检索结果-内蒙古大学图书馆

中国家禽 2019年第15期41卷 18-22页

作者：张文赵长润陈基明朱丹张愉王露范文胜磨美兰韦平广西大学动物科学技术学院

根据鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的3′端非编码区保守区域,设计并合成一对特异性引物,建立IBV纳米PCR检测方法,并进行了特异性、灵敏性和重复性试验,然后将建立的方法进行初步应用。结果显示:该方法特异性良好,能从4种不同基因型IBV核酸... 详细信息

根据鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的3′端非编码区保守区域,设计并合成一对特异性引物,建立IBV纳米PCR检测方法,并进行了特异性、灵敏性和重复性试验,然后将建立的方法进行初步应用。结果显示:该方法特异性良好,能从4种不同基因型IBV核酸样品中检测到约346bp的目的条带,而对禽偏肺病毒、H9亚型禽流感病毒、新城疫病毒、传染性喉气管炎病毒、传染性法氏囊病毒、马立克氏病病毒、禽白血病病毒、鸭肝炎病毒等其他病原检测结果均为阴性;敏感性试验表明,纳米PCR的最低检测浓度为1.01×10^-4ng/μL,其敏感性是普通PCR的10倍;重复性试验显示3次均能检出IBV核酸。纳米PCR方法的临床应用表明,送检样品及攻毒鸡样品的检出率分别达到50%(10/20)和60%(30/50),与普通PCR方法检测结果符合率为100%。研究建立的IBV纳米PCR检测方法具有较高的敏感性和良好的特异性,为IBV的临床诊断、病原检测和流行病学调查提供了新的技术手段。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒纳米PCR 特异性敏感性

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鸡传染性支气管炎病毒CQ/01/2004株的分离与鉴定

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中国预防兽医学报 2006年第4期28卷 383-387页

作者：陈峰周庆丰王敬师李少璃张齐吴孔兴曹永长华南农业大学动物科学学院广东广州510640 广东温氏食品集团有限公司广东新兴527439

2004年从重庆某肉用鸡场疑似鸡传染性支气管炎的病鸡中采集病料,按常规处理后接种9～10日龄鸡胚,通过鸡胚连续传代培养3代,并对该分离毒株的鸡胚致病性、血凝性和NDV的干扰特性进行检测,同时进行了动物回归试验。结果表明,该分离株具有... 详细信息

2004年从重庆某肉用鸡场疑似鸡传染性支气管炎的病鸡中采集病料,按常规处理后接种9～10日龄鸡胚,通过鸡胚连续传代培养3代,并对该分离毒株的鸡胚致病性、血凝性和NDV的干扰特性进行检测,同时进行了动物回归试验。结果表明,该分离株具有IBV感染特征,可使鸡胚胚体出血、蜷缩、矮化;该分离毒株无直接血凝性,对NDV有明显的干扰作用;动物回归试验中有75%的感染鸡在10d内发病或死亡。剖检病死鸡可见肾苍白、肿胀,肾小管内充塞大量尿酸盐,支气管有出血点、有大量粘液。采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术对CQ/01/2004的纤突蛋白S1基因进行扩增、克隆和序列测定,结果表明该基因具有IBVS1基因的共有分子特征,将测序结果提交GenBank进行同源性检索,发现分离株CQ/01/2004和J株S1的同源性最高,核苷酸同源性为94%,氨基酸同源性为89.4%,与M41的核苷酸同源性为80.6%,氨基酸同源性为78.0%。试验结果表明,分离的病毒株CQ/01/2004为鸡传染性支气管炎病毒。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒分离鉴定序列分析

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鸡传染性支气管炎病毒地方流行株的分离与鉴定

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中国兽医学报 2009年第7期29卷 845-848页

作者：闫芳岳文斌刘娟李绪英赵宇军吉文汇刘风波吴倩任家琰化丽珍山西农业大学动物科技学院山西太谷030801

从山西各地区疑似鸡传染性支气管炎（IB）的病料中，分离到5株鸡传染性支气管炎病毒（IBV）分离株，并对分离病毒进行了病毒形态观察、对鸡新城疫病毒（NDV）的干扰、鸡胚致病性试验、动物回归试验、血凝特性试验、病毒理化特性测定等... 详细信息

从山西各地区疑似鸡传染性支气管炎（IB）的病料中，分离到5株鸡传染性支气管炎病毒（IBV）分离株，并对分离病毒进行了病毒形态观察、对鸡新城疫病毒（NDV）的干扰、鸡胚致病性试验、动物回归试验、血凝特性试验、病毒理化特性测定等生物特性鉴定及IBVN基因特异性片段的检测。电镜观察，可见直径为60～120nm，有囊膜及纤突呈冠状排列的病毒粒子；对NDV有明显的干扰作用；分离株的传代物均有明显的致鸡胚矮小化作用；动物回归感染死亡鸡肾脏病变明显，表现肾脏肿大、花斑肾现象，输尿管内充塞大量尿酸盐；无直接血凝性，经1％胰酶处理后可凝集鸡红细胞；分离株对乙醚和氯仿敏感；采用反转录-聚合酶链式反应（RT—PCR）对分离毒株进行扩增，结果均扩增出特异N基因核酸片段。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒分离鉴定

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鸡传染性支气管炎病毒变异株的分离及分子特征研究

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中国预防兽医学报 2013年第12期35卷 960-963页

作者：边葶苈朱林文思雷静任景乐李烨周继勇廖敏浙江大学农业部动物病毒学重点实验室浙江杭州310058 青岛市畜牧兽医研究所山东青岛266100

为了解近年来鸡传染性支气管炎病毒（IBv）分子生物学特征及其变异情况，本研究以最近从山东潍坊某鸡场产蛋鸡卵巢中分离的一株IBV WF2011为研究对象，进行基因2～基因6的基因组测序及分析。结果表明分离株3’端基因组具有典型的IBV基... 详细信息

为了解近年来鸡传染性支气管炎病毒（IBv）分子生物学特征及其变异情况，本研究以最近从山东潍坊某鸡场产蛋鸡卵巢中分离的一株IBV WF2011为研究对象，进行基因2～基因6的基因组测序及分析。结果表明分离株3’端基因组具有典型的IBV基因编码特征5’．S．3a．3b．E．M．5a．5b．N．3’，S蛋白裂解位点为ⅫRRSRR，，与美国株Gray、Holte、JMK、Conn46和韩国株SNU8067的s蛋白裂解位点相同。同源性比较和系统进化分析显示，WF2011分离株与常见的参考病毒株的同源性普遍较低，s1基因的同源性在49．7％～86．0％之间，并且与LX4、SAlBK和Mass类型的病毒株存在较大的遗传距离。WF2011是一株变异程度比较大的IBV变异株。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒变异株遗传进化分析

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鸡传染性支气管炎病毒变异株(793/B)M基因与2种截短M基因的原核表达及鉴定

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中国兽医学报 2010年第7期30卷 898-902页

作者：孙宁李宏梅刁有祥孙法良王明亮马艳芳纪巍山东农业大学动物科技学院山东泰安271018

运用生物信息学技术推测鸡传染性支气管炎病毒(IBV)变异株(793/B)M基因的抗原位点,应用DNAStar软件针对M基因及其抗原表位片段设计3对引物,PCR扩增并成功构建了M基因的pGEX6p-M和2种截短M基因的pGEX6p-M1,pGEX6p-M2原核表达质粒,SDS-PAG... 详细信息

运用生物信息学技术推测鸡传染性支气管炎病毒(IBV)变异株(793/B)M基因的抗原位点,应用DNAStar软件针对M基因及其抗原表位片段设计3对引物,PCR扩增并成功构建了M基因的pGEX6p-M和2种截短M基因的pGEX6p-M1,pGEX6p-M2原核表达质粒,SDS-PAGE检测分别在50000,32000,29000处有特异性表达条带,表明GST-M,GST-M1,GST-M2重组蛋白获得成功表达;Westernblotting检测显示,GST-M和GST-M1重组蛋白能被鼠抗IBV(793/B)血清识别,而GST-M2重组蛋白不能被识别。GST-M与GST-M1重组蛋白具有良好的抗原性,初步证实M蛋白存在抗原表位,这为进一步研究IBV(793/B)M蛋白的免疫原性和制备基因工程疫苗提供了重要依据。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒 M重组蛋白原核表达

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鸡传染性支气管炎病毒S1基因在昆虫细胞中的高效表达

引用

中国兽医学报 1999年第5期19卷 421-424页

作者：宋延华刘福安华南农业大学动物医学系广东广州510642

将鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）Ｓ１基因ｃＤＮＡ克隆至含有起始密码ＡＴＧ的转移载体ｐＳＸＩＶＶＩ＋Ｘ３／４，构建成重组转移质粒ｐＳＸＩＶＶＩ＋Ｘ３／４ Ｓ１．Ｈｏｌｔｅ，再与粉纹夜... 详细信息

将鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）Ｓ１基因ｃＤＮＡ克隆至含有起始密码ＡＴＧ的转移载体ｐＳＸＩＶＶＩ＋Ｘ３／４，构建成重组转移质粒ｐＳＸＩＶＶＩ＋Ｘ３／４ Ｓ１．Ｈｏｌｔｅ，再与粉纹夜蛾核型多角体病毒ＴｎＮＰＶ ＳＶＩ－ＧＤＮＡ（ＯＣＣ－，ｇａｌ＋）共转染草地夜蛾（Ｓｆ９）细胞，经空斑纯化得到已插入Ｓ１基因并能形成多角体的重组病毒ＴｎＮＰＶ（Ｘ３／４）Ｓ１．Ｈｏｌｔｅ ＯＣＣ＋。以重组毒株感染Ｔｎ５Ｂ１细胞，在不同时间收取感染了病毒的细胞进行ＳＤＳ ＰＡＧＥ与Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹检测。ＴｎＮＰＶ（Ｘ３／４）Ｓ１．Ｈｏｌｔｅ ＯＣＣ＋在感染的细胞中高效表达了Ｓ１基因，表达产物为约１０００００的融合蛋白，与预计的表达修饰后的产物大小相符，推测此蛋白已糖基化。ＳＤＳ ＰＡＧＥ凝胶薄层色谱分析结果显示，感染病毒后４８、７２、９６ｈ，Ｓ１蛋白分别占细胞内总蛋白量的２８７％、３５８％、３７１％。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒 IBV 昆虫细胞传染性支气管炎病毒 S1基因杆状病毒表达

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鸡传染性支气管炎病毒TJ9602、HN9604、BJ9601分离株特性的研究

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畜牧兽医学报 2005年第12期36卷 1323-1328页

作者：刘兴友何宏轩姚四新陈德胜甘孟侯陈溥言南京农业大学南京210095 河南科技学院新乡453003 中国农业大学北京100094

从天津、河南、北京的鸡场分别分离到TJ9602、HN9604、BJ9601鸡传染性支气管炎病毒毒株,对其进行了动物回归、生物学特性、理化特性、血清学试验、抗原定位,对分离株的S1基因进行了RT-PCR扩增、核酸序列分析等研究。确定3株分离毒株为... 详细信息

从天津、河南、北京的鸡场分别分离到TJ9602、HN9604、BJ9601鸡传染性支气管炎病毒毒株,对其进行了动物回归、生物学特性、理化特性、血清学试验、抗原定位,对分离株的S1基因进行了RT-PCR扩增、核酸序列分析等研究。确定3株分离毒株为致肾病变的IBV,亲嗜器官为肾脏。HN9604和BJ9601与M41和H120均有较强的中和抗原交叉反应性,S1基因同源性分析,HN9604和BJ9601 S1基因与H120毒株的同源性最高,与H120毒株同属于A分支,均属于Ⅰ群。TJ9602与H120、M41等参考毒株的中和抗原交叉反应均较低,S1基因同源性分析,属于Ⅱ群。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒 S1基因

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鸡传染性支气管炎病毒CK/CH/LHLJ/04V的分离鉴定及致弱的初步研究

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中国预防兽医学报 2007年第10期29卷 748-752页

作者：龚利洋张庆霞韩宗玺马亚珍聂磊邵昱昊刘胜旺孔宪刚中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

从黑龙江省某鸡场发病鸡群的肾脏中分离到一株病毒,通过病毒致SPF鸡胚病变特征、对鸡外周血红细胞凝集特性、病毒粒子形态学特征以及RT-PCR鉴定等方面的研究,表明该病毒为鸡传染性支气管炎病毒,并命名为CK/CH/LHLJ/04V。通过对该病毒基... 详细信息

从黑龙江省某鸡场发病鸡群的肾脏中分离到一株病毒,通过病毒致SPF鸡胚病变特征、对鸡外周血红细胞凝集特性、病毒粒子形态学特征以及RT-PCR鉴定等方面的研究,表明该病毒为鸡传染性支气管炎病毒,并命名为CK/CH/LHLJ/04V。通过对该病毒基因型分析以及对SPF鸡致病性试验发现该病毒为我国近年来流行的一类重要IBV的代表。将该毒株在SPF鸡胚连续传代110代(P110),取不同代次毒进行动物实验。结果显示,该毒株对SPF雏鸡的致病力随鸡胚传代次数的增加而逐渐降低。P110代毒以105.0 EID50/0.1 mL的剂量通过点眼滴鼻接种15日龄SPF雏鸡,鸡群发病率和死亡率均为0。不同代次毒接种SPF鸡对同源毒株P3代强毒的攻击均具有100%保护性。实验表明,IBV毒株CK/CH/LHLJ/04V P110对SPF雏鸡已无致病性,但仍具有良好的免疫原性,可作为研制IB弱毒疫苗的候选毒株。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒分离鉴定弱毒疫苗

来源：评论

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鸡传染性支气管炎病毒ck/CH/LHLJ/090908株的基因组特性研究

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中国预防兽医学报 2014年第11期36卷 838-841页

作者：陈玲凤韩宗玺邵昱昊孔宪刚刘胜旺中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽呼吸道病创新团队黑龙江哈尔滨150001

为了解传染性支气管炎病毒(IBV)H120疫苗病毒株的变异情况,本研究利用设计的16对引物扩增分离株ck/CH/LHLJ/090908的基因组序列,并采用3'-RACE和5'-RACE技术,扩增得到该病毒全基因组序列。通过与已发表参考病毒株的全基因组序... 详细信息

为了解传染性支气管炎病毒(IBV)H120疫苗病毒株的变异情况,本研究利用设计的16对引物扩增分离株ck/CH/LHLJ/090908的基因组序列,并采用3'-RACE和5'-RACE技术,扩增得到该病毒全基因组序列。通过与已发表参考病毒株的全基因组序列进行比较分析,结果表明该分离株基因组全长为27 609 nt,其基因排序未发生改变,纤突蛋白裂解位点为533RRFRR537。遗传进化分析表明该分离株与H120疫苗株的基因组具有高度同源性(99.7%),进化亲缘关系最近。对其基因组序列进行进一步的分析表明,该分离株的E基因发生了248 nt^280 nt连续33个核苷酸的缺失,导致其编码的E蛋白缺失11个氨基酸,推测该分离株为H120疫苗株在鸡群中自然传代进化的变异株。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒基因组序列序列分析点突变缺失

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鸡传染性支气管炎病毒HH06分离株的鉴定及其S1基因的分子特征

引用

中国兽医科学 2007年第11期37卷 926-930页

作者：马德星潘龙任晓峰王金侠李广兴东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030 秦皇岛市第二医院河北秦皇岛066000

从黑龙江省哈尔滨市某鸡场疑似鸡传染性支气管炎的发病蛋鸡肾组织病料中分离到1株病毒,命名为HH06。该分离毒株经SPF鸡胚传代、血凝试验、负染电镜检查以及动物回归试验,证实为IBV。用RT-PCR扩增得到了HH06株S1基因片段,经测序,并与国内... 详细信息

从黑龙江省哈尔滨市某鸡场疑似鸡传染性支气管炎的发病蛋鸡肾组织病料中分离到1株病毒,命名为HH06。该分离毒株经SPF鸡胚传代、血凝试验、负染电镜检查以及动物回归试验,证实为IBV。用RT-PCR扩增得到了HH06株S1基因片段,经测序,并与国内外IBV参考毒株的相应基因进行序列比较分析。结果表明,HH06株S1基因由1 620个核苷酸组成,推导的多肽由540个氨基酸残基组成,推导的氨基酸裂解位点序列为5个连续碱性氨基酸HRRRR。HH06株S1基因序列与除LX4外的其他参考株相应基因的核苷酸及氨基酸序列同源性均较低,亲缘关系均较远。初步证实HH06株为不同于IBV疫苗株的一个新毒株。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒分离鉴定 S1基因分子特征

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