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老年雄性app/ps1模型小鼠大脑海马齿状回内有髓神经纤维结构的体视学研究

重庆医科大学学报 2017年第1期42卷 79-84页

作者：朱殷青蒋林张毅周春妮晁风蕾张蕾唐静梁芯綦英强张杨唐勇重庆医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的:运用现代体视学方法定量研究16月龄雄性app/ps1双转基因小鼠海马齿状回有髓神经纤维的结构改变,以期深入了解阿尔茨海默病海马的形态学改变。方法:Morris水迷宫方法测试16月龄雄性野生型小鼠和16月龄雄性app/ps1双转基因模型小鼠... 详细信息

目的:运用现代体视学方法定量研究16月龄雄性app/ps1双转基因小鼠海马齿状回有髓神经纤维的结构改变,以期深入了解阿尔茨海默病海马的形态学改变。方法:Morris水迷宫方法测试16月龄雄性野生型小鼠和16月龄雄性app/ps1双转基因模型小鼠的空间学习记忆能力,透射电子显微镜技术和现代体视学方法定量研究模型小鼠和野生型小鼠海马齿状回内有髓神经纤维长度、有髓神经纤维及其轴突和髓鞘体积等参数。结果:Morris水迷宫结果显示在前六天的隐蔽站台试验中模型组小鼠逃避潜伏期明显长于野生型小鼠(分组效应:F=9.952,P=0.008;时间效应:F=3.082,P=0.023;时间分组交互作用:F=0.312,P=0.873),在第七天的空间探索试验中模型小鼠穿台次数明显少于野生型小鼠(F=2.961,P=0.011),原平台所在象限停留时间百分比明显小于野生型小鼠(F=0.090,P=0.002)。虽然两组小鼠海马体积没有统计学差异,但是DG区内有髓神经纤维的超微结构均存在退行性改变,体视学定量分析结果显示在0.7~1.2μm直径段模型组小鼠海马DG内有髓神经纤维长度较野生型组明显降低(P=0.022)。结论:16月龄时app/ps1模型小鼠空间学习记忆能力明显减退,且海马DG内0.7~1.2μm直径段有髓神经纤维明显丢失可能是app/ps1模型小鼠空间学习记忆能力进行性减退的结构基础之一。

关键词： app/ps1模型小鼠齿状回有髓神经纤维透射电子显微镜体视学

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老年app/ps1小鼠海马齿状回有髓神经纤维和少突胶质细胞改变的体视学研究及跑步锻炼对其作用

老年APP/PS1小鼠海马齿状回有髓神经纤维和少突胶质细胞改变的体...

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作者：朱殷青重庆医科大学

学位级别：硕士

第一部分老年app/ps1模型小鼠大脑海马齿状回内有髓神经纤维和少突胶质细胞改变的体视学研究目的:运用现代体视学方法定量研究16月龄雄性app/ps1双转基因AD模型小鼠海马齿状回有髓神经纤维和少突胶质细胞的改变,以期深入了解阿尔兹海默... 详细信息

第一部分老年app/ps1模型小鼠大脑海马齿状回内有髓神经纤维和少突胶质细胞改变的体视学研究目的:运用现代体视学方法定量研究16月龄雄性app/ps1双转基因AD模型小鼠海马齿状回有髓神经纤维和少突胶质细胞的改变,以期深入了解阿尔兹海默病海马齿状回(DG)的形态学改变。方法:随机选用16月龄雄性野生型小鼠和16月龄雄性app/ps1双转基因AD模型小鼠各7只。运用Morris水迷宫方法测试16月龄雄性野生型小鼠和16月龄雄性app/ps1双转基因AD模型小鼠的空间学习记忆能力,然后麻醉处死,随机选择一侧大脑半球,按照体视学的抽样方法从每只小鼠海马DG内抽取3-4个组织块送电镜,运用无偏体视学方法获得海马齿状回DG总体积及其内有髓神经纤维参数:包括有髓神经纤维总长度、总体积、髓鞘平均厚度等。另一侧大脑半球用于制备50μm连续等距连续冰冻切片,等距随机抽样后进行少突胶质细胞CNPase特异性抗体免疫组化染色,运用无偏体视学方法计数海马齿状回内CNPase阳性细胞的数量。结果:Morris水迷宫结果显示在前六天的隐蔽站台试验中模型组小鼠逃避潜伏期显著性长于野生型小鼠(分组效应:p=0.008,F=9.952;时间效应:p=0.023,F=3.082;时间分组交互作用:p=0.873,F=0.312),在第七天的空间探索试验中模型小鼠穿台次数显著性少于野生型小鼠(p=0.011,t=-3.008),原平台所在象限停留时间显著性短于野生型小鼠(p=0.002,t=-3.887)。虽然两组小鼠海马体积没有显著性差异,但是DG区内有髓神经纤维的超微结构均存在退行性改变,体视学定量分析结果显示在0.5.1μm直径段模型组小鼠海马DG内有髓神经纤维长度较野生型组显著性降低(p=0.049,t=-2.192)。另外,两组小鼠大脑海马齿状回内CNPase阳性细胞数量无显著性差异(p=0.282,t=1.154)。结论:16月龄时app/ps1模型小鼠空间学习记忆能力显著性减退,我们推测海马DG内0.5.1μm直径段有髓神经纤维显著性丢失可能是app/ps1模型小鼠空间学习记忆能力进行性减退的结构基础之一。第二部分跑步锻炼对老年app/ps1小鼠海马齿状回内有髓神经纤维和少突胶质细胞的作用目的:研究跑步锻炼是否能够延缓老年app/ps1双转基因AD模型小鼠学习记忆功能下降的进度。如果跑步锻炼对老年app/ps1双转基因AD模型小鼠的学习记忆功能障碍具有改善作用,那么是否可能通过影响海马齿状回及其内有髓神经纤维和少突胶质细胞来发挥作用。方法:选用12月龄app/ps1雄性双转基因小鼠14只,随机均分成模型对照组和跑步组,每组各7只。对跑步组小鼠进行跑步锻炼干预,速度10 m/min,每周干预5 d,休息2 d,为期4个月。跑步结束后,利用Morris水迷宫进行行为学测试,然后麻醉处死,随机选择一侧大脑半球,按照体视学的抽样方法从每只小鼠海马DG内抽取3-4个组织块送电镜,运用无偏体视学方法获得海马齿状回DG总体积及其内有髓神经纤维参数:包括有髓神经纤维总长度、总体积、外直径、内直径等。另一侧大脑半球用于制备50μm连续冰冻切片,等距随机抽样后进行少突胶质细胞CNPase特异性抗体免疫组化染色,运用无偏体视学方法计数海马齿状回内CNPase阳性细胞的数量。结果:Morris水迷宫结果显示在前六天的隐蔽站台试验中两组小鼠逃避潜伏期无显著性差异(分组效应:p=0.200,F=1.837;时间效应:p=0.023,F=3.644;时间分组交互作用:p=0.282,F=1.326),在第七天的空间探索试验中跑步组小鼠穿台次数与模型组小鼠相比无显著性差异(p=0.315,t=1.075),原平台所在象限停留时间显著性长于模型组小鼠(p=0.015,t=2.823)。与模型组小鼠相比,跑步组小鼠虽然其海马总体积、DG总体积、有髓神经纤维总长度、总体积以及髓鞘平均厚度等均不具有显著性,但是DG内有髓神经纤维在0.2.7μm直径段长度显著性大于模型组(p=0.023,t=2.598)。另外,与模型组小鼠相比,跑步组小鼠海马DG内CNPase阳性细胞数量无显著性改变(p=0.220,t=-1.331)。结论:4个月跑步锻炼在一定程度上改善了16月龄雄性app/ps1小鼠的空间记忆能力,且对其海马DG内0.2.7μm直径段有髓神经纤维具有一定保护作用。

关键词：少突胶质细胞有髓神经纤维齿状回 app/ps1模型小鼠体视学海马齿状回 app/ps1转基因小鼠跑步

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基于NLRP3炎性小体探讨清心开窍方对app/ps1双转基因小鼠神经炎症的影响

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温州医科大学学报 2023年第6期53卷 431-439页

作者：王柳莺赖晓晓刘硕徐露婷沈燕胡海燕温州医科大学附属第二医院中医科浙江温州325027 温州医科大学第二临床医学院浙江温州325035

目的:研究清心开窍方对阿尔兹海默病(AD)模型小鼠神经性炎症和认知能力的影响,并探讨与核苷酸结合寡聚域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体相关通路的关联。方法:将app/ps1双转基因小鼠随机分为模型组、多奈哌齐治疗组[1.67 mg/(kg·d)]... 详细信息

目的:研究清心开窍方对阿尔兹海默病(AD)模型小鼠神经性炎症和认知能力的影响,并探讨与核苷酸结合寡聚域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体相关通路的关联。方法:将app/ps1双转基因小鼠随机分为模型组、多奈哌齐治疗组[1.67 mg/(kg·d)]、清心开窍方治疗组[低剂量组:4.75 mg/(kg·d);中剂量组:9.5 mg/(kg·d);高剂量组:19 mg/(kg·d)],每组10只。SPF级的雄性C57BL/6J小鼠作为对照组。Morris水迷宫实验测试定向导航和空间感知能力;HE和Nissl染色测定海马区的细胞和尼氏体数目的变化;蛋白质印迹(Western blot)和定量实时荧光聚合酶链反应(RT-q PCR)测定NLRP3、Caspase-1、Aβ、IL-1β和IL-6的表达。结果:与对照组相比,模型组小鼠的平均逃逸潜伏期明显增加(P<0.01),通过平台次数和在平台所在目标象限停留时间明显减少(P<0.01),海马区神经元数量减少,不规则,尼氏体数量减少,染色颜色浅,NLRP3、Caspase-1、Aβ、IL-1β、IL-6表达明显增加(P<0.01);与模型组相比,多奈哌齐治疗组和清心开窍方治疗组逃避潜伏期均明显缩短,穿越平台次数及在平台所在象限停留时间明显增多(P<0.05或P<0.01),治疗组小鼠神经细胞排列更为紧密有序,形态更为完整,尼氏体数目明显增加,颜色加深,NLRP3、Caspase-1、Aβ、IL-1β和IL-6的表达明显减少(P<0.05或P<0.01)。结论:清心开窍方可能通过抑制NLRP3炎症通路减轻神经炎症改善app/ps1小鼠的Aβ病理变化以及学习和记忆障碍。

关键词：阿尔兹海默病清心开窍方 app/ps1模型小鼠 NLRP3炎性小体

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黄甲软肝颗粒对阿尔茨海默病的药效学研究

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中南药学 2023年第9期21卷 2293-2299页

作者：张诗涵马四补张丽艳于婷唐海姣王宗权华杰贵州中医药大学贵阳550025 盈科瑞(横琴)药物研究院有限公司广东珠海519031 浙江维康药业股份有限公司浙江丽水323000

目的探讨黄甲软肝颗粒治疗阿尔茨海默病的药理作用。方法选取8只C57BL/6J小鼠作为正常对照组,40只app/ps1小鼠随机分为模型组,多奈哌齐组(3 mg·kg^(-1)),黄甲软肝颗粒低、中、高剂量组(1.16、2.32、4.64 g·kg^(-1))。采用Y迷... 详细信息

目的探讨黄甲软肝颗粒治疗阿尔茨海默病的药理作用。方法选取8只C57BL/6J小鼠作为正常对照组,40只app/ps1小鼠随机分为模型组,多奈哌齐组(3 mg·kg^(-1)),黄甲软肝颗粒低、中、高剂量组(1.16、2.32、4.64 g·kg^(-1))。采用Y迷宫、新物体识别和Morris水迷宫测试小鼠认知功能及记忆损伤的情况,同时取材检测各小鼠脑内海马组织中Aβ、pTau/Tau、BACE、GSK3β蛋白表达的变化,通过HE染色、尼氏染色等观察神经元排列及结构变化。结果与模型组比较,黄甲软肝高剂量组自发交替比率和目标象限穿越次数显著升高。与正常对照组比较,模型组小鼠在目标象限停留时间显著下降,黄甲软肝各剂量组均显著高于模型组。与模型组比较,黄甲软肝中、高剂量组小鼠Aβ蛋白表达显著降低;各剂量组小鼠pTau/Tau蛋白表达显著降低,海马BACE、GSK3β蛋白表达差异无统计学意义,各剂量组均显著逆转了Aβ沉积显现,尼氏小体均有所增加。结论黄甲软肝颗粒具有显著抗阿尔茨海默病作用。

关键词：黄甲软肝颗粒阿尔茨海默病药效学 app/ps1模型小鼠

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