检索结果-内蒙古大学图书馆

食品科学 2016年第8期37卷 231-235页

作者：李亚楠王瑞李涛王云贵黄登宇山西大学生命科学学院食品药品快速检测中心山西太原030006 山西先锋科技开发有限公司山西太原030006 深圳易瑞生物技术有限公司广东深圳518101

建立检测动物组织中呋喃妥因代谢物的直接竞争化学发光酶免疫法。采用棋盘法确定抗体和酶标抗原的最佳稀释度,通过单因素试验优化包被条件、封闭液种类和竞争反应时间,建立直接竞争抑制曲线,并对方法的灵敏度、特异性、准确度和精密度... 详细信息

建立检测动物组织中呋喃妥因代谢物的直接竞争化学发光酶免疫法。采用棋盘法确定抗体和酶标抗原的最佳稀释度,通过单因素试验优化包被条件、封闭液种类和竞争反应时间,建立直接竞争抑制曲线,并对方法的灵敏度、特异性、准确度和精密度进行方法学评价。结果表明,经优化,最佳反应条件为抗体稀释度1∶4 000,酶标抗原稀释度1∶80,包被条件为37℃2h后4℃过夜,封闭液为1%牛血清白蛋白,竞争反应1h。该方法的线性检测范围为0.030~10.595 ng/m L,IC_（50）为0.559 ng/m L;加标回收率为84.9%~103.4%,批内变异系数为3.4%~7.8%,批间变异系数为4.7%~11.8%;除与呋喃妥因原药交叉反应率为36.2%,与其他结构类似物及衍生化试剂交叉反应率均小于0.1%。该方法灵敏、准确,可用于动物组织中呋喃妥因代谢物的快速筛查。

关键词：呋喃妥因 1-氨基-乙内酰脲直接竞争化学发光酶免疫检测动物组织

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呋喃妥因代谢物AHD单克隆抗体的制备及其免疫学特性研究

呋喃妥因代谢物AHD单克隆抗体的制备及其免疫学特性研究

引用

中国水产学会鱼病专业委员会第七次会员代表大会暨学术讨论会

作者：王伟利姜兰谭爱萍赵飞罗理邹为民中国水产科学研究院珠江水产研究所广州510380

硝基呋喃类药物在动物体内代谢迅速,其代谢物为非法添加的监控对象.为了建立一种灵敏、便捷的检测呋喃妥因代谢物1-氨基-乙内酰脲(AHD)方法,本研究将呋喃妥因代谢物AHD分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)耦联,经质谱扫描、紫外光谱... 详细信息

硝基呋喃类药物在动物体内代谢迅速,其代谢物为非法添加的监控对象.为了建立一种灵敏、便捷的检测呋喃妥因代谢物1-氨基-乙内酰脲(AHD)方法,本研究将呋喃妥因代谢物AHD分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)耦联,经质谱扫描、紫外光谱扫描和SDS-PAGE鉴定,成功合成了免疫抗原CPAHD-BSA和包被抗原AHD-GA-cOVA.应用杂交瘤技术将免疫鼠脾细胞与SP2/O细胞融合,建立了分泌抗CPAHD单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株,经有限稀释法进行多次亚克隆,获得稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为E7.使用本细胞株制备的腹水对CPAHD的半抑制浓度(IC50)为0.3ppb,对呋喃妥因原药的半抑制浓度为3.9ppb,与同类抗生素及其代谢物未发现交叉反应,显示高度的灵敏性和特异性.采用本抗体建立的竞争酶联免疫方法可以同时进行呋喃妥因原型药物和代谢物AHD的检测,对CPAHD的检测限低于0.05ppb.

关键词：呋喃妥因 1-氨基-乙内酰脲单克隆抗体间接酶联免疫法竞争酶联免疫法

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呋喃妥因代谢物AHD单克隆抗体的制备及其免疫学特性研究

呋喃妥因代谢物AHD单克隆抗体的制备及其免疫学特性研究

引用

2009年中国水产学会学术年会

作者：王伟利谭爱萍姜兰赵飞罗理邹为民中国水产科学研究院珠江水产研究所

硝基呋喃类药物在动物体内代谢迅速,其代谢物为非法添加的监控对象。为了建立一种灵敏、便捷的检测呋喃妥因代谢物1-氨基-乙内酰脲(AHD)方法,本研究将呋喃妥因代谢物AHD分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)耦联,经质谱扫描、紫外光谱... 详细信息

硝基呋喃类药物在动物体内代谢迅速,其代谢物为非法添加的监控对象。为了建立一种灵敏、便捷的检测呋喃妥因代谢物1-氨基-乙内酰脲(AHD)方法,本研究将呋喃妥因代谢物AHD分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)耦联,经质谱扫描、紫外光谱扫描和SDS-PAGE鉴定,成功合成了免疫抗原CPAHD-BSA和包被抗原AHD-GA-cOVA。应用杂交瘤技术将免疫鼠脾细胞与SP2/O细胞融合,建立了分泌抗CPAHD单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株,经有限稀释法进行多次亚克隆,获得稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为E7。使用本细胞株制备的腹水对CPAHD的半抑制浓度(IC50)为0.3ppb,对呋喃妥因原药的半抑制浓度为3.9ppb,与同类抗生素及其代谢物未发现交叉反应,显示高度的灵敏性和特异性。采用本抗体建立的竞争酶联免疫方法可以同时进行呋喃妥因原型药物和代谢物AHD的检测,对CPAHD的检测限低于0.05ppb。

关键词：呋喃妥因 1-氨基-乙内酰脲单克隆抗体间接酶联免疫法竞争酶联免疫法

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