目的:研究胰高血糖素样肽1(glucagon like peptide-1,gLP-1)能否通过升高ABCA1、ABCg1的表达情况来实现胆固醇的逆转运,降低巨噬细胞内的胆固醇蓄积,最终减少高脂饲养的ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块面积。方法:(1)将6-8周龄的雄性Ap...
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目的:研究胰高血糖素样肽1(glucagon like peptide-1,gLP-1)能否通过升高ABCA1、ABCg1的表达情况来实现胆固醇的逆转运,降低巨噬细胞内的胆固醇蓄积,最终减少高脂饲养的ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块面积。方法:(1)将6-8周龄的雄性ApoE-/-敲除的实验小鼠分为四组:空白对照组(普通饲养)、实验组(高脂饲养)、gLP-1激动组(高脂饲养+gLP-1药物注射)、gLP-1抑制组(高脂饲养+gLP-1药物注射+Exendin(9-39));通过HE染色以及油红O染色来观察ApoE-/-小鼠主动脉斑块面积,并通过免疫组化观察ABCA1、ABCgA的表达情况;(2)将小鼠来源的RAW264.7巨噬细胞传代培养后分为8组:空白对照组、实验组、不同浓度gLP-1(0、1.5、3、5、10nmol/L)激动组、gLP-1抑制组,并通过PCR、WB、高效液相色谱法检测各组细胞内ABCA1、ABCg1 m RNA、蛋白、TC、FC、CE的水平。结果:(1)动物实验:与空白对照组比较,实验组斑块面积明显增多(P<0.05),ABCA1、ABCg1表达量明显降低(P<0.05);与实验组比较,gLP-1激动组斑块面积显著降低(P<0.05),ABCA1、ABCg1表达量明显升高(P<0.05);与gLP-1激动组比较,gLP-1抑制组斑块面积显著升高(P<0.05),ABCA1、ABCg1表达量明显降低(P<0.05)。(2)细胞实验:与空白对照组比较,实验组ABCA1、ABCg1m RNA和蛋白表达量明显降低(P<0.05),TC、FC、CE的含量显著提高(P<0.05);与实验组比较,gLP-1激动组ABCA1、ABCg1m RNA和蛋白表达量明显升高(P<0.05),TC、FC、CE的含量显著降低(P<0.05);与gLP-1激动组比较,gLP-1抑制组ABCA1、ABCg1m RNA和蛋白表达量显著下降(P<0.05),TC、FC、CE的含量显著升高(P<0.05)。结论:在动物水平上:gLP-1能够在一定程度上提高ABCA1、ABCg1的表达量,从而减少高脂饲养的ApoE-/-小鼠主动脉斑块的面积,实现主动脉斑块的逆转运。在细胞水平上:ABCA1、ABCg1的表达水平能够在gLP-1的影响下显著升高,并且在gPL-1的间接影响下,细胞内胆固醇的水平也会有所下降,使得巨噬细胞向泡沫细胞转化这一过程受到抑制。
探讨化合物E23869体外对脂代谢的作用及其机制。本研究利用前期已建立的人atp结合盒转运体A1(atp-binding cassette transporter A1,ABCA1)和清道夫受体B型I(scavenger receptor class B type I,SR-BI/CLA-1)表达上调剂筛选模型,对20 00...
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探讨化合物E23869体外对脂代谢的作用及其机制。本研究利用前期已建立的人atp结合盒转运体A1(atp-binding cassette transporter A1,ABCA1)和清道夫受体B型I(scavenger receptor class B type I,SR-BI/CLA-1)表达上调剂筛选模型,对20 000个化合物进行筛选,获得能上调ABCA1和CLA-1表达的化合物E23869,其上调活性分别为196%和198%,EC50值分别为0.25和0.66μmol·L-1;Western blotting实验结果表明,在RAW264.7和L02细胞中,活性化合物E23869均能显著上调ABCA1、SR-BI/CLA-1及atp结合盒转运体g1(atp-binding cassette transporter g1,ABCg1)的蛋白水平;体外功能实验证实,E23869能有效地抑制巨噬细胞泡沫化和促进细胞内胆固醇外排。进一步研究表明,化合物E23869能通过部分激活PPARα和PPARγ从而上调ABCA1、SR-BI/CLA-1和ABCg1的表达,并且对前脂肪细胞3T3-L1诱导分化的作用较弱。总之,化合物E23869能够上调ABCA1和SR-BI/CLA-1活性,并且具有较好的体外调节脂代谢的作用,为新型调血脂药物的先导化合物。
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