100代毒接种7日龄非免疫雏鸡,免疫后2周分别用Sczy3 P3和分离株ScT、CK/CH/SCEM/12I进行攻毒,统计各试验组鸡群抗体效价、攻毒后临诊症状和病死率、气管和肾脏的带毒情况等指标,并制备组织病理学切片。结果显示：免疫组鸡只血清样品全部转为阳性,而非免疫对照组检测全为阴性,Sczy3 P100对同源毒株和同一基因型分离株CK/CH/SCEM/12I均可提供有效免疫保护；而对不同基因型毒株ScTW不能提供有效免疫保护,试验鸡可检出较高比例的气管和肾脏带毒。目前我国有众多的IBV基因型流行,故而1BV新疫苗的研究任重道远。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒流行毒株 S1基因免疫保护效力

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：