检索结果-内蒙古大学图书馆

中国动物保健 2025年第2期27卷 101-102页

作者：潘青梅江苏省盐城市响水县农业干部学校江苏盐城224600

本研究针对鸡新城疫病毒引起的病毒性腹泻,从病原学、流行病学、临床症状等方面进行了深入探讨,并提出了一系列防控措施。研究表明,鸡新城疫病毒具有较强的传染性和致病性,病毒在环境中的存活时间较长,传播途径多样。本文提出了加强饲... 详细信息

本研究针对鸡新城疫病毒引起的病毒性腹泻,从病原学、流行病学、临床症状等方面进行了深入探讨,并提出了一系列防控措施。研究表明,鸡新城疫病毒具有较强的传染性和致病性,病毒在环境中的存活时间较长,传播途径多样。本文提出了加强饲养管理、疫苗免疫和药物防治等综合防控措施。实践证明,通过实施这些措施,可以有效控制鸡新城疫病毒性腹泻的传播,保障养鸡业的健康发展。为我国养鸡业提供了有益的参考和借鉴。

关键词：鸡新城疫病毒病毒性腹泻防控措施

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鸡新城疫病毒单克隆抗体的中和作用

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病毒学报 1991年第1期7卷 23-29页

作者：周维松刘秀梵江苏农学院

23株抗鸡新城疫病毒(NDV)单克隆抗体(简称单抗)中,9株(10-1、15-1、L15-6、LA15-7、FHY-23、39-S-2、44-S-2、94-St 107-2具有中和能力。研究证明,有溶血抑制能力的单抗均有中和能力,表明病毒的溶血能力与感染性相关。该9株单抗对吸附前... 详细信息

23株抗鸡新城疫病毒(NDV)单克隆抗体(简称单抗)中,9株(10-1、15-1、L15-6、LA15-7、FHY-23、39-S-2、44-S-2、94-St 107-2具有中和能力。研究证明,有溶血抑制能力的单抗均有中和能力,表明病毒的溶血能力与感染性相关。该9株单抗对吸附前的NDV F48E8株有不同程度的中和作用,蚀斑减少中和试验、病变抑制中和试验和鸡胚中和试验的中和效价呈平行相关性。单抗L15-6对已吸附于细胞的F48E8 4℃作用1小时,使感染细胞荧光灶形成单位(ICFFU)减少了77.6％。单抗10-1、15-1、L15-6、LA15-7等分别作用于感染了F48E8的细胞,能抑制此感染性细胞产生病变.免疫荧光试验证实,在病变受抑制的细胞内仍有病毒抗原,一旦终止单抗的连续作用,孔内细胞在48小时内即产生病变。单抗对NDV的中和作用,可能包括阻止病毒的吸附、穿入或促使已吸附的病毒解离等,但单抗并不能完全中和细胞内存在的病毒。单抗15-1、L15-6均能保护SPF鸡不受100LD50 F48E8的攻击,15-1还对已出现鸡新城疫症状的实验性病鸡有治疗作用。

关键词：鸡新城疫病毒单克隆抗体中和作用

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鸡新城疫病毒、鸡细小病毒和禽流感病毒三重PCR检测方法的建立及应用

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南方农业学报 2019年第11期50卷 2576-2582页

作者：奉彬谢芝勋邓显文张艳芳谢丽基谢志勤范晴曾婷婷罗思思黄娇玲广西兽医研究所/广西兽医生物技术重点实验室

【目的】建立能同时检测鸡新城疫病毒(NDV)、鸡细小病毒(ChPV)和禽流感病毒(AIV)的三重PCR检测方法,为临床上快速诊断及有效防控NDV、ChPV和AIV的单一或混合感染提供技术支持。【方法】参考NCBI中已公布NDV的F基因(登录号DQ195265.1)、C... 详细信息

【目的】建立能同时检测鸡新城疫病毒(NDV)、鸡细小病毒(ChPV)和禽流感病毒(AIV)的三重PCR检测方法,为临床上快速诊断及有效防控NDV、ChPV和AIV的单一或混合感染提供技术支持。【方法】参考NCBI中已公布NDV的F基因(登录号DQ195265.1)、ChPV的NS1基因(登录号GU214704.1)和AIV的M基因保守区(登录号DQ485211.1),设计合成针对NDV、ChPV和AIV的特异性引物,应用这3对引物建立三重PCR检测方法,对反应体系及扩增程序进行优化,并通过特异性试验、敏感性试验、重复性试验和临床样品检测等评估其实用性。【结果】优化后的三重PCR反应体系为ChPV和AIV的上、下游引物各0.5μL,NDV的上、下游引物各1.0μL,NDV、ChPV和AIV的核酸模板各1.0μL,Premix TaqTM 12.5μL,无RNase水补足至25.0μL。最佳扩增程序:95.0℃预变性5 min;94.0℃1 min,58.5℃1 min,72.0℃1 min,进行35个循环;72.0℃延伸10 min,12.0℃结束反应。建立的三重PCR能同时扩增出NDV(453 bp)、ChPV(687 bp)和AIV(239 bp)的特异性条带,对应的最低检测下限分别为2.5 pg NDV、6.4 pg ChPV和2.0 pg AIV,但扩增传染性支气管炎病毒(IBV)、禽呼肠孤病毒(ARV)、马立克病毒(MDV)、传染性喉气管炎病毒(AILTV)和禽肺炎病毒(APV)等病原体均呈阴性。应用建立的三重PCR对50份鸡喉头或泄殖腔棉拭子样品进行检测,结果显示有1份NDV阳性、9份ChPV阳性和2份AIV阳性样品,其中包含2份ChPV和AIV均呈阳性的样品,1份ChPV和NDV均呈阳性的样品,与常规PCR的检测结果一致。【结论】建立的三重PCR能同时对NDV、ChPV和AIV 3种病原进行特异性诊断,在混合感染病例鉴别诊断方面具有广阔的应用前景。

关键词：鸡新城疫病毒鸡细小病毒禽流感病毒三重PCR 特异性敏感性

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鸡新城疫病毒内蒙古毒株HN蛋白基因的序列分析与同源性比较

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黑龙江畜牧兽医 2010年第5期 110-112页

作者：白艳波张七斤内蒙古农业大学动物科学与医学学院内蒙古呼和浩特010018

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鸡新城疫病毒荧光RT-PCR与病毒分离方法的比较

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中国兽医杂志 2007年第11期43卷 30-31页

作者：古飞霞田云庞耀彬仲恺农业技术学院生命科学学院广东广州510225 广东省动物防疫监督总所广东广州510230

2006年冬春季,在广州附近地区的一些竹丝鸡场、三黄鸡场、珠珍鸡场的35～50日龄鸡群相继暴发了以高死亡率、伴有呼吸道和神经症状的疫情.

关键词：鸡新城疫病毒分离方法 PCR RT 荧光神经症状剖检病变死亡率

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鸡新城疫病毒的分离与初步鉴定

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中国家禽 2012年第21期34卷 56-57页

作者：苏战强张建平赵璐郭庆勇况玲买买提.黑牙斯丁蒋国英新疆农业大学动物医学学院新疆乌鲁木齐830052

近几年，乌鲁木齐周边地区常发生一种以呼吸困难和气管环严重出血为特点的鸡病，各日龄、多品种鸡均可发病，而且没有明显的季节性，治疗效果差，死淘率高，对养殖业危害巨大。为了探求该类疾病与新城疫的相关性，于2011年7～12月期间... 详细信息

近几年，乌鲁木齐周边地区常发生一种以呼吸困难和气管环严重出血为特点的鸡病，各日龄、多品种鸡均可发病，而且没有明显的季节性，治疗效果差，死淘率高，对养殖业危害巨大。为了探求该类疾病与新城疫的相关性，于2011年7～12月期间，以乌鲁木齐周边地区发病三黄鸡群为研究对象，采集有出血病变病死鸡气管环病料，

关键词：鸡新城疫病毒鉴定分离周边地区乌鲁木齐呼吸困难治疗效果季节性

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鸡新城疫病毒细胞苗的研究概况

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中国兽医杂志 1990年第8期16卷 55-56页

作者：武占银西北农业大学兽医系

对鸡新城疫(ND)的研究已有60余年的历史,迄今尚未完全解决本病的控制,ND仍是各国养禽业的主要威胁之一。目前在各种综合防制措施中,免疫预防最为关键,也是本病研究中的热点。用于免疫的疫苗多为鸡胚苗。由于疫苗的广泛使用,使得鸡蛋中... 详细信息

对鸡新城疫(ND)的研究已有60余年的历史,迄今尚未完全解决本病的控制,ND仍是各国养禽业的主要威胁之一。目前在各种综合防制措施中,免疫预防最为关键,也是本病研究中的热点。用于免疫的疫苗多为鸡胚苗。由于疫苗的广泛使用,使得鸡蛋中母源抗体水平普遍上升,以鸡胚接种制苗就会因母源抗体而影响效价。

关键词：鸡新城疫病毒细胞苗

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鸡新城疫病毒HN09-69株主要基因的克隆、原核表达及鉴定

鸡新城疫病毒HN09-69株主要基因的克隆、原核表达及鉴定

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作者：陈礼朋河南农业大学

学位级别：硕士

新城疫(***)是由新城疫病毒(Newcastlediseasevirus，NDV)引起禽的高度接触性传染病，主要引起呼吸道，神经系统或肠道病变。NDV是单股负链的RNA病毒，为副黏病毒科副黏病毒亚科禽腮腺炎病毒属中的一个成员，基因组编码NP、P、M、F、HN... 详细信息

新城疫(***)是由新城疫病毒(Newcastlediseasevirus，NDV)引起禽的高度接触性传染病，主要引起呼吸道，神经系统或肠道病变。NDV是单股负链的RNA病毒，为副黏病毒科副黏病毒亚科禽腮腺炎病毒属中的一个成员，基因组编码NP、P、M、F、HN、L6种主要结构蛋白。另外，P基因可以通过“RNA编辑”方式编码产生额外的两个非结构蛋白-V蛋白和W蛋白。从1926年发现该病以来，NDV传播到世界各个国家和地区，并对世界养禽业及国际贸易造成巨大的经济损失。2009年本实验室从中牟某发病鸡场采集病料，并经病毒分离、鉴定和致病性实验，证明病原为强毒NDV，并命名为HN09-69株。本试验以HN09-69分离株为研究对象，对主要基因分别进行了克隆、原核表达及鉴定。运用RT-PCR技术从HN09-69分离株的基因组中分别扩增出NP、P、M、F、HN基因的全长ORF序列并测序。对NP、P、M、F、HN基因核苷酸同源性进行比较、序列和进化分析，得出HN09-69株与传统疫苗株LaSota、Clone-30、VG/GA、F48E8、Mukteswar同源性较低，而与水禽分离株FP1-02、SD09、SF02、SDWF02、ZJ1同源性较高，均在96％以上，并与两鸭源分离株SD09、SF02在同一进化分支上，从基因分型上得出HN09-69株属于当前流行的Ⅶd型。对各基因进行基于氨基酸序列的生物信息学分析，表明F、HN存在信号肽和跨膜区。\n 其次，分别以构建的克隆质粒为模板，用上下游分别含BamHⅠ、XhoⅠ位点的引物，亚克隆NP、P、V基因的ORF及M(1-798bp)、F(1119-1506bp)、HN(675-1116bp)基因片段插入到原核表达载体pET-28a(+)中，成功构建了重组原核表达质粒。将鉴定正确的原核表达质粒分别转化BL21(DE3)宿主菌，经IPTG诱导表达，SDS-PAGE电泳结果表明，各重组质粒在BL21(DE3)菌中获得了高效表达，分别在相应位置上出现明显的目的蛋白条带，且NP、P蛋白以可溶性蛋白形式表达，M、F、HN、V蛋白以包涵体蛋白形式表达。然后对各蛋白表达的条件进行优化，并对蛋白进行Western-blot鉴定。用Ni亲和层析柱对NP、P进行大量纯化，后与适量的佐剂混合乳化，做成疫苗，免疫42日龄SPF鸡(300ag/只)。二免后第7天开始采血，并每隔7天采血一次，第21天用F48E8株进行攻毒，观察结果LaSota免疫组的保护率为100％，NP蛋白免疫组和对照组保护率为0，P蛋白免疫组保护率为20％。\n 综上所述，本研究成功克隆了HN09-69株主要基因，构建了原核表达质粒，并实现了其在宿主菌中的高效表达。纯化了NP、P融合蛋白，并进行SPF鸡免疫保护实验，为进一步研究各蛋白的免疫原性和亚单位疫苗奠定基础。

关键词：鸡新城疫病毒原核表达融合蛋白蛋白纯化

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鸡新城疫病毒HeB02株的分离鉴定及其F基因的克隆和表达

鸡新城疫病毒HeB02株的分离鉴定及其F基因的克隆和表达

引用

作者：孙祎敏河北师范大学

学位级别：硕士

本论文从有神经症状的病死鸡的脑组织中分离出一株病毒，通过对分离株进行MDT(77h)、ICPI(1.1)、IVPI(2.63)等生物学试验、空斑试验及电镜观察等，设计了一对引物(P1、P2)，分别含有酶切位点KpnI、BamHI，以HeB02基因组为模板，扩增出F... 详细信息

本论文从有神经症状的病死鸡的脑组织中分离出一株病毒，通过对分离株进行MDT(77h)、ICPI(1.1)、IVPI(2.63)等生物学试验、空斑试验及电镜观察等，设计了一对引物(P1、P2)，分别含有酶切位点KpnI、BamHI，以HeB02基因组为模板，扩增出F基因片段，将其连接到pGEM-T载体，构建了重组质粒pST-F并对片断进行了测序，将F基因定向克隆于真核表达载体pVAXl中，构建了重组质粒pSV-F，转染COS-1细胞，SDS-PAGE电泳可见表达的特异蛋白条带。经Westernblotting，ELISA和中和试验检测，表达产物与相应抗体可发生特异性反应，说明F基因真核表达的蛋白具有很好的反应原性。

关键词：鸡新城疫病毒基因组序列分析基因工程疫苗

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鸡新城疫病毒抗膀胱癌作用的体内与体外实验的研究

鸡新城疫病毒抗膀胱癌作用的体内与体外实验的研究

引用

作者：黄健北京医科大学

学位级别：硕士

应用该病毒治疗膀胱肿瘤尚未见报道,鸡新城疫病毒能否对膀胱癌细胞产生明显的杀伤作用,是该实验研究的主要目的.为研究鸡新城疫病毒对膀胱癌细胞的杀伤作用,作者自1996年9月至1997年4月分别进行了鸡新城疫病毒对膀胱癌细胞杀伤作用的体... 详细信息

应用该病毒治疗膀胱肿瘤尚未见报道,鸡新城疫病毒能否对膀胱癌细胞产生明显的杀伤作用,是该实验研究的主要目的.为研究鸡新城疫病毒对膀胱癌细胞的杀伤作用,作者自1996年9月至1997年4月分别进行了鸡新城疫病毒对膀胱癌细胞杀伤作用的体内、体外实验研究,体外实验采用细胞计数、绘制肿瘤细胞生长曲线的方法,研究了鸡新城疫病毒对膀胱癌细胞杀伤作用的浓度效应关系,并对比了鸡新城疫病毒、卡介苗和丝裂霉素C的作用,并使用电镜观察了该病毒作用后的细胞内部改变.体内实验采用膀胱癌的动物模型,对鸡新城疫病毒、卡介苗和丝裂霉素C的作用进行了比较,并初步探讨了鸡新城疫病毒的作用机制,观察了该病毒作用后的病理改变.该研究表明,在体内、体外实验中,鸡新城疫病毒对膀胱癌细胞均有一定的杀伤作用,其作用机制以直接杀伤作用为主,兼有调节全身免疫机能而杀伤肿瘤细胞的作用.对鸡新城疫病毒进一步的研究有可能为提高膀胱癌的疗效提供一个新的方法.

关键词：鸡新城疫病毒膀胱癌体内外实验机制

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