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复旦学报（医学版） 2003年第1期30卷 49-51页

作者：黄富春范钰林庚金钱立平许祖德李华河南省漯河市第二人民医院消化科漯河462000 复旦大学附属华山医院消化科上海200040 上海医学院病理学系上海200032

目的　研究 β 榄香烯诱导结肠癌细胞的凋亡作用 ,探讨其治疗结肠癌的作用机制。方法　选择 β 榄香烯诱导结肠癌细胞凋亡 ,采用光镜、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测凋亡及细胞周期。Fura 2荧光复合技术测结肠癌细胞内 [Ca2 +]i浓度... 详细信息

目的　研究 β 榄香烯诱导结肠癌细胞的凋亡作用 ,探讨其治疗结肠癌的作用机制。方法　选择 β 榄香烯诱导结肠癌细胞凋亡 ,采用光镜、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测凋亡及细胞周期。Fura 2荧光复合技术测结肠癌细胞内 [Ca2 +]i浓度。结果　β 榄香烯对结肠癌细胞增殖具有很强的抑制作用。β 榄香烯能够诱导结肠癌凋亡。在结肠癌细胞凋亡过程中 ,胞内 [Ca2 +]i明显升高 ,以凋亡早期更为明显。 1h时为 ( 2 5 6.18± 8.85 )nmol/L ,明显高于对照组 ( 12 7.81± 5 .18)nmol/L(P <0 .0 1)。结论　β 榄香烯对结肠癌细胞生长具有很强的抑制作用 ,与诱导凋亡有关。Ca2 +在 β

关键词： β-榄香烯诱导结肠癌 lovo细胞细胞凋亡分子机制

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神经酰胺在儿茶素诱导lovo细胞凋亡中的作用

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中国药学杂志 2000年第8期35卷 517-520页

作者：谭晓华周殿元张亚历北京军区总医院全军肝病研究所北京100700 第一军医大学南方医院全军消化内科研究所广东广州510510

目的　探讨神经酰胺在表没食子儿茶素没食子酸酯 (EGCG)、表没食子儿茶素 (EGC)和表儿茶素 (EC)诱导大肠癌lovo细胞凋亡及其差异性中的作用。方法　EGCG ,EGC和EC以及C2 和C6 神经酰胺处理lovo细胞后 ,用琼脂糖凝胶电泳 ,Heochst染色... 详细信息

目的　探讨神经酰胺在表没食子儿茶素没食子酸酯 (EGCG)、表没食子儿茶素 (EGC)和表儿茶素 (EC)诱导大肠癌lovo细胞凋亡及其差异性中的作用。方法　EGCG ,EGC和EC以及C2 和C6 神经酰胺处理lovo细胞后 ,用琼脂糖凝胶电泳 ,Heochst染色、流式细胞术定性和定量检测lovo细胞凋亡相关的形态学和生化方面的改变 ;用二酰基甘油激酶法测定 3种儿茶素处理lovo细胞后其神经酰胺含量的变化。结果　EGCG和EGC处理lovo细胞后 ,可引起lovo细胞的凋亡 ,C2 和C6 神经酰胺也可引起相似的改变 ,但EC则无此作用。EGCG或EGC处理lovo细胞后细胞内神经酰胺含量先一短暂的升高后逐渐回到基线水平 ,而EC则先引起短暂的下降再逐渐回升至基线水平。结论　 3种儿茶素在诱导lovo细胞凋亡时呈现出差异性。

关键词：儿茶素大肠癌神经酰胺 lovo细胞细胞凋亡

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大蒜素对结肠癌lovo细胞端粒酶活性、环氧化酶-2及核因子-κB的影响

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复旦学报（医学版） 2004年第6期31卷 597-599页

作者：关文明范钰林庚金钱立平许祖德黄富春河南省漯河市第二人民医院内科漯河462000 复旦大学附属华山医院消化科上海200040 上海医学院病理学系上海200032

目的　探讨大蒜素对结肠癌细胞的作用机制。方法　采用不同浓度的大蒜素处理结肠癌lovo细胞后 ,分别应用四唑盐比色试验、端粒重复扩增微孔板杂交法、RT PCR和Westernblot方法检测环氧化酶 2mRNA和蛋白水平的表达 ,采用凝胶迁移率法检... 详细信息

目的　探讨大蒜素对结肠癌细胞的作用机制。方法　采用不同浓度的大蒜素处理结肠癌lovo细胞后 ,分别应用四唑盐比色试验、端粒重复扩增微孔板杂交法、RT PCR和Westernblot方法检测环氧化酶 2mRNA和蛋白水平的表达 ,采用凝胶迁移率法检测核因子 κB活性。结果　大蒜素对结肠癌lovo细胞增殖具有较强的抑制作用。大蒜素能够抑制端粒酶活性 ,且这种作用呈浓度及时间依赖。同时发现 ,大蒜素能抑制环氧化酶 2mRNA和蛋白水平的表达及抑制核因子 κB活性。结论　大蒜素能够抑制结肠癌细胞的恶性增殖 ,其机制与抑制端粒酶活性、抑制环氧化酶 2基因的表达及抑制核因子

关键词：核因子-kB lovo细胞环氧化酶-2 端粒酶活性结肠癌抑制表达 RNA 基因微孔板杂交

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石蒜碱通过调控MAPK/ERK信号通路抑制人结肠腺癌lovo细胞生长

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中国病理生理杂志 2020年第3期36卷 479-486页

作者：张平袁晓慧喻婷婷黄华坤杨春梅张露露罗小辑罗进勇重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室重庆医科大学附属第一医院骨科重庆400016

目的:探讨石蒜碱(lycorine)对人结肠腺癌lovo细胞活力、凋亡和迁移侵袭能力的影响及其作用机制。方法:不同浓度(1~8μmol/L) lycorine处理lovo细胞,CCK-8法检测细胞活力;划痕愈合和Transwell小室实验检测迁移和侵袭能力;Hoechst染色及... 详细信息

目的:探讨石蒜碱(lycorine)对人结肠腺癌lovo细胞活力、凋亡和迁移侵袭能力的影响及其作用机制。方法:不同浓度(1~8μmol/L) lycorine处理lovo细胞,CCK-8法检测细胞活力;划痕愈合和Transwell小室实验检测迁移和侵袭能力;Hoechst染色及流式细胞术实验检测凋亡改变;萤光素酶报告基因系统检测MAPK/ERK信号通路活化情况;同时采用Western blot法检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)、上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)相关标志物、凋亡相关蛋白及磷酸化ERK1/2蛋白水平的变化。结果:与空白对照组相比,lycorine处理组lovo细胞的活力和迁移侵袭能力受到显著抑制(P<0.05),同时EMT相关标志物基质金属蛋白酶7(matrix metalloproteinase-7, MMP-7)和N-cadherin表达下调,E-cadherin表达上调(P<0.05),而凋亡细胞数及cleaved caspase-3无显著差异(P>0.05)。此外,lycorine处理组Elk1/SRF转录活性降低,ERK1/2磷酸化水平降低(P<0.05)。结论:石蒜碱可通过调控MAPK/ERK信号通路及抑制EMT过程lovo细胞的活力及迁移侵袭能力,从而在体外主要发挥生长抑制的抗肿瘤作用。

关键词：石蒜碱 lovo细胞上皮-间充质转化 MAPK/ERK信号通路细胞活力

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芹黄素对体外人大肠癌lovo细胞生物学活性的影响及机制研究

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中国药理学通报 2012年第8期28卷 1153-1158页

作者：王胜奇赵博欣韩述岭李国锋南方医科大学南方医院药学部广东广州510515 南方医科大学南方医院普外科广东广州510515

目的探讨芹黄素对体外人大肠癌lovo细胞生物学活性的影响及其可能的作用机制。方法不同浓度的芹黄素作用于体外培养的人大肠癌lovo细胞24、48或72 h,采用光学显微镜和透射电镜分别观察芹黄素对lovo细胞形态和超微结构的影响;采用四甲基... 详细信息

目的探讨芹黄素对体外人大肠癌lovo细胞生物学活性的影响及其可能的作用机制。方法不同浓度的芹黄素作用于体外培养的人大肠癌lovo细胞24、48或72 h,采用光学显微镜和透射电镜分别观察芹黄素对lovo细胞形态和超微结构的影响;采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)和平板克隆形成实验分别检测芹黄素对lovo细胞增殖和克隆形成能力的影响;采用PI染色法、Annexin V FITC/PI双染法,流式细胞术分别检测芹黄素对lovo细胞周期分布和凋亡的影响;采用Western blot法检测芹黄素对Bcl-2、pro-caspase-3、cleaved caspase-3表达的影响。结果芹黄素可浓度-时间依赖性的抑制人大肠癌lovo细胞的增殖及克隆形成,作用48、72 h时的半数抑制浓度IC50分别为98.05μmol·L-1及33.91μmol·L-1;细胞周期分布发生改变,主要表现在G0/G1期细胞比例减少、G2/M期细胞比例增加,细胞周期阻滞于G2/M期;细胞凋亡率增加;Bcl-2、pro-caspase-3表达下调;cleaved caspase-3表达上调;差异具有统计学意义(P<0.05)。结论芹黄素可通过阻滞细胞周期于G2/M期抑制lovo细胞增殖,通过下调Bcl-2、pro-caspase-3表达,上调cleaved caspase-3表达,诱导lovo细胞凋亡,是一种有开发前景的大肠癌化疗药物。

关键词：芹黄素 lovo细胞增殖细胞周期凋亡 Bcl2 caspase3

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RNA干扰沉默高迁移率族蛋白B1的表达对结直肠癌lovo细胞增殖和侵袭的抑制作用

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中华肿瘤杂志 2015年第9期37卷 664-670页

作者：李增军王海鹏宋宝孙燕来徐忠法韩建军山东省肿瘤医院山东省肿瘤防治研究院普外科济南250117 山东省肿瘤医院山东省肿瘤防治研究院基础研究中心济南250117 济南大学山东省医学科学院

目的探讨小分子RNA（siRNA）干扰高迁移率族蛋白B1（HMGB1）基因的表达对结直肠癌细胞株kv0增殖和侵袭的抑制作用。方法采用慢病毒介导的RNA干扰技术沉默HMGB1的表达，以逆转录聚合酶链反应和Western blot法检测干扰后lovo细胞中HMGB1 m... 详细信息

目的探讨小分子RNA（siRNA）干扰高迁移率族蛋白B1（HMGB1）基因的表达对结直肠癌细胞株kv0增殖和侵袭的抑制作用。方法采用慢病毒介导的RNA干扰技术沉默HMGB1的表达，以逆转录聚合酶链反应和Western blot法检测干扰后lovo细胞中HMGB1 mRNA和蛋白的表达情况。采用四甲基偶氮唑蓝（MTr）法、流式细胞术、Transwell小室实验、细胞划痕实验及裸鼠成瘤实验，分析HMGB1基因沉默对lovo细胞生长、增殖、侵袭及转移的影响。结果慢病毒介导siRNA可成功转染结直肠癌细胞株lovo。HMGB1-siRNA转染组lovo细胞中HMGB1 mRNA和蛋白的相对表达水平分别为0．24±0．04和0．21±0．03，阴性对照组分别为0．82±0．13和1．15±0．18，空白对照组分别为0．93±0．15和1．21±0．20；HMGB1-siRNA转染组HMGB1 mRNA和蛋白的表达水平均明显低于阴性对照组和空白对照组（P〈0．05）。MTT法检测结果显示，HMGB1-siRNA转染组lovo细胞的生长速度较阴性对照组和空白对照组降低（P〈0．05）。流式细胞术检测结果显示，HMGBI—siRNA转染组lovo细胞的增殖指数为38．27±1．32，明显低于阴性对照组（54．66±1．74）和空白对照组（57．43±1．29，P〈0．05）。Transwell小室实验显示，HMGB1-siRNA转染组穿膜细胞数为（14．0±3．5）个／高倍视野，明显低于阴性对照组[（51．0±6．7）个／高倍视野]和空白对照组[（68．0±5．3）个／高倍视野，P〈0．05]。细胞划痕实验显示，划痕后培养48h时，HMGB1-siRNA转染组lovo细胞的迁移距离为（83．61±23．21）μm，明显低于阴性对照组[（202．86±46．46）μm]和空白对照组[（214．58±57．38）μm，P〈0．05]。裸鼠成瘤实验显示，21d后，肿瘤最终体积为（521±34）mm^3,明显小于阴性对照组[（763±46）mm^3]和空白对照组[（802±51）mm^3，P〈0．05]。结论慢病毒介导的RNA干扰技术可有效抑制结直肠癌lovo细胞中HMGB1基因的表达，HMGB1基因沉默可使结直肠癌细胞生长缓慢，增殖周期延长，侵袭与迁移能力明显下降，裸鼠移植瘤的生长受到明显抑制。

关键词：结直肠肿瘤高迁移率族蛋白B1 lovo细胞 RNA干扰肿瘤侵袭肿瘤转移裸鼠

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神经胶质成熟因子γ抑制人结直肠癌lovo细胞增殖并影响人脐静脉内皮细胞的骨架运动

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中国组织工程研究 2021年第13期25卷 2055-2059页

作者：王惠丽陈志江吴炳义广东省妇幼保健院检验科广东省广州市511442 南方医科大学珠江医院儿科中心广东省广州市510280 南方医科大学南方医院临床医学研究中心广东省广州市510515

背景:神经胶质成熟因子γ(glia maturation factor-gamma,GMFG)是细胞骨架运动重建过程中ADF/cofilin超家族蛋白成员之一,可以通过调节肌动蛋白介导细胞骨架重组参与细胞运动的调控。作者前期发现GMFG的高表达与结直肠癌肿瘤患者临床病... 详细信息

背景:神经胶质成熟因子γ(glia maturation factor-gamma,GMFG)是细胞骨架运动重建过程中ADF/cofilin超家族蛋白成员之一,可以通过调节肌动蛋白介导细胞骨架重组参与细胞运动的调控。作者前期发现GMFG的高表达与结直肠癌肿瘤患者临床病理相关,但具体的上游及下游机制有待探究。目的:探索GMFG对人脐静脉内皮细胞骨架及lovo细胞增殖的影响。方法:①将人脐静脉内皮细胞接种在激光共聚焦皿中,待细胞贴壁稳定生长后,细胞免疫荧光染色观察GMFG的表达与人脐静脉内皮细胞骨架蛋白F-actin表达的关系;然后加入秋水仙素抑制细胞有丝分裂,分为对照组、0.5 mg/L秋水仙素组、1.0 mg/L秋水仙素组,流式细胞术观察3组细胞周期的变化,Western blot蛋白印迹观察3组细胞GMFG蛋白表达;②将人结直肠癌lovo细胞接种在激光共聚焦皿中,待细胞贴壁稳定生长后,细胞免疫荧光染色观察GMFG的表达与细胞周期的相关性,然后采用siRNA技术干扰lovo细胞中GMFG的表达,分为空白对照组、空转染组和siRNA-GMFG组,Edu实验检测细胞增殖率的变化。结果与结论:①在人脐静脉内皮细胞中,GMFG的表达与人脐静脉内皮细胞骨架运动有关,细胞骨架回缩时GMFG表达增多;秋水仙素抑制人脐静脉内皮细胞有丝分裂后,随秋水仙素用量增加G2/M期细胞占比增加,GMFG蛋白表达下降;②在lovo细胞中,GMFG的表达强度与细胞有丝分裂有关,在细胞有丝分裂中后期GMFG表达增强;③siRNA技术干扰lovo细胞GMFG表达后,细胞增殖率下降;④结果表明,干扰GMFG表达能够抑制人结直肠癌lovo细胞的增殖率,并且细胞骨架运动与GMFG的表达存在一定的相关性。

关键词：人脐静脉内皮细胞细胞骨架 lovo细胞细胞增殖神经胶质成熟因子γ 秋水仙素肠癌

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miRNA-95靶向FOXD1基因对结直肠癌lovo细胞放射敏感性的影响及其机制

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中国应用生理学杂志 2020年第2期36卷 148-151页

作者：梁宛伶肖天保袁峰曹一波颜登国贵州中医药大学第一附属医院肛肠外科贵阳550001 四川省自贡市第一人民医院核医学科自贡643000 贵州医科大学附属医院肛肠外科贵阳550001

目的:探讨miRNA-95靶向FOXD1基因对结直肠癌lovo细胞放射敏感性的影响及其机制。方法:结直肠癌lovo细胞购自武汉普诺赛生命科技有限公司,将lovo细胞分为三组接种于6孔板中,每组3个复孔,实验重复3次,C组(对照组正常lovo细胞),M组(miRNA-9... 详细信息

目的:探讨miRNA-95靶向FOXD1基因对结直肠癌lovo细胞放射敏感性的影响及其机制。方法:结直肠癌lovo细胞购自武汉普诺赛生命科技有限公司,将lovo细胞分为三组接种于6孔板中,每组3个复孔,实验重复3次,C组(对照组正常lovo细胞),M组(miRNA-95-mimics转染lovo细胞),I组(miRNA-95-inhibitions转染lovo细胞),利用直线加速器6 MV/8 Gy的X射线垂直照射细胞,剂量率3 Gy/min,持续照射12 h后收集细胞。采用RT-PCR法检测lovo细胞中FOXD1的表达情况,流式细胞术检测lovo细胞凋亡情况,Western blot检测细胞中FOXD1蛋白的水平,细胞克隆测定细胞存活率,裸鼠成瘤实验取转染未经X射线照射的C组、M组、I组lovo细胞细胞悬液,各取0.2 ml分别接种于C组、M组、I组BALB/C-nu雄性裸鼠左下肢足部皮上1次,每组10只,注射2周后,各组选取5只裸鼠进行X射线照射,每天4 Gy照射一次,连续照射15 d,其余小鼠不照射,处死裸鼠并取出肿瘤进行称重。结果:与C组比对,M组FOXD1水平明显升高,I组FOXD1水平明显低于M组、C组(P<0.05);在同样8 Gy照射后,与I组比对,C组和M组lovo细胞凋亡率显著下降(P<0.05);在8 Gy照射后,与I组比对,M组和C组lovo细胞单克隆存活率有上升趋势(P<0.05)。无照射条件下,与M组相比,C组和I组肿瘤体积减少(P均<0.05),与C组比较,I组肿瘤体积减少(P<0.05)。X射线照射15 d后,与无照射组各组裸鼠相比肿瘤体积显著减小(P均<0.05),与M组相比,C组和I组肿瘤体积减少(P<0.05)。结论:miRNA-95低表达可提高lovo细胞的放射敏感性,促进细胞凋亡,其作用机制可能抑制FOXD1蛋白的活性有关。

关键词： miRNA-95 放射敏感性 lovo细胞小鼠 X射线

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儿茶素对lovo细胞生长周期的影响和诱导凋亡的作用

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中华预防医学杂志 2000年第6期34卷 333-335页

作者：谭晓华周殿元张亚历姜泊北京军区总医院全军肝病研究所 100700 第一军医大学南方医院全军消化内科研究所

目的　探讨表没食子儿茶素没食子酸酯 (EGCG)、表没食子儿茶素 (EGC)、表儿茶素没食子酸酯 (ECG)和表儿茶素 (EC)对大肠癌lovo细胞生长周期的影响和它们诱导lovo细胞凋亡作用及其差异性。方法　用MTT法、琼脂糖凝胶电泳、透射电镜和流... 详细信息

目的　探讨表没食子儿茶素没食子酸酯 (EGCG)、表没食子儿茶素 (EGC)、表儿茶素没食子酸酯 (ECG)和表儿茶素 (EC)对大肠癌lovo细胞生长周期的影响和它们诱导lovo细胞凋亡作用及其差异性。方法　用MTT法、琼脂糖凝胶电泳、透射电镜和流式细胞术观察 4种儿茶素处理lovo细胞后 ,它们对lovo细胞的生长抑制作用、细胞生长周期的改变以及诱导其凋亡形态学和生化方面的改变。结果　EGCG和EGC对lovo细胞的生长抑制作用显示时间和剂量效应关系 ,且可引起lovo细胞凋亡相关的一系列改变 ,而ECG和EC则无上述作用。此外 ,EGCG、EGC和ECG可使lovo细胞生长阻滞在G1期 ,而EC主要引起S期阻滞。结论　 4种儿茶素对lovo细胞的生长抑制作用具有明显的差异性。

关键词：儿茶素结肠直肠肿瘤 lovo细胞细胞凋亡

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当归挥发油通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号转导通路影响人结肠癌lovo细胞自噬研究

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中国现代应用药学 2022年第4期39卷 437-441页

作者：朱丽娟罗建云宋润泽王丽娟张安平臧凯宏甘肃中医药大学药学院兰州730000 甘肃省中药药理与毒理学重点实验室兰州730000 陕西省西安市医疗保障局西安710021 兰州大学第二医院血管外科兰州730000

目的研究当归挥发油(volatile oil of Angelicae Sinensis Radix,VOAS)对人结直肠癌lovo细胞自噬的影响及其分子机制。方法用不同浓度的VOAS(6.25,12.5,25,50和100μg·mL^(-1))作用于人结肠癌lovo细胞48 h,CCK8比色法检测VOAS对LOV... 详细信息

目的研究当归挥发油(volatile oil of Angelicae Sinensis Radix,VOAS)对人结直肠癌lovo细胞自噬的影响及其分子机制。方法用不同浓度的VOAS(6.25,12.5,25,50和100μg·mL^(-1))作用于人结肠癌lovo细胞48 h,CCK8比色法检测VOAS对lovo细胞增殖的抑制作用。将VOAS 50μg·mL^(-1)作用于lovo细胞,AO荧光染色和透射电镜观察细胞自噬情况;Western blotting观察VOAS对自噬相关蛋白LC3B、Beclin-1、Atg5及PI3K/Akt/mTOR信号转导通路的影响。结果6.25~100μg·mL^(-1)的VOAS能够抑制lovo细胞的增殖,具有浓度依赖性;50μg·mL^(-1)的VOAS能够促进lovo细胞的自噬,上调自噬相关蛋白LC3B-Ⅱ、Beclin-1及Atg5的表达,同时下调PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白的表达。结论VOAS能够促进人结肠癌lovo细胞自噬,其机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号转导通路有关。

关键词：当归挥发油 lovo细胞自噬 PI3K/Akt/mTOR信号转导通路

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