检索结果-内蒙古大学图书馆

中国比较医学杂志 2022年第8期32卷 145-154页

作者：谢晓露陈秀寇利秋李亚玲西南医科大学附属医院药学部四川泸州646000 西南医科大学药学院四川泸州646000

阿尔兹海默病(Alzheimer’s disease,ad)是临床常见中枢神经系统退行性病变,其病因不明、病机不清,并对患者家庭和社会造成了巨大负担。成功建立一个符合人类疾病发生、发展进程的动物模型用于ad研究,对探索疾病发生机制、开发疾病相关... 详细信息

阿尔兹海默病(Alzheimer’s disease,ad)是临床常见中枢神经系统退行性病变,其病因不明、病机不清,并对患者家庭和社会造成了巨大负担。成功建立一个符合人类疾病发生、发展进程的动物模型用于ad研究,对探索疾病发生机制、开发疾病相关治疗药物或其他干预措施尤为重要。因此,本文对国内外ad动物模型构建的技术方法、作用原理、当前应用进行了综述,总结了其相关指标的评价方法,分析了转基因ad动物模型与非转基因ad动物模型的优缺点,概述了认知行为学方法、免疫学方法与影像学方法的应用前景及特点,以期为有关领域的研究者选择合适的动物模型提供参考,为构建新型动物模型和发展新的模型指标评价方法提供新思路。

关键词： ad动物模型指标评价方法 Aβ tau 认知和记忆障碍

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

用于建立ad动物模型的重组腺相关病毒的构建、表征和筛选

用于建立AD动物模型的重组腺相关病毒的构建、表征和筛选

引用

作者：艾宁吉林大学

学位级别：硕士

阿尔茨海默症(Alzheimer’s disease,ad)是一种渐行性神经退行性疾病,主要病理学特征包括β-淀粉样蛋白过度沉积形成的Aβ斑块、过度磷酸化tau蛋白(pTau)形成的神经元纤维缠结和神经元的丢失。近年来科学家们对ad的治疗策略进行了很多尝... 详细信息

阿尔茨海默症(Alzheimer’s disease,ad)是一种渐行性神经退行性疾病,主要病理学特征包括β-淀粉样蛋白过度沉积形成的Aβ斑块、过度磷酸化tau蛋白(pTau)形成的神经元纤维缠结和神经元的丢失。近年来科学家们对ad的治疗策略进行了很多尝试,但到目前为止获批的ad药物均只能在一定程度上缓解病情,并不能治愈或者阻断ad病程发展。因此,临床对预防和治疗ad的新药需求极为迫切。免疫治疗手段是ad新药研发的重点,然而过去十年以Aβ或以tau为靶点的ad疫苗研究罕有成功,原因在于疫苗在人体中的安全性欠缺,且诱导产生的免疫原性不够强。另外,单独Aβ疫苗或pTau疫苗只作用于一种ad致病因子而使得疗效不佳。因此研发同时靶向ad患者脑内的Aβ蛋白和pTau蛋白的疫苗是进一步提高ad治疗效果的潜在策略。为了进一步开发针对Aβ蛋白和pTau蛋白的双靶向ad疫苗,能够同时表达两种病理蛋白的动物模型对于疫苗的治疗效果评价是非常必要的,同时这种动物模型对于探究Aβ和tau在体内的相互作用同样十分重要。但直到目前为止能够获得的同时表达两种病理蛋白的三转基因鼠中,Aβ蛋白和pTau蛋白的表达时间存在较长间隔,不利于双靶向ad疫苗的研究,因此构建一种能够同时表达Aβ蛋白和pTau蛋白的动物模型迫在眉睫。但随着研究技术的不断发展和丰富,重组腺相关病毒(rAAV)载体被应用于多种疾病模型的构建。腺相关病毒具有转导能力强、安全性高、免疫原性低、能够介导基因持久表达的优点,在许多种疾病的治疗中被应用。因此,利用rAAV高效转导基因的能力在动物中实现ad病理蛋白的表达成为一种潜在的有效构建ad动物模型的方法。研究表明不同血清型rAAV在动物组织中存在组织趋向性,使目的基因的转导效率在特异组织达到最优化。目前已经有10种血清型被发现,根据对每种血清型对不同组织器官细胞的亲和性研究发现,rAAV2对于神经系统的亲和性较好,rAAV8则对肝、肌肉、眼、神经系统都具有较好的亲和性,rAAV9也在许多器官中,如肺、肝、肌肉、心脏、神经系统中显示了良好的亲和性。因此,三种病毒血清型在都能实现目的基因在神经系统的转导,以往的部分研究显示与rAAV2相比rAAV8在神经系统中具有较好的转导效率,而rAAV9同样被寄予厚望,但究竟哪种血清型更适用于神经系统中仍然需要进一步研究。相同血清型rAAV病毒在不同启动子的作用下对外源基因的表达效果也会存在差别,因此启动子的不同也会影响基因表达效率。利用rAAV在神经系统转导外源基因过程中普遍使用的启动子类型包括hSyn、mecp2、TUBA1A、CaMK??a、Iba1、CNP等,其中CaMK??a在脑中含量丰富,参与神经兴奋在突出间的传递,并且能够特异性的在兴奋神经元中启动基因的表达。相反CAG启动子是一种广谱性启动子,通过研究表明CAG启动子能够介导基因广泛的在大多数细胞中表达。在神经退行性疾病中,神经细胞遭到大量破坏,如果CAMK??a启动子能够介导外源基因特异性的在神经细胞中表达,与CAG启动子相比CAMK??a启动子是否能够加快ad动物模型的构建,还需要进一步探究。本论文的主要目的是寻找能够在小鼠大脑中大量表达目的基因的最优的rAAV血清型。我们采用两种类型的启动子,分别为CAG启动子和CAMK??a启动子,以及三种不同的rAAV血清型,包括rAAV2、rAAV8和rAAV9,包装出分别在两种不同启动子作用下的三种血清型rAAV。通过包装在相同启动子作用下,同时表达RFP基因的三种不同血清型病毒比较不同血清型病毒在小鼠脑内亲和力强弱;通过包装在不同启动子作用下表达GFP目的基因的同种病毒血清型病毒比较CAG启动子和CAMK??a启动子在小鼠脑内的基因转导效率。为了优化动物模型构建的方法,本论文还进行了一系列方法学的建立,包括rAAV包装方法优化、动物模型构建材料的选择和病毒注射方法的使用等。我们的结果表明与rAAV2、rAAV8相比,rAA9具有更突出的在小鼠脑内转导表达目的基因的能力。同时在CAG启动子和CAMK??a启动子作用下的体内病毒感染力检测实验显示,CAMK??a启动子并未特异性的在神经细胞中表达外源基因。因此,在构建动物模型过程中利用CAG启动子和9型rAAV病毒更加有利于诱导大脑组织中基因的转导和表达。我们接下来也会利用CAG启动子和9型rAAV进行过表达Aβ和pTau的ad模型鼠的构建。

关键词： ad动物模型重组腺相关病毒 rAAV2 rAAV8 rAAV9 CAG启动子 CAMKⅡa启动子

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

NSTK对ad动物模型的神经保护作用及调控能量代谢障碍的机制

NSTK对AD动物模型的神经保护作用及调控能量代谢障碍的机制

引用

作者：刘沙上海交通大学

学位级别：博士

阿尔茨海默疾病（Alzheimer’s disease,ad）是由多种因素诱发的中枢神经系统退行性疾病。ad的病理机制复杂,对拟用于ad治疗候选药物的科学评价需采用能较准确模拟ad病理特征的模型,特别是相应的整体动物模型。ad的早期病理进程之一为... 详细信息

阿尔茨海默疾病（Alzheimer’s disease,ad）是由多种因素诱发的中枢神经系统退行性疾病。ad的病理机制复杂,对拟用于ad治疗候选药物的科学评价需采用能较准确模拟ad病理特征的模型,特别是相应的整体动物模型。ad的早期病理进程之一为能量代谢障碍,能量代谢障碍的发生和发展直接影响ad的其他病理进程包括炎症及氧化应激等,因此针对能量代谢障碍的干预手段可有效提高ad的疗效。在前期神经保护药物的研究中,我们聚焦具有自主知识产权的内源性大麻素（anandamide,AEA）类似物脂肪酰氨基酸。通过系统研究,我们发现了水溶性强、稳定及成药性好的抗脑缺血的神经保护候选药─N-硬脂酰酪氨酸二钾盐（Dipotassium N-stearoyltyrosinate,NSTK）。在对NSTK成药性的系统研究中,我们发现NSTK作为脂肪酰胺水解酶（fatty acid amide hydrolase,FAAH）抑制剂,通过作用于大麻素系统（endocannabinoid system,ECS）干预脑缺血过程的多条损伤途径,达到其神经保护作用。由于对脑缺血损伤和ad损伤的干预有一定的相似性,我们在细胞水平对NSTK抗ad的活性及其机制进行了初步研究,发现其具有抗ad导致的氧化应激、兴奋毒性等作用。为进一步评价NSTK治疗ad的可行性及探讨其机制,本文在ad动物模型上考察NSTK的神经保护作用,研究其通过干预炎症、氧化应激、糖代谢障碍等多个病理进程发挥的神经保护作用机制;我们还通过U251细胞实验探讨NSTK通过干预能量代谢障碍影响炎症及氧化应激等病理进程的作用及其机制。第一章NSTK对ad动物模型的神经保护作用本章选择APP/PS1/Tau三转基因小鼠以及Tau单转基因小鼠,通过动物行为学,组织病理学,ELISA实验等,评价NSTK在转基因ad动物模型上的神经保护活性。我们观察到NSTK（30 mg/kg,45 mg/kg）明显改善APP/PS1/Tau三转基因小鼠和Tau单转基因小鼠的整体行为能力。行为学实验中,NSTK可剂量依赖性地改善转基因小鼠的自主活动,焦虑行为及提高小鼠学习记忆能力。由于同Tau单转基因小鼠相比APP/PS1/Tau三转基因小鼠的行为学以及病理特征更加明显,后续实验中,ad动物模型均采用APP/PS1/Tau三转基因小鼠。我们观察了NSTK对APP/PS1/Tau三转基因小鼠的神经保护活性,采用免疫荧光和ELISA方法,观察到NSTK显著降低皮层和海马区Aβ斑块以及Aβ42和Aβ40的含量,降低NFTs的产生,提高皮层和CA1区神经元的存活率,抑制皮层和DG区星形胶质细胞的活化。结果表明,NSTK在ad动物模型上表现出较好的神经保护活性,该活性可能涉及协同干预多个病理进程。以上研究结果为具有良好成药性的抗脑缺血神经保护候选药NSTK应用于ad治疗提供了积极的实验数据。第二章NSTK对APP/PS1/Tau转基因小鼠多损伤途径干预的神经保护作用机制ad的病理机制涉及炎症、氧化应激、糖代谢障碍等多条损伤途径,仅干预单一的病理进程对ad的防治疗效有限,协同干预多条损伤途径可有效提高ad疗效。我们通过Elisa和Western blotting实验,观察了NSTK对APP/PS1/Tau转基因小鼠的海马组织中与炎症、氧化应激、糖代谢障碍等病理进程中相关细胞因子及蛋白表达的影响。NSTK（30 mg/kg,45 mg/kg）处理APP/PS1/Tau转基因小鼠可明显降低海马组织中炎性因子（IL-1β,TNF-α）的含量及下调与炎症相关蛋白NF-κB的表达;降低海马组织中脂质过氧化物MDA的含量,提高与氧化应激水平相关酶CAT、SOD的活力;提高海马组织中葡萄糖的含量及上调与葡萄糖代谢及调控葡萄糖代谢信号转导的相关蛋白（GLUTs、p-AMPK）的表达。以上实验结果在转基因动物水平进一步证明,NSTK可通过抑制炎症、氧化应激、糖代谢障碍等多条损伤途径起到较好的神经保护作用。这些观察不仅从机制上支撑了上一章得出的“NSTK对ad动物模型具有良好的神经保护作用”的结论,也为下一章基于U251细胞开展的“NSTK对能量代谢障碍的调控作用及对炎症、氧化应激损伤修复的影响”的研究奠定整体动物的实验基础。第三章NSTK调控U251细胞能量代谢障碍及其机制能量代谢障碍是ad发生发展的早期事件,干预能量代谢障碍对ad发生发展中出现的炎症和氧化应激等病理进程有重要的影响。调控能量代谢障碍并通过调控能量代谢障碍改善炎症和氧化应激等病理进程有助于提高ad的疗效。能量代谢障碍的主要表现是葡萄糖摄取下降。本章采用U251细胞建立模拟能量代谢障碍的低氧损伤模型,并进一步评价了NSTK逆转低氧引起的U251细胞中葡萄糖摄取下降的活性及机制。NSTK（1μ

关键词： N-硬脂酰酪氨酸二钾盐 ad动物模型低氧模型多途径损伤能量代谢障碍腺苷酸活化蛋白激酶

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

TIMP2基因修饰间充质干细胞治疗阿尔兹海默症的实验小鼠模型研究

引用

中国输血杂志 2020年第5期33卷 441-445页

作者：冯佳谢芳莘杨嘉洁黄雨李晓红左凤琼刘少先张勇刚陈勇军马峰中国医学科学院北京协和医学院输血研究所四川成都610052 康景生物科技有限公司上海科技大学四川大学基础医学院

目的建立并验证组织金属蛋白酶抑制因子2(TIMP2)基因修饰间充质干细胞(MSCs)治疗阿尔兹海默症(ad)有效性的实验动物模型。方法 1)TIMP2基因修饰MSCs的获得:利用腺相关病毒(AAV)基因表达载体和人脐带来源的MSCs(hUB-MSCs)构建TIMP2基因... 详细信息

目的建立并验证组织金属蛋白酶抑制因子2(TIMP2)基因修饰间充质干细胞(MSCs)治疗阿尔兹海默症(ad)有效性的实验动物模型。方法 1)TIMP2基因修饰MSCs的获得:利用腺相关病毒(AAV)基因表达载体和人脐带来源的MSCs(hUB-MSCs)构建TIMP2基因修饰的MSCs(命名为hUB-MSCs-T),采用ELISA检测hUB-MSCs-T分泌TIMP2蛋白含量,通过流式检测hUB-MSCs-T表面分子,以及通过脂肪、成骨、软骨细胞分化试验鉴定对hUB-MSCs-T的分化能力。2)hUB-MSCs-T对ad实验小鼠的影响:将30只7月龄雄性ad小鼠随机均分为3组,PBS组:小鼠尾静脉注射0.006 7 mol/L PBS缓冲液0.2 mL/只;hUB-MSCs组:注射1×10^6个/mL悬浮hUB-MSCs0.2 mL/只;hUB-MSCs-T组:注射1×10^6个/mL悬浮hUB-MSCs-T0.2 mL/只;均为1次/周,连续8周。治疗后第1—4周,采用旷场试验、新物体识别试验和巴恩斯迷宫试验评价小鼠的记忆和认知能力;治疗后第5周解剖小鼠3只/组,取海马区域组织做测序分析。结果 hUB-MSCs-T、hUB-MSCs和PBS 3组ad小鼠在巴恩斯迷宫试验d1第1次训练的逃避潜伏期(s)分别为76±93 vs 148±83 vs 150±89 (P<0.05),第4次训练的逃避潜伏期(s)分别为52±46 vs 87±87 vs 96±78(P<0.05);在巴恩斯迷宫试验d12的长时记忆试验中,进入目标洞次数分别为17±9.6 vs 12.0±5.3 vs 10.0±7.7(P<0.05)。结论 hUB-MSCs-T在一定程度上改善了ad小鼠的记忆和认知能力。

关键词：阿尔兹海默症人脐带间充质干细胞组织金属蛋白酶抑制因子2 腺相关病毒 ad动物模型小鼠

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

阿尔茨海默病致病基因突变相关的啮齿类动物和非人灵长类动物模型

引用

实验动物科学 2016年第6期33卷 59-63页

作者：姚紫彤王舒波卢静陈柏安首都医科大学基础医学院实验动物学系实验动物部北京100069

我国现有阿尔茨海默病(ad)患者800-1000万,患者数量随着人口老龄化逐年增加,目前尚无有效治疗或者逆转ad的药物和方法。过去基于啮齿类动物模型筛选出的用于治疗ad的药物在人体试验中均疗效差或有严重的副作用,这与啮齿类动物模型和ad... 详细信息

我国现有阿尔茨海默病(ad)患者800-1000万,患者数量随着人口老龄化逐年增加,目前尚无有效治疗或者逆转ad的药物和方法。过去基于啮齿类动物模型筛选出的用于治疗ad的药物在人体试验中均疗效差或有严重的副作用,这与啮齿类动物模型和ad患者病理及行为特征差异大有直接关系。非人灵长类动物与人的大脑和神经系统高度相似,建立ad非人灵长类动物模型意义重大。ad病因复杂,但是致病基因突变是其已知的明确病因,应该重视利用基因修饰或者基因筛选等技术建立ad非人灵长类动物模型。本文将着重介绍ad致病基因突变相关的转基因小鼠模型和非人灵长类动物模型的特点和现状。

关键词：阿尔茨海默病致病基因 ad动物模型非人灵长类动物

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

阿尔茨海默病动物模型构建的现状与反思

引用

中华神经科杂志 2015年第8期48卷 725-728页

作者：胡勇博任汝静王刚上海交通大学医学院附属瑞金医院神经内科 200025

动物模型是研究阿尔茨海默病（Alzheimer＇s disease,ad）的重要途径和方法,20世纪以来,随着各种动物模型的不断涌现,人们对疾病的认识达到了前所未有的高度[M].动物模型为探索疾病病因、发病机制及临床药物的筛选做出了重要贡献.但是,... 详细信息

动物模型是研究阿尔茨海默病（Alzheimer＇s disease,ad）的重要途径和方法,20世纪以来,随着各种动物模型的不断涌现,人们对疾病的认识达到了前所未有的高度[M].动物模型为探索疾病病因、发病机制及临床药物的筛选做出了重要贡献.但是,受限于当前的技术水平,能够完全模拟人类老年痴呆病理过程和临床特点的动物模型依然难以实现,每一种动物模型只能展现人类疾病病理特征或临床特点的某些方面.此外,模型实验作为一种间接性研究,其所得到的研究成果并不一定能够完全适用于解释人类自身的疾病过程,这种由动物实验所得出的理论及其转化应用的效果最终还需要在人体上得到验证.我们旨在总结当前ad动物模型的进展,并探讨其在ad研究中的转化效用和价值,以期对今后有关ad动物模型的发展提供借鉴.

关键词： ad动物模型阿尔茨海默病模型构建人类疾病疾病病因临床特点临床药物发病机制

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

BACE1新磷酸化修饰位点对APP代谢产生Aβ的作用

BACE1新磷酸化修饰位点对APP代谢产生Aβ的作用

引用

第六届亚太神经科学联合会学术会议暨中国神经科学学会第十一届全国学术会议

作者：安海婷张建亮钱燕静董林郑焱王晓民首都医科大学基础医学院神经生物学系

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,ad)是发生在老年人群中最常见的神经系统退行性疾病。迄今为止ad发病机制不清并无有效的治疗策略。BACE1作为切割APP生成Aβ的关键酶,在ad的发生发展过程中至关重要。我们发现并鉴定了ad转基因鼠脑内... 详细信息

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,ad)是发生在老年人群中最常见的神经系统退行性疾病。迄今为止ad发病机制不清并无有效的治疗策略。BACE1作为切割APP生成Aβ的关键酶,在ad的发生发展过程中至关重要。我们发现并鉴定了ad转基因鼠脑内BACE1新的磷酸化修饰位点Thr252,且Thr252磷酸化BACE1水平在7月龄的5XFad转基因鼠脑内较野生型鼠升高。为进一步研究这一新的磷酸化修饰位点如何影响BACE1作为APP代谢产生A?限速酶的功能,我们构建了野生型BACE1-EGFP、BACE1-T252A-EGFP(不能被磷酸化的突变体)和BACE1-T252D-EGFP(可被恒定磷酸化的突变体)质粒和慢病毒表达载体,并利用过表达APPswe突变体的HEK293细胞系及感染APPswe慢病毒表达载体的原代神经元,观察野生型及各种突变体形式的BACE1对APP代谢产生A?的影响。我们发现野生型BACE1和BACE1-T252D主要表达在细胞膜,而BACE1-T252A则弥散分布于胞浆内。同时,转染BACE1-T252A的细胞产生A?的量显著低于野生型BACE1及BACE1-T252D转染组。提示这一新的磷酸化位点参与了BACE1的功能成熟过程。进一步研究其在ad病理过程中的作用将为以BACE1作为靶点精准干预ad提供理论依据。

关键词：阿尔茨海默病 BACE1 beta淀粉样蛋白 APP代谢 ad动物模型

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

BACE1新磷酸化修饰位点对APP代谢产生Aβ的作用

BACE1新磷酸化修饰位点对APP代谢产生Aβ的作用

引用

The 6th FAONS Congress and 11th Biennial Conference of CNS(第六届亚太神经科学联合会学术会议暨第十一届中国神经科学学会全国学术会议)

作者：安海婷张建亮钱燕静董林郑焱王晓民首都医科大学基础医学院神经生物学系

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,ad)是发生在老年人群中最常见的神经系统退行性疾病.迄今为止ad 发病机制不清并无有效的治疗策略.BACE1 作为切割APP 生成Aβ 的关键酶,在ad 的发生发展过程中至关重要.我们发现并鉴定了ad 转基... 详细信息

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,ad)是发生在老年人群中最常见的神经系统退行性疾病.迄今为止ad 发病机制不清并无有效的治疗策略.BACE1 作为切割APP 生成Aβ 的关键酶,在ad 的发生发展过程中至关重要.我们发现并鉴定了ad 转基因鼠脑内BACE1 新的磷酸化修饰位点Thr252,且Thr252 磷酸化BACE1 水平在7 月龄的5XFad 转基因鼠脑内较野生型鼠升高.

关键词：阿尔茨海默病 BACE1 beta淀粉样蛋白 APP代谢 ad动物模型

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

组蛋白去乙酰化酶在阿尔茨海默病认知损害中的作用

引用

中华神经科杂志 2014年第8期47卷 580-583页

作者：胡源章军建武汉大学中南医院神经内科 430070

越来越多的证据表明表观遗传调节机制在阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,ad）的发生、发展过程中起着重要作用.而其中乙酰化组蛋白及非组蛋白在认知相关的基因表达与信号转导过程中具有重要的调控作用.近年来大量针对组蛋白去乙酰... 详细信息

越来越多的证据表明表观遗传调节机制在阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,ad）的发生、发展过程中起着重要作用.而其中乙酰化组蛋白及非组蛋白在认知相关的基因表达与信号转导过程中具有重要的调控作用.近年来大量针对组蛋白去乙酰化酶（histone deacetylase,HDAC）进行干预的实验都证明其对ad动物模型的认知损害具有改善作用,为该病的治疗提供了新的药物靶点.我们对HDAC的分类、功能及其在ad认知损害中的作用做一综述.

关键词：组蛋白去乙酰化酶阿尔茨海默病认知损害 ad动物模型遗传调节调控作用信号转导基因表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

T细胞在ad模型鼠中对海马神经元凋亡和再生的影响及机制分析

T细胞在AD模型鼠中对海马神经元凋亡和再生的影响及机制分析

引用

作者：刘靖南方医科大学

学位级别：博士

研究背景：阿尔茨海默病(Alzheimer's Disease, ad)又称老年性痴呆症,是好发于中老年人的一种神经系统退行性疾病,为最常见的痴呆类型。随着人口老龄化进程的加快,老年性痴呆发病率也逐年升高,其居高不下的致死率及致残率给患者、... 详细信息

研究背景：阿尔茨海默病(Alzheimer's Disease, ad)又称老年性痴呆症,是好发于中老年人的一种神经系统退行性疾病,为最常见的痴呆类型。随着人口老龄化进程的加快,老年性痴呆发病率也逐年升高,其居高不下的致死率及致残率给患者、家庭和社会造成严重的心理和经济负担。如何防治这一类疾病已成为当今医学科学重点研究的课题之一。老年性痴呆在病理上以神经细胞外存在老年斑(senile plaque, SP)、细胞内出现神经原纤维缠结(neurofibillary tangle, NFT)、皮层神经元减少以及新皮层和脑膜血管出现淀粉样变等为特征。在临床上老年性痴呆以隐袭起病、缓慢进展、逐渐加重,尤其以记忆力的减退和丧失、语言和行为障碍、思维能力下降以及认知功能障碍等为主要临床特征。目前,“Aβ假说”被广泛地接受为老年性痴呆最主要的发病机理之一。该假说认为Aβ聚集和沉积是ad发病的中心环节,多种病因引起β-淀粉样蛋白(β-amyloid protein)代谢异常,表现为Aβ产生过多或降解减少,Aβ在特定脑区聚集沉淀,引发各种免疫炎症反应和神经毒性级联反应,造成突触损伤和神经元死亡,从而导致老年性痴呆患者的记忆力减退和认知功能障碍等症状产生。虽然ad不被认为是经典的炎症或免疫反应介导的疾病,但大量的实验证据和临床资料证明老年性痴呆的发生与机体免疫功能的异常之间有着密切的关系。当Aβ清除机制受损,致使Aβ沉积形成免疫原,激活了机体免疫反应。研究证实在ad患者脑内有强烈的炎症反应发生,有资料显示ad动物模型和ad患者的体液免疫及细胞免疫功能均有异常,Aβ实验性免疫治疗的功效进一步证实了ad发病的免疫炎症机理,主动免疫不仅产生了特异性抗Aβ抗体,阻止和减少了淀粉样斑块的形成,而且还减轻了ad的临床症状、提高了接种鼠的认知能力。但是少数病人在接种疫苗后出现了脑膜脑炎等副作用,在后来的尸检中还发现患者脑膜中有大量自身反应性T细胞和巨噬细胞浸润现象等。 ad发病的免疫炎症机制和Aβ免疫治疗的效果启发我们思考：既然由Aβ沉积引发的免疫炎症反应参与了ad的发病过程,那么细胞免疫在ad病理中发挥了何种功能?特别是T细胞在ad病理过程中有何作用?ad的最终病理结局是脑神经元凋亡或死亡而减少,那么T细胞的存在与否对脑神经元凋亡和新生是否影响?如有影响其发挥作用的机制可能是什么?目前,T细胞在老年性痴呆中对神经元凋亡和再生的影响还没有直接证据,其机制也不清楚。本课题将对以上问题开展初步研究,为揭示ad的发病机制而进行基础性的研究和探索。目的：为探究T细胞在阿尔茨海默病(Alzheimer's Disease, ad)发病机理中对脑海马神经元凋亡和再生的影响及其分子机制。 1.建立模拟ad的BALB/c小鼠动物模型。包括免疫功能正常的模拟ad小鼠动物模型和T细胞免疫缺陷的模拟ad小鼠动物模型,并对这种新建立的动物模型进行病理学评价。 2.利用所建立模拟ad的BALB/c小鼠动物模型,探讨T淋巴细胞在ad模型鼠中对小鼠脑海马神经元凋亡和再生的影响作用。 3.应用荧光定量PCR技术,探究在ad模型鼠中T细胞对海马神经元凋亡和再生影响的可能分子机制。方法： 1.选取BALB/c正常小鼠(BALB/c-WT)和T细胞缺陷的BALB/c裸小鼠(BALB/c-nude)各24只,随机分为实验组和对照组。利用显微注射方法分别在实验组和对照组小鼠双侧海马CA1区注射寡聚态Aβ1-42和生理盐水(NS)。实验组又分为两组,即实验I组(BALB/c-WT+Ap1-42)和实验II组(BALB/c-nude+Ap1-42),对照组也分对照I组(BALB/c-WT+NS)和对照II组(BALB/c-nude+NS),每组12只,4组共48只。建立模拟ad的BALB/c小鼠动物模型。于造模后的第7d、21d二个时间点分批次分别取各组模型鼠的脑组织和外周血。 ***染色,在光镜下观察并比较实验组(Aβ1-42-injection)与对照组(NS-injection)注射部位的脑组织及周围的炎症反应情况；免疫组织化学显色检测Aβ1-42在实验组小鼠脑内沉积表现。 3.利用免疫组织化学方法,于造模21d时,分别检测实验组和对照组小鼠海马神经元内与凋亡相关基因Bcl-2和Bax的表达情况；用TUNEL法进一步检测各组小鼠海马神经元发生凋亡的情况。 4.采用同样方法,于造模7d时,用微管结合蛋白(Doublecortin, DCX)抗体特异性标记海马齿状回增殖的神经前体细胞,分别检测实验组和对照组小鼠脑海马神经前体细胞再生的情况。 5.用荧光定量RT-PCR方法

关键词： T细胞 ad动物模型神经元凋亡神经元再生细胞因子

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：