检索结果-内蒙古大学图书馆

大豆科学 2019年第3期38卷 353-359页

作者：杨明明高海京马啸燕孙英楠邵宇鹏包格格李文滨王志坤东北农业大学大豆生物学教育部重点实验室/农业部东北大豆生物学与遗传育种重点实验室黑龙江哈尔滨150030

高转化效率是分子育种的重要前提,根癌农杆菌介导的遗传转化由于其有较高的遗传效率和较低的拷贝数成为目前优选方法。为优化大豆遗传转化体系,以本实验室已有转化体系为基础,利用pCAMBIA3301中35S∶gus基因瞬时表达体系,从萌发时间、... 详细信息

高转化效率是分子育种的重要前提,根癌农杆菌介导的遗传转化由于其有较高的遗传效率和较低的拷贝数成为目前优选方法。为优化大豆遗传转化体系,以本实验室已有转化体系为基础,利用pCAMBIA3301中35S∶gus基因瞬时表达体系,从萌发时间、切豆方法、侵染时间、共培养方式以及共培养时间等方面对东农47、垦农18和B12088大豆栽培品种的遗传转化体系进行优化。结果表明:东农47萌发1 d,侵染30 min;垦农18和B12088萌发12 h,侵染30 min,gus基因瞬时表达率最高。在其它的处理上,3个品种表现结果一致,即蘸取菌液切豆,共培养中子叶伤口朝下摆放,黑暗条件下共培养3～5 d,gus基因瞬时表达最高。3个品种在最适条件下,gus染色效率均达到90%以上,垦农18遗传转化效率较高。本研究为大豆农杆菌介导子叶节转化方法提供了一个改进的方案,并且为拓宽可利用于大豆遗传转化的种质资源奠定基础。

关键词：根癌农杆菌大豆遗传转化转化率 gus基因瞬时表达

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高羊茅和黑麦草农杆菌介导转化体系的研究

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中国生物工程杂志 2007年第1期27卷 22-27页

作者：王艳丽叶兴国董芳乔卫华陶丽莉李晓璐许兴中国农业科学院作物科学研究所北京100081 宁夏大学农学院银川750021 山东农业大学生命科学院泰安271018 北京工商大学化工学院北京100037 宁夏农业生物技术重点实验室银川750002

利用C58C1农杆菌菌系(携带的表达载体上含gus基因和nptII基因)感染4个草坪草品种追寻者、爱神特、腾跃和守门员成熟胚来源的愈伤组织,共培养后部分愈伤组织进行X-Gluc组织化学染色检测,其余愈伤组织在含G41810～25mg/L的MS改良培养上先... 详细信息

利用C58C1农杆菌菌系(携带的表达载体上含gus基因和nptII基因)感染4个草坪草品种追寻者、爱神特、腾跃和守门员成熟胚来源的愈伤组织,共培养后部分愈伤组织进行X-Gluc组织化学染色检测,其余愈伤组织在含G41810～25mg/L的MS改良培养上先后筛选抗性愈伤组织和分化抗性再生植株,对移栽成活的144棵抗性再生植株分别进行了ELISA检测、PCR检测和组织化学染色检测。愈伤组织阶段X-Gluc染色检测结果表明,4个草坪草品种gus基因瞬间表达率8.6%～46.9%,爱神特愈伤组织对农杆菌侵染最为敏感,其次是腾跃和守门员,追寻者最不敏感;ELISA检测结果表明,45株呈现阳性,证明nptII基因已转入草坪草并已表达;PCR检测结果与ELISA检测结果一致,表明nptII基因确实已经整合到了草坪草基因组中,且没有发生沉默现象;转基因植株X-Gluc染色检测结果表明,gus基因在43株中得到了稳定表达,在2株中发生了沉默现象。4个草坪草品种抗性再生植株分化率0%～43.5%,转化率0%～21.5%。结果还表明,gus基因瞬间表达率与稳定转化率在草坪草上很不一致,不能作为衡量基因型转化效果的指标。

关键词：草坪草农杆菌转化法 gus基因瞬时表达分子检测

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农杆菌敏感小麦基因型的筛选研究

引用

麦类作物学报 2005年第6期25卷 6-10页

作者：王艳丽叶兴国刘艳鹏杜丽璞徐惠君中国农业科学院作物育种栽培研究所/农业部作物遗传育种重点实验室北京100081 中国农业科学院研究生院北京100081

基因型是影响农杆菌转化植物的主要因素之一,筛选对农杆菌敏感的小麦基因型对于进一步提高小麦转化效率具有重要意义.利用c58C1农杆菌菌系(含gus基因)感染不同小麦品种的幼穗和幼胚,共培养后进行X-Gluc组织化学染色检测,以筛选对农杆菌... 详细信息

基因型是影响农杆菌转化植物的主要因素之一,筛选对农杆菌敏感的小麦基因型对于进一步提高小麦转化效率具有重要意义.利用c58C1农杆菌菌系(含gus基因)感染不同小麦品种的幼穗和幼胚,共培养后进行X-Gluc组织化学染色检测,以筛选对农杆菌敏感的小麦基因型.结果表明,83个小麦基因型的幼穗经农杆菌感染后,gus基因表达率66.7%～82.8%,CA9924、北农49、西农2611、京冬11等基因型对农杆菌感染比较敏感,多数基因型对农杆菌感染不敏感.80个小麦基因型的幼胚经农杆菌感染后,gus基因表达率在10.0%以上的基因型仅占3.8%,没有gus基因表达的基因型多达71.3%,绝大多数基因型对农杆菌感染不敏感;当幼胚与农杆菌的共培养在滤纸上进行时,97H2169、轮选208、兰考906、扬麦6号等基因型对农杆菌感染非常敏感,gus基因表达率达到50.0%～93.3%,没有gus基因表达的基因型下降到36.8%.表明不同小麦基因型以及相同基因型的不同外植体对农杆菌的敏感性存在着显著差异,兰考906、扬麦6号、西农2611、京冬11等基因型是农杆菌转化小麦较为理想的受体材料;滤纸上共培养方式更有利于农杆菌对小麦外植体的侵染,gus基因表达率平均比固体培养基共培养方式高16.6个百分点.

关键词：小麦农杆菌幼胚幼穗 gus基因瞬时表达

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百合愈伤组织的诱导及瞬时表达的研究

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北方园艺 2013年第16期 103-107页

作者：权永辉刘雅莉祁银燕姜玲田菲菲杜灵娟旱区作物逆境生物学国家重点实验室(西北农林科技大学) 农业部西北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室陕西杨凌712100 西北农林科技大学林学院陕西杨凌712100 西北农林科技大学园艺学院陕西杨凌712100

以百合品种‘罗宾娜’(Robina)鳞片、花丝和花梗分化的不定芽为试材,诱导愈伤组织,并通过固体、液体和经过液体预培养后在固体上培养的方式继代增殖。结果表明:分化的不定芽在萘乙酸(NAA)0.5mg/L的培养基上愈伤组织的诱导率最高;从芽基... 详细信息

以百合品种‘罗宾娜’(Robina)鳞片、花丝和花梗分化的不定芽为试材,诱导愈伤组织,并通过固体、液体和经过液体预培养后在固体上培养的方式继代增殖。结果表明:分化的不定芽在萘乙酸(NAA)0.5mg/L的培养基上愈伤组织的诱导率最高;从芽基部形成的愈伤组织以经过液体预培养后在固体上培养的方式继代,繁殖速率最大,再生率为100%。使用农杆菌介导转化pCAMBIAl301质粒后,3种不同方式培养的愈伤组织的gus瞬时表达效率差异并不显著。

关键词：百合愈伤组织植株再生 gus基因瞬时表达

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百合体细胞胚的诱导及悬浮培养的研究

百合体细胞胚的诱导及悬浮培养的研究

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作者：权永辉西北农林科技大学

学位级别：硕士

在植物遗传转化体系的研究中，首要条件是建立良好的遗传转化受体系统。使用体细胞胚途径建立的再生体系由于再生率高、嵌合体少、变异小等优点，被认为是遗传转化的理想受体材料。在百合诱导体细胞胚进行遗传转化的报道中，诱导体细胞... 详细信息

在植物遗传转化体系的研究中，首要条件是建立良好的遗传转化受体系统。使用体细胞胚途径建立的再生体系由于再生率高、嵌合体少、变异小等优点，被认为是遗传转化的理想受体材料。在百合诱导体细胞胚进行遗传转化的报道中，诱导体细胞胚的条件高、材料来源单一、增殖慢，转化率低，并且已有的研究都集中于麝香百合和新铁炮百合。因此，本实验研究了适于进行蓝色花分子育种的OT杂种百合‘罗宾娜’（Liliumtenuifolium oriental x tumpet ‘Robina’）的体细胞胚途径的再生体系，对不同外植体诱导胚性愈伤组织的所需的激素进行了探讨，测定了液体培养基对愈伤组织继代增殖的影响，采用农杆菌介导进行了gus基因的瞬时表达研究。主要结果如下：（1）以OT杂种百合‘罗宾娜’鳞茎鳞片、花丝、子房和茎轴、花梗等为外植体进行了胚性愈伤组织诱导。鳞茎鳞片和花丝外植体在培养基MS+Picloram1.0mg·L-1上诱导率最高，分别为36.60%和40.01%，而子房外植体在MS+Picloram1.5mg·L-1上诱导率最高，为47.20%。茎轴外植体在培养基MS+NAA2.2mg·L-1+TDZ0.1mg·L-1上诱导率则高达89.20%。在鳞茎鳞片、花丝、花梗和花药使用NAA，2,4-D和6-BA组合间接诱导愈伤组织过程中，最适外植体为鳞茎鳞片，在MS+NAA1.0mg L-1+2,4-D0.5mg L-1+6-BA0.1mg L-1培养基上的分化率最高，为54.54%，从不定芽基部形成愈伤组织的最适培养基为MS+NAA0.5mg·L-1，诱导率为71.17%。三种不同激素诱导的愈伤组织再生率都为100%。（2）Picloram和NAA与TDZ组合诱导的愈伤组织在液体培养过程中都不易分散，其中Picloram诱导的三种外植体的愈伤组织培养1个月后可建立起由1～3mm的细胞团构成的悬浮系，以花丝愈伤组织建立的悬浮系增殖最快，再生率也最高，为79.74%。 NAA与TDZ对茎轴诱导的愈伤组织45天后建立起由2～5mm的细胞团构成的悬浮系，NAA与TDZ对茎轴诱导愈伤组织的悬浮系的再生率高于Picloram诱导愈伤组织的悬浮系，为86.94%。在NAA0.5mg·L-1的培养基上由不定芽芽基部形成的愈伤组织以经过液体预培养后在固体上培养的方式继代，繁殖速率最大，该愈伤组织的液体培养与前两者不同，其培养液中无游离细胞出现，而是接种愈伤块的个体膨大增殖，并且再生率与固体培养的再生率相同。（3）使用农杆菌介导转化pCAMBIA1301质粒后，Picloram诱导花丝产生愈伤组织的悬浮物侵染时的最佳侵染时间分别和10min，Picloram诱导花丝产生的悬浮物的gus瞬时表达效率为26.8/100mg愈伤组织（蓝色斑点数）。 NAA与TDZ组合诱导茎轴产生愈伤组织的悬浮物为8min，NAA与TDZ组合诱导的悬浮物的gus瞬时表达效率为28.3/100mg愈伤组织。使用NAA分别经固体培养、液体培养和液体预培养后再固体培养三种不同方式继代培养的愈伤组织，侵染时确定的最佳侵染时间为10min，它们的gus瞬时表达效率差异并不显著。

关键词：百合‘Robina’ 愈伤组织悬浮培养植株再生 gus基因瞬时表达

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甜玉米愈伤组织遗传转化条件优化研究

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广东农业科学 2008年第S1期35卷 24-26页

作者：杨子龙钟旎胡建广广东省农科院作物研究所广东广州510640

利用gus基因瞬时表达技术比较了根癌农杆菌和基因枪两种转化方法,在不同的条件下对甜玉米愈伤组织遗传转化率影响。结果表明,根癌农杆菌培养浓度OD_(600)值达到1.164、稀释浸染浓度OD_(600)值为0.30时,gus基因的瞬时表达率最高,为57.69... 详细信息

利用gus基因瞬时表达技术比较了根癌农杆菌和基因枪两种转化方法,在不同的条件下对甜玉米愈伤组织遗传转化率影响。结果表明,根癌农杆菌培养浓度OD_(600)值达到1.164、稀释浸染浓度OD_(600)值为0.30时,gus基因的瞬时表达率最高,为57.692%;农杆菌侵染愈伤组织过程中,在真空度为-10 mMPa下处理5 min,转化率略有提高。在基因枪转化中,氦气压力与射程对转化率有较大影响,在压力为1100 psi、射程为6 cm时,gus基因的瞬时表达率最高,转化率为58.333%。

关键词：甜玉米根癌农杆菌基因枪 gus基因瞬时表达

来源：评论

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