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6′′′-阿魏酰斯皮诺素对Aβ_(1-42)诱导损伤的SH-SY5Y细胞保护作用研究

食品工业科技 2022年第13期43卷 373-380页

作者：张妹张彦青解军波王轻戚务勤天津商业大学生物技术与食品科学学院天津300134 天津中医药大学中药学院天津301617

目的:探讨酸枣仁黄酮类成分6′′′-阿魏酰斯皮诺素预处理对Aβ_(1-42)诱导损伤SH-SY5Y细胞的保护作用。方法:利用6′′′-阿魏酰斯皮诺素(1、5、10、20和40μmol/L)预处理SH-SY5Y细胞2 h,随后加入5μmol/L的Aβ_(1-42)共同孵育24 h,利... 详细信息

目的:探讨酸枣仁黄酮类成分6′′′-阿魏酰斯皮诺素预处理对Aβ_(1-42)诱导损伤SH-SY5Y细胞的保护作用。方法:利用6′′′-阿魏酰斯皮诺素(1、5、10、20和40μmol/L)预处理SH-SY5Y细胞2 h,随后加入5μmol/L的Aβ_(1-42)共同孵育24 h,利用CCK-8法检测细胞活力;Calcein-AM/PI双染法观察细胞形态;试剂盒检测细胞内活性氧、丙二醛、线粒体膜电位水平及谷胱甘肽过氧化物酶活力;蛋白免疫印迹法检测细胞凋亡相关蛋白:Bcl-2关联死亡启动子重组蛋白、B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白的表达。结果:6′′′-阿魏酰斯皮诺素可以抑制Aβ_(1-42)诱导的细胞凋亡,提高细胞活力(P<0.001);改善Aβ_(1-42)诱导损伤细胞的氧化应激情况,降低细胞内活性氧(P<0.001)、丙二醛水平(P<0.01),提高谷胱甘肽过氧化物酶活力(P<0.001);改善Aβ_(1-42)诱导损伤的细胞线粒体功能,上调细胞线粒体膜电位水平(P<0.001);增加抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白的表达(P<0.01),并降低促凋亡蛋白Bcl-2关联死亡启动子重组蛋白的表达(P<0.01)。结论:6′′′-阿魏酰斯皮诺素对Aβ_(1-42)诱导损伤的SH-SY5Y细胞具有保护作用,其机制与6′′′-阿魏酰斯皮诺素抗氧化活性及调节凋亡相关蛋白表达有关。

关键词：酸枣仁 6′′′-阿魏酰斯皮诺素 β淀粉样蛋白抗氧化活性线粒体

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UPLC-UV-ELSD测定不同产地炒酸枣仁饮片中酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B、斯皮诺素和6′′′-阿魏酰斯皮诺素的含量

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中国当代医药 2021年第6期28卷 8-12页

作者：高红宁殷奕严国俊南京中医药大学药学院江苏南京210046 南京多康商贸有限公司研发部江苏南京210000

目的建立超高效液相色谱(UPLC)-紫外(UV)-蒸发光散射检测法(ELSD)同时测定不同产地炒酸枣仁饮片中酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B、斯皮诺素和6′′′-阿魏酰斯皮诺素的含量,对不同产地炒酸枣仁饮片进行质量评价。方法采用Waters Acquity UPL... 详细信息

目的建立超高效液相色谱(UPLC)-紫外(UV)-蒸发光散射检测法(ELSD)同时测定不同产地炒酸枣仁饮片中酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B、斯皮诺素和6′′′-阿魏酰斯皮诺素的含量,对不同产地炒酸枣仁饮片进行质量评价。方法采用Waters Acquity UPLC色谱系统,UV检测器,ELSD检测器,色谱柱为ACQUITY C18柱(150 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为0.1%甲酸水-乙腈(梯度洗脱),流速0.3 mL/min,柱温35℃,UV检测波长335 nm,进样量3μL,喷雾器参数50%,ELSD条件气压172 kPa,漂移管温度60℃。结果在上述色谱条件下测得酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B、斯皮诺素和6′′′-阿魏酰斯皮诺素分别在27.20~435.20 mg/mL、12.60~200.80 mg/mL、26.38~422.00 mg/mL、24.38~390.00 mg/mL时与色谱峰面积线性关系良好,平均回收率分别为100.01%、99.99%、100.00%、100.04%,相对标准偏差分别为0.17%、0.32%、0.32%、0.32%。结论UPLC-UV-ELSD法准确、灵敏,可作为不同产地炒酸枣仁饮片的质量控制方法,测定结果表明,河北产炒酸枣仁饮片中4种成分含量相对较高。

关键词：超高效液相色谱-紫外-蒸发光散射检测法炒酸枣仁酸枣仁皂苷A 酸枣仁皂苷B 斯皮诺素 6′′′-阿魏酰斯皮诺素含量测定

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6'''-阿魏酰斯皮诺素通过AMPK/mTOR通路调节自噬缓解Aβ1-42诱导细胞损伤

6'''-阿魏酰斯皮诺素通过AMPK/mTOR通路调节自噬缓解Aβ1-42诱导...

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作者：张妹天津商业大学

学位级别：硕士

阿尔茨海默病（Alzheimer disease,AD）是一种渐进性神经退行性疾病,其发生与β淀粉样蛋白（Amyloidβ,Aβ）的沉积密切相关,Aβ在脑内沉积形成的不溶性斑块被认为是阿尔茨海默病的早期病理特征。酸枣仁（Ziziphi Spinosae Semen,ZSS）... 详细信息

阿尔茨海默病（Alzheimer disease,AD）是一种渐进性神经退行性疾病,其发生与β淀粉样蛋白（Amyloidβ,Aβ）的沉积密切相关,Aβ在脑内沉积形成的不溶性斑块被认为是阿尔茨海默病的早期病理特征。酸枣仁（Ziziphi Spinosae Semen,ZSS）是一种传统中药,其在神经功能调节方面表现出显著的生物活性。6′′′-阿魏酰斯皮诺素（6′′′-Feruloylspinosin,6-FS）是酸枣仁主要的黄酮类成分之一,有研究表明6′′′-阿魏酰斯皮诺素可以延长阿尔茨海默病模型线虫寿命,具有潜在的阿尔茨海默病治疗作用,但仍缺少系统报道。因此,本课题为探究6′′′-阿魏酰斯皮诺素干预阿尔茨海默病的机制进行了以下研究,结果如下:（1）首先利用Aβ1-42处理细胞,构建神经细胞损伤模型,并给予不同浓度6′′′-阿魏酰斯皮诺素,分析其对损伤细胞的影响。研究发现5、10μmol/L Aβ1-42可以显著降低SH-SY5Y细胞活力（p<0.001）,并改变SH-SY5Y细胞形态。5、10、20μmol/L 6′′′-阿魏酰斯皮诺素可以呈浓度依赖性地减少Aβ1-42诱导的细胞凋亡,提高细胞活力（p<0.001）;改善Aβ1-42诱导损伤细胞的氧化应激情况,降低细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）、丙二醛（malonaldehyde,MDA）水平,提高谷胱甘肽过氧化物酶活力（p<0.01、p<0.001）;调节凋亡相关蛋白表达,增加B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白（B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2）的表达,并降低Bcl-2关联死亡启动子重组蛋白（Bcl-x L/Bcl-2 associated death promoter,Bad）的表达（p<0.01）,减少细胞凋亡。（2）其次,探讨6′′′-阿魏酰斯皮诺素对Aβ1-42诱导损伤SH-SY5Y细胞线粒体的影响。研究发现,5μmol/L Aβ1-42可以诱导SH-SY5Y细胞线粒体损伤,损伤线粒体功能,减少细胞内腺嘌呤核苷三磷酸（Adenosine Triphosphate,ATP）含量（p<0.001）,降低线粒体膜电位（Mitochondrial membrane potential,MMP）(p<0.001),并增加SH-SY5Y细胞内线粒体转运蛋白:线粒体外膜易位酶20（mitochondrial outer membrane translocase 20,Tom20）、线粒体内膜易位酶23（mitochondrial inner membrane translocase 23,Tim23）的表达（p<0.001）。10μmol/L 6′′′-阿魏酰斯皮诺素可以抑制Aβ1-42诱导的细胞线粒体损伤,增加Aβ1-42诱导损伤地SH-SY5Y细胞内ATP及线粒体膜电位水平,调节线粒体膜转运相关蛋白Tom20及Tim23的表达,改善线粒体功能。（3）然后,研究6′′′-阿魏酰斯皮诺素对Aβ1-42诱导损伤SH-SY5Y细胞自噬状态的影响。首先利用Aβ1-42构建神经细胞损伤模型,并利用6′′′-阿魏酰斯皮诺素、细胞自噬激动剂雷帕霉素（Rapamycin,RAPA）及细胞自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-Methyladenine,3-MA）处理细胞。发现5μmol/L Aβ1-42及5 mmol/L 3-MA处理导致可以导致细胞活力降低（p<0.001、p<0.001）、提高细胞内活性氧含量（p<0.001）,使细胞线粒体膜电位下降（p<0.001）,并影响细胞自噬相关蛋白的表达。6′′′-阿魏酰斯皮诺素及RAPA处理细胞可以提高细胞活力（p<0.001）,降低细胞内ROS累积（p<0.01）,提高细胞线粒体膜电位水平（p<0.01,p<0.05）。并且6′′′-阿魏酰斯皮诺素可以上调自噬关键分子酵母Atg6同系物（autophagy key molecule yeast Atg6 homolog,Beclin1）的表达,降低核孔糖蛋白（nuclear pore glycoprotein,P62）的表达,提高微管相关蛋白1轻链3（micro tubule-associated protein in 1 light chain 3,LC3）的比例,调节细胞自噬,缓解细胞损伤。（4）最后,对6′′′-阿魏酰斯皮诺素调节自噬的具体机制进行研究。利用Aβ1-42构建神经细胞损伤模型,并利用6′′′-阿魏酰斯皮诺素、AMPK激动剂Phenformin（Phen）以及AMPK抑制剂Compound C（CC）处理细胞。其中Aβ1-42及CC处理导致细胞活力降低（p<0.001、p<0.001）、细胞内ROS含量上升（p<0.01

关键词：酸枣仁 6′′′-阿魏酰斯皮诺素 Aβ1-42 AMPK/mTOR通路自噬

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不同产区酸枣仁中斯皮诺素、6′′′-阿魏酰斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B的含量测定

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中草药 2019年第11期50卷 2712-2717页

作者：周赛男陈安家郭宝林张庆英秦小龙山西医科大学山西太原030001 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所北京100193 北京大学药学院北京100191 河北荣和中药材销售有限公司河北保定071299

目的研究和比较全国7大产区不同产地酸枣仁药材中2种黄酮和2种皂苷的含量,筛选优质药材来源。方法 2016年和2017年2个年度对7大产区进行调查和样品收集,共收集样品74份,使用UPLC-UV-ELSD检测斯皮诺素和6′′′-阿魏酰斯皮诺素2种黄酮,... 详细信息

目的研究和比较全国7大产区不同产地酸枣仁药材中2种黄酮和2种皂苷的含量,筛选优质药材来源。方法 2016年和2017年2个年度对7大产区进行调查和样品收集,共收集样品74份,使用UPLC-UV-ELSD检测斯皮诺素和6′′′-阿魏酰斯皮诺素2种黄酮,以及酸枣仁皂苷A和酸枣仁皂苷B2种皂苷的含量。结果 2016、2017年采集样品中酸枣仁样品中斯皮诺素的质量分数分别为0.052%~0.102%和0.049%~0.144%,6′′′-阿魏酰斯皮诺素质量分数分别为0.021%~0.072%和0.026%~0.088%,酸枣仁皂苷A的质量分数分别为0.016%~0.061%和0.033%~0.054%,酸枣仁皂苷B的质量分数分别为0.008%~0.046%和0.005%~0.046%。结论经相关性分析,7个大产区间各成分含量基本上没有显著差异,斯皮诺素含量较高的产地有山西临汾(包括大宁和吉县)、河北涉县、河北迁安、甘肃庆阳、陕西眉县、陕西合阳、辽宁建昌、天津蓟县,酸枣仁皂苷A含量高的产地为山东各地,以及河北内丘和陕西渭南。综合比较山东各地2类成分含量普遍都高且变化较小。相关性分析也显示2种黄酮含量具有较好的相关性,而2种皂苷含量的相关性较差。

关键词：酸枣仁斯皮诺素 6′′′-阿魏酰斯皮诺素酸枣仁皂苷A 酸枣仁皂苷B UPLC-UV-ELSD 含量测定

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基于代谢组学与肠道菌群探讨炒酸枣仁治疗睡眠-觉醒昼夜节律障碍小鼠模型的作用机制

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中草药 2024年第18期55卷 6208-6225页

作者：何灵张圣美陶宇裴香萍闫艳杜晨晖山西中医药大学中药与食品工程学院山西太原030619 山西大学中医药现代研究中心山西太原030006

目的通过持续光照4周复制睡眠-觉醒昼夜节律障碍(circadian rhythm sleep-wake disorder,CRSWD)模型,探讨炒酸枣仁对CRSWD小鼠的作用及作用机制。方法采用雄性C57BL/6J小鼠,持续光照4周复制CRSWD模型,给予炒酸枣仁进行干预,期间测定小... 详细信息

目的通过持续光照4周复制睡眠-觉醒昼夜节律障碍(circadian rhythm sleep-wake disorder,CRSWD)模型,探讨炒酸枣仁对CRSWD小鼠的作用及作用机制。方法采用雄性C57BL/6J小鼠,持续光照4周复制CRSWD模型,给予炒酸枣仁进行干预,期间测定小鼠的体质量和摄食量,实验结束后分4个时间点(ZT0、ZT6、ZT12、ZT18)取材,利用qRT-PCR检测小鼠下丘脑时钟基因(circadian locomotor output cycles kaput,Clock)、脑和肌肉ARNT样蛋白1基因(brain-muscle arnt-like protein 1,Bmal1)、周期基因1(period 1,Per1)、Per2、隐花色素基因1(cryptochrom 1,Cry1)、视黄酸受体相关孤儿受体基因(retinoic acid receptor-related orphan,ROrα)、孤束核基因(reverse erythroblastosis virus,Rev-erbα)的表达;利用16S rRNA测序和GC-MS技术研究小鼠肠道菌群及短链脂肪酸含量的变化;采用UHPLC-Q-TOF-MS/MS技术研究模型小鼠大脑差异代谢物的变化。结果炒酸枣仁显著调控模型小鼠下丘脑中Clock、Bmal1、Per1、Per2、Cry1、ROrα、Rev-erbα7个生物钟基因的表达(P<0.05、0.01、0.001),使其恢复到与空白组昼夜节律振荡趋势一致。肠道菌群16S rRNA测序与短链脂肪酸含量测定结果表明,炒酸枣仁可能通过升高梭状芽孢杆菌属Clostridium、乳酸杆菌属Lactobacillus、罗氏菌属Roseburia相对丰度,从而增加丁酸含量。脑代谢组学结果表明,ZT6和ZT18时共有的代谢通路有三羧酸循环、半胱氨酸和蛋氨酸代谢、烟酸和烟酰胺代谢。炒酸枣仁可以通过调节梭状芽孢杆菌属、乳酸杆菌属及其代谢产物丁酸的含量,进一步影响体内氨基酸代谢通路,从而恢复CRSWD小鼠模型睡眠-觉醒昼夜节律。结论从节律生物钟基因水平、肠道菌群、脑代谢组学等多角度,揭示了炒酸枣仁治疗CRSWD小鼠模型的作用。

关键词：炒酸枣仁睡眠-觉醒昼夜节律障碍生物钟基因 16S rRNA测序代谢组学乌药碱木兰花碱维采宁斯皮诺素 6′′′-阿魏酰斯皮诺素酸枣仁皂苷A 酸枣仁皂苷B

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整合指纹图谱与多成分含量测定的酸枣仁汤质量评价研究

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中草药 2022年第15期53卷 4698-4708页

作者：李佳涵王慧刘佳星杜晨晖闫艳山西大学中医药现代研究中心山西太原030006 山西中医药大学中药与食品工程学院山西太原030619

目的利用HPLC-DAD-ELSD分析技术,建立酸枣仁汤指纹图谱结合多成分含量测定方法,为其质量控制提供参考。方法采用Phenomenex C色谱柱(250 mm×4.6 mm,5.0μm),以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,体积流量为1.0 mL/min,柱... 详细信息

目的利用HPLC-DAD-ELSD分析技术,建立酸枣仁汤指纹图谱结合多成分含量测定方法,为其质量控制提供参考。方法采用Phenomenex C色谱柱(250 mm×4.6 mm,5.0μm),以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,体积流量为1.0 mL/min,柱温30℃,在282 nm和335 nm检测波长下,分别以芒果苷和斯皮诺素为参照峰;ELSD漂移管温度105℃,载气体积流量2.5 L/min条件下,以酸枣仁皂苷A为参照峰,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统对10批自制酸枣仁汤进行相似度评价;同时建立13个指标成分含量测定方法,应用于市售产品及自制样品的质量评价。结果 10批自制酸枣仁汤的平均出膏率为21.57%,在282 nm和335 nm分别标定了5个和4个共有峰,相似度分别为0.907~0.999、0.926~0.999;HPLC-ELSD指纹图谱中标定了4个共有峰,相似度为0.946~0.999。13种指标成分在各自的线性范围内线性关系良好(r>0.995 9),平均加样回收率为93.69%,RSD值平均为2.04%。10批不同剂型市售产品中新芒果苷、乌药碱、芒果苷、异芒果苷、甘草苷、斯皮诺素、阿魏酸、6′′′-阿魏酰斯皮诺素、异甘草苷、知母皂苷BII、酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B和甘草酸的质量分数分别为0.30~3.38、0.02~0.20、0.27~6.04、0.33~1.38、1.54~12.02、0.16~0.87、0.16~1.27、0.04~0.35、0.25~3.12、3.66~20.92、0.36~0.98、0.32~0.89、4.90~36.37 mg/g,波动范围大。自制酸枣仁汤13种成分含量波动范围小。结论建立了酸枣仁汤HPLC-DAD-ELSD指纹图谱与多成分含量测定相结合的质量评价方法,方法准确、可靠,为市售酸枣仁汤产品的质量控制和体内药动学研究提供参考。

关键词：酸枣仁汤高效液相色谱法指纹图谱多成分含量测定质量评价新芒果苷乌药碱芒果苷异芒果苷甘草苷斯皮诺素阿魏酸 6′′′-阿魏酰斯皮诺素异甘草苷知母皂苷BII 酸枣仁皂苷A 酸枣仁皂苷B 甘草酸

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肠道菌群介导的酸枣仁总黄酮体内代谢轮廓研究

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中草药 2022年第14期53卷 4376-4387页

作者：段慧竹刘佳星闫艳杜晨晖山西中医药大学中药与食品工程学院山西太原030619 山西大学中医药现代研究中心山西太原030006

目的比较正常和抗生素大鼠对酸枣仁总黄酮体内代谢转化反应的差异,及2组大鼠血浆中斯皮诺素的药动学变化特征。方法采用ig联合抗生素建立抗生素干预大鼠模型;正常与抗生素大鼠ig酸枣仁总黄酮(120 mg/kg),收集粪便及不同时间点的血浆样... 详细信息

目的比较正常和抗生素大鼠对酸枣仁总黄酮体内代谢转化反应的差异,及2组大鼠血浆中斯皮诺素的药动学变化特征。方法采用ig联合抗生素建立抗生素干预大鼠模型;正常与抗生素大鼠ig酸枣仁总黄酮(120 mg/kg),收集粪便及不同时间点的血浆样品。采用UHPLC-Q-TOF-MS/MS技术分析粪便中原型成分及代谢产物;以黄芩苷为内标,建立UPLCMS/MS测定大鼠血浆中斯皮诺素含量的方法,并应用于斯皮诺素在正常与抗生素大鼠体内药动学比较研究。结果正常及抗生素大鼠粪便中共鉴定了24个化合物,包括9个原型成分(维采宁II、斯皮诺素、牡荆素、异牡荆素、当药黄素、异当药黄素、山柰酚-3-O-芸香糖苷、6′′′-p-香豆酰斯皮诺素、6′′′-阿魏酰斯皮诺素)和15个代谢产物。正常大鼠中主要发生氢化、糖基化等4种代谢反应,抗生素干预后发生了脱甲氧基、去羟基化等6种代谢反应。与正常组相比,抗生素组大鼠血浆中斯皮诺素的血药浓度显著降低(P<0.05),达峰时间和半衰期显著升高(P<0.05)。结论抗生素干预会导致酸枣仁黄酮类成分在大鼠体内代谢反应紊乱,并影响斯皮诺素的药动学行为。

关键词：酸枣仁总黄酮抗生素大鼠肠道菌群体内代谢药动学维采宁II 斯皮诺素牡荆素异牡荆素当药黄素异当药黄素山柰酚-3-O-芸香糖苷 6′′′-p-香豆酰斯皮诺素 6′′′-阿魏酰斯皮诺素

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同时快速测定酸枣仁中5种活性成分含量的研究

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天津药学 2024年第1期36卷 5-10页

作者：张琛武成洁郭宝林张浩山西药科职业学院山西030031 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所北京100193 黄冈金贵中药产业发展有限公司湖北438000

目的:简化样品处理及检测条件,建立同时快速测定酸枣仁中5种活性成分含量的方法。方法:采用《中国药典》方法、直接加热回流法、超声浓缩法和超声离心法提取酸枣仁中的活性成分,通过同一梯度洗脱程序,利用HPLC-DAD液相检测204 nm和335 n... 详细信息

目的:简化样品处理及检测条件,建立同时快速测定酸枣仁中5种活性成分含量的方法。方法:采用《中国药典》方法、直接加热回流法、超声浓缩法和超声离心法提取酸枣仁中的活性成分,通过同一梯度洗脱程序,利用HPLC-DAD液相检测204 nm和335 nm下5种成分(包括斯皮诺素、6′′′-阿魏酰斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B和白桦脂酸)的峰面积,并进行方法学考查以及对9批酸枣仁药材的含量测定。结果:通过比较,超声离心法提取效率最高,速度最快,其结合HPLC-DAD液相检测法的方法学验证结果也符合试验要求,对9批酸枣仁药材进行含量测定,其中有7批符合《中国药典》标准。结论:本文建立的超声离心提取结合HPLC-DAD液相检测法,可以同时快速测定酸枣仁中5种活性成分含量,准确高效,切实可行。

关键词：超声离心法酸枣仁斯皮诺素 6′′′-阿魏酰斯皮诺素酸枣仁皂苷A 酸枣仁皂苷B 白桦脂酸

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酸枣仁中斯皮诺素薄层鉴别方法改进

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时珍国医国药 2022年第2期33卷 389-390页

作者：周洪亮姜誉弘邱明鸣南京中医药大学附属医院江苏南京210029

目的改进《中国药典》2020年版一部酸枣仁项下斯皮诺素的薄层鉴别方法。方法改进了原标准的样品处理、展开及显色方法,以三氯甲烷-甲醇-水(5∶3∶1)的下层溶液为展开剂,喷以10%硫酸乙醇溶液,105℃条件下显色至斑点清晰,置紫外光灯(365nm... 详细信息

目的改进《中国药典》2020年版一部酸枣仁项下斯皮诺素的薄层鉴别方法。方法改进了原标准的样品处理、展开及显色方法,以三氯甲烷-甲醇-水(5∶3∶1)的下层溶液为展开剂,喷以10%硫酸乙醇溶液,105℃条件下显色至斑点清晰,置紫外光灯(365nm)下检视。结果供试品色谱图中,斯皮诺素、6′′′-阿魏酰斯皮诺素斑点清晰,分离度好,Rf值适中,可有效鉴别酸枣仁及其伪品。结论所建立的酸枣仁薄层鉴别方法操作简单,耐用性好,可替代原标准用于酸枣仁的鉴别。

关键词：酸枣仁斯皮诺素 6′′′-阿魏酰斯皮诺素薄层鉴别改进

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基于灰色关联分析方法研究炒酸枣仁镇静催眠作用谱效关系

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中草药 2021年第17期52卷 5267-5274页

作者：杨超朱晓钗万浩婷刘晴刘晓蔡宝昌南京中医药大学药学院江苏南京210023 南京海昌中药集团有限公司江苏南京210061

目的采用基于灰色关联分析方法的谱效相关研究手段筛选炒酸枣仁Ziziphi Spinosae Semen发挥镇静催眠作用的药效物质基础。方法ip对氯苯丙氨酸建立大鼠失眠模型,造模结束后ig给予炒酸枣仁水煎液,分别于给药后不同时间点采集各实验组大鼠... 详细信息

目的采用基于灰色关联分析方法的谱效相关研究手段筛选炒酸枣仁Ziziphi Spinosae Semen发挥镇静催眠作用的药效物质基础。方法ip对氯苯丙氨酸建立大鼠失眠模型,造模结束后ig给予炒酸枣仁水煎液,分别于给药后不同时间点采集各实验组大鼠大脑皮层、下丘脑及血浆样品,采用酶联免疫试剂盒方法测定相关药效指标,建立各个药效指标的效应-时间曲线;同时利用UHPLC-Q-TOF-MS分析技术对其中化学成分进行监测,建立各成分的响应强度-时间曲线,使用灰色关联统计方法,对各药效指标的效应-时间曲线与各成分的响应强度-时间曲线分别进行拟合,计算得到各成分与药效的相关度,再将代谢产物归属为原型化学成分,进行权重计算,得到相关系数,并进行排序,客观反映炒酸枣仁水煎液中化学成分与药效的动态发展过程和内在联系。结果于大鼠大脑皮层、下丘脑及血浆中共发现药物相关移行成分23种,其中7种为原型成分,16种为代谢产物。灰色关联分析结果表明,斯皮诺素、山茶苷B、6′′′-阿魏酰斯皮诺素、维采宁-2、莲心季铵碱、去甲异紫堇定、酸枣仁碱F、白桦脂酸共8种化学成分的相关系数较高。结论推测斯皮诺素、山茶苷B、6′′′-阿魏酰斯皮诺素、维采宁-2、莲心季铵碱、去甲异紫堇定、酸枣仁碱F、白桦脂酸为炒酸枣仁发挥镇静催眠作用的主要化学物质基础。

关键词：酸枣仁炒制镇静催眠谱效相关灰色关联度斯皮诺素山茶苷B 6′′′-阿魏酰斯皮诺素维采宁-2 莲心季铵碱去甲异紫堇定酸枣仁碱F 白桦脂酸 UHPLC-Q-TOF-MS

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