检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：蔡永芳云南大学

学位级别：硕士

以白菜类(Brassica rapa)蔬菜为代表的叶类蔬菜,生长周期短、复种指数高、栽培过程中需肥量大,肥料的过量施用是其栽培中存在的普遍问题。肥料的过量施用会带来一系列问题,因此如何在保证产量的情况下,减少肥料的施用是蔬菜作物栽培过... 详细信息

以白菜类(Brassica rapa)蔬菜为代表的叶类蔬菜,生长周期短、复种指数高、栽培过程中需肥量大,肥料的过量施用是其栽培中存在的普遍问题。肥料的过量施用会带来一系列问题,因此如何在保证产量的情况下,减少肥料的施用是蔬菜作物栽培过程中需要解决的问题之一。磷转运蛋白(PHT,phosphorus transporter)和紫色酸性磷酸酶(pap,Purple acid phosphatase)在植物磷获取、磷转运和再利用等多方面中起着重要作用。因此,鉴定和分析白菜类作物中响应低磷的pap和PHT基因家族成员,并挖掘与低磷响应成员关联的分子标记,对后续利用分子辅助选择或基因编辑等技术进行耐低磷响应品种筛选或种质创新具有重要意义。基于上述认知,本研究筛选和鉴定了白菜中响应低磷的PHT和pap的编码基因成员信息,并挖掘了与低磷响应成员关联的SSR位点;进一步,利用市场常见的87个白菜类蔬菜品种,对鉴定的SSR位点的多态性进行分析,并基于87个品种低磷处理表型综合评价结果,分析SSR位点在耐低磷种质筛选中的运用潜力;同时,本论文还利用CRISPR/Cas9技术,对低磷响应成员Br pap36进行了编辑,为后续研究Br pap36的功能或基于该基因的种质创新奠定了材料基础。具体结果如下:1、在***中共鉴定到53个PHTs基因,可分为5个亚族。其中,有15个Br PHTs响应低磷胁迫,均为Br PHT1亚家族成员,在响应成员中挖掘到一个具有多态性的SSR位点SSRBr PHT1:30。2、在***中分离到39个paps基因,可分为3个亚族和6个次亚族。其中,有15个Br paps响应低磷胁迫,在响应成员中挖掘到5个具有多态性的SSR位点,SSRBr pap12、SSRBr pap13、SSRBr pap33和SSRBr pap38。3、完成了87个品种耐低磷能力的综合评价,并将其分为两类。结合耐低磷综合评价结果和低磷响应Br PHTs和Br paps成员关联SSR位点的基因型分析结果发现,SSRBr pap33和SSRBr pap22两个位点与表型一致性较高。4、利用CRISPR/Cas9,完成了对低磷响应成员Br pap36进行了编辑,创制出了新的等位类型,为后续该基因的功能研究奠定了材料基础。上述研究结果为并利用Br PHTs和Br paps低磷响应成员进行种质资源筛选和创新提供了基因源和材料基础。

关键词：白菜类作物 pap基因 PHT基因耐低磷SSR标记基因编辑

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

3个梅花R2R3-MYB类转录因子Pmpap基因的克隆与表达分析

3个梅花R2R3-MYB类转录因子PmPAP基因的克隆与表达分析

引用

2019年中国观赏园艺学术研讨会

作者：邱丽珂郑唐春何金儒王佳程堂仁张启翔花卉种质创新与分子育种北京市重点实验室国家花卉工程技术研究中心城乡生态环境北京实验室园林环境教育部工程研究中心林木花卉遗传育种教育部重点实验室园林学院北京林业大学北京100083

为了探究梅花花色调控的分子机理,根据全基因组信息,以'三轮玉碟'梅花为试验材料,克隆出3个pap同源基因Pmpaps,并结合转录组及定量PCR对Pmpaps转录水平进行分析.序列分析结果表明3个Pmpaps基因在核苷酸与氨基酸水平上存在一定差... 详细信息

为了探究梅花花色调控的分子机理,根据全基因组信息,以'三轮玉碟'梅花为试验材料,克隆出3个pap同源基因Pmpaps,并结合转录组及定量PCR对Pmpaps转录水平进行分析.序列分析结果表明3个Pmpaps基因在核苷酸与氨基酸水平上存在一定差异.开放读码框长度分别为729bp(PmpapI)、732bp(Pmpap2)和726bp(Pmpap3);分别编码242、243和241个氨基酸;均含有2个保守的R结构域,属于R2R3-MYB转录因子家族.同源性比对和系统进化结果显示,3个基因彼此相似度最高达94％,Pmpap1与欧洲李和碧桃基因相似性最高,为95％,在进化树中Pmpaps被细分至李属小分支中,与欧洲李、碧桃、樱桃李及甜樱桃聚到一起.qRT-PCR结果显示,3个Pmpaps基因营养器官、果实和四轮花器官中均有表达,尤其在紫红色萼片和粉红色花瓣中具有较高表达,推测Pmpaps基因在调控梅花花色苷合成途径中起重要作用.

关键词：梅花 R2R3-MYB pap基因花色苷基因克隆表达分析

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

抗病基因pap及GO转化嘎啦苹果的研究

抗病基因PAP及GO转化嘎啦苹果的研究

引用

作者：洪小娟西北农林科技大学

学位级别：硕士

苹果是我国重要的果树之一,真菌病和病毒病是影响苹果品质和产量的重要限制因素,抗病育种是解决这一问题的根本途径。由于苹果在遗传上高度杂合,传统的杂交育种手段选育抗病品种难度极大且育种周期较长,现代基因工程育种技术为转基因定... 详细信息

苹果是我国重要的果树之一,真菌病和病毒病是影响苹果品质和产量的重要限制因素,抗病育种是解决这一问题的根本途径。由于苹果在遗传上高度杂合,传统的杂交育种手段选育抗病品种难度极大且育种周期较长,现代基因工程育种技术为转基因定向改良苹果抗病性提供了可能。本研究以抗病基因GO和抗病毒基因pap为目的基因,研究了农杆菌介导法和基因枪法转基因定向改良嘎拉苹果抗病性。主要研究结果如下: 1优化了嘎啦苹果叶片遗传转化体系,利用农杆菌介导法将美洲商陆抗病毒蛋白(pap)基因转入嘎啦苹果。研究表明叶片经过3 d的预培养,于OD600值为0.6的菌液中侵染10 min,3 d共培养,抑菌素Cef的浓度为250 mg/L,庆大霉素筛选压力为50 mg/L的条件下,转化效率最高。通过根癌农杆菌介导转化,获得了抗性植株,经初步鉴定其中2株为转化植株。 2构建了菠菜乙醇酸氧化酶基因的植物表达双元载体pBinGO,并将其导入根癌农杆菌EHA105中。 3以嘎啦苹果叶片为受体材料,利用基因枪介导法进行GO基因的遗传转化。初步确立了嘎啦苹果基因枪遗传转化的物理参数:金粉微粒大小为1.0 um,氦气压力为1100spi,真空度为27 inchHg,轰击距离为6 cm时转化效率最高;苹果待转化叶片在高渗培养基中经过4 h的预处理,基因枪转化后在分化培养基中进行2-3 d的恢复培养,然后在筛选培养基中进行筛选,转化效率较高;经基因枪法转化获得了抗性植株。为今后基因枪法在苹果遗传转化中的应用提供了方法依据。

关键词：苹果 pap基因 GO基因根癌农杆菌介导基因枪介导

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

矮牵牛遗传转化非洲商陆蛋白基因的研究

引用

园林科技 2008年第1期 9-10,8页

作者：冯慧王茂良王建红李莉北京市园林科学研究所 100102 中国农业科学院植物保护研究所 100094

本文建立了矮牵牛的遗传转化体系,将非洲商陆蛋白基因转入矮牵牛,经PCR检测得到29个转非洲商陆蛋白基因株系。

关键词：矮牵牛遗传转化 pap基因

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

玉米遗传转化受体系统优化及转pap基因研究

玉米遗传转化受体系统优化及转PAP基因研究

引用

作者：邓士政河南农业大学

学位级别：硕士

玉米抗病基因工程被认为是防治玉米病毒病的有效途径。克服玉米幼胚培养对基因型的依赖，提高玉米愈伤组织再生能力是玉米基因工程的基础。本研究从优化玉米幼胚培养遗传转化受体系统和抗病毒基因pap的转化两个方面进行研究。以15种基... 详细信息

玉米抗病基因工程被认为是防治玉米病毒病的有效途径。克服玉米幼胚培养对基因型的依赖，提高玉米愈伤组织再生能力是玉米基因工程的基础。本研究从优化玉米幼胚培养遗传转化受体系统和抗病毒基因pap的转化两个方面进行研究。以15种基因型的玉米为试验材料，通过对玉米幼胚进行变温处理显著提高了愈伤组织诱导率和整齐度，提高了愈伤组织质量；通过在分化前对愈伤组织进行干燥处理48h、震荡洗涤48h+干燥处理48h可以普遍提高植株再生率和再生进程，植株再生率分别提高了34.69%和39.55%。震荡洗涤48h+干燥48h处理可以更快促进植株再生。这些方法的应用优化了玉米幼胚培养遗传转化受体系统，为转pap基因研究奠定了基础，对其他植物组织培养研究应用有借鉴价值。为了获取广谱性、安全性玉米抗病毒新材料，用基因枪轰击法，将含有美洲商陆抗病毒蛋白(pap)基因的pEmu—MCS—N质粒和含有卡那霉素筛选基因的p35SNEO质粒共转化导入12种基因型的3172块玉米幼胚愈伤组织受体中。对转化过的杂交种和自交系愈伤组织分别采用15mg.L-1和10mg.L-1的G418浓度筛选2代后，经恢复培养30天，获得40块抗性愈伤组织。抗性愈伤组织经继代培养后，采用干燥处理后再分化培养的方法，获得了169棵再生植株。用移栽的46株再生植株的叶片提取DNA和RNA,经对DNA进行PCR扩增和用地高辛（DIG）标记的pap基因特异性探针点杂交检测，结果显示6棵植株呈阳性反应，信号强烈，说明pap基因已经整合到这些植株的基因组内。经对RNA进行RT-PCR和用地高辛（DIG）标记的pap基因特异性探针点杂交检测，结果显示这6棵阳性植株pap基因已在转录水平上表达。

关键词：遗传转化受体系统转基因愈伤组织共转化 pap基因

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

商陆和美洲商陆基因组pap基因的克隆及序列分析

商陆和美洲商陆基因组PAP基因的克隆及序列分析

引用

蔬菜分子育种研讨会

作者：陈国菊雷建军曹必好曾国平华南农业大学园艺学院华南农业大学园艺学院华南农业大学园艺学院华南农业大学园艺学院

以商陆(Phytolacca acinosa)和美洲商陆(Phytolacca americana)叶片为试验材料,提取基因组DNA,经PCR扩增出3个pap基因(pap、papa1和papa2),将它们与克隆载体pMD18-T相连接,进行序列测定,pap、papa1和papa2均为714个碱基,与Lin等(1991年... 详细信息

关键词：商陆美洲商陆 pap基因序列分析

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

商陆抗病毒蛋白基因在麝香百合中的转化和表达

引用

华北农学报 2005年第6期20卷 77-79页

作者：王进忠王彦珺王锡锋张民照高遐虹孙淑玲周广和北京农学院植物科学技术系中国农业科学院植物保护研究所北京100094

以麝香百合叶片愈伤组织为受体,利用根瘤农杆菌介导法将美洲商陆蛋白(pap)基因和抗卡那霉素筛选基因以共转化的方式转入百合叶片愈伤组织中,然后在含有MS培养基中筛选愈伤组织并得到再生植株,在建立的农杆菌转化百合的遗传转化体系中,获... 详细信息

以麝香百合叶片愈伤组织为受体,利用根瘤农杆菌介导法将美洲商陆蛋白(pap)基因和抗卡那霉素筛选基因以共转化的方式转入百合叶片愈伤组织中,然后在含有MS培养基中筛选愈伤组织并得到再生植株,在建立的农杆菌转化百合的遗传转化体系中,获得49株再生植株,经PCR检测表明pap基因已经转移到有抗性愈伤组织再生出百合植株中。

关键词： pap基因麝香百合转化表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

商陆抗病毒蛋白基因导入百合愈伤组织初报

引用

生物技术 2005年第3期15卷 73-75页

作者：王进忠王彦珺王锡锋张民照高遐虹周广和北京农学院植物科学技术系北京102206 中国农业科学院植物保护研究所北京100094

利用美洲商陆抗病毒蛋白(Pokeweedantiviralprotein,pap)具有广谱的抗病毒特性,通过冻融法将含有pap基因的重组表达载体PBI121转入土壤农杆菌LBA4404中,利用叶盘法在农杆菌的介导下转比麝香百合愈伤组织,通过抗性筛选和PCR输测获得了转... 详细信息

利用美洲商陆抗病毒蛋白(Pokeweedantiviralprotein,pap)具有广谱的抗病毒特性,通过冻融法将含有pap基因的重组表达载体PBI121转入土壤农杆菌LBA4404中,利用叶盘法在农杆菌的介导下转比麝香百合愈伤组织,通过抗性筛选和PCR输测获得了转pap基因的百合植株。

关键词： pap基因麝香百合转化检测

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

商陆抗病毒蛋白基因导入玉米幼胚愈伤组织研究初报

引用

河南农业大学学报 2003年第1期37卷 6-9页

作者：孙晓丽郑霞陈定虎季良越胡彦民汤继华周广和河南农业大学河南郑州450002 中国农科院植保所北京100094

以87 1自交系,87 1×综3,郑22×87 1,郑22×HI(A×B)4个基因型的玉米幼胚愈伤组织为受体,利用基因枪介导法将商陆抗病毒蛋白(pap)基因和抗卡那霉素筛选基因以共转化的方式导入玉米胚性愈伤组织,然后在含有25～40mg·... 详细信息

以87 1自交系,87 1×综3,郑22×87 1,郑22×HI(A×B)4个基因型的玉米幼胚愈伤组织为受体,利用基因枪介导法将商陆抗病毒蛋白(pap)基因和抗卡那霉素筛选基因以共转化的方式导入玉米胚性愈伤组织,然后在含有25～40mg·L-1G418培养基上筛选愈伤组织并分化得到再生植株.PCR和Southern杂交结果表明,pap基因已经转入由抗性愈伤组织再生出的玉米植株中.

关键词：商陆抗病毒蛋白基因导入玉米幼胚愈伤组织基因枪法 pap基因筛选基因

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

商陆抗病毒蛋白基因的克隆、序列分析及在原核中的表达

引用

中国农业科学 2002年第4期35卷 390-393页

作者：陈定虎王锡锋李莉周广和中国农业科学院植物保护研究所中国农业科学院植物保护研究所北京100094 植物病虫害生物学国家重点实验室

从美洲商陆 (Phytolaccaamericana)叶片中通过异硫氰酸胍法提取出了完整的总RNA ,经RT PCR扩增出缺失突变型pap基因 ,将该基因与克隆载体pGEM(r) T相连接 ,从SP6和T7两端同时对其进行序列测定 ,共测得 711个碱基 ,与国外报道的pap基因... 详细信息

从美洲商陆 (Phytolaccaamericana)叶片中通过异硫氰酸胍法提取出了完整的总RNA ,经RT PCR扩增出缺失突变型pap基因 ,将该基因与克隆载体pGEM(r) T相连接 ,从SP6和T7两端同时对其进行序列测定 ,共测得 711个碱基 ,与国外报道的pap基因序列相比较 ,其同源性达 99.6 %。同时将该基因克隆至原核表达载体pET 5a上 ,转化大肠杆菌菌株BL2 1(DE3) plysS ,在 0 .4mmol/LIPTG的诱导下表达 ,经SDS PAGE分析表明 ,该基因在大肠杆菌中得到了特异性表达 ,表达蛋白大小为 2 6ku ,与预期值相符。Westernblotting分析发现该表达蛋白与法国pap抗血清有特异反应。琼脂双扩散免疫沉淀法鉴定发现表达蛋白与其自己的抗血清及法国的pap抗血清均能形成免疫沉淀线 ,且这两条沉淀线在相交处呈融合状态 ,说明原核表达的该蛋白与法国从商陆叶片中提取出的pap具有高度的同源性 ,也说明本试验准确克隆到了pap基因且在大肠杆菌中得到了表达

关键词：美洲商陆 pap基因序列分析原核表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：