检索结果-内蒙古大学图书馆

分子植物育种 2021年第4期19卷 1150-1156页

作者：王博姜琦郑强吴启康国会艳牡丹江师范学院生命科学与技术学院牡丹江157011

植物体内的启动子含有多种顺式作用元件,通过调控下游基因的表达,影响植物的生长发育。本研究以白桦中含有BplMYB46启动子的质粒为模板,将含有W-box元件的启动子短片段克隆出来,经过酶切、连接和热激转化到大肠杆菌中。经过PCR检测及测... 详细信息

植物体内的启动子含有多种顺式作用元件,通过调控下游基因的表达,影响植物的生长发育。本研究以白桦中含有BplMYB46启动子的质粒为模板,将含有W-box元件的启动子短片段克隆出来,经过酶切、连接和热激转化到大肠杆菌中。经过PCR检测及测序分析,结果表明pCAMBIA1301-W-box-gus重组载体构建成功。获得工程菌后,瞬时侵染烟草后进行gus染色,结果显示,烟草叶片能被染色,但颜色较浅,说明W-box元件能够驱动gus基因表达,但驱动能力较低。本研究为后续分析上游转录因子与W-box顺式作用元件的互作以及筛选诱导型启动子从而改良白桦品质提供前期基础数据。

关键词：白桦(Betula platyphylla) W-box元件 gus基因表达

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烟草NtGCN2启动子的克隆及功能研究

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中国烟草学报 2021年第3期27卷 122-130页

作者：翟春贺王浩李怡博苏梦迪郭豪杨永霞张松涛河南农业大学烟草学院国家烟草栽培生理生化研究基地烟草行业烟草栽培重点实验室河南郑州450002 广东烟草韶关市有限公司广东韶关512000

【目的】探究烟草蛋白激酶NtGCN2启动子驱动gus基因在ABA、SA、AZA和MeJA四种处理下的表达模式。【方法】克隆烟草NtGCN2上游2000 bp的启动子序列,并采用Plant CARE和PLACE数据库进行顺式作用元件预测。构建NtGCN2启动子驱动β-葡萄糖... 详细信息

【目的】探究烟草蛋白激酶NtGCN2启动子驱动gus基因在ABA、SA、AZA和MeJA四种处理下的表达模式。【方法】克隆烟草NtGCN2上游2000 bp的启动子序列,并采用Plant CARE和PLACE数据库进行顺式作用元件预测。构建NtGCN2启动子驱动β-葡萄糖苷酸酶基因(gus)的融合表达载体并转化烟草K326。利用获得NtGCN2-Nsy-pro2000::gus的转基因植株,探究NtGCN2启动子驱动的gus报告基因在ABA、SA、AZA和MeJA四种激素处理下的表达模式。【结果】顺式作用元件预测结果发现,在NtGCN2-Nsy-pro2000上存在多种顺式作用元件,如脱落酸应答元件(ABRE)、茉莉酸甲酯应答元件(TGACG-motif)等。ABA、SA和AZA处理下NtGCN2启动子驱动的gus基因表达和酶活性均显著增加,而MeJA处理下NtGCN2启动子驱动的gus基因表达及酶活性下降。【结论】NtGCN2上游2000 bp序列具有启动子活性,NtGCN2-Nsy-pro2000驱动gus基因在不同激素处理下呈现不同的响应模式。ABA、SA和AZA激活NtGCN2-Nsy-pro2000驱动的gus基因表达,而MeJA抑制NtGCN2-Nsy-pro2000驱动的gus基因表达。

关键词： GCN2 启动子激素处理 gus基因表达

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水稻金属硫蛋白基因(MT2bL)启动子的克隆与表达分析

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分子植物育种 2017年第10期15卷 3856-3869页

作者：李伟吴超吕永刚张小玲郭效琼张慧鑫董陈文华陈丽娟李东宣云南农业大学稻作研究所昆明650201 云南省农业科学院粮食与作物研究所昆明650205 省部共建云南生物资源保护与利用国家重点实验室昆明650201

金属硫蛋白(metallothionein,MT)富含半胱氨酸,而且能够结合多种金属离子,调控细胞内金属代谢的平衡。本研究根据水稻在减数分裂期、开花期和开花后5 d的基因芯片数据结果,从水稻品种黎榆B(*** *** *** B)基因组中克隆得到了一个植物MT-... 详细信息

金属硫蛋白(metallothionein,MT)富含半胱氨酸,而且能够结合多种金属离子,调控细胞内金属代谢的平衡。本研究根据水稻在减数分裂期、开花期和开花后5 d的基因芯片数据结果,从水稻品种黎榆B(*** *** *** B)基因组中克隆得到了一个植物MT-2类基因Metallothionein2b-Like(Os MT2b L)的启动子序列,序列全长2 063 bp。利用植物启动子区域顺式作用元件数据库(PLACE)分析表明该启动子序列含有5个CURE(copper-response element)元件(GTAC)以及多个其它顺式作用元件。构建了多个启动子融合表达载体(p Ca MV35S::gus,p MT2b L::gus,p Ubi1::gus,p CYC::gus和p ACT1::gus),并通过根癌农杆菌介导转化水稻愈伤组织获得了转基因植株。gus组织染色结果分析表明,Os MT2b L基因启动子在水稻幼苗期的胚根、胚芽和胚芽鞘中具有高水平的gus表达活性,特别是在胚根根尖和胚芽顶端的gus表达活性较高;在减数分裂期的植株叶片、颖壳和开花10 d后的未成熟种子中gus表达活性也较高;gus蛋白荧光定量分析结果表明,Os MT2b L基因启动子在水稻叶片中驱动gus基因表达的活性比Ca MV35S基因启动子高出3倍以上。

关键词：水稻(Oryza sativa L.) OsMT2bL基因启动子 gus基因表达

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启动子陷阱技术在橡胶树中的应用研究

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热带作物学报 2013年第8期34卷 1473-1477页

作者：华玉伟杨加伟黄天带李季黄华孙中国热带农业科学院橡胶研究所农业部胶树生物学与遗传资源利用重点实验室海南儋州571737

启动子陷阱技术是克隆未知基因启动子的有效途径。首先用反向无启动子的gusA替换pCAMBIA-2301载体上的gusA及启动子序列,构建橡胶树启动子陷阱载体pCAMBIA2301:gus-NOS,然后转化橡胶树。结果表明:获得了gus染色阳性胚状体6个,再生后获得... 详细信息

启动子陷阱技术是克隆未知基因启动子的有效途径。首先用反向无启动子的gusA替换pCAMBIA-2301载体上的gusA及启动子序列,构建橡胶树启动子陷阱载体pCAMBIA2301:gus-NOS,然后转化橡胶树。结果表明:获得了gus染色阳性胚状体6个,再生后获得2个转基因株系。其中1个株系在胚状体、叶片和根中能检测到gus基因的强烈表达,另1个株系仅在根中检测到微弱的gus基因表达,说明获得的转基因植株为不同启动子启动gus基因的株系。因此通过橡胶树启动子陷阱载体的构建及其在橡胶树中的表达,能够发现和克隆橡胶树内源基因的启动子。

关键词：橡胶树启动子启动子陷阱遗传转化 gus基因表达

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玉米5\'端核骨架结合序列对转基因烟草中外源基因表达的影响

玉米5\'端核骨架结合序列对转基因烟草中外源基因表达的影响

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作者：于彬中国农业科学院生物技术研究中心

学位级别：硕士

该试验是作物基因工程的一部分,目的是将由玉米MAR分别置于nptⅡ及gus基因的两侧(MAR-nptⅡ-gus-MAR)或置于gus基因的两侧(MAR-gus-MAR),转化烟草,比较几种构建方式下MAR对gus基因表达水平和个体表达水平差异的影响,为基因工程改良作物... 详细信息

该试验是作物基因工程的一部分,目的是将由玉米MAR分别置于nptⅡ及gus基因的两侧(MAR-nptⅡ-gus-MAR)或置于gus基因的两侧(MAR-gus-MAR),转化烟草,比较几种构建方式下MAR对gus基因表达水平和个体表达水平差异的影响,为基因工程改良作物品种提供调控元件.将玉米adh1 5\'MAR亚克隆到pUC上得到了pUMI,构建了五种MAR不同放置方式的植物表达载体pDZ、pWZ、pWF、pNZ、pNF.经遗传转化获得了转基因烟草植株,通过组织化学检测选出gus表达阳性的植株,经PCR检测、PCR-Southern、基因组DNA Southern杂交证明MAR和gus已整合到烟草基因组中.以组织化学法分析gus短暂表达,表明MAR对gus的短暂表达无影响,说明MAR需整合进染色体后才能起作用.通过对转基因烟草植侏gus表达的定量检测和统计分析,研究了玉米adh15\'MAR对转基因表达水平的影响.该论文较系统地研究了玉米adh1 5\'MAR不同构建方式对外源基因表达的影响,据他们所知目前在文献中尚未见报道.鉴于pWZ表达载体有显著提高外源基因表达的作用,故该表达载体可在今后植物基因工程中应用,以提高转基因植物中抗病、抗虫等目的基因的表达.

关键词：转基因沉默核骨架结合序列玉米adh1 5\\\'\'MAR 转基因烟草 gus基因表达

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高等植物ACC氧化酶基因启动子研究进展

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天津农业科学 2014年第4期20卷 14-16页

作者：吴健侯和胜辽宁师范大学生命科学学院辽宁省植物生物工程重点实验室辽宁大连116081

启动子是控制植物基因表达的重要DNA序列结构,本文从高等植物ACO基因启动子克隆、顺式作用元件分析及gus基因表达等方面着眼,综述该领域的研究进展。

关键词：乙烯 ACO启动子顺式作用元件 gus基因表达

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T-DNA插入诱发的拟南芥茎顶端分生组织突变体分析

T-DNA插入诱发的拟南芥茎顶端分生组织突变体分析

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中国细胞生物学学会第八届会员代表大会暨学术大会

作者：马今方李萍高清祥王新宇王崇英兰州大学生命科学学院生物系兰州大学生命科学学院生物系兰州大学生命科学学院生物系兰州大学生命科学学院生物系兰州大学生命科学学院生物系

T-DNA插入诱变(T-DNA insertion mutagenesis)是上世纪80年代中后期建立的一种快速识别和分离基因的遗传学新技术,它为研究植物的生长、代谢和发育的遗传基础提供了一个强有力的手段。T-DNA既可以作为诱变剂导致被T-DNA插入中断的基因... 详细信息

T-DNA插入诱变(T-DNA insertion mutagenesis)是上世纪80年代中后期建立的一种快速识别和分离基因的遗传学新技术,它为研究植物的生长、代谢和发育的遗传基础提供了一个强有力的手段。T-DNA既可以作为诱变剂导致被T-DNA插入中断的基因功能丧失或获得,同时又可以作为随后基因分离的标签。因此,T-DNA插入诱变技术也被称之为基因标签(gene tag)法或基因诱捕(gene trap)法。该技术已被用于多种植物突变体的分离和基因克隆。我们利用T-DNA插入诱

关键词：拟南芥 T-DNA插入 gus基因表达茎顶端分生组织维管束

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