检索结果-内蒙古大学图书馆

超高效液相色谱串联质谱联用法快速筛选3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶a还原酶抑制剂

分析化学 2013年第7期41卷 1013-1018页

作者：吴琼王世聪马俊锋李婉南邢述付学奇吉林大学生命科学学院分子酶学工程教育部重点实验室

建立了超高效液相色谱串联质谱仪(UPLC-MS/MS)检测酶促反应体系中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)浓度变化,快速筛选3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶a还原酶(HMGCR)抑制剂的方法。优化了HMGCR酶促反应体系和检测NADPH的色谱-质谱条件,... 详细信息

建立了超高效液相色谱串联质谱仪(UPLC-MS/MS)检测酶促反应体系中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)浓度变化,快速筛选3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶a还原酶(HMGCR)抑制剂的方法。优化了HMGCR酶促反应体系和检测NADPH的色谱-质谱条件,探讨了NADPH的离子化试剂的作用和质谱碎裂机理。采用ACQUITY UPLC BEH Amide色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以三乙胺/六氟异丙醇缓冲液(pH=8.0)为流动相,流速0.3 mL/min,柱温30℃,电喷雾离子源-多反应监测模式,对酶促反应体系中的NADPH进行分析。NADPH的峰面积与其浓度在0.05～50μmol/L范围内呈良好的线性关系(r>0.9996),定量限(S/N=10)为0.05μmol/L。

关键词：超高效液相色谱串联质谱还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶a还原酶抑制剂筛选

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降脂药与儿童自身免疫性疾病因果关系的药物靶向孟德尔随机化研究

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医学信息 2025年第3期38卷 91-96页

作者：孔德进孔祥斌张景秀高阳临沂市中心医院儿科临沂市中心医院耳鼻喉科

目的分析影响降脂药物靶点表达或功能的遗传变异是否与儿童自身免疫性疾病风险相关。方法使用HMGCR（编码他汀类药物的靶点）、PCSK9（编码PCSK9抑制剂的靶点）和APOB（编码米泊美生的靶点）降脂药物的蛋白靶点编码基因的变异体进行... 详细信息

目的分析影响降脂药物靶点表达或功能的遗传变异是否与儿童自身免疫性疾病风险相关。方法使用HMGCR（编码他汀类药物的靶点）、PCSK9（编码PCSK9抑制剂的靶点）和APOB（编码米泊美生的靶点）降脂药物的蛋白靶点编码基因的变异体进行孟德尔随机化分析。使用药物靶点孟德尔随机化（MR）分析靶向抑制剂对不同自身免疫性疾病的影响。结果抑制HMGCR靶点的表达对儿童1型糖尿病保护作用[IVW法：OR（95%CI）=0.5996（0.3714～0.8277）,P=1.11×10-5；加权中位数法：OR （95%CI）=0.6555 （0.3725～0.9385）,P=0.0034]。抑制APOB靶点对幼年特发性关节炎[IVW法：OR （95%CI）=0.3053（-0.3960～1.0066）,P=9.130×10-4；加权中位数法：OR（95%CI）=0.3599（-0.5955～1.3152）,P=0.0036]和早发型重症肌无力[IVW法：OR（95%CI）=0.2361（-0.4439～0.9162）,P=3.182×10-5；加权中位数法：OR（95%CI）=0.3192（-0.5376～1.1760）,P=0.0090]有保护作用。APOB抑制剂对儿童甲状腺炎在IVW法有保护作用[OR（95%CI）=0.3849（-0.5495～1.3193）,P=0.0452]，加权中位法无统计学意义[OR（95%CI）=0.3821（-0.6843～1.4485）,P=0.0770]。抑制PCSK9、HMGCR和APOB靶点与川崎病、乳糜泻和银屑病的风险均无显著相关性。结论降脂药可能通过靶点对儿童1型糖尿病、幼年特发性关节炎、早发型重症肌无力及儿童甲状腺炎有保护作用，但临床应用仍需谨慎。

关键词：降血脂药自身免疫疾病 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶a还原酶前蛋白转化酶枯草溶菌素9 载脂蛋白B类

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三花降脂颗粒的降脂作用及对肝脏PPARα和HMGCR表达的影响

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西北药学杂志 2025年第1期40卷 184-192页

作者：杨嘉妮魏军飞陈书存刘琳邹俊波史亚军商洛市中医医院商洛726000 陕西中医药大学咸阳712046 西安市中医医院西安710001

目的探究三花降脂颗粒(Sanhua Jiangzhi Granules,SHJZ)对高脂血症大鼠的降脂作用及其作用机制。方法将36只SD大鼠随机分为空白组、模型组、SHJZ低剂量组(1.8 g3;kg^(-1))、SHJZ中剂量组(3.6 g3;kg^(-1))、SHJZ高剂量组(7.2 g... 详细信息

目的探究三花降脂颗粒(Sanhua Jiangzhi Granules,SHJZ)对高脂血症大鼠的降脂作用及其作用机制。方法将36只SD大鼠随机分为空白组、模型组、SHJZ低剂量组(1.8 g·kg^(-1))、SHJZ中剂量组(3.6 g·kg^(-1))、SHJZ高剂量组(7.2 g·kg^(-1)),以及辛伐他汀组(1.8 g·kg^(-1)),每组6只。高脂饲料饲养30 d,建立高脂血症大鼠模型。按照上述分组剂量治疗4周后,检测血清中总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high-densitylipoproteincholesterol,HDL-C)水平以及肝脏组织中的TC、TG水平,苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)观察肝组织病理学改变,蛋白印迹法(Western blotting)检测肝组织中过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator-activated receptor α,PPARα)、3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶a还原酶(3-hydroxy-3-methylglutarylcoenzyme A reductase,HMGCR)的表达水平。结果与空白组比较,模型组大鼠的肝组织脂肪变性明显,血清中的TC、TG、LDL-C水平显著升高(P<0.01),HDL-C的水平显著降低(P<0.01),肝组织中的TC、TG水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,SHJZ治疗的大鼠肝脏脂肪颗粒沉积得到改善,脂肪变性程度减轻,血清中的TC、TG、LDL-C水平降低(P<0.05),HDL-C水平升高(P<0.05),肝脏组织中的TC、TG水平显著降低(P<0.01)。Western blotting结果表明,与空白组比较,模型组大鼠肝脏中PPARα蛋白表达显著降低(P<0.01),HMGCR蛋白表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,SHJZ低、中、高剂量组大鼠肝脏中PPARα蛋白表达显著升高(P<0.01),HMGCR蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论三花降脂颗粒具有明显的降脂作用,调节血脂指标,保护肝脏组织,其治疗高脂血症的作用机制可能与激活PPAR信号通路密切相关。

关键词：三花降脂颗粒(SHJZ) 高脂血症过氧化物酶体增殖物激活受体 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶a还原酶

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白桦BpHMGR基因的结构及表达模式分析

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中草药 2016年第6期47卷 982-989页

作者：李思达梁楠松周姗詹亚光曾凡锁东北林业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150040

目的研究白桦Betula platyphylla 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶a还原酶(3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-Co A reductase,Bp HMGR)全长基因结构特征及编码蛋白性质,揭示其节律表达模式以及对外源NO信号分子的响应机制。方法通过RACE技术克隆白... 详细信息

目的研究白桦Betula platyphylla 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶a还原酶(3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-Co A reductase,Bp HMGR)全长基因结构特征及编码蛋白性质,揭示其节律表达模式以及对外源NO信号分子的响应机制。方法通过RACE技术克隆白桦Bp HMGR基因,应用生物信息学软件对Bp HMGR及其编码蛋白进行详细分析,利用实时荧光定量PCR定量分析Bp HMGR基因在昼夜节律变化中的表达模式。根据Bp HMGR氨基酸序列构建系统进化树,分析昼夜节律以及外源NO对白桦叶片中Bp HMGR转录水平的影响。结果 Bp HMGR基因全长1 764 bp,包含完整开放阅读框,已上传至NCBI,并获得登录号KJ452334,其编码蛋白由587 aa组成。白桦Bp HMGR基因与大豆(XP_003519474.1)、葡萄(XP_002275827.1)、苜蓿(XP_003617066.1)亲缘关系较近。结论 Bp HMGR随昼夜周期变化呈现出节律表达特性,在夜晚21:00时达到峰值。初步揭示了外源NO能诱导白桦细胞内三萜代谢途径的关键酶Bp HMGR基因上调表达,进而促进三萜产物齐墩果酸的合成。

关键词：白桦 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶a还原酶生物节律一氧化氮生物信息学分析

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PLIN2通过调控SREBP2促进RAW264.7巨噬细胞脂质蓄积

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中国病理生理杂志 2021年第1期37卷 1-9页

作者：蒋思怦张瑞李晓歌张荣郭东铭袁中华南华大学心血管疾病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室湖南省动脉硬化性疾病国际科技创新合作基地湖南衡阳421001

目的:探讨脂滴包被蛋白2(PLIN2)是否通过调控固醇调节元件结合蛋白2(SREBP2)影响小鼠RAW264.7巨噬细胞中脂质蓄积。方法:采用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)处理RAW264.7巨噬细胞不同时间(0、6、12、24和48 h),Western blot检测PLIN2和SREBP... 详细信息

目的:探讨脂滴包被蛋白2(PLIN2)是否通过调控固醇调节元件结合蛋白2(SREBP2)影响小鼠RAW264.7巨噬细胞中脂质蓄积。方法:采用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)处理RAW264.7巨噬细胞不同时间(0、6、12、24和48 h),Western blot检测PLIN2和SREBP2蛋白表达水平;过表达或敲减PLIN2,RT-qPCR和Western blot检测SREBP2、3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶a还原酶(HMGCR)和葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达水平,油红O染色检测细胞脂质蓄积情况;采用免疫荧光和氧化酶法分别检测PLIN2对SREBP2核转位和细胞内游离胆固醇(FC)的影响;采用内质网应激(ERS)抑制剂4-苯基丁酸(4-PBA)处理细胞,Western blot和RT-qPCR检测GRP78、SREBP2和HMGCR表达水平。结果:ox-LDL处理24 h后,PLIN2和SREBP2表达水平显著增加(P<0.05)。过表达PLIN2能上调SREBP2和HMGCR表达,增加细胞内FC水平(P<0.05),促进细胞内脂质蓄积;敲减PLIN2则相反。此外,过表达PLIN2能增加GRP78表达水平(P<0.05),说明过表达能促进细胞ERS;同时,过表达PLIN2能激活SREBP2并促进其核转位;ERS抑制剂4-PBA可显著抑制SREBP2及HMGCR蛋白表达水平的上升(P<0.05)。结论:PLIN2通过上调SREBP2表达,从而促进RAW264.7巨噬细胞脂质蓄积。

关键词：脂滴包被蛋白2 内质网应激固醇调节元件结合蛋白2 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶a还原酶葡萄糖调节蛋白78

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珍稀濒危药用铁皮石斛HMGR基因的克隆和特征分析

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药学学报 2014年第3期49卷 411-418页

作者：张琳王继涛张大为张岗郭顺星陕西中医学院药学院陕西省中药基础与新药研究重点实验室陕西西安712046 中国医学科学院、北京协和医学院药用植物研究所北京100193

3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶（3-hydroxy-3-methylglutarylcoenzyme—Areductase，HMGR）是甲羟戊酸途径中的第一个限速酶，在植物细胞萜类物质合成代谢过程中发挥重要作用。但是，HMGR基因在珍稀濒危兰科药用植物铁皮石斛类萜... 详细信息

3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶（3-hydroxy-3-methylglutarylcoenzyme—Areductase，HMGR）是甲羟戊酸途径中的第一个限速酶，在植物细胞萜类物质合成代谢过程中发挥重要作用。但是，HMGR基因在珍稀濒危兰科药用植物铁皮石斛类萜生物合成途径中的作用尚不清楚。本研究利用RT-PCR和RACE技术，首次从铁皮石斛中克隆到一个HMGR基因，命名为DoHMGRl（GenBank注册号JX272632）。DoHMGRl基因eDNA全长2071bp，编码一条由562个氨基酸组成的多肽，分子量59-73kD，等电点6-18。DoHMGRl蛋白包含HMGR蛋白家族的4个保守结构域（63-561、147-551、268-383、124-541）和两个跨膜基序（42-64、85～107）。DoHMGR1基因与多种植物HMGR基因相似性很高（67％～89％），与万代兰、水稻、玉米等单子叶植物亲缘关系较近。DoHMGR1基因具有组织表达特异性，其转录本在石斛根和茎中表达量较高，为叶中的2-13和1-98倍。DoHMGR1基因的分子鉴定为进一步解析该基因在铁皮石斛萜类物质合成代谢途径中的分子调控作用奠定基础。

关键词：铁皮石斛 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶a还原酶基因表达实时定量PCR

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活性氧在密旋链霉菌Act12诱导丹参毛状根中丹参酮积累中的作用

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中国中药杂志 2014年第11期39卷 1985-1991页

作者：阎岩赵欣张顺仓刘岩梁宗锁西北农林科技大学生命科学学院陕西杨凌712100 铜川市中医药发展局陕西铜川727031 陕西国际商贸学院医学院陕西咸阳712046 天津天士力现代中药资源有限公司天津300402

作者前期研究成果显示密旋链霉菌Act12可以上调丹参酮生物合成途径上的关键酶基因的表达大幅提高丹参毛状根中丹参酮含量。该实验则进一步研究了活性氧在Act12诱导丹参毛状根中丹参酮积累的作用。在继代培养21 d的丹参毛状根中添加Act1... 详细信息

作者前期研究成果显示密旋链霉菌Act12可以上调丹参酮生物合成途径上的关键酶基因的表达大幅提高丹参毛状根中丹参酮含量。该实验则进一步研究了活性氧在Act12诱导丹参毛状根中丹参酮积累的作用。在继代培养21 d的丹参毛状根中添加Act12不同的诱导子及诱导子组合,分别测定不同收获期毛状根的生物量,毛状根中活性氧积累量,丹参酮类成分的积累量和关键酶基因表达量。Act12诱导后丹参毛状根中活性氧含量上升,HMGR和DXR基因表达上调,最高分别达到对照的32.4,4.8倍,毛状根中丹参酮积累增加,最高达到对照的10.2倍;加入活性氧抑制剂CAT和SOD后,丹参毛状根中的活性氧含量较Act12处理显著下降,HMGR和DXR基因表达也明显下降,毛状根中丹参酮含量较Act12处理下降了74.6%。活性氧介导了Act12诱导丹参酮积累,Act12很可能是通过ROS信号通路激活了MVA和MEP途径,从而提高了丹参酮在毛状根中的含量。

关键词：丹参毛状根活性氧密旋链霉菌Act12 次生代谢 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶a还原酶 1-脱氧-D-木酮糖-5 磷酸还原异构酶

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茅苍术HMGR基因保守区片段的克隆与分析

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中草药 2007年第10期38卷 1551-1554页

作者：刘群曹小迎蒋继宏戴传超徐州师范大学江苏省药用植物生物技术重点实验室江苏徐州221116 南京师范大学生命科学学院江苏南京210097

目的对茅苍术3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶a还原酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase,HMGR)进行基因克隆及序列分析。方法采用cDNA末端快速扩增技术,以茅苍术嫩叶总RNA的cDNA为模板扩增茅苍术HMGR基因的保守区片断。结果序列分析表... 详细信息

目的对茅苍术3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶a还原酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase,HMGR)进行基因克隆及序列分析。方法采用cDNA末端快速扩增技术,以茅苍术嫩叶总RNA的cDNA为模板扩增茅苍术HMGR基因的保守区片断。结果序列分析表明,所克隆的cDNA保守区序列长度为458bp,而且同时得到了两个核苷酸序列的同源性为84.28%的片段,相应的氨基酸序列的同源性为92.11%。分别命名为HMGRcr1,HMGR-cr2。推断这可能是该基因家族中的两个成员。而且同源序列比对发现,推断的HMGRcr1氨基酸序列和HMGRcr2氨基酸序列与其他植物都有较高的同源性。结论首次分离并报道了茅苍术HMGRcDNA克隆,为进一步研究萜类生物合成机制及其在提高植物药用价值方面提供理论依据。

关键词：茅苍术 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶a还原酶基因克隆

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鱼腥草HMGR基因cDNA克隆、差异表达及蛋白质结构分析

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中草药 2017年第18期48卷 3815-3819页

作者：魏麟黎晓英刘胜贵王丹黄豪兰龙强蒋玉红郭文博伍贤进怀化学院生命科学系民族药用植物资源研究与利用湖南省重点实验室湘西药用植物与民族植物学湖南省高校重点实验室湖南怀化418008

目的克隆鱼腥草3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶a还原酶(HMGR)基因并分析其差异表达。方法采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法获得HMGR基因cDNA序列并对HMGR蛋白进行理化性质、蛋白二级结构及三维结构预测分析,并预测该蛋白功能;利用RT-PCR方法检... 详细信息

目的克隆鱼腥草3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶a还原酶(HMGR)基因并分析其差异表达。方法采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法获得HMGR基因cDNA序列并对HMGR蛋白进行理化性质、蛋白二级结构及三维结构预测分析,并预测该蛋白功能;利用RT-PCR方法检测HMGR基因在鱼腥草的地下茎、地上茎、叶、花中的表达情况。结果克隆获得的HMGR基因cDNA全长为1 626 bp,编码541个氨基酸。生物信息学预测HMGR蛋白含2个跨膜区,不含信号肽。HMGR基因主要在鱼腥草的花中表达,其他器官中表达相对较低,地下茎中表达量最低。结论首次从鱼腥草中克隆了HMGR基因,为进一步阐明该基因在鱼腥草萜类化合物代谢途径中的作用奠定基础。

关键词：鱼腥草 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶a还原酶萜类 RT-PCR cDNA序列

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接骨草HMGR基因cDNA克隆、不同器官中的差异表达及生物信息学分析

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中草药 2015年第16期46卷 2449-2453页

作者：姚元枝黎晓英郭文博刘宇魏麟怀化学院生物与食品工程学院民族药用植物资源研究与利用湖南省重点实验室湘西药用植物与民族植物学湖南省高校重点实验室湖南怀化418008

目的克隆接骨草Sambucus chinensis 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶a还原酶(HMGR)基因并分析其差异表达。方法采用RT-PCR方法获得HMGR基因c DNA序列,并对HMGR蛋白进行理化性质、蛋白二级结构及三级结构预测分析,并预测该蛋白功能;利用实时荧... 详细信息

目的克隆接骨草Sambucus chinensis 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶a还原酶(HMGR)基因并分析其差异表达。方法采用RT-PCR方法获得HMGR基因c DNA序列,并对HMGR蛋白进行理化性质、蛋白二级结构及三级结构预测分析,并预测该蛋白功能;利用实时荧光定量PCR方法检测HMGR基因在接骨草的根状茎、地上茎、叶、花中的表达情况。结果克隆获得的HMGR基因c DNA全长为1 626 bp,编码593个氨基酸。生物信息学预测HMGR蛋白含2个跨膜区,不含信号肽。HMGR基因主要在接骨草的花和地上茎中表达较高,其他器官表达相对较低。结论首次从接骨草中克隆了HMGR基因,为进一步阐明该基因在接骨草萜类化合物代谢途径中的重要作用奠定基础。

关键词：接骨草 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶a还原酶实时荧光定量PCR c DNA序列萜类化合物

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