检索结果-内蒙古大学图书馆

现代泌尿生殖肿瘤杂志 2016年第4期8卷 233-234页

作者：李显文钟朝晖付春花陆新升张斌罗锦斌曾灿深圳市蛇口人民医院泌尿外科 518000 中南大学湘雅二医院泌尿外科北京大学深圳医院ICU

有研究发现抑癌基因blcap基因特异性表达于肌层非浸润性膀胱癌病灶中,而在浸润性膀胱癌中该基因表达下降。本研究在成功构建膀胱癌相关性抑癌基因blcap基因干扰表达载体的基础上,进一步研究blcap基因干预对膀胱癌细胞系T24增殖的影响。... 详细信息

有研究发现抑癌基因blcap基因特异性表达于肌层非浸润性膀胱癌病灶中,而在浸润性膀胱癌中该基因表达下降。本研究在成功构建膀胱癌相关性抑癌基因blcap基因干扰表达载体的基础上,进一步研究blcap基因干预对膀胱癌细胞系T24增殖的影响。报告如下。

关键词：膀胱癌细胞系 blcap基因 T24 基因干扰非浸润性膀胱癌表达载体基因干预基因表达空白对照组重组载体

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

blcap基因RNA过编辑对肝癌细胞增殖的影响

引用

中国热带医学 2016年第1期16卷 1-5页

作者：刘琢冰吴伟刚刘妙娜刘威龙杨桂林陈心春周伯平广东医学院附属深圳市第三人民医院深圳市肝病研究所深圳市感染免疫重点实验室广东深圳518112

目的研究blcap基因RNA过编辑对肝癌SMMC7721、Focus细胞的生长增殖能力的影响,并探讨其在肝癌发生发展的作用。方法采用半定量PCR的方法分析blcap基因在11株肝癌细胞以及2株正常肝脏细胞中的表达情况,选出2株blcap基因相对低表达的肝癌... 详细信息

目的研究blcap基因RNA过编辑对肝癌SMMC7721、Focus细胞的生长增殖能力的影响,并探讨其在肝癌发生发展的作用。方法采用半定量PCR的方法分析blcap基因在11株肝癌细胞以及2株正常肝脏细胞中的表达情况,选出2株blcap基因相对低表达的肝癌细胞株。以基因转染技术,将空质粒(pc DNA3.1,对照组)、blcap_WT(野生型)和blcap_RDD(过编辑型)质粒(实验组)分别转染肝癌细胞株,通过Western blot法检验转染效率。利用CCK-8生长曲线试验和平板克隆形成实验检测肝癌细胞株的增殖能力。结果半定量PCR结果显示blcap基因在肝癌SMMC7721、Focus细胞中的表达量相对较低。Western blot的结果显示,实验组细胞blcap基因的蛋白表达水平较对照组细胞明显增高(P<0.05),表明转染较成功。CCK-8生长曲线试验和平板克隆形成实验的结果显示,肝癌SMMC7721和Focus细胞在转染blcap_RDD质粒后,其增殖能力较空质粒对照组及blcap_WT组细胞明显增强(P<0.05)。结论 blcap基因过编辑可促进肝癌SMMC7721和Focus细胞的增殖,提示其在肝癌细胞中的过编辑与肝癌的发生发展密切相关。

关键词： blcap基因过编辑肝癌细胞增殖

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

siRNA对HeLa细胞膀胱癌相关蛋白基因表达的抑制作用

引用

武汉大学学报（医学版） 2011年第6期32卷 709-712,732页

作者：左泽华张力伍欣星赵旻武汉大学医学院病毒学研究所湖北武汉430071

目的:构建抑癌基因膀胱癌相关蛋白(blcap)基因高效真核siRNA载体,转染人宫颈癌细胞系HeLa,构建blcap基因沉默细胞系,以观察靶向siRNA对blcap基因的表达抑制作用。方法:设计并重组靶向siRNA各3条,分别命名为pRNA-U6.1-B1,B2,B3-siRNA,重... 详细信息

目的:构建抑癌基因膀胱癌相关蛋白(blcap)基因高效真核siRNA载体,转染人宫颈癌细胞系HeLa,构建blcap基因沉默细胞系,以观察靶向siRNA对blcap基因的表达抑制作用。方法:设计并重组靶向siRNA各3条,分别命名为pRNA-U6.1-B1,B2,B3-siRNA,重组体经脂质体转染细胞,通过荧光显微镜观察细胞内质粒表达情况,并采用RT-PCR和Western blot方法检测转染前后blcap基因mRNA及蛋白的表达,验证RNAi作用的特异性及时效性。结果:同对照组相比,各blcap siRNA均可引起靶基因表达水平的显著性下降(P<0.05),尤以pRNA-U6.1-B2-siRNA的作用效果最强(P<0.01);而空脂质体组及阴性对照siRNA组的靶基因表达水平则无明显变化。将pRNA-U6.1-B2-siRNA转染细胞后12,24,48h均可观察到靶基因表达的显著性降低(P<0.05),其中在24h后达到最强抑制效果。结论:不同序列的siRNA,对靶基因的干扰效率不同;blcap基因siR-NA能够特异、高效性的抑制靶基因的表达;抑制作用在24h达到高峰,并可维持到转染后48h。试验结果为进一步研究采用RNA干扰技术进行宫颈癌的生物治疗奠定了基础。

关键词：宫颈癌 siRNA blcap基因

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

宫颈癌相关blcap基因的原核表达及条件优化

引用

医学分子生物学杂志 2007年第1期4卷 15-19页

作者：解庭波俞娟左泽华赵旻伍欣星武汉大学医学院病毒学研究所分子病毒学研究室

目的利用大肠埃希菌表达系统表达宫颈癌相关blcap基因,并优化表达条件。方法利用PCR技术从逆转录病毒重组载体pL(blcap)SN中扩增宫颈癌相关blcap基因,将其插入到原核表达载体pET-32(a)中,从而构建原核表达重组质粒pET-32(a)-blcap,随后... 详细信息

目的利用大肠埃希菌表达系统表达宫颈癌相关blcap基因,并优化表达条件。方法利用PCR技术从逆转录病毒重组载体pL(blcap)SN中扩增宫颈癌相关blcap基因,将其插入到原核表达载体pET-32(a)中,从而构建原核表达重组质粒pET-32(a)-blcap,随后将阳性重组质粒转化到表达宿主菌中,通过IPTG诱导表达并优化表达条件,所表达的带有His标签目的融合蛋白经Ni2+亲和层析纯化回收,并采用SDS-PAGE和Western印迹对目的蛋白进行分析和鉴定。结果构建的重组表达质粒经PCR、酶切和DNA测序鉴定与预期的结果一致,含有重组质粒的表达宿主菌经过IPTG诱导表达了分子量约为28ku的融合蛋白,并经优化确定了最佳的诱导表达条件。结论成功构建了pET-32(a)-blcap原核表达质粒,表达并经纯化得到了blcap目的蛋白,为研究该蛋白的性质及其制备针对该蛋白的抗体奠定了基础。

关键词：宫颈癌 blcap基因原核表达条件优化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

人blcap基因单核苷酸多态性与宫颈癌的相关性

引用

基础医学与临床 2004年第6期24卷 646-650页

作者：刘娟熊金虎伍欣星武汉大学医学院病毒研究所分子病毒研究室武汉430071 武汉大学中南医院检验科武汉430071

人膀胱癌相关蛋白 (blcap)基因是本研究室从细胞原癌、抑癌基因分类芯片中筛选并克隆的宫颈癌候选抑癌基因。为检测该基因调控区的单核苷酸多态性 (SNP)及其不同基因型与宫颈癌的相关性 ,采用病例对照研究方法及动态等位基因杂交 (DASH... 详细信息

人膀胱癌相关蛋白 (blcap)基因是本研究室从细胞原癌、抑癌基因分类芯片中筛选并克隆的宫颈癌候选抑癌基因。为检测该基因调控区的单核苷酸多态性 (SNP)及其不同基因型与宫颈癌的相关性 ,采用病例对照研究方法及动态等位基因杂交 (DASH)技术 ,对 30例原发性宫颈癌患者和 6 0例正常人blcap基因调控区的 2个SNP位点进行了检测。结果显示 :位于blcap基因下游调控区的SNPrs3795 14 7位点存在AA、AC和CC 3种基因型 ,且与宫颈癌发病存在显著相关性 (P <0 0 1)。SNPrs3795 14 7处在blcap基因下游调控区域 ,其多态类型可能在某种程度上影响blcap基因的表达调控 ,从而进一步支持了 :blcap基因与宫颈癌的发生、发展可能存在密切关系。

关键词： blcap基因宫颈癌相关性单核苷酸多态性(SNP) 单核苷酸多态性病例-对照研究相关蛋白调控区表达调控克隆

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

保肢手术的前瞻性基因疗法研究:blcap基因在人骨肉瘤细胞发展过程中的调节作用(英文)

引用

中国临床康复 2004年第5期8卷 982-983页

作者：范德刚范清宇张惠中张盈华刘云燕解放军第四军医大学唐都医院全军骨肿瘤研究所陕西省西安市710038 解放军第四军医大学唐都医院中心实验室陕西省西安市710038

目的:探索blcap基因反义寡核苷酸对人骨肉瘤细胞SOSP-9607的影响,为保肢手术方法作前瞻研究基础。方法:通过细胞培养,测量细胞生长曲线、计算细胞集落形成率、检测细胞周期,观察blcap基因反义寡核苷酸对人骨肉瘤细胞系SOSP-9607的影响... 详细信息

目的:探索blcap基因反义寡核苷酸对人骨肉瘤细胞SOSP-9607的影响,为保肢手术方法作前瞻研究基础。方法:通过细胞培养,测量细胞生长曲线、计算细胞集落形成率、检测细胞周期,观察blcap基因反义寡核苷酸对人骨肉瘤细胞系SOSP-9607的影响。结果:blcap基因反义寡核苷酸浓度为10μmol/L时,对此细胞的生长速度和集落形成能力有明显促进效应;流式细胞仪检测发现其引起细胞周期变化,对细胞增殖活性有增强作用。结论:首次发现blcap基因反义寡核苷酸对人骨肉瘤细胞SOSP-9607有明显的影响,提示blcap基因可能作为一种抑癌基因在人骨肉瘤发展过程中起作用。

关键词：保肢手术基因疗法 blcap基因人骨肉瘤肿瘤细胞调节作用细胞生长细胞周期反义寡核苷酸

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

宫颈癌相关blcap基因的生物信息学分析

引用

中国病毒学 2004年第2期19卷 168-170页

作者：刘娟熊金虎伍欣星武汉大学医学院病毒学研究所分子病毒研究室湖北武汉430071 武汉大学中南医院检验科湖北武汉430071

blcap is a potential gene for suppression of cervical carcinoma, which was found by analysing the cervical carcinoma specimen with the oncogene and anti-oncogene cDNA microarray. Basing on the bioinformatical analyses, we try to predict the function of blcap gene. The results show that there are several genes that highly resemble with blcap. The comparability between the sequences of blcap and Homo sapiens mRNA (DKFZp564M053) or BC10 is 99% and 87%, respectively. The protein encoded by blcap is composed of Leu(19.5%)、pro(9.19%)、ser(8.04%)、cys(8.04%) and other amino acids. The secondary structure of the N-terminal of blcap encoded protein is an alpha helix. In the C-terminal, it is beta sheet and in the middle, it is coil. The of the terminals is more hydrophobile than the middle region. Between 45-55aa, there is a transmembrane region. Therefore, we forecast the blcap is a member of transmembrane protein I. By analyzing the signal peptide and the procedure of blcap gene with the program of SignalP (V1.1), we found a cleavage site in 59-66aa. By using the program of Netpho, we predicted there might be three phospholate sites at 68aa, 73aa and 78aa. At 78-81aa, we found a typical [ST]-X(2)-[DE] structure—the phospholate site of tyrosine protein kinase, which might be related to its function. Bioinformatic studies of blcap provided the foundation for the function researches of blcap in laboratory.

关键词：宫颈癌 blcap基因生物信息学人乳头瘤病毒 HPV 分子标记人膀胱癌相关蛋白

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

宫颈癌相关blcap基因抑癌功能及机制研究

宫颈癌相关BLCAP基因抑癌功能及机制研究

引用

作者：刘娟武汉大学

学位级别：硕士

宫颈癌是发展中国家最常见的妇科恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率均很高，已成为威胁女性身体健康的主要杀手。此病的发病率有明显的地理差异，在我国存在宫颈癌的高发区——主要集中在湖北省，江西省及新疆等地区。过去常认为高危... 详细信息

宫颈癌是发展中国家最常见的妇科恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率均很高，已成为威胁女性身体健康的主要杀手。此病的发病率有明显的地理差异，在我国存在宫颈癌的高发区——主要集中在湖北省，江西省及新疆等地区。过去常认为高危型人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）如HPV16，18等型的感染是导致宫颈癌的主要原因之一，但近年来众多的研究表明，细胞内遗传因素的改变也起着重要的作用。因此，确定宫颈癌相关基因，从分子水平上了解细胞癌变机制，为宫颈癌的临床诊断、预防、易感性预测及治疗提供分子标记和靶基因具有十分重要的意义。基于此目的，我科室研究人员采用细胞原癌、抑癌基因分类芯片对原发性宫颈癌标本进行了分析，确定了与宫颈癌相关的11条候选原癌或抑癌基因（其中包括在宫颈癌组织中表达降低的7条基因和表达增高的4条基因），并选取了在宫颈癌组织中表达降低最明显、GenBank ID为NM006698的人膀胱癌相关蛋白（Homo sapiens bladder cancer associated protein，blcap）基因，进行进一步研究，包括：转染HeLa细胞后的细胞形态观察、HeLa细胞生长曲线的绘制以及集落形成实验等。为明确blcap基因与宫颈癌的相关性及其在宫颈癌发病中所起的作用，本研究首先采用生物信息学的方法对其在核酸及氨基酸水平上进行了分析，并对其功能做了初步预测，发现了几条与blcap基因同源性较高的基因：Homo sapiens mRNA（DKFZp564M053），BC-10基因等，它们与blcap基因的序列相似性分别为：99％、87％，而且不同种属间blcap基因较为保守。blcap基因编码的87个氨基酸中亮氨酸（19.5％）、脯氨酸（9.19％）、丝氨酸（8.04％）、半胱氨酸（8.04％）含量较高，对其二级结构的分析发现blcap基因编码的蛋白质N端以螺旋结构为主，C端以折叠结构为主，亲水性较高，而中间区域则以无规则卷曲为主，疏水性较高。在其45-65aa处存在一个跨膜区，初步预测其为一个Ⅰ型跨膜蛋白。利用SignalP V2.0软件对其进行信号肽序列分析，发现在63-64aa处可能存在一个裂解位点，利用Netpho软件对其进行磷酸化位点分析发现在68位的Tyr，73位和78位的Ser存在着3个可能的磷酸化位点，在78-81aa处发现一个典型的[ST]-X（2）-[DE]结构，即酪氨酸蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点，该位点可能与blcap基因编码蛋白质的功能活化有关。通过生物信息学方法，对blcap基因及其编码蛋白功能的预测为实验室进一步研究其功能奠定了基础。第二，为了证实blcap基因为一条宫颈癌相关抑癌基因，我们根据判定抑癌基因的三个标准，即:（l）该基因在恶性肿瘤的相应正常组织中必须正常表达;（2）在恶性肿瘤中该基因出现功能失活或结构改变或表达缺陷;（3）将该基因的野生型导人该基因异常的肿瘤细胞内，可部分或全部改变其恶性表型;进行了相关实验研究，包括:检测了blcap基因在人正常细胞和不同肿瘤细胞中表达水平的差异、blcap基因裸鼠体内抑瘤实验及DNA Ladder实验，发现:blcap基因在人不同肿瘤细胞中表达水平较之在人正常细胞中的表达水平低;同等量HeLa细胞注射裸鼠皮下后，稳定转染了blcap基因的HeLa细胞较之未转染blcap基因的空HeLa细胞及转染了空载体的HeLa细胞出瘤时间晚，最终成瘤体积小，且肿瘤病理切片结果显示，稳定转染了BLC妙基因的HeLa细胞所成肿瘤组织仅在中央部分出现小的坏死灶，未转染 blcap基因的空HeLa细胞及转染了空载体的HeLa细胞所成肿瘤组织周边已出现坏死;在DNA Ladder实验中，稳定转染blcap基因的HeLa细胞DNA中出现大小约 200bp及其倍体的DNA梯带，而转染空载体pLXsN的HeLa细胞及正常培养的HeLa 细胞中则未出现，说明HeLa细胞在转染blcap基因后出现了凋亡。基于以上实验结果，并结合我科室已有的研究结果，我们认为blcap基因为一条宫颈癌相关抑癌基因。第三，在证实blcap基因为一条宫颈癌相关抑癌基因基础上，我们进一步研究了其在宫颈癌发生过程中失活的机制，即:检测了blcap基因调控区的单核昔酸多

关键词： blcap基因宫颈癌生物信息学抑癌基因单核苷酸多态性(SNPs)

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

克隆blcap基因并重组原核细胞表达质粒研究

引用

中国现代医学杂志 2004年第18期14卷 55-57,60页

作者：范德刚范清宇张惠中张鹏龙华刘云燕第四军医大学唐都医院全军骨肿瘤研究所陕西西安710038

目的克隆blcap基因并构建原核表达质粒。方法利用RT-PCR方法,从骨肉瘤细胞SOSP-9607总RNA中克隆blcap基因ORF,通过酶切、连接、转化等手段,获得重组原核细胞表达质粒。结果成功克隆blcap基因ORF并构建重组质粒pGEX-4T-blcap。结论克隆BL... 详细信息

目的克隆blcap基因并构建原核表达质粒。方法利用RT-PCR方法,从骨肉瘤细胞SOSP-9607总RNA中克隆blcap基因ORF,通过酶切、连接、转化等手段,获得重组原核细胞表达质粒。结果成功克隆blcap基因ORF并构建重组质粒pGEX-4T-blcap。结论克隆blcap基因并重组原核细胞表达质粒,为分析蛋白特性、研究基因功能创造了条件。

关键词： blcap基因骨肉瘤基因表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

blcap基因克隆及其真核表达质粒的构建

引用

肿瘤防治研究 2004年第8期31卷 F003-F003页

作者：范德刚范清宇张惠中张鹏龙华刘云燕第四军医大学唐都医院全军骨肿瘤研究所西安710038

0 引言 blcap基因(又称为bc10基因)是国外学者在研究侵袭性膀胱癌时发现的[1],其与细胞侵袭性相关,具有抑癌基因的部分特征,考虑是一种新的抑癌基因[2].该基因在人骨肉瘤细胞内有表达,并且在高转移亚系中表达水平明显降低[4].本研究克... 详细信息

0 引言 blcap基因(又称为bc10基因)是国外学者在研究侵袭性膀胱癌时发现的[1],其与细胞侵袭性相关,具有抑癌基因的部分特征,考虑是一种新的抑癌基因[2].该基因在人骨肉瘤细胞内有表达,并且在高转移亚系中表达水平明显降低[4].本研究克隆blcap基因,并构建真核细胞表达质粒,为进一步研究其功能提供材料.

关键词： blcap基因骨肉瘤转移基因重组

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：