检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：原宇西北农林科技大学

学位级别：硕士

鸽ⅰ型副黏病毒（Pigeon paramyxoviruses type 1,PPMV-1）又称鸽新城疫病毒,常引起鸽新城疫,是危害养鸽业的重要病原之一。PPMV-1是新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）在鸽群中的抗原变异毒株,目前国内常见的PPMV-1属于NDV基因... 详细信息

鸽ⅰ型副黏病毒（Pigeon paramyxoviruses type 1,PPMV-1）又称鸽新城疫病毒,常引起鸽新城疫,是危害养鸽业的重要病原之一。PPMV-1是新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）在鸽群中的抗原变异毒株,目前国内常见的PPMV-1属于NDV基因VⅠ型。近年来,鸽新城疫在我国多个省份均有暴发,感染鸽的发病率和死亡率都较高,给养鸽业造成巨大损失。接种疫苗是防控病毒病最有效的手段,但是,目前国内对于鸽新城疫的防控尚无商品化疫苗,临床多使用鸡新城疫疫苗,常见疫苗株为La Sota和B1等,这些疫苗株与PPMV-1流行株基因型存在差异,抗原差异性也较大,因此,保护率低,研发特异性针对鸽新城疫的生物制剂成为当务之急。本研究拟从临床发病鸽样品中分离PPMV-1毒株,并进行遗传进化分析,进一步利用分离的PPMV-1毒株制备油乳剂灭活疫苗和卵黄抗体,分别确定其免疫保护效果和治疗效果,以期为防控鸽新城疫提供材料。研究取得以下结果。1.成功分离到1株鸽ⅰ型副黏病毒2019年宁夏回族自治区某公棚发生鸽新城疫,病鸽呈头颈扭曲状,部分病鸽呼吸伴有呼噜音,排绿色稀便。剖检发现,肺脏淤血,有出血点;肝脏肿大有出血点;肾脏肿大;嗉囊出血;肌胃角质层下方有出血点;肠黏膜水肿。镜检发现,肺淤血,肺泡壁上皮细胞脱落,肺泡腔内有红细胞;肝索紊乱,肝细胞肿大;肾小管上皮细胞变性坏死,肾间质有少量红细胞;脾小梁结构不清晰,淋巴细胞数量减少,组织间有红细胞。采集病料,经SPF鸡胚盲传3代后分离到一株PPMV-1,RT-PCR和测序鉴定后命名为Pigeon/NX。经测定,Pigeon/NX的MDT和ICPI分别为96 h和0.41,全基因组序列为15192 nt,基因组顺序为3’-NP-P-M-F-HN-L-5’,符合NDV基因组特性。遗传进化分析发现,Pigeon/NX与pi/CH/LHLJ/131237和Pigeon/China/BJ/2013亲缘关系较近,与市面上常用的疫苗株La Sota株和B1株亲缘关系较远。使用Pigeon/NX和La Sota进行交叉血凝抑制试验,R系数为0.71（小于0.8）,表明Pigeon/NX和La Sota株之间存在抗原差异。对Pigeon/NX f基因的遗传进化分析发现,Pigeon/NX与ClassⅡ基因VIb亚型NDV处于同一分支。Pigeon/NX F蛋白裂解位点处氨基酸序列为112R-R-Q-K-R-F117,与其他PPMV-1和禽源NDV强毒株的F蛋白裂解位点一致。2.利用分离的Pigeon/NX制备了鸽新城疫灭活疫苗并进行了攻毒保护试验Pigeon/NX灭活疫苗的制备SPF鸡胚扩增Pigeon/NX,测定EID50为10-7.33/0.2 m L。收集HA效价大于8（log2）的Pigeon/NX尿囊液制备油乳剂灭活疫苗,制备的Pigeon/NX灭活疫苗剂型为油包水型,接种LB和TSA培养基无细菌生长,黏度检测结果为5.2 s,接种雏鸽14 d未见明显异常。将制备的Pigeon/NX疫苗与商品化La Sota灭活疫苗分别以2×10～6 EID50免疫鸽群,14 d后以相同剂量加强免疫,首免后每隔7 d检测血清抗体水平,结果显示,La Sota组从首免7 d后开始产生抗体,抗体HI效价为0.25±0.25（log2）;Pigeon/NX组从首免14 d开始产生抗体,抗体HI效价为1.00±0.67（log2）,显著低于La Sota组的1.75±0.25（log2）(P<0.05);在首免21 d,La Sota组抗体HI效价5.25±0.33（log2）,Pigeon/NX组抗体HI效价为5.00±0.92（log2）,差异不显著;在首免28 d,La Sota组抗体HI效价6.5±0.33（log2）,Pigeon/NX组抗体HI效价为6.25±0.25（log2）,差异不显著。在免疫28 d,对照组、La Sota免疫组和Pigeon/NX免疫组点眼滴鼻5×10～6 EID50 Pigeon/NX。在攻毒第2天,对照鸽精神沉郁、食欲不振,在第11天死亡1只,第13天死亡2只,La Sota组在第13天死亡1只鸽;Pigeon/NX组鸽未见明显异常。3.利用分离的Pigeon/NX制备了鸽新城疫卵黄抗体并进行了治疗效果试验Pigeon/NX疫苗免疫产蛋鸡3次,首免14 d后,每7 d收集鸡蛋,检测鸡蛋卵黄抗体HI效价,第35天卵黄抗体HI效价大于10.40±0.93（log2）,极显著高于第21天抗体效价（P<0.01）,第35天到第70天差异不显著（P>0.05）,从35 d开始收集鸡蛋制备卵黄抗体。制备的卵黄抗体接种于LB和TSA培养基无细菌生长,接种雏鸽14 d

关键词：鸽ⅰ型副黏病毒新城疫灭活疫苗卵黄抗体

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2019年广西鸽ⅰ型副黏病毒的分离鉴定及F基因分子进化分析

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基因组学与应用生物学 2022年第3期41卷 545-552页

作者：撒薇陈田陆凡韦平韦天超广西大学动物科学技术学院南宁530004

为了解广西鸽ⅰ型副黏病毒(pigeon paramyxovirus type 1,PPMV-1)分离株的基因亚型及遗传进化,2019年从广西鸽场疑似感染PPMV-1的送检临床样品进行病毒分离和鉴定,并对其进行F基因的测序以及系统发育和分子钟的分析。结果显示,从送检样... 详细信息

为了解广西鸽ⅰ型副黏病毒(pigeon paramyxovirus type 1,PPMV-1)分离株的基因亚型及遗传进化,2019年从广西鸽场疑似感染PPMV-1的送检临床样品进行病毒分离和鉴定,并对其进行F基因的测序以及系统发育和分子钟的分析。结果显示,从送检样品分离3株病毒株,分别命名为Pi/CH/GX1101/2019,Pi/CH/GX1201/2019和Pi/CH/GX1202/2019。测序结果表明其F基因编码区长度均为1662核苷酸(nt),编码553氨基酸(aa)。分离株的F蛋白裂解位点为^(112)RRQKRF^(117),符合强毒株特征;系统发育分析表明3株毒株属于两个基因亚型:Ⅵ.2.1.1.2.1亚型(原Ⅵj)和Ⅵ.2.1.1.2.2亚型(原Ⅵk);分子钟分析结果显示中国Ⅵ.2.1.1.2.1亚型和Ⅵ.2.1.1.2.2亚型毒株大约在20世纪80年代开始出现进化分歧;Ⅵ.2.1.1.2.1亚型的Pi/CH/GX1201/2019和Pi/CH/GX1202/2019与位于进化枝低节点的野鸟源参考毒株W4的亲缘关系较近,同在一个分支中,而Ⅵ.2.1.1.2.2亚型的Pi/CH/GX1101/2019毒株与进化枝低节点的2株野鸟源参考毒株Grey heron/CH/GD/GZ333/2015和European turtle dove/CH/GD/GZ23/2015的亲缘关系相近,同在一个小簇中。研究结果证明广西鸽群主要流行Ⅵ.2.1.1.2.1亚型和Ⅵ.2.1.1.2.2亚型的PPMV-1,并推测存在从野鸟传入商业鸽群的风险。

关键词：鸽ⅰ型副黏病毒分离鉴定 F基因分子进化分析

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上海地区鸽ⅰ型副黏病毒F基因遗传进化及生物信息学分析

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中国畜牧兽医 2024年第12期51卷 5150-5161页

作者：刘健周锦萍沈莉萍桂亚萍葛菲菲王晓旭杨显超刘佩红王建上海市动物疫病预防控制中心上海201103 上海市农业科学院上海201106

【目的】了解上海地区鸽ⅰ型副黏病毒(PPMV-1)流行毒株F基因遗传变异情况,分析F蛋白生物信息学特征,为PPMV-1的防控提供技术支持。【方法】应用RT-PCR方法扩增分离株F基因,测序并进行遗传进化分析,并通过生物信息学在线软件对F蛋白结构... 详细信息

【目的】了解上海地区鸽ⅰ型副黏病毒(PPMV-1)流行毒株F基因遗传变异情况,分析F蛋白生物信息学特征,为PPMV-1的防控提供技术支持。【方法】应用RT-PCR方法扩增分离株F基因,测序并进行遗传进化分析,并通过生物信息学在线软件对F蛋白结构功能进行预测分析。【结果】分离株F基因编码区全长为1662 bp,编码553个氨基酸,F蛋白裂解位点序列为112R-R-Q-K-R-F117,符合强毒株序列结构特征。系统进化树分析结果显示,分离株属于新城疫病毒(NDV)ClassⅡ群Ⅵ.2.1.1.2.2亚型,与疫苗株La Sota和Mukteswar处于不同进化分支,与国内分离株Pi/SH/CH/0617/2013和pigeon/Ningxia/2068/2016同属Ⅵ.2.1.1.2.2分支。生物信息学分析结果表明,F蛋白为亲水性蛋白,分子质量约为59.03 ku,理论等电点(PI)为7.87,半衰期为30 h,不稳定系数为35.06,脂肪系数为109.73。F蛋白主要分布在细胞质膜和内质网中,具有跨膜结构和信号肽,包含6个潜在的N-糖基化位点、13个半胱氨酸残基、103个O-糖基化位点,以及67个磷酸化位点。二级结构中α-螺旋、无规则卷曲、延伸链、β-转角分别占46.11%、31.46%、18.08%及4.34%,三级结构预测结果与二级结构相一致。B细胞抗原位点预测结果显示,F蛋白含有11个抗原表位(氨基酸数目≥7)。【结论】本研究分离获得的PPMV-1分离株属于NDV ClassⅡ群Ⅵ.2.1.1.2.2亚型,其F蛋白具有较好的抗原表位,可作为PPMV-1疫苗研制和抗病毒治疗的靶蛋白。研究结果为有效防控PPMV-1感染提供了一定的参考依据,同时也为进一步研发新型疫苗奠定了基础。

关键词：鸽ⅰ型副黏病毒 F基因遗传进化生物信息学

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1株鸽ⅰ型副黏病毒的分离与鉴定

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中国畜牧兽医 2016年第7期43卷 1856-1861页

作者：韦天超翟国胜李海琼潘超农海连黄文飞磨美兰韦平广西大学动物科学技术学院南宁530004

本试验采集病死鸽临床样品,用SPF鸡胚接种传代分离病毒后,通过血凝(HA)与血凝抑制(HI)试验、RT-PCR及F基因部分片段测序与分析对分离株进行鉴定,并通过测定鸡胚平均死亡时间(MDT)、1日龄雏鸡脑内接种致病指数(ICPI)和动物回归试验评估... 详细信息

本试验采集病死鸽临床样品,用SPF鸡胚接种传代分离病毒后,通过血凝(HA)与血凝抑制(HI)试验、RT-PCR及F基因部分片段测序与分析对分离株进行鉴定,并通过测定鸡胚平均死亡时间(MDT)、1日龄雏鸡脑内接种致病指数(ICPI)和动物回归试验评估分离株的毒力和致病性。结果表明,从病鸽组织病料中分离获得1株鸽ⅰ型副黏病毒(PPMV-1),命名为GXP120012。分离株GXP120012的F基因裂解位点112-117位的氨基酸组成为R-R-Q-K-R-F,符合强毒株特征;GXP120012与PPMV-1参考毒株pi/CH/LLN/110713的核苷酸序列同源性高达98.9%,并处于同一遗传分支,基因型为Ⅵ型。该分离株的MDT为102h,ICPI为0。动物回归试验发现,分离株GXP120012对鸽具有较强的致病性,而对鸡没有致病力。本试验结果为今后鸽新城疫的分子流行病学研究和疾病防控提供理论依据。

关键词：鸽ⅰ型副黏病毒分离鉴定致病性基因型

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一株广西鸽ⅰ型副黏病毒的分离鉴定及F基因序列分析

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黑龙江畜牧兽医 2019年第11期 73-76,84页

作者：邓乔木韦汉军张远琴苑亚东王正一曾荣玲韦天超广西大学动物科学技术学院南宁530004 广西南宁市上林县镇圩瑶族乡农林水利综合服务中心南宁530505

为了确定鸽ⅰ型副黏病毒(PPMV-1)分离株的基因型及遗传变异,试验对广西某鸽场疑似感染PPMV-1的临床样品进行RT-PCR诊断、病毒分离鉴定和人工感染试验,并对分离株进行F基因测序、相似性分析及构建遗传进化树。结果表明:临床样品经RT-PCR... 详细信息

为了确定鸽ⅰ型副黏病毒(PPMV-1)分离株的基因型及遗传变异,试验对广西某鸽场疑似感染PPMV-1的临床样品进行RT-PCR诊断、病毒分离鉴定和人工感染试验,并对分离株进行F基因测序、相似性分析及构建遗传进化树。结果表明:临床样品经RT-PCR扩增可得到特异性目的条带,病毒分离株具有血凝活性并能被特异性新城疫(ND)阳性血清抑制。分离株能引起非免疫鸽发病,发病率和死亡率分别为100%和10%。对分离得到的PPMV-1(命名为pi/CH/GX1026/2016)进行序列分析,该分离株F蛋白的裂解位点为^112RRQKR↓F^117,符合新城疫病毒(NDV)强毒株的特征。pi/CH/GX1026/2016分离株与毒株Grey heron/Ch/GD/GZ333/2015和European turtle dove/Ch/GD/GZ23/2015核苷酸和氨基酸相似性较高,核苷酸相似性分别是99.6%和99.4%,氨基酸相似性分别是99.3%和98.9%;与疫苗株La Sota核苷酸和氨基酸相似性较低,分别是83.8%和88.3%。分离株与基因Ⅵ型NDV毒株Grey heron/Ch/GD/GZ333/2015和European turtle dove/Ch/GD/GZ23/2015遗传关系亲近,与基因Ⅱ型疫苗株La Sota的遗传关系较远。说明pi/CH/GX1026/2016分离株为基因Ⅵ型的PPMV-1,该毒株与NDV常用疫苗株La Sota的遗传关系较远。

关键词：鸽ⅰ型副黏病毒分离鉴定 F基因相似性分析遗传进化分析

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两株鸽ⅰ型副黏病毒的分离与鉴定

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中国家禽 2019年第15期41卷 67-69页

作者：马玉峰李敏李琛董昌海金宇保灵生物药品有限公司内蒙古呼和浩特010030 扬州优邦生物药品有限公司江苏扬州225008

临床采集的发病鸽组织处理后经绒毛尿囊膜接种10日胚龄SPF鸡胚,并通过免疫学和分子生物学方法进行病原鉴定,确定分离到2株鸽ⅰ型副黏病毒。结合免疫学试验和分子生物学试验对分离株研究发现,分离病毒与鸽新城疫病毒参考株处于同一个遗... 详细信息

临床采集的发病鸽组织处理后经绒毛尿囊膜接种10日胚龄SPF鸡胚,并通过免疫学和分子生物学方法进行病原鉴定,确定分离到2株鸽ⅰ型副黏病毒。结合免疫学试验和分子生物学试验对分离株研究发现,分离病毒与鸽新城疫病毒参考株处于同一个遗传进化分支,核苷酸序列一致性为89.6%~94.5%,分离株F蛋白裂解位点的氨基酸序列与新城疫强毒一致。表明在我国鸽群中仍存在高致病性新城疫病毒。研究结果为鸽瘟的防控提供了一定的理论基础。

关键词：鸽ⅰ型副黏病毒分离序列新城疫

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鸽ⅰ型副黏病毒(S-1株)灭活疫苗保存期试验研究

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国外畜牧学（猪与禽） 2023年第5期43卷 73-76页

作者：张俊平蒋凤英张春玲王瑞阳赵本进丁卫星杨惠萍李春华上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海佳牧生物制品有限公司上海201403

为了确定鸽ⅰ型副黏病毒(S-1株)灭活疫苗的保存期,对不同温度下保存不同时间的3批鸽ⅰ型副黏病毒(S-1株)灭活疫苗实验室制品的物理性状、安全性和免疫效力进行了检测。试验结果表明,该疫苗冷藏(2~8℃)保存12个月、室温(25℃左右)保存6个... 详细信息

为了确定鸽ⅰ型副黏病毒(S-1株)灭活疫苗的保存期,对不同温度下保存不同时间的3批鸽ⅰ型副黏病毒(S-1株)灭活疫苗实验室制品的物理性状、安全性和免疫效力进行了检测。试验结果表明,该疫苗冷藏(2~8℃)保存12个月、室温(25℃左右)保存6个月,其物理性状、安全性和免疫效力无明显变化,均能达到《鸽ⅰ型副黏病毒(S-1株)灭活疫苗质量标准》的要求。因此,在《鸽ⅰ型副黏病毒(S-1株)灭活疫苗制造及检验试行规程》中规定该疫苗的保存期为:冷藏(2~8℃)保存,保存期为12个月。

关键词：鸽ⅰ型副黏病毒灭活疫苗保存期

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鸽ⅰ型副黏病毒、圆环病毒和疱疹病毒混合感染的诊断

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现代畜牧兽医 2024年第3期 59-63页

作者：黄运福颜国庆梁海皇银慧慧赵武曾雪颜兰天艳刘伟广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室农业农村部中国(广西)-东盟跨境动物疫病防控重点实验室广西南宁530001 南宁桂柳利腾农业科技有限公司广西南宁530001

研究旨在确诊广西某肉鸽场中出现神经症状的病鸽并为该场提供相应的防治方案,通过临床诊断、病理解剖、分子生物学检测、细菌分离、病毒分离等方法对广西某肉鸽场病鸽进行诊断。结果显示,剖检可见病鸽肝脾肿大、坏死,花斑肾;分子生物学... 详细信息

研究旨在确诊广西某肉鸽场中出现神经症状的病鸽并为该场提供相应的防治方案,通过临床诊断、病理解剖、分子生物学检测、细菌分离、病毒分离等方法对广西某肉鸽场病鸽进行诊断。结果显示,剖检可见病鸽肝脾肿大、坏死,花斑肾;分子生物学检测结果显示,鸽ⅰ型副黏病毒(pigeon paramyxovirus type 1,PPMV-1)、圆环病毒(pigeon circovirus,PiCV)和疱疹病毒(pigeon herpesvirus,PiHV)为阳性;对病样进行细菌培养,结果未分离到细菌;将病样接种SPF鸡胚进行病毒分离,结果显示,尿囊液血凝效价稳定在8 log2,其血凝性可被新城疫病毒(NDV)阳性血清抑制,但不能被禽流感病毒(AIV)阳性血清抑制。研究表明,最终诊断结果为PPMV-1、PiCV和PiHV混合感染。

关键词：鸽ⅰ型副黏病毒鸽圆环病毒鸽疱疹病毒

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鸽ⅰ型副黏病毒F蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

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国外畜牧学（猪与禽） 2017年第7期37卷 36-39页

作者：唐豪于轩陈冬梅陈伯祥杨明郭慧琳袁勇甘肃省动物疫病预防控制中心甘肃兰州730046 甘肃省畜牧产业管理局甘肃兰州730000 甘肃省农牧厅机关后勤服务中心甘肃兰州730000 甘肃省畜牧兽医研究所甘肃平凉744000

为了制备鸽ⅰ型副黏病毒融合蛋白(F蛋白)的单克隆抗体,以鸽ⅰ型副黏病毒F基因抗原重组蛋白免疫BALB/C小鼠,得到能稳定分泌抗F蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞3株。对效价最高的一株进行特性测定,结果显示其腹水抗体效价达到6.4×104以上... 详细信息

为了制备鸽ⅰ型副黏病毒融合蛋白(F蛋白)的单克隆抗体,以鸽ⅰ型副黏病毒F基因抗原重组蛋白免疫BALB/C小鼠,得到能稳定分泌抗F蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞3株。对效价最高的一株进行特性测定,结果显示其腹水抗体效价达到6.4×104以上,细胞培养上清液的效价达1︰800,其抗体亚类为lg G 2b,轻链为κ链,染色体数目为98条;血凝抑制试验显示单抗没有血凝抑制效价;间接ELISA进行特异性试验表明单抗与鸡传染性支气管炎病毒、鸡减蛋综合征病毒、鸡马立克氏病病毒、猪瘟病毒、猪传染性胃肠炎病毒、羊痘病毒、大肠杆菌、沙门氏菌没有交叉反应,而与鸡新城疫病毒具有较强的交叉反应。PPMV-1 F蛋白单克隆抗体的制备为鸽ⅰ型副黏病毒病新诊断方法的建立奠定了基础。

关键词：鸽ⅰ型副黏病毒 F蛋白单克隆抗体制备

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2011-2016年广西鸽ⅰ型副黏病毒F和HN基因的遗传进化分析

2011-2016年广西鸽Ⅰ型副黏病毒F和HN基因的遗传进化分析

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中国畜牧兽医学会2018年学术年会禽病学分会第十九次学术研讨会

作者：邓乔木张远琴韦平磨美兰黄腾韦天超广西大学动物科学技术学院

引言为了了解广西鸽ⅰ型副黏病毒(PPMV-1)的遗传进化,本课题组利用本实验室的14株广西分离株和NCBI上的PPMV-1毒株F基因序列构建遗传进化树,并利用本实验室的分离株和NCBI发表的广西PPMV-1毒株的F基因和HN基因序列分别绘制分子钟,阐述... 详细信息

引言为了了解广西鸽ⅰ型副黏病毒(PPMV-1)的遗传进化,本课题组利用本实验室的14株广西分离株和NCBI上的PPMV-1毒株F基因序列构建遗传进化树,并利用本实验室的分离株和NCBI发表的广西PPMV-1毒株的F基因和HN基因序列分别绘制分子钟,阐述广西地区PPMV-1流行的基因亚型和遗传进化。材料与方法14株PPMV-1分离株从我国广西不同地区肉鸽群分离(11株分离株来自免疫鸽群)。使用Lasergene

关键词：分离株鸽ⅰ型副黏病毒疫苗株

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