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自制混合型小柱净化-高效液相色谱-串联质谱法同时测定尿液中有机磷酸酯代谢物和8-羟基-2′-脱氧鸟苷

色谱 2020年第6期38卷 647-654页

作者：李栋张芹张圣虎徐诚陈建秋刘艳华宋宁慧郭瑞昕中国药科大学工学院江苏南京211198 生态环境部南京环境科学研究所江苏南京210042

建立了基于自制混合型小柱的样品净化-高效液相色谱-串联质谱同时测定7种有机磷酸酯(OPEs)主要代谢产物及生物标志物8-羟基-2′-脱氧鸟苷(8-OHdG)的分析方法。样品经乙腈提取后用自制小柱富集净化,以乙腈-0.2%(v/v)氨水溶液作为流动相... 详细信息

建立了基于自制混合型小柱的样品净化-高效液相色谱-串联质谱同时测定7种有机磷酸酯(OPEs)主要代谢产物及生物标志物8-羟基-2′-脱氧鸟苷(8-OHdG)的分析方法。样品经乙腈提取后用自制小柱富集净化,以乙腈-0.2%(v/v)氨水溶液作为流动相进行梯度洗脱,在多反应监测模式下进行定性和定量分析。结果显示,8种目标物在0.1~200μg/L范围内呈良好的线性关系,7种OPEs代谢物的回收率为52.36%~114.56%,8-OHdG回收率为88.63%~97.72%。将该方法应用于人体尿液实际样品中,7种OPEs代谢物和8-OHdG的检出范围分别为6.24~46.07μg/L和5.90~16.71μg/L,8-OHdG与7种OPEs代谢物总含量之间存在显著相关性。该方法操作简单、灵敏度高、准确性好、重现性强,可为更全面地评价人体内OPEs暴露水平及机体损伤提供可靠的技术支持。

关键词：高效液相色谱-串联质谱法有机磷酸酯代谢物 8-羟基-2′-脱氧鸟苷尿液

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基于胶体金的8-羟基-2′-脱氧鸟苷免疫层析试纸条

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生物工程学报 2022年第3期38卷 1197-1208页

作者：叶伟伟王丽文张宇李潮锋钱天润付贤树张明洲单继宏浙江工业大学机械工程学院浙江杭州310014 浙江工业大学食品科学与工程学院浙江杭州310014 中国计量大学生命科学学院浙江杭州310018 浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室浙江杭州310018

8-羟基-2′-脱氧鸟苷(8-hydroxy-2′-deoxyguanosine,8-OHdG)是评价DNA氧化损伤较灵敏和稳定的生物标志物。文中采用竞争法建立一种快速、灵敏检测8-OHdG的胶体金免疫层析试纸条。将样品垫(玻璃纤维素膜)、结合垫(玻璃纤维素膜)、硝酸... 详细信息

8-羟基-2′-脱氧鸟苷(8-hydroxy-2′-deoxyguanosine,8-OHdG)是评价DNA氧化损伤较灵敏和稳定的生物标志物。文中采用竞争法建立一种快速、灵敏检测8-OHdG的胶体金免疫层析试纸条。将样品垫(玻璃纤维素膜)、结合垫(玻璃纤维素膜)、硝酸纤维素膜和吸水垫依此粘贴在聚氯乙烯(polyvinyl chloride,PVC)底板上,构建试纸条。通过柠檬酸钠还原三水合四氯金酸制备胶体金(gold nanoparticles,AuNPs),8-OHdG配对的抗体(antibody,Ab)包被于AuNPs的外层(Ab coated AuNPs,Ab@AuNPs)作为探针。牛血清蛋白(bovine serum protein,BSA)与8-OHdG用碳二亚胺盐酸盐偶联制备人工抗原,作为检测线的包被抗原。羊抗鼠多抗(imunoglobulin G,IgG)作为质控线的包被抗体。对试纸条的硝酸纤维素膜、上样液的配方、金标抗体喷涂量等实验参数进行了优化。结果表明,硝酸纤维素膜(nitrocellulose film,NC)膜采用CN 95,上样液的最优配方为1%BSA+3%吐温-20+3%蔗糖+0.9%NaCl溶液,最适金标抗体喷涂量为4μL。利用试纸条在可见光下检测8-OHdG,根据检测线(test line,T线)和质控线(control line,C线)的显色强度对比,可初步判断尿液中8-OHdG的含量水平。并通过T线的灰度值计算尿液中的8-OHdG的浓度,检测限为2.55μg/L。该方法简单、快速且有较好的特异性,可检测人体尿液中的8-OHdG含量,以初步评价人体的健康状态。

关键词：免疫层析胶体金 8-羟基-2′-脱氧鸟苷试纸

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8-羟基-2'-脱氧鸟苷的生物学意义及其尿中含量的测定方法

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癌变．畸变．突变 2007年第5期19卷 418-420页

作者：赵燕郝卫东北京大学公共卫生学院北京100083

DNA中的脱氧鸟苷受到羟自由基(.OH)攻击后,其C-8位生成8-羟基-脱氧鸟苷(8-OH-dG),8-OH-dG无需进一步代谢即排入尿中。因其生成量相对较高,且不受饮食影响、能用灵敏度较高的分析方法检测等特点,已成为常用的DNA氧化损伤生物学标志。文... 详细信息

DNA中的脱氧鸟苷受到羟自由基(.OH)攻击后,其C-8位生成8-羟基-脱氧鸟苷(8-OH-dG),8-OH-dG无需进一步代谢即排入尿中。因其生成量相对较高,且不受饮食影响、能用灵敏度较高的分析方法检测等特点,已成为常用的DNA氧化损伤生物学标志。文中主要介绍了其形成机制、生物学意义及目前常用的测定方法。

关键词： 8-羟基-2′-脱氧鸟苷 DNA氧化损伤 DNA修复

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左归丸对老年大鼠大脑皮质8-羟基脱氧鸟苷酸的调节作用

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复旦学报（医学版） 2002年第3期29卷 208-210页

作者：赵刚蔡定芳范钰袁中君复旦大学中西医结合研究所上海200040 复旦大学附属华山医院消化科上海200040 沈阳市第五人民医院中医科沈阳110023

目的　探讨老龄大鼠大脑皮质基因组DNA中 8 羟基 2′ 脱氧鸟苷 (8 OH dG)变化规律和左归丸的调节作用。方法　建立 2 4月龄自然衰老实验模型 ,随机分为老年组 (生理盐水灌胃 )和治疗组 (左归丸灌胃 ) ,处理 3个月 ;以 3月龄大鼠为青年... 详细信息

目的　探讨老龄大鼠大脑皮质基因组DNA中 8 羟基 2′ 脱氧鸟苷 (8 OH dG)变化规律和左归丸的调节作用。方法　建立 2 4月龄自然衰老实验模型 ,随机分为老年组 (生理盐水灌胃 )和治疗组 (左归丸灌胃 ) ,处理 3个月 ;以 3月龄大鼠为青年对照组。取大脑皮质 ,抽提DNA ,采用酶联免疫吸附法 (ELISA)测定 8 OH dG水平。结果　老龄大鼠大脑皮质基因组DNA 8 OH dG水平比青年对照组明显升高 ,左归丸组低于老年组 (P <0 .0 5)。结论　8 OH dG在大脑皮质老化过程中上调。

关键词：衰老大脑皮质 8-羟基-2′-脱氧鸟苷酶联免疫吸附法左归丸老龄大鼠

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终末期肾病血液透析患者血清endocan、8-OHdG与不宁腿综合征的关系

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中国医师杂志 2025年第2期27卷 195-200页

作者：韩帅邵兵杨微张艳宁锦州医科大学研究生学院锦州121001 沈阳市第一人民医院肾内科沈阳110041 辽宁电力中心医院肾内科沈阳110403 中国人民解放军北部战区总医院肾内科沈阳110015

目的探讨终末期肾病(ESRD)血液透析患者血清内皮细胞特异性分子(endocan)、8-羟基-2′-脱氧鸟苷(8-OHdG)与不宁腿综合征(RLS)的关系。方法前瞻性选取2021年5月-2023年5月沈阳市第一人民医院、辽宁电力中心医院、中国人民解放军北部战区... 详细信息

目的探讨终末期肾病(ESRD)血液透析患者血清内皮细胞特异性分子(endocan)、8-羟基-2′-脱氧鸟苷(8-OHdG)与不宁腿综合征(RLS)的关系。方法前瞻性选取2021年5月-2023年5月沈阳市第一人民医院、辽宁电力中心医院、中国人民解放军北部战区总医院三家医院收治的180例ESRD血液透析患者,根据是否发生RLS分为RLS组(41例)和非RLS组(139例)。根据国际RLS评定量表(IRLS)将RLS患者分为轻度组(12例)、中度组(19例)、重度组(10例)。采用酶联免疫吸附法检测患者血清endocan、8-OHdG水平。采用Pearson相关性分析法评估RLS患者血清endocan、8-OHdG水平与IRLS评分的相关性,多因素logistic回归模型分析ESRD血液透析患者发生RLS的影响因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清endocan、8-OHdG水平对ESRD血液透析患者RLS的诊断价值。结果与非RLS组[(4.03±1.23)ng/ml、(0.38±0.13)ng/ml]比较,RLS组血清endocan[(6.10±1.95)ng/ml]、8-OHdG[(0.53±0.14)ng/ml]水平较高(t=8.180、6.379,均P<0.001)。轻度组、中度组、重度组RLS患者血清endocan[(3.61±1.01)ng/ml、(6.39±1.41)ng/ml、(8.54±2.68)ng/ml]、8-OHdG[(0.39±0.07)ng/ml、(0.51±0.05)ng/ml、(0.74±0.08)ng/ml]水平依次升高(F=23.065、83.013,均P<0.001)。Pearson相关性分析显示,RLS患者血清endocan、8-OHdG水平与IRLS评分呈正相关(r=0.813、0.830,均P<0.001)。多因素logistic回归分析显示,透析时间偏长、血清endocan升高、8-OHdG升高为ESRD血液透析患者发生RLS的独立危险因素,铁蛋白升高为独立保护因素(均P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清endocan、8-OHdG水平联合诊断ESRD血液透析患者RLS的曲线下面积为0.919(95%CI:0.870~0.955),大于血清endocan、8-OHdG水平单独诊断的0.791(95%CI:0.724~0.848)、0.780(95%CI:0.712~0.838)。结论血清endocan、8-OHdG升高与ESRD血液透析患者RLS发生及病情程度加重有关,血清endocan、8-OHdG水平联合检测对ESRD血液透析患者发生RLS的诊断价值较高。

关键词：血液透析终末期肾病内皮细胞特异性分子 8-羟基-2′-脱氧鸟苷不宁腿综合征

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老年慢性心力衰竭患者血清8-羟基脱氧鸟苷和锰超氧化物歧化酶水平与认知功能障碍的相关性研究

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中华老年心脑血管病杂志 2023年第1期25卷 89-91页

作者：李勇军李翔唐一锋张苡榕柳丽六盘水市人民医院心内科 553000

目的探究老年慢性心力衰竭(CHF)患者血清8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)、锰超氧化物歧化酶(MnSOD)水平与认知功能障碍的相关性,并分析二者对发生认知功能障碍的诊断价值。方法选取2018年7月至2021年12月六盘水市人民医院心内科收治的老年CHF患... 详细信息

目的探究老年慢性心力衰竭(CHF)患者血清8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)、锰超氧化物歧化酶(MnSOD)水平与认知功能障碍的相关性,并分析二者对发生认知功能障碍的诊断价值。方法选取2018年7月至2021年12月六盘水市人民医院心内科收治的老年CHF患者128例,根据蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分分为认知功能障碍组(MoCA评分<26分)64例和认知功能正常组(MoCA评分≥26分)64例。收集2组一般资料,检测血清8-OHdG、MnSOD水平;采用Pearson相关性分析老年CHF并发认知功能障碍患者血清8-OHdG、MnSOD水平与MoCA评分的相关性;logistic回归分析老年CHF患者发生认知功能障碍的影响因素;采用ROC曲线分析血清8-OHdG、MnSOD水平对老年CHF患者发生认知功能障碍的诊断价值。结果与认知功能正常组比较,认知功能障碍组受教育年限>12年、LVEF、MoCA评分、血清MnSOD水平均明显降低(P<0.01),血清8-OHdG水平明显升高(P<0.01);老年CHF并发认知功能障碍患者血清8-OHdG水平与MoCA评分呈负相关(P<0.01),血清MnSOD水平与MoCA评分呈正相关(P<0.01);受教育年限、LVEF、MnSOD是影响老年CHF患者发生认知功能障碍的保护因素(P<0.01),8-OHdG是影响老年CHF患者发生认知功能障碍的危险因素(P<0.01);血清8-OHdG和MnSOD联合诊断老年CHF患者发生认知功能障碍的曲线下面积明显高于血清8-OHdG、MnSOD单独诊断[0.952(0.892~0.994)vs 0.863(0.796~0.930)、0.869(0.807~0.935),P<0.05]。结论老年CHF合并认知功能障碍患者血清8-OHdG水平升高,MnSOD水平降低,8-OHdG、MnSOD联合对老年CHF患者发生认知功能障碍具有较好的诊断价值。

关键词：心力衰竭 8-羟基-2′-脱氧鸟苷超氧化物歧化酶认知功能障碍

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抗oh^8dG单克隆抗体的制备及生物学特性研究

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浙江大学学报（医学版） 2003年第1期32卷 33-36页

作者：王建沈建根朱永良浙江大学医学院免疫学教研室浙江杭州310031 浙江大学医学院附属第二医院浙江杭州310009

目的 :制备抗 8-羟基 - 2′-脱氧鸟苷 (oh8d G)的单克隆抗体 ,并通过免疫组化检测胃粘膜中的 oh8d G,评价幽门螺杆菌 (Hp)感染与 DNA氧化损伤的关系。方法 :以 BSA- oh8d G偶联物免疫 BALB/ C小鼠 ,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体 ,以竞... 详细信息

目的 :制备抗 8-羟基 - 2′-脱氧鸟苷 (oh8d G)的单克隆抗体 ,并通过免疫组化检测胃粘膜中的 oh8d G,评价幽门螺杆菌 (Hp)感染与 DNA氧化损伤的关系。方法 :以 BSA- oh8d G偶联物免疫 BALB/ C小鼠 ,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体 ,以竞争性 ELISA、Western blot和免疫组化进行生物学特性鉴定。结果 :建立了两个抗 oh8d G的单克隆抗体杂交瘤细胞株 (ZMC9,ZMD11) ,竞争性 ELISA和 Western blot显示该抗体对 oh8d G有高度特异性 ,免疫组化结果显示 oh8d G在 Hp阳性胃粘膜组织中表达率为 5 5 % ,Hp阴性胃粘膜组织中表达率为 5 % ,两者差异有显著性 (P<0 .0 1)。结论 :本研究制备的单克隆抗体能特异识别 oh8d G;Hp感染可导致胃粘膜组织 oh8d G水平增高。

关键词： 8-羟基-2′-脱氧鸟苷单克隆抗体幽门螺杆菌免疫组化制备

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局灶性脑缺血-再灌注大鼠神经元DNA氧化损伤的研究

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中国危重病急救医学 2001年第8期13卷 478-480页

作者：邓娟周华东陈曼娥张莉莉第三军医大学大坪医院神经内科重庆400042

目的 :研究 8羟基 2′脱氧鸟苷 ( 8OHd G)在大鼠局灶性脑缺血再灌注后的表达情况。方法 :采用栓线法制备大脑中动脉再灌注大鼠模型 ,按再灌注时间不同分为 4组 ,利用免疫组织化学方法显示 8OHd G在脑内的表达 ,并用寡核苷酸末端核糖核... 详细信息

目的 :研究 8羟基 2′脱氧鸟苷 ( 8OHd G)在大鼠局灶性脑缺血再灌注后的表达情况。方法 :采用栓线法制备大脑中动脉再灌注大鼠模型 ,按再灌注时间不同分为 4组 ,利用免疫组织化学方法显示 8OHd G在脑内的表达 ,并用寡核苷酸末端核糖核酸转移酶 ( Td T)介导的 d UTP缺口原位末端标记 ( TU NEL )法标记DNA片段。结果 :正常组和假手术组大鼠脑内偶见 8OHd G阳性细胞 ,缺血 2小时再灌注 2小时时 ,缺血区散在 8OHd G阳性细胞 ;再灌注 2 4小时时 ,8OHd G阳性程度达到高峰 ;4 8小时时 ,缺血区内的神经细胞显示中度的 8OHd G阳性 ,缺血区外的神经细胞为强阳性 ,此处的细胞 TUNEL 染色为阴性。结论 :脑缺血再灌注后 ,DNA氧化损伤比细胞死亡发生范围更加广泛 ,DNA氧化损伤并不一定导致细胞死亡。抗氧化治疗可能在限制脑缺血再灌注时氧化应激中起重要作用。

关键词：脑缺血再灌注 8-羟基-2′-脱氧鸟苷 DNA损伤神经元

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糖尿病与唾液中DNA、蛋白质和脂类氧化损伤

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甘肃医药 2011年第1期30卷 1-6页

作者：苏海翔 Ana M.Velly Mark Trifiro Hyman M.Schipper Mervyn Gornitsky 甘肃省医学科学研究院甘肃省肿瘤医院甘肃兰州730050 Lady Davis医学研究所麦吉尔大学神经科学和神经外科学系麦吉尔大学牙科系蒙特利尔犹太总院牙科明尼苏达大学诊断和生物科学系美国明尼阿波利斯市55455 蒙特利尔犹太总院内分泌科麦吉尔大学内科系

目的:观察糖尿病是否与唾液中氧化还原动态平衡的改变相关。方法:用ELISA方法分析148名糖尿病患者和475名对照的非刺激性唾液中氧胁迫损伤标志物8-羟基-2′-脱氧鸟苷(8-hydroxy-2'-deoxyguanosine,8-OHdG)、蛋白质羰基(Protein carb... 详细信息

目的:观察糖尿病是否与唾液中氧化还原动态平衡的改变相关。方法:用ELISA方法分析148名糖尿病患者和475名对照的非刺激性唾液中氧胁迫损伤标志物8-羟基-2′-脱氧鸟苷(8-hydroxy-2'-deoxyguanosine,8-OHdG)、蛋白质羰基(Protein carbonyls,PC)和8-异前列腺素F2α(8-epi-prostaglandin-F2α,8-epi-PGF2α)的含量。用逻辑相关分析的统计学方法分析氧胁迫损伤指标与使用胰岛素、二甲双胍和餐饮控制糖尿病患者之间的相关性。结果:(i)与对照组相比糖尿病组唾液中的Log8-OHdG、LogPC和Log8-epi-PGF2α明显升高;(ii)I型糖尿病组唾液中的LogPC明显较对照组高,II型糖尿病组Log8-OHdG、LogPC和Log8-epi-PGF2α均较对照组有明显升高;(iii)二甲双胍治疗组和单纯餐饮控制的糖尿病组唾液Log8-OHdG和LogPC水平较高;(iv)单纯胰岛素治疗组和胰岛素及二甲双胍联合治疗组唾液LogPC水平高于对照组;(v)多变量分析和条件逻辑回归分析表明Log8-OHdG、LogPC、Log8-epi-PGF2α和糖尿病间存在明显的相关性。结论:糖尿病患者唾液中氧化性DNA、脂类和蛋白质损伤产物8-OHdG、8-epi-PGF2α、PC水平均明显升高,表明存在唾液中的氧化还原动态平衡紊乱。唾液氧胁迫指标的分析有可能成为一种新的疾病监测方式,并且提示一种疾病干预的新途径。

关键词：糖尿病氧胁迫 8-羟基-2′-脱氧鸟苷蛋白质羰基 8-异前列腺素F2α

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黄曲霉素B1诱导铁过载鼠肝细胞DNA损伤的研究

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海峡预防医学杂志 2010年第4期16卷 1-3,F0003页

作者：谢剑锋小路武彦菱川善隆宋宁林万松福建省疾病预防控制中心福州350001 日本国立长崎大学医学部福建医科大学基础医学院

[目的]研究黄曲霉素B1(AFB1)对正常鼠与铁过载鼠肝细胞DNA损伤情况。[方法]采用8-羟基-2′-脱氧鸟苷(8-OHdG)和AFB1单克隆抗体,通过免疫组化方法分析不同AFB1剂量组下两组鼠肝细胞DNA的损伤情况。[结果]AFB1诱导的DNA损伤主要发生在肝... 详细信息

[目的]研究黄曲霉素B1(AFB1)对正常鼠与铁过载鼠肝细胞DNA损伤情况。[方法]采用8-羟基-2′-脱氧鸟苷(8-OHdG)和AFB1单克隆抗体,通过免疫组化方法分析不同AFB1剂量组下两组鼠肝细胞DNA的损伤情况。[结果]AFB1诱导的DNA损伤主要发生在肝门静脉区和胆管区,随剂量的加大损伤加重,且铁过载组DNA损伤大于正常组。[结论]铁过载可加重AFB1对鼠肝细胞的DNA损伤。

关键词：黄曲霉素B1 铁过载 8-羟基-2′-脱氧鸟苷免疫组化 DNA损伤

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